HPLC法测定黄连、黄芩药对提取物中11个成分的含量

目的:建立高效液相色谱法测定黄连、黄芩药对提取物中11个成分(药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A)的含量。方法:采用Phenomoil 5μC18BDS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈-水(37∶63,内含磷酸二氢钾0.3400 g,十二烷基硫酸钠0.1700 g,磷酸调pH约为4),流速1.0 mL·min-1,检测波长349 nm,柱温30℃,对药对中黄连进行测定;采用Agilent ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.3%磷酸三乙胺(B)水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min-1,检测波长为275 nm,柱温30℃,对药对中黄芩进行测定。结果:药根碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A进样量分别在0.015～0.15μg(r=0.9997)、0.033～0.33μg(r=0.9993)、0.17～1.7μg(r=0.9991)、0.079～0.79μg(r=0.9991)、0.31～3.1μg(r=0.9991)、0.42～4.2μg(r=0.9992)、0.078～0.78μg(r=0.9995)、0.053～0.53μg(r=0.9993)、0.016～0.16μg(r=0.9993)、1.2×10-3～0.012μg(r=0.9991)、0.010～0.10μg(r=0.9994)范围内呈良好线性关系;平均回收率(n=5)分别为100.1%、97.7%、97.6%、102.2%、99.4%、99.3%、99.9%、99.8%、101.1%、101.1%、100.3%,RSD分别为2.1%、1.1%、1.2%、0.9%、1.2%、1.8%、1.8%、2.2%、2.0%、1.9%、2.3%。结论:该方法为黄芩、黄连药对提取物的质量综合评价提供了科学依据。     

变换波长HPLC法同时测定藿香鼻炎合剂中五种成分的含量

目的建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定藿香鼻炎合剂中的广藿香酮、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法。方法采用Kromasil C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相A:乙腈,流动相B:0.4%磷酸溶液,进行梯度洗脱;流速:1.0 mL/min;柱温:30℃;检测波长分别规定为310 nm(广藿香酮)、280 nm(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素)。结果广藿香酮、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的线性范围分别为4.300~86.00μg/mL(r=0.999 6)、15.87~317.4μg/mL(r=0.999 8)、6.920~138.4μg/mL(r=0.9999)、6.340~126.8μg/mL(r=0.999 4)、5.250~105.0μg/mL(r=0.999 8),平均加样回收率和RSD均符合中国药典规定。结论本文建立的HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定广藿香酮、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素5个成分,方法专属性强,重复性好,可作为藿香鼻炎合剂全面可靠的质量控制方法。     

基于一测多评法定量的四季三黄片质量评价研究

目的 建立同时测定四季三黄片中黄芩苷、去甲汉黄芩素苷、千层纸素A-7-O-β-D葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A等7种成分的一测多评法。方法 采用HPLC,岛津VP-ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%三氟乙酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速1.0 mL·min^-1;柱温30℃;检测波长276 nm。以黄芩苷为内参物,建立去甲汉黄芩素苷、千层纸素A-7-O-β-D葡萄糖醛酸苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A的相对校正因子,同时采用一测多评法和外标法测定四季三黄片中7个成分的含量,并将2种方法的测定结果进行比较。结果 7种成分在各自范围内线性关系良好(r>0.999 8),平均加样回收率97.0%～102.1%,RSD为1.2%～2.5%。共测定了4个企业29批四季三黄片中7种成分的含量,结果一测多评法与外标法测定结果无明显差异。不同企业样品间各成分含量存在明显差异。结论 建立的含量方法能够反映出投料用黄芩饮片的质量状况,进而全面有效地评价四季三黄片的质量,为其质量标准的提升奠定基础。     

HPLC同时测定复方鱼腥草软胶囊中6种有效成分的含量

摘要：目的:采用HPLC法同时测定复方鱼腥草软胶囊中新绿原酸、绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素6种成分的含量。方法:采用SynergiTM?Hydro-RP 80A色谱柱（250 mm×4.6 mm,4μm）,柱温为40℃,乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速为1.0 ml·min-1,检测波长为324 nm（检测新绿原酸、绿原酸）和274 nm（检测黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素）。结果:新绿原酸、绿原酸、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素6种成分分离良好;各成分的进样质量范围分别在0.012～0.245μg（r=0.999 8）、0.029～0.583μg（r=0.999 7）、0.201～4.028μg（r=0.999 9）、0.068～1.362μg（r=0.999 6）、0.035～0.704μg（r=0.999 8）、0.020～0.402μg（r=0.999 9）与峰面积呈现良好的线性关系;加样回收率分别为99.33%,98.76%97.53%99.03%97.85%98.72%,RSD分别为1.61%,1.13%,1.07%,0.89%,1.61%,1.29%（n=6）。结论:建立的方法简单、快速、准确,可实现复方鱼腥草软胶囊中6种成分的同时测定,可为全面评价复方鱼腥草软胶囊提供科学依据。     

