聚集素在前列腺癌细胞不同周期时相的表达

目的探讨凋亡相关基因聚集素（clusterin）在前列腺癌不同周期时相的差异表达及意义。方法应用改良的胸腺嘧啶核苷（TdR）和高压笑气双阻断法将前列腺癌细胞系PC-3同步在不同的周期时相，应用流式细胞术检测同步化的效率。应用RT-PCR及Western blotting方法检测不同周期时相聚集素在mRNA和蛋白水平的表达。结果前列腺癌细胞系PC-3的M、G1、S和G2期细胞同步化效率分别为92．1％、87．0％、80．2％和75，9％；聚集素在不同周期时相均有表达且存在差异，G1和S期表达水平较低，M期和G2期表达水平较高，RNA和蛋白表达具有一致性。结论细胞周期对聚集素的表达有较大的影响，对于采用聚集素途径治疗前列腺癌具有指导意义。     

尿液PCA3基因检测在前列腺癌诊治中的临床意义

目的 探讨前列腺按摩后尿液中PCA3基因表达在前列腺癌诊断和治疗中的临床应用.方法 收集前列腺增生患者34例,前列腺癌24例,取尿液,前列腺癌患者内分泌治疗后重新取尿液,分别离心后取沉淀物,用RT-PCR半定量方法检测PCA3表达情况.结果 前列腺增生患者尿液中未找到PCA3基因,前列腺癌患者尿液PCA3基因表达呈阳性,内分泌治疗前后前列腺癌患者尿液PCA3基因表达有显著差异.结论 尿液PCA3检测可以作为前列腺癌诊断的一个指标,可以对前列腺癌的治疗进行指导.它作为一种无创性诊断方法具有良好的前景.     

人前列腺干细胞抗原在前列腺组织中的表达

目的：克隆人前列腺干细胞抗原(PSCA)基因，并利用半定量逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)对其组织表达谱进行分析。方法：从人前列腺癌组织提取总RNA，利用RT—PCR技术扩增出人PSCA基因编码区序列，并通过半定量RT—PCR方法检测6例人新鲜正常前列腺组织、16例前列腺增生组织及11例前列腺肿瘤组织中PSCA基因表达水平。结果：序列测定表明，克隆获得的369bp片段与文献报道的人PSCA基因编码区cDNA序列一致，PSCA为前列腺组织特异表达，在前列腺癌组织中的表达明显高于前列腺增生及前列腺正常组织。结论：PSCA是一种新的前列腺肿瘤标记物。     

二氢二醇脱氢酶1在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨二氢二醇脱氢酶(DDI)在前列腺癌中的表达及意义。方法应用逆转录聚合酶链式反应方法检测DD亚型之—DDI在前列腺癌组织(11例)及正常前列腺组织(10例)中的表达水平。应用密度扫描技术半定量分析RT-PCR产物电泳条带的密度。结果DDImRNA在前列腺癌组织中表达明显增高,吸光度比值0．184～0．478,中位数为0．289：在正常前列腺组织中的表达水平较低,吸光度比值0．590～1．216,中位数为0．801。癌与正常前列腺组织间DDImRNA的表达差异有显著性(P＜0．001)。结论DDImRNA在前列腺癌中的高表达提示DD可能在前列腺癌的发生发展中发挥着重要的作用。     

