白介素-15和其受体可能参与增强炎性肠病患者肠固有层B细胞的活化和分化

目的:研究炎性肠病(IBD)中,白介素-15(IL-15)和其受体(IL-15R)在肠黏膜B细胞活化和分化阶段的作用。方法:采用逆转录聚合酶链反应和免疫组化检测IBD患者炎性结肠黏膜组织和对照组肠组织的IL-15和IL-15Rαm RNA及蛋白表达水平。利用从对照组织分离的固有层单核细胞(LPM Cs)体外分析了重组体(r)IL-15对B细胞中IL-15Rα表达和免疫球蛋白G(IgG)产生的影响。结果:IBD患者尤其是溃疡性结肠炎(UC)患者,肠黏膜IL-15和IL-15Rαm RNA表达明显高于对照组,IL-15Rα蛋白反应阳性的单核细胞比例也高于对照组。IL-15Rα蛋白大量定位在…     

TRPV1在炎症性肠病大鼠结肠黏膜表达及其与肥大细胞相关性研究

目的:探讨炎症性肠病(IBD)大鼠模型肠黏膜TRPV1表达和肥大细胞变化,以及二者在IBD发病机制中的作用。方法:雄性SD大鼠用Morris法制备炎症性肠病模型,免疫组化法检测大鼠结肠黏膜TRPV1蛋白表达,RT-PCR检测TRPV1 mRNA表达,并设正常对照组。结果:正常组肠黏膜无或弱阳性TRPV1表达,IBD组肠黏膜TRPV1 mRNA和蛋白表达较正常组增强,肥大细胞数显著增多(P<0.01)。TRPV1蛋白及mRNA水平与肥大细胞数量之间呈正相关(r1=0.528,r2=0.62,P<0.01)。结论:IBD发生发展与TRPV1过度表达及肥大细胞数量变化密切相关。     

5-羟色胺系统与炎症性肠病发病的相关性

目的检测炎症性肠病(IBD)肠黏膜组织中5-羟色胺(5-HT)、5-羟色胺转运体(5-SERT)、5-羟色胺3受体(5-HT3R)mRNA及其蛋白表达,探讨5-HT系统与炎症性肠病的相关性。方法应用RT-PCR和蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测IBD患者(IBD组)炎症肠黏膜组织和健康者(健康对照组)肠黏膜组织中5-HT、SERT、5-HT3R mRNA及其蛋白表达。结果 IBD组5-TH3R mRNA表达量高于健康对照组(P<0.001);同时IBD组5-TH、5-TH3R表达量均高于健康对照组(P=0.003,P=0.013);此外5-HT与克罗恩病和溃疡性结肠炎的活动度有关,5-HT的表达量随疾病活动度的加重而升高(P=0.017,P=0.010)。结论5-TH、5-TH3R表达量的上调增加IBD的易感性,并且5-HT的表达量与IBD活动度相关。     

胰岛素样生长因子与炎症性肠病活动度和病变范围的相关性

目的 通过检测炎症性肠病(IBD)患者血清胰岛素样生长因子(IGF-1)水平以及肠道黏膜组织中IGF-1的表达,探讨IGF-1与IBD活动度和病变部位之间关系.方法 收集2008年1月-10月诊断为IBD的患者75例,其中克罗恩病(CD)30例,溃疡性结肠炎(UC)45例,收集同期行结肠镜检查未见异常且年龄、性别构成与IBD组相近的39例患者作为对照组.根据Harvey和Bradshow标准的疾病活动指数(简化CDAI)及Southerland疾病活动指数(UCAI)对CD和UC患者的疾病程度进行分级.测定所有患者的血清IGF-1水平以及肠道黏膜组织的IGF-1表达.结果 活动期UC和CD患者的血清IGF-1水平分别为(149.37±101.81)、(112.23±45.94)ng/mL;缓解期分别为(159.4±91.63)、(142.89±121.61)ng/mL,均显著低于对照组的(236.00±62.55)ng/mL(P值均0.05).UC组中,全结肠型和部分结肠型患者的血清IGF-1水平分别为(157.56±96.60)、(140.47±101.68)ng/mL,两亚组间的差异无统计学意义(P>0.05).CD组中,结肠累及型和小肠型患者的血清IGF-1水平分别为(97.48±29.35)、(145.90±113.14)ng/mL,两亚组间的差异无统计学意义(P>0.05).IBD组患者的肠道黏膜IGF-1呈高表达,而对照组呈低表达.结论 血清IGF-1对判断IBD的活动度、病变部位的特异性不强.IBD患者的肠壁组织中可见IGF-1蛋白表达显著增强,可能肠间质细胞局部分泌的IGF-1介导了炎症的发生、发展.     