黄芩透过人胎盘屏障体外模型药物成分研究

目的研究黄芩透过人胎盘屏障药物成分。方法用尤斯灌流室技术建立人胎盘屏障体外模型,预平衡30 min后,于母体池加入10 mg·mL-1黄芩溶液,分别于5~240 min内在胎儿池取样,用高效液相色谱技术分析样品中所含药物成分。色谱柱:Agilent Zorbax-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水(梯度洗脱),内标为葛根素,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为278 nm,柱温20℃,进样量为5μL。结果从5 min开始,黄芩苷、汉黄芩苷、汉黄芩素即可透过人胎盘屏障;黄芩素和千层纸素A从20 min开始才透过胎盘屏障;30 min后检测到的11种药物成分均可透过胎盘屏障,且在后续取样时间点未见新的物质生成。结论黄芩中的5种黄酮类成分(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A)均可透过人胎盘屏障体外模型。     

HPLC-DAD法同时测定柴黄颗粒中5种成分的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定柴黄颗粒中5种成分的含量。方法采用Gemini-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱;流速:1.0 ml/min;柱温:25℃;检测波长:210 nm、280 nm,进样量:10μl。结果柴黄颗粒中黄芩苷在6.096~304.8 ng (r=1.000 0)、汉黄芩苷在3.438~171.9 ng (r=0.999 9)、黄芩素在1.964~98.2 ng (r=0.999 7)、汉黄芩素在0.916~45.8 ng (r=0.999 8)、柴胡皂苷a在21.6~1 080.0 ng (r=0.999 9)范围内线性良好,平均回收率分别为95.16%(RSD=1.65%)、96.59%(RSD=1.30%)、92.33%(RSD=1.92%)、94.87%(RSD=1.42%)、96.77%(RSD=1.73%)。结论所建立的方法具有操作简单、快速、准确度高的优点,可用于柴黄颗粒中5种成分的含量测定。     

加压溶剂提取-UPLC法同时测定黄芩中6个黄酮类化合物的含量

目的建立超高效液相色谱法同时测定黄芩中6种黄酮类成分的含量。方法采用Waters Acquity UPLC BEH C18柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),流动相:乙腈(A)-体积分数为0.05%的磷酸水溶液(B)梯度洗脱[0 min:A-B(体积比为30∶70),5 min:A-B(体积比为50∶50);9 min:A-B(体积比为60∶40)],流速:0.4 m L·min-1,检测波长:220 nm,柱温:30℃。结果 6个黄酮(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、白杨素和千层纸素A)的色谱峰面积与质量浓度呈良好的线性关系,线性分别为24.4~292.1(r=0.999 5)、8.5~102.4(r=0.999 7)、6.8~82.0(r=0.999 5)、3.1~37.4(r=0.999 5)、0.6~6.7(r=0.999 5)、1.2~14.8 mg·L-1(r=0.999 6);平均回收率(n=6)分别为99.9%、100.8%、97.7%、100.1%、97.6%、98.9%。结论本方法可被用于黄芩中黄酮类成分的定量分析。     

HPLC法同时测定化痰平喘片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素的含量

目的:建立同时测定化痰平喘片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为甲醇-0.1%磷酸(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为277 nm,柱温为30℃,进样量为10μl。结果:黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素检测进样量线性范围为0.069 04~0.690 4(r=0.999 4)、0.054 56~0.545 6(r=0.999 6)、0.030 36~0.303 6μg(r=0.999 1);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率分别为97.64%~99.06%(RSD=0.57%,n=6)、98.31%~100.64%(RSD=0.85%,n=6)、97.53%~99.48%(RSD=0.76%,n=6)。结论:该方法操作简便、稳定、重复性好,可用于化痰平喘片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的同时测定。     

HPLC法同时测定芩连片中黄芩苷﹑黄芩素和汉黄芩素的含量

目的建立同时测定芩连片中黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素含量的HPLC方法。方法采用Dia-monsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm)分离,以甲醇-体积分数为0.4%的磷酸溶液为流动相梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为277 nm,柱温为35℃。结果黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素的线性范围分别为36.8～368.0 mg.L-1(r=0.999 7)、1.75～17.5 mg.L-1(r=0.999 8)、1.50～15.0mg.L-1(r=0.999 9),黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的平均回收率分别为97.3%(RSD=1.8%)、101.1%(RSD=1.8%)、99.0%(RSD=2.0%)。结论 HPLC法可用于芩连片的质量控制。     