聚集素抗LNCaP细胞凋亡作用的研究

目的研究聚集素抗LNCaP细胞凋亡的作用及聚集素反义寡核苷酸(AS-ODN)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)细胞毒性作用的影响。方法培养转染全长聚集素序列的LNCaP细胞(A)为实验组,野生型LNCaP细胞(L)及转染PIRES2-EGFP空载体的LNCaP细胞(M)为对照组,以20 ng/ml TNF-α进行诱导,MTT及ELISA法检测3组细胞增殖活性与凋亡程度；转染聚集素AS-ODN后A细胞分4组,①对照组：常规培养；②AS-ODN组：转染AS-ODN,培养液不含TNF-α；③TNF-α组：未转染AS-ODN,培养液含20ng/ml TNF-α；④TNF-α+AS-ODN组：转染AS-ODN,培养液含20ng/ml TNF-α,观察4组细胞增殖活性与凋亡程度的变化。结果L、M、A3组细胞增殖活性分别为0.84±0.03、0.85±0.04、0.95±0.03,L与M间差异无统计学意义(P＞0.05),L、M与A相比增殖活性显著降低(P值均＜0.01)。3组细胞ELISA吸光度值分别为0.59±0.04、0.62±0.03、0.33±0.04,L与M间差异无统计学意义(P＞0.05),但L、M与A相比凋亡程度显著增高(P值均＜0.01)。A细胞①～④组细胞增殖活性吸光度值分别为1.30±0.03,1.25±0.03,0.99±0.03,0.80±0.03,两两比较组间差异均有统计学意义(P值均＜0.05)；4组细胞凋亡程度吸光度值分别为0.02±0.00,0.21±0.02,0.63±0.07,1.16±0.04,两两比较组间差异均有统计学意义(P值均＜0.01)。结论转染并永久表达全长序列聚集素后,TNF-α对LNCaP细胞的细胞毒性作用显著降低,转染聚集素AS-ODN显著增强TNF-α的细胞毒性作用,聚集素具有抗LNCaP细胞凋亡的作用。     

粘蛋白7在膀胱癌尿脱落细胞中的表达及意义

目的:探讨粘蛋白7(mucin7,MUC7)在膀胱移行细胞癌(TCC)诊断中的意义。方法:采用巢式逆转录聚合酶链反应(nested RT-PCR)方法检测MUC7mRNA在TCC患者尿脱落细胞中的表达。结果:68例TCC患者中有42例尿液MUC7表达阳性,敏感性为62%;MUC7表达与临床分期有关而与病理分级无关。对照组25例中有3例在尿液中MUC7为阳性表达,特异性为88%。结论:用RT-PCR的方法检测尿脱落细胞中的MUC7,具有较高的膀胱癌诊断价值。     

二氢二醇脱氢酶2在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨二氢二醇脱氢酶(DD)在前列腺癌中的表达及意义. 方法以β-actin为内参基因,应用逆转录聚合酶链反应方法检测DD亚型之一DD2在前列腺癌组织(11例)及正常前列腺组织(10例)中的表达水平.应用密度扫描技术定量分析RT-PCR产物电泳条带的密度. 结果 DD2 mRNA在前列腺癌组织中表达明显增高,吸光度比值0.550～1.018,中位数0.726;在正常前列腺组织中的表达水平较低,吸光度比值0.248～0.420,中位数0.333.癌与正常前列腺组织间DD2 mRNA表达差异有显著性意义(P<0.001). 结论 DD2 mRNA在前列腺癌中的高表达提示DD可能在前列腺癌的发生发展中发挥重要作用.     

前列腺癌组织中TGF-β1 mRNA表达及其临床意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)在前列腺癌中的表达及意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对前列腺癌组织中TGF-β1mRNA表达进行研究。结果:TGF-β1mRNA的相对含量值:在正常前列腺组织为0.74±0.11;在前列腺癌T1~T2期为(0.69±0.10),T3~T4期为(0.44±0.08);Gleason评分≤5分者为(0.70±0.12),6~8分者为(0.54±0.11),≥9分者为(0.42±0.09)。T1~T2期与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),T3~T4期与正常前列腺组织相比,差异有极显著性(P<0.01),T3~T4期与T1~T2期前列腺癌相比,差异有显著性(P<0.05)。Gleason评分≤5分者与正常前列腺相比,差异无显著性(P>0.05),6~8分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.05),≥9分者与正常前列腺相比,差异有显著性(P<0.01),≥9分者与≤5分及6~8分者相比,差异均有显著性(P<0.01和P<0.05)。结论:TGF-β1的mRNA表达与临床分期、病理分级呈负相关。     