低氧诱导因子-1α及诱导型一氧化氮合酶在炎症性肠病中的表达

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在炎症性肠病(IBD)中的表达及作用. 方法:取经过临床表现、内镜、病理、影像学等方法共同确诊的IBD活检的石蜡标本,用免疫组织化学方法检测HIF-1α和iNOS蛋白表达情况. 结果:在47例溃疡性结肠炎(UC)、13例克隆病(CD)和10例正常结肠黏膜组织中,HIF-1α蛋白的细胞表达阳性率中位数分别为54%,59%和1%,前两者分别与后者比较有显著性差别(P<0.01),而前两者之间比较无显著性差别(P>0.05);iNOS蛋白的细胞表达阳性率中位数分别为58%,54%和2%,前两者分别与后者比较有显著性差别(P<0.01),而前两者之间比较无显著性差别(P>0.05);HIF-1α和iNOS蛋白水平呈正相关(溃疡性结肠炎:r=0.627;克隆病:r=0.610)(P<0.05). 结论:HIF-1α和iNOS蛋白均参与了IBD的发病,HIF-1α可能是iNOS基因表达中的一个重要调节者.     

既往深部静脉血栓形成部位出现局限性移植后Kaposi肉瘤：停用西罗莫司后的突发皮损

K aposi肉瘤(K S)是一种与人疱疹病毒8感染相关的血管增殖性肿瘤。H H V-8引发K aposi肉瘤的机制是通过分泌血管内皮生长因子(V EG F)及上调内皮细胞中VEG F受体———K DR,而致病。作者报道了一例72岁接受肾移植发生K S的男性患者,其使用了西罗莫司、麦考酚酸莫酯、他克莫司及     

长期炎症性结肠炎患者的结肠直肠不典型增生发生率低:荧光内镜检查结果

背景与研究目的:长期炎症性肠病(IBD)患者的结肠不典型增生的风险性增加。常规结肠镜检查可能遗漏平坦黏膜的不典型增生病变。用氨基乙酰丙酸(5-ALA)作为光敏剂的内镜荧光成像已经成为一种新的鉴别正常结肠黏膜和不典型增生技术。将这项技术和随机活检结合前瞻性评估长期IBD患者不典型增生的发生率。患者与方法:42例(28例溃疡性结肠炎,11例克罗恩病,3例不确定性结肠炎,平均43岁,极差21～78)长期(疾病中位持续时间14年,极差3～40)IBD结肠炎连续病例进行52次结肠镜检查。所有患者均处于临床缓解期。用常规白光和荧光(口服5-ALA)结肠镜两…     

食管鳞癌中Ets-1 mRNA和蛋白的表达

目的检测转录因子Ets-1 mRNA和蛋白在食管不同病变组织中的表达。方法采用原位杂交和免疫组织化学SP法检测62例食管鳞癌、31例癌旁不典型增生组织及62例食管正常黏膜组织中Ets-1 mRNA和蛋白的表达情况。结果 Ets-1 mRNA和蛋白表达阳性率在正常食管黏膜、癌旁不典型增生及食管鳞癌组织中均依次升高,组间比较差别均具有统计学意义(P<0.01)。Ets-1 mRNA的阳性表达率随着食管鳞癌分级的增高而增高,但差别无统计学意义(P>0.05),而与浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);Ets-1蛋白的表达与食管鳞癌的分级、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P<0.05);二者的表达与患者的性别、年龄无关(P>0.05)。Ets-1 mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈正相关关系(r=0.343,P<0.05)。结论 Ets-1基因表达增强可能是食管鳞癌发生的早期事件,可作为判定食管鳞癌侵袭和转移能力的一项指标。     