RP-HPLC法测定不同产地黄芩中5种黄酮苷元成分的含量

目的:建立测定不同产地黄芩中5种黄酮苷元成分含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Agilent Extend-C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为276 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃。结果:去甲汉黄芩素、黄芩素、汉黄芩素、白杨素、千层纸素A的进样量分别在0.018 0⁰.108 0、0.378 00.108 0、0.378 0².268 0、0.094 52.268 0、0.094 5⁰.567 0、0.022 50.567 0、0.022 5⁰.135 0、0.035 40.135 0、0.035 4⁰.212 4μg范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r分别为0.999 9、0.999 5、0.999 6、0.999 5、0.999 5);精密度、重复性、稳定性试验的RSD<3%;加样回收率分别为98.72%(RSD=2.5%,n=6)、101.80%(RSD=2.0%,n=6)、99.25%(RSD=2.3%,n=6)、98.71%(RSD=1.5%,n=6)、99.05%(RSD=1.2%,n=6)。结论:该方法操作简便、快速,结果准确,可用于黄芩中黄酮苷元成分的含量测定。     

HPLC法同时测定黄芩、白芍药对提取物中8种指标成分的含量

目的:建立同时测定黄芩、白芍药对提取物中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、芍药苷、芍药内酯苷、没食子酸和12,,3,4,6-五没食子酰葡萄糖8种成分含量的HPLC方法。方法:Agilent ZORBAXSB-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm5,μm),流动相组成A:乙腈,B:0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL.min-1,检测波长:230 nm,柱温:30℃。结果:黄芩苷线性范围为186.4～932.0μg,定量下限为186.4μg(r=0.999 8),平均回收率为100.1%(RSD=2.0%,n=6);黄芩素线性范围为19.12～95.60μg,定量下限为19.12μg(r=0.999 7),平均回收率为99.3%(RSD=2.5%,n=6);汉黄芩苷线性范围为44.20～221.0μg,定量下限为44.20μg(r=0.999 5),平均回收率为98.6%(RSD=2.5%,n=6);汉黄芩素线性范围为10.30～51.50μg,定量下限为10.30μg(r=0.999 9),平均回收率为97.5%(RSD=1.4%,n=6);芍药苷线性范围为4.312～43.12μg,定量下限为4.312μg(r=0.999 6),平均回收率为98.4%(RSD=2.4%,n=6);芍药内酯苷线性范围为3.060～30.60μg,定量下限为3.060μg(r=0.999 5),平均回收率为98.2%(RSD=2.0%,n=6);没食子酸线性范围为9.994～199.9μg,定量下限为9.994μg(r=0.999 5),平均回收率为98.8%(RSD=2.1%,n=6);1,2,3,4,6-五没食子葡萄糖线性范围为8.800～44.00μg,定量下限为8.800μg(r=0.999 5),平均回收率为98.0%(RSD=2.2%,n=6)。结论:本方法可应用于黄芩、白芍药对提取物中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素、芍药苷、芍药内酯苷、没食子酸和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖8种成分含量的同时测定。     

HPLC法同时测定黄芩中5种黄酮类成分的含量

目的:建立以高效液相色谱法同时测定黄芩中5种黄酮类成分含量的方法,并采用该方法分析天津市15家零售药店中黄芩的质量。方法:色谱柱为AgilentZorbaxSB-C1(8150mm×4.6mm,5μm),流动相为含0.1%甲酸的乙腈-水溶液(梯度洗脱),检测波长为278nm。结果:黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素和千层纸素A的进样量分别在0.085～2.727μg(r=0.9999)、0.021～0.672μg(r=0.9999)、0.037～1.181μg(r=0.9999)、0.016～0.504μg(r=0.9993)、0.006～0.185μg(r=0.9997)范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均回收率分别为102.5%(RSD=2.63%)、97.09%(RSD=2.49%)、102.1%(RSD=2.87%)、97.5%(RSD=2.41%)和100.4%(RSD=2.86%)(n均为6)。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于黄芩药材的质量控制。     