AURORA-A在肝恶性肿瘤中的表达及意义

目的　研究Aurora AmRNA在肝癌组织中的表达 ,探讨Aurora A基因与肝癌发生的关系。方法　采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测 30例肝癌组织及 30例正常肝组织中的Aurora AmRNA。结果　Aurora AmRNA在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织 (P <0 .0 5 )。结论　Aurora AmRNA在肝癌组织中的过度表达提示Aurora A基因与肝癌的发病及发展有关。     

前列腺癌组织中聚集素的表达及临床意义

目的 探讨聚集素(Clusterin)在前列腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 应用免疫组织化学方法检测Clusterin在45例前列腺增生组织、40例前列腺癌组织标本中的表达,结合临床病理学资料,分析它们之间的相关性.结果 Clusterin在前列腺增生及前列腺癌组织中的阳性表达率分别为15.7％和87.5％,前列腺癌组织中Clusterin表达水平明显高于前列腺增生组织.Clusterin阳性表达与前列腺癌临床分期、Gleason评分均呈正相关.结论 前列腺癌组织中Clusterin 蛋白过度表达可能与其抗凋亡作用有关,与前列腺癌的恶性程度相关.     

聚集素在前列腺正常、增生、癌组织中的表达及意义

目的　通过检测聚集素 (Clusterin)在前列腺正常、增生、癌变组织中的表达 ,探讨其与前列腺疾病发生发展的关系。　方法　采用免疫组织化学染色法检测 12例正常前列腺组织、15例良性前列腺增生组织 (BPH)、5 6例前列腺癌标本中Clusterin的表达水平。　结果　 3种组织中Clusterin的阳性及弱阳性表达率为 81% (67/83 ) ,其中前列腺正常、增生、癌组织中阳性及弱阳性表达率分别为17% (2 /12 )、73 % (11/15 )、96% (5 4/5 6)。前列腺癌组织中Clusterin表达水平明显高于前列腺正常 (t=8 82 ,P <0 0 1)及增生 (t =7 63 ,P <0 0 1)组织 ,且在癌组织中与肿瘤病理分级 (r =0 64 9,P <0 0 1)、临床分期 (r=0 60 9,P <0 0 1)呈正相关。　结论　Clusterin可能通过抗凋亡机制在前列腺癌的生物特性中发挥着重要的作用     

雌激素受体亚型在人乳腺癌的表达及意义

目的　研究人乳腺癌组织以及癌旁正常乳腺组织中雌激素受体 (ER)亚型ERα和ERβ的表达 ,及其在乳腺癌发生发展中的作用。方法　应用逆转录聚合酶链反应方法检测 30例患者乳腺癌组织以及相应癌旁正常组织中ERα和ERβ的mRNA的表达情况。结果　ERα在人乳腺癌组织的表达明显高于癌旁正常组织 (t=7 399,P <0 0 1) ,ERβ在人乳腺癌组织的表达明显低于癌旁正常组织 (t=- 3 2 36 ,P <0 0 1) ,ERα/ERβ比值在人乳腺癌组织明显高于癌旁正常组织 (t =6 385 ,P <0 0 1) ;没有淋巴结转移的乳腺癌患者ERα/ERβ比值明显高于有淋巴结转移的乳腺癌患者 (t =2 6 0 2 ,P <0 0 5 ) ;在分期较晚的肿瘤ERα/ERβ比值明显低于分期较早的肿瘤 (t =3 75 4 ,P <0 0 5 )。结论　ERα在乳腺癌发生发展过程中与ERβ发挥不同的作用 ,并有可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点。     