溃疡性结肠炎和肠易激综合征患者结肠黏膜HBD-2和TNF-α的表达

目的 研究β-防御素2(HBD-2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)在溃疡性结肠炎和肠易激综合征(腹泻型)患者结肠黏膜中的表达,及其在发病中的作用和相互关系.方法 收集30例溃疡性结肠炎患者、20例肠易激综合征(腹泻型)患者和10名健康对照的结肠黏膜组织,免疫组织化学法检测各组HBD-2和TNF-α蛋白表达.结果 免疫组织化学分析显示溃疡性结肠炎组HBD-2和TNF-α表达强度均高于肠易激综合征(腹泻型)组(z=-4.856,z=-3.987,均P＜0.01)和正常结肠黏膜组(z=-3.611,z=-3.248,均P＜0.01),肠易激综合征(腹泻型)组和正常结肠黏膜组HBD-2和TNF-α表达强度比较差异无统计学意义(z=-0.373,z=-0.032,均P＞0.05).轻、中、重度3组溃疡性结肠炎之间HBD-2和TNF-α的表达强度比较差异无统计学意义(x2=1.190、P＞0.05,X2=1.672、P＞0.05).结论 HBD-2和TNF-α的表达水平在溃疡性结肠炎结肠黏膜组织中明显升高,与肠易激综合征(腹泻型)关系不密切,与溃疡性结肠炎病情轻重关系不密切.     

白细胞介素-12 B及其受体在炎症性肠病患者外周血和肠黏膜中的表达及意义

目的 探讨白细胞介素(IL)-12B及其受体在炎症性肠病(IBD)患者外周血及肠黏膜中的表达和意义.方法 通过结肠镜下收取结肠黏膜标本,其中活动期的克罗恩病(CD)患者、溃疡性结肠炎(UC)患者各60例,健康对照者50例.使用Western blot对活动期IBD患者发病部位肠黏膜蛋白水平进行检测,以同期结肠镜检查未见异常的患者作为对照.收集患者及健康体检者的外周血2 mL,留取血浆,提取血细胞总RNA,用Real-time PCR法检测IL-12B及其受体IL-12RB1的mRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆IL-12p40的表达.结果 外周血Real-time PCR结果显示IL-12B mRNA在CD、UC患者中的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05);IL-12RB1的mRNA在CD、UC患者中表达也增高,但只有CD患者有统计学意义(P<0.05).肠黏膜Real-time PCR结果显示IL-12B mRNA在CD、UC患者中的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05);而IL-12RB1 mRNA的表达在3组之间差异无统计学意义(P>0.05).外周血及肠黏膜的Real-time PCR结果显示IBD患者中Th细胞特异性转录因子(T-bet、GATA3、RORγ-t和Foxp3)的mRNA表达有不同程度的改变,且变化都有统计学意义.相关性分析显示,外周血IL-12B与T-bet的mRNA表达呈正相关(r=0.781,P<0.01);肠黏膜IL-12B与T-bet和RORγ-t的mRNA表达均呈强正相关(r=0.807,P=0.000;r=0.831,P=0.000).血清ELISA结果显示IL-12p40在IBD患者中的表达均高于健康对照者,且差异有统计学意义(P<0.05).CD患者IL-12p40表达高于UC患者(P<0.05).肠黏膜Western blot结果示IL-12p40在CD、UC患者中的表达均高于正常对照组,但只有CD患者IL-12p40蛋白的表达高于UC患者(P<0.05),其受体IL-12RB1、IL-12RB2蛋白在CD、UC中表达也高于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 IL-12B mRNA和蛋白在活动期CD患者外周血及病变部位肠黏膜中表达均明显上调.IL-12B可能通过Th1和Th17途径在IBD患者尤其是CD患者炎症过程中发挥重要的促炎作用.     

VEGF、VEGFR2(KDR)、MMP-1以及转录调节因子Ets-1在子宫颈癌组织中的表达及其意义

目的 从分子水平观察肿瘤血管生成因子VEGF、VEGF受体KDR、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)及其转录调节因子Ets-1(E26 tranformation-specific-1,Ets-1)在子宫颈癌中的表达并揭示其因子间相互关系,为判断患者预后和解释促血管生成因子间内在规律提供根据。方法 利用原位杂交和免疫组织化学染色法检测87例子宫颈癌组织中VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-l等因子mRNA和蛋白表达规律;患者生存曲线比较在阴性组和阳性组间进行;因子间分析利用Pearson相关分析法。结果 VEGF mRNA和蛋白主要分布在癌细胞胞质中,阳性率分别为78．6％(68／87)和70．4％(61／87);KDR mRNA和蛋白主要在内皮细胞上表达,其表达率与VEGF表达率间存在密切的相关关系,r=0．892;MMP-1在肿瘤细胞和间质血管内皮细胞中表达,尤其在血管新生处表达明显;Em-1主要分布在内皮细胞和肿瘤细胞中,其表达率与KDR和IVl／vtP-1表达率间的相关系数(r)分别为0．900和0．873;上述四因子表达与肿瘤分化度、淋巴结转移及5年存活率均有密切的相关性。结论 VEGF、KDR、MMP-1以及Ets-1是参与子宫颈癌血管生成的重要因子,且彼此间存在密切的相关性,检测其表达规律可为判断子宫颈癌生物学行为和解释促血管生成因子间内在联系提供理论根据。     

