去炎松-A和5-氟脲嘧啶混合液对增生性瘢痕胶原代谢影响的实验研究

目的探讨TAC和5-FU混合液对增生性瘢痕胶原代谢的影响.方法用兔耳建立增生性瘢痕动物模型,随机分成四组,在瘢痕局部注射TAC和5-FU混合液为A组、注射TAC为B组、注射5-FU为C组、对照为D组,每周注射1次,第4次注射后1周观察组织学改变,测定瘢痕内HPr、PCⅢ的含量,Ⅰ、Ⅲ型胶原面积及比例.结果①组织学D组呈现出增生性瘢痕的病理特征,A、B、C三组呈现胶原纤维溶解,成纤维细胞的超微结构受到明显影响.②HPr和PCⅢ含量测定A、B、C、D四组之间比较差异有显著意义(P＜0.05),A组含量最低,D组含量最高.③Ⅰ、Ⅲ型胶原面积及比例测定A、B、C、D四组Ⅰ、Ⅲ型胶原面积差异有显著意义(P＜0.05),A组Ⅰ型胶原比例最低.结论 TAC和5-FU混合液能有效抑制增生性瘢痕内胶原的合成,降解胶原纤维,对Ⅰ型胶原的抑制比Ⅲ型胶原强,改善Ⅰ、Ⅲ型胶原的构成比,作用强于单纯的应用TAC或5-FU.     

白介素-1β在自体神经匀浆激活的巨噬细胞上的表达

目的探讨IL-1β在体外培养的自体神经匀浆激活的巨噬细胞表面的表达及与外周神经损伤的关系。方法将1个月龄SD幼鼠坐骨神经远端切断，预溃变2d后，制成神经匀浆液，回注自体腹腔3d后，抽取腹腔液体培养巨噬细胞，培养3d后收集培养基，即得自体神经匀浆激活的巨噬细胞的条件培养基。不损伤坐骨神经而直接腹腔注射培养基培养3d后的巨噬细胞的上清即为未激活的巨噬细胞条件培养基。将上述两种巨噬细胞条件培养基分别设为C组和B组，把含15％小牛血清的DMEM／F12培养液注射于SD幼鼠腹腔5min后培养的巨噬细胞条件培养基设为A组即对照组．将A、B、C3组分别在倒置显微镜和透射电镜下观察巨噬细胞形态变化，应用ELISA法检测3组巨噬细胞上清液中的IL-1β的含量。结果自体神经匀浆激活的巨噬细胞胞内超微结构发生改变较明显，B组与A组比较IL-1β的含量差异无统计学意义，C组与A、B组之问IL-1β的含量差异均有统计学意义。结论吞噬自体神经匀浆颗粒后的巨噬细胞被诱导激活，从而高表达IL-1β，将可能对外周神经损伤后功能的恢复有较大的促进作用。     

臭氧液对兔膝骨性关节炎滑膜炎症的影响

目的评价臭氧液对兔膝骨性关节炎滑膜炎症的影响。方法新西兰兔32只,采用随机数字表法分为四组,每组8只。A组不予任何处理;B组仅造模;C组造模成功后,关节腔注射20μg/ml臭氧液2ml,每周1次,连续3周;D组不造模,仅行关节腔注射臭氧液,方法同C组。观察膝关节滑膜形态,检测滑膜组织中IL-6和TNF-α含量。结果 A组滑膜组织无充血水肿,滑膜细胞无增生现象,滑膜组织结构正常;B组滑膜组织正常结构破坏,细胞重度增生,炎性细胞浸润明显,血管增生充血,滑膜厚度较A组明显增加;C组滑膜组织炎症细胞减少,充血水肿减轻,滑膜厚度较B组明显降低;D组滑膜无炎症表现。与A组比较,D组IL-6和TNF-α含量无明显增高,B、C组IL-6和TNF-α含量明显增高(P0.05),但C组明显低于B组(P0.05)。结论关节腔注射20μg/ml臭氧液2ml可以减轻滑膜炎症,降低滑膜中IL-6和TNF-α含量,且对正常关节滑膜组织无明显损害。     

甘露醇注射速度对留置针穿刺部位血管损伤的实验研究

目的 了解在25℃环境中以不同速度静脉注射20%甘露醇对兔耳静脉损伤情况.方法 选择健康成年的新西兰兔36只,随机取4只作为对照组,另32只随机分为A、B、C、D四组各8只.均于兔两耳留置静脉留置针.对照组给予生理盐水5 ml/kg 30 min注入;另四组给予20%甘露醇5 ml/kg分别于5 min(A组)、10 min(B组)、20 min(C组)、30 min(D组)注射完毕.均8 h给药1次,连续3 d.最后1次给药后处死兔,在穿刺点及以上2 cm处取血管组织行病理检查.结果 对照组血管壁增厚、血管周围炎症、纤维组织增生及血栓形成情况与其余四组之间比较,差异有显著性意义(均P<0.05);实验组四组比较,差异无显著性意义(均P>0.05),D组血管壁增厚、血管周围炎症相对较多,A组血栓形成相对较多.结论 注射甘露醇对穿刺部位血管均有损伤;根据注射甘露醇时的速度、持续时间不同,穿刺部位血管的损伤特点不一.     