黄芩黄酮对自由基引起的大鼠脑线粒体损伤的保护作用

目的　探讨黄芩中主要四种黄酮—黄芩素、黄芩苷、汉黄芩素和汉黄芩苷对脑线粒体氧化损伤的保护作用。方法　运用抗坏血酸 Fe2 +、2 ,2 azobis ( 2 amidinopropane)hy drochloride (AAPH)及NADPH三种不同损伤体系诱导大鼠大脑皮质线粒体脂质过氧化 ,研究黄芩中四种主要黄酮在不同体系中的保护作用。结果　四种黄酮在 10 μmol·L-1下对NADPH诱导的脂质过氧化都具有保护作用 ,而只有黄芩素和黄芩苷在前二体系中效果显著 ;四种黄酮对抗坏血酸 Fe2 +体系诱发的线粒体肿胀和膜的流动性降低都有一定的保护作用。结论　黄芩黄酮能抑制不同体系诱导的线粒体氧化损伤 ,黄芩素在各项测定中效果最好     

Protective effects of flavonoids in the roots of Scutellaria baicalensis Georgi against hydrogen peroxide-induced oxidative stress in HS-SY5Y cells.

Oxidative stress plays an important role in the pathological process of neurodegenerative diseases. The effects of four major flavonoids present in Scutellaria baicalensis Georgi on hydrogen peroxide-induced neuronal cell damage are studied in this paper. When human neuroblastoma SH-SY5Y cells were incubated in Hanks' solution with the addition of 400 microM hydrogen peroxide for 2 h, the viability of cells was decreased remarkably, while the cell lipid peroxidation and the percentage of lactose dehydrogenase released into the culture medium was significantly increased. Addition of 10 microM of baicalein and baicalin significantly attenuated the cellular injury induced by hydrogen peroxide, while the effect of wogonin was marginal and wogonoside showed no effect at the tested concentration. In a separate experiment, 10 microM of baicalein and baicalin also antagonized the intracellular free-calcium concentration ([Ca2+]i) increase caused by 1 mM hydrogen peroxide. The effects of baicalein in both experiments were similar to those of quercetin, a well-studied antioxidant flavonoid. These results demonstrated the protective effects of flavonoids originating from Scutellaria baicalensis Georgi on the oxidative injury of neuronal cells.     

一测多评法测定复方黄白胶囊中四种黄酮成分的含量

目的建立一测多评测定复方黄白胶囊中4种黄酮成分（黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素）的方法。方法采用斜率校正法,以黄芩苷作为内参物,计算汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素与黄芩苷的相对校正因子;分别用一测多评法和外标法测定复方黄白胶囊中4种黄酮成分的含量。结果黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素的色谱保留时间分别为14．80、28．58、37．76及47．52。阴性对照在相应位置处未见色谱峰,样品色谱图中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩索色谱峰的纯度因子分别为998．8、995．2、989．6及988．5。汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素与黄芩苷间的相对校正因子分别为1．396、1．808和2．010。复方黄白胶囊中4种黄酮成分采用校正因子计算的含量值与外标法实测值之间无明显差异。黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素的加样回收率平均值分别为99．5％、99．7％、100．5％、99．4％,相对标准偏差分别为1．3％、0．9％、1．6％及1．1％（n=6）。本研究表明一测多评法测定黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素及汉黄芩素方法专属性、精密度、稳定性、重复性和回收率均良好。结论一测多评法可用于复方黄白胶囊中4种黄酮成分的定量分析。     

Interaction of flavones from the roots of Scutellaria baicalensis with the benzodiazepine site

A radioreceptor binding assay was used to guide the isolation of four chemical constituents in the organic solvent extracts of Scutellaria baicalensis Georgi capable of binding to the benzodiazepine site (BZD-S) of the GABAA receptor: wogonin (Ki = 2.03 +/- 0.24 microM), baicalin (Ki = 77.10 +/- 4.79 microM), baicalein (Ki = 5.69 +/- 0.95 microM), and scutellarein (Ki = 12.00 +/- 1.27 microM). All four compounds contain the flavonoid phenylbenzopyrone nucleus. Based on BZD-S binding, the order of affinity among these four compounds was wogonin > baicalein > scutellarein > baicalin.     

双黄解毒乳膏质量标准研究

目的:建立双黄解毒乳膏的质量标准。方法:采用薄层色谱法对制剂中的黄芩和关黄柏进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对制剂中的黄芩苷含量进行定量分析。结果:定性鉴别方法能同时鉴别黄芩、关黄柏,专属性强,分离度好。黄芩苷进样浓度在80.0～400.0μg·mL-1范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9998);平均回收率为97.3%,RSD=1.3%(n=9)。结论:所建标准可用于双黄解毒乳膏的质量控制。