E26转录因子和VEGF在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义

目的 探讨E26转录因子(E26 transformation specific-1, Ets-1)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在卵巢上皮性肿瘤中的表达及意义。方法 在55例卵巢上皮性肿瘤以及12例正常卵巢组织中,采用免疫组化SP法检测其中Ets-1及VEGF蛋白的表达;原位杂交法检测组织中Ets-1mRNA的表达。结果Ets-1及VEGF在卵巢上皮性癌中的表达显著高于正常、良性及交界组(P<0.01)。FIGO Ⅲ-Ⅳ期组中Ets-1以及VEGF蛋白的表达均高于FIGO Ⅰ-Ⅱ早期组(P<0.05);肿瘤细胞低分化组中Ets-1的表达明显高于中高分化组(P<0.01);有淋巴结转移组中两者表达高于无淋巴结转移组(P<0.05);Ets-1蛋白和m RNA的表达显著相关(r_s为0.609,P<0.01);肿瘤组织中Ets-1和VEGF的表达密切相关(r_s=0.288,P<0.05)。结论 Ets-1和VEGF是卵巢上皮性肿瘤中重要的促血管生成因子,与肿瘤的发展转移及患者的预后关系密切。     

E26转录因子-1和信号转导与转录激活因子6在食管病变组织中的表达及临床意义

目的探讨E26转录因子-1(Ets-1)和信号转导与转录激活因子6(STAT6)在食管病变组织中的表达,并分析其相关性与临床意义。方法应用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法和反转录聚合酶链反应法检测36例食管鳞癌、36例癌旁非典型增生及18例正常食管黏膜组织中Ets-1、STAT6的表达。结果 Ets-1、STAT6蛋白在正常食管黏膜、癌旁非典型增生及食管鳞癌组织中阳性表达率均依次升高,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05),且二者呈正相关关系(r=0.447,P<0.05)。Ets-1、STAT6 mRNA在正常食管黏膜、癌旁非典型增生及食管鳞癌组织中相对含量依次升高,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。Ets-1及STAT6异常表达与食管癌的分级、浸润深度及淋巴结转移均密切相关(P<0.05)。结论 Ets-1和STAT6异常表达与食管上皮癌变有关,二者可能具有协同作用,并可作为判断患者预后的分子指标。     

VEGF对体外培养的人脐静脉内皮细胞Ets-1的诱导表达

目的：探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）对体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）中转录因子Ets-1的诱导表达。 方法：原代培养获得HUVECs;应用细胞免疫化学染色技术及形态计量分析系统Image-Pro Plus（IPP）,检测VEGF对培养的内皮细胞Ets-1蛋白的诱导表达作用并对相关指标进行半定量分析。结果：VEGF（10 μg•L^-1）可诱导内皮细胞Ets-1蛋白的短时表达升高（P<0.01）,即随时间的延长,Ets-1表达也逐渐增强,在10 min时达高峰,30 min后Ets-1表达逐渐降低到无VEGF刺激的水平。 结论：VEGF可诱导人脐静脉内皮细胞中Ets-1蛋白的短时表达增加。     

血管内皮生长因子及其受体Flt-1、KDR在胃癌组织中的表达及意义

目的探讨胃癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)及其受体1(Flt-1)、受体2(KDR)表达和微血管密度(MVD)的意义。方法采用免疫组织化学方法检测208例胃癌组织和139例胃正常黏膜组织VEGF、Flt-1、KDR表达和计数MVD。结果胃癌组织中VEGF及其受体Flt-1、KDR的表达明显高于胃正常黏膜组织(P<0.01);胃癌组MVD比胃正常黏膜组度高[(26.19±16.23)/mm2vs(16.02±09.88)个/mm2,P<0.01]。VEGF、Flt-1、KDR表达与肿瘤浸