TNF-α抑制兔耳瘢痕增生的实验研究

目的：通过建立兔耳增生性瘢痕模型,研究肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）在减轻增生性瘢痕形成中的作用。方法：建立兔耳增生性瘢痕模型,实验动物随机分为A、B、C、D、E五组,并设C组为对照组,A、B、D、E组瘢痕内分别注射不同浓度TNF-α溶液0．1ml（100ng／ml,500ng／ml,1000ng／ml,5000ng／ml）,C组瘢痕内注射等量生理盐水。观察增生性瘢痕组织块的组织结构、成纤维细胞的密度以及caspase-3蛋白的表达情况。分析不同浓度TNF-α对增生性瘢痕形成的影响。结果：瘢痕增生块减轻程度随TNF-α浓度增加而增加,即TNF-α浓度越高,增生性瘢痕体积越小,成纤维细胞密度越低,caspase-3表达强度越强。结论：肿瘤坏死因子-α可明显抑制兔耳增生性瘢痕的形成及瘢痕组织增生．     

生物可降解人工胸壁的生物相容性与体内降解研究

目的对制备的人工胸壁材料的生物相容性及体内降解情况进行研究,为其应用于临床提供实验依据。方法参照医疗器械生物学评价标准和要求,对人工胸壁组分材料聚对二氧环己酮(A)、壳聚糖(B)、羟基磷灰石/胶原海绵(C)进行评价。溶血实验另设生理盐水为阴性对照组,蒸馏水为阳性对照组,各组取样本5个加抗凝兔血0.2ml,取上清测吸光度(A)值并计算溶血率。取20只小鼠行急性全身毒性实验,每组5只,分为A、B、C和阴性对照组;阴性对照注入生理盐水,A、B、C组由尾静脉注入A、B、C材料浸提液,50ml/kg,于24、48、72h时观察。热源实验取12只大白兔,每组3只,分为A、B、C组和阴性对照组(注入生理盐水),自耳静脉分别注射A、B、C材料浸提液,10ml/kg后,每隔1h测肛温1次,共3次,观察动物的体温变化,并计算各兔体温的升高度数和升高总数。体内植入及降解实验取12只大白兔,将A、B、C材料(制成10mm×10mm大小)分别植入背部肌肉内,于2、4、8、12、16、24周各时间点处死2只,行大体观察,组织学、材料降解及组织相容性观察。结果人工胸壁各组分材料的溶血率均小于国家规定的5%标准,在体外不引起溶血反应;与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05);不引起全身毒性反应,各材料注入后,A、B、C组动物均无死亡,活动进食正常。热源实验各组动物体温升高值均在0.6℃以下,且每组3只兔体温升高值的总数<1.4℃,无致热作用;各材料植入体内初期有轻度炎性反应,随植入时间延长逐步减轻;组分材料分期降解吸收,降解过程中未见组织变性、坏死和异常增生。结论人工胸壁各组分材料具有良好的生物相容性和适宜的降解性能,具有临床开发应用前景。     

复合富血小板血浆(PRP)的可注射型组织工程骨的构建及其修复兔桡骨缺损的放射学评估

目的用自体富血小板血浆(PRP)、骨髓基质干细胞(BMSCs)和纤维蛋白胶(FG)构建可注射型组织工程骨并从放射学方面评价其修复自体兔桡骨缺损的效果。方法36只新西兰兔随机分为A、B、C三组,每组12只。所有动物术前1周抽取耳背中央动脉血提取PRP。A组于术前1～2个月抽取双髂骨处骨髓并培养出BMSCs,在体外与FG及自体PRP构建成可注型组织工程骨,植入自体桡骨1.5cm节段性骨缺损,为实验组。B、C两组分别植入PRP FG、FG于同样骨缺损处为对照组。另取4只桡骨同样部位和大小骨缺损旷置作为空白组。术后4、8、12周时摄前臂正位X线片。用放射影像学评分和图像分析X线阻射影比较骨缺损的修复情况。结果A、B两组骨缺损放射影像学评分以及新生骨痂的密度在4、8、12周均优于C组(P<0.05),A、B两组之间在放射影像学评分上无明显差别(P>0.05),但在新生骨痂密度上,A>B>C(P<0.05)。空白组术后16周骨缺损无愈合。结论PRP对骨缺损愈合有明显促进作用,复合PRP的可注射型材料与BMSCs构建组织工程骨可修复兔桡骨节段性骨缺损。     