肺癌术中血癌胚抗原mRNA的检测及意义

目的探讨肺癌术中有无肿瘤细胞的血行播散及其规律。方法对52例肺癌、5例肺部良性病变手术患者,于开胸时、结扎肺静脉时及结扎后1h取外周静脉血,结扎肺静脉时取肺静脉血,采用巢式逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术检测血中癌胚抗原(CEA)mRNA的表达量(以经内参照校正的紫外灯光下灰度值表示)。取人腺癌细胞系A549作阳性对照并检测该方法的灵敏度。结果CEAmRNA检测阳性率开胸时为31%(16/52),结扎肺静脉时外周血与肺静脉血、结扎肺静脉后1h外周静脉血均为54%(28/52),且病例一致。开胸时的CEAmRNA表达水平最低95±20,结扎肺静脉时肺静脉血最高126±22,结扎肺静脉时外周静脉血与结扎肺静脉后1h的外周静脉间差异无统计学意义(P>0.05)。CEAmRNA的术中阳性率,鳞癌患者为64%(14/22),腺癌患者为47%(14/30),阳性率与肿瘤性质无关(χ2=1.47,P>0.05);中央型肺癌的术中阳性率(80%,20/25)显著高于周围型肺癌(30%,8/27)(χ2=16.81,P=0.000);TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期者阳性率分别为32%(8/25),55%(6/11),93%(14/15)和0(0/1),分期较晚者显著高于分期较早者(χ2=17.93,P=0.000)。5例阴性对照均为阴性。经检验该方法的灵敏度为1×10-6。结论肺癌术中的确存在血行播散,结扎肺静脉的早晚可能对瘤细胞播散量有较大影响;中央型肺癌和     

多药耐药基因在泌尿系统肿瘤细胞系中的表达

目的检测泌尿系统肿瘤多药耐药基因及其产物的表达。方法对肾颗粒细胞癌细胞系ＧＲＣ１，肾透明细胞癌细胞系ＲＣＣ９４９，膀胱移行细胞癌细胞系ＢＩＵ８７、Ｔ２４、ＥＪ，前列腺癌细胞系ＰＣ３ｍ和对照的白血病细胞系ＨＬ６０进行免疫细胞化学和逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）检测。结果只有ＧＲＣ１同时表达Ｐ糖蛋白（ＰＧＰ）和ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ，其他肿瘤细胞系均无表达。结论泌尿系肿瘤细胞系多数无ＰＧＰ也没有ＭＤＲ１基因ｍＲＮＡ水平的表达，只有ＧＲＣ１例外     

Survivin转录变异体在胃癌组织中的表达及其与预后的关系

目的研究survivin各转录变异体在胃癌组织中的表达情况及与其预后的关系。方法采用实时荧光定量RT-PCR技术,对77例胃恶性肿瘤患者的肿瘤组织、正常胃黏膜的成对标本进行mRNA定量检测。结果在检测患者肿瘤组织中野生型survivin、survivin-2B与survivin-△Ex3的表达量均显著高于其对应正常胃黏膜组织中的表达量(P<0.01)。在胃癌组织中,survivin的表达率为100%(77/77),survivin-2B的表达率为79.8%(61/77),survivin-△Ex3的表达率为64.9%(50/77)。survivin高表达组患者的生存率明显低于低表达组(P<0.01)。结论Survivin的3个转录变异体中,野生型survivin对胃癌患者预后具有重要的评估价值。     

肝细胞癌抗原基因在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的　探讨肝细胞癌抗原 (HCA)基因mRNA在肝细胞癌 (HCC)组织中的表达。方法　用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法对HCC患者的癌组织和相应癌旁组织及肝硬化和正常肝组织中的 4种HCAmRNA的表达进行检测 ;结合临床病理资料进行分析。　结果　 46例HCC患者中 ,HCA90、HCA51 9、HCA52 0、HCA587基因mRNA阳性率分别是 65 2 %、76 1 %、45 7%和 32 6 % ;至少表达一种HCA者达 82 6 % ;而癌旁组织中仅HCA51 9基因有 6 5 %mRNA表达为阳性。 1 0例肝硬化和正常肝组织中 4种HCA基因均不表达。 4种HCA的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、血清AFP水平、HBV和HCV感染无显著相关性 (P >0 0 5)。在部分AFP正常的患者中存在HCA基因的表达。　结论　HCA基因在HCC中呈高比例、高特异性表达 ,为HCC免疫治疗提供了新的潜在靶位