三种手术方法治疗兔Perthes病股骨头的VEGF表达

[目的]采用3种不同的手术方法(髓芯减压、滑膜切除和自体松质骨移植)治疗Perthes病模型,通过观察并比较VGEF表达的变化对其治疗效果作评价.[方法]36只3个月龄新西兰大白兔随机平均分为A、B、C、D4组.手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型.模型制作后2周对B、C、D组分别采用髓芯减压、滑膜切除、自体松质骨移植方法加以治疗.[结果]大体观察:A、B、C三组均在8周发现股骨头较健侧变小,部分标本可见塌陷.D组8周股骨头软骨下骨未见明显塌陷.组织学观察:A、B、C三组8周才可见到部分修复.D组4周即可见纤维肉芽组织增生,部分新骨形成.免疫组织化学:B、C组各时间点VEGF免疫反应性(immunoreactivity,VEGF-IR)与A组无明显差异.D组各时间点增殖区与肥大区VEGF阳性细胞率高于其他各组,相比有统计学意义(P＜0.05,α=0.05).[结论]自体松质骨移植手术治疗Perthes病模型中,VEGF的表达明显高于其他两组,组织病理上也发现本组股骨头骺软骨较其他两手术治疗组修复明显.     

骨髓间充质干细胞自体移植时间对兔急性肾功能衰竭治疗效果的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSCs)自体移植对兔急性肾功能衰竭的治疗作用并探讨不同移植时间对其治疗效果的影响.方法 骨髓穿刺抽取新西兰大耳白兔骨髓,分离、培养、扩增MSCs.30只兔通过夹闭双肾动脉90 min后再灌注制作急性肾功能衰竭模型,随机分为移植A组、移植B组和未治疗C组,每组10只.移植A组在恢复血流即刻,移植B组在恢复血流后72 h将BrdU标记的自体MSCs经颈静脉回输移植,未治疗C组仅制作急性肾功能衰竭模型.于造模后21 d处死兔,比较各组的存活率、肾功能及肾组织形态学改变.结果 与未治疗组比较,移植组肾功能较快恢复(P<0.05),肾组织损伤明显改善(P<0.05).移植A组的效果优于移植B组(P<0.05).结论 骨髓间充质干细胞自体移植能有效治疗缺血再灌注损伤引起的急性肾功能衰竭,早期移植的效果好.     

羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响

目的 研究羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响.方法 将接种VX2肝肿瘤的新西兰白兔随机分成4组,每组10只.A组:肝种植瘤内注入含0.2%羧甲基纤维素钠的生理盐水1 ml;B组:注入20 mg/ml 5-Fu 1 ml;C组:注入20 mg/ml Nano-HAP溶胶1 ml;D组:注入同样浓度5-Fu和Nano-HAP混合液2 ml.四组实验动物于注药后7、14、21 d行肝脏B超扫描,记录生存时间,取肝肿瘤组织病理学检查.结果 术后7、14、21 d A组平均肿瘤体积分别为(4.93±0.76)cm3、(15.67±2.75)cm3和(52.36±10.57)cm3 ; B组为(4.16土0.33)cm3、(10.26±1.60)cm3和(18.89±4.65)cm3;C组为(1.43±0.13)cm3、(3.69±0.77)cm3和(9.51±2.09)cm3;D组为(2.80±0.46)cm3、(3.77±0.91)cm3和(8.46±0.95)cm3.B、C、D三组肿瘤体积均小于同期对照组,D组肿瘤体积最小.四组动物中位生存期分别为34、41、51和44 d.B、C、D三组生存期较对照A组延长.超声监测显示C、D组羟基磷灰石纳米粒子溶胶瘤内注射时可见肿瘤内强回声光点.多次注射后瘤体内可见钙化样强回声光团.HE染色后光镜下观察见A组和B组肿瘤组织出现多处片状坏死,C、D组注射区域呈片状坏死,被条索状或片状钙化灶分隔.结论 羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射治疗兔VX2肝肿瘤是安全、可行的,对肿瘤生长有明显的抑制作用,未见毒性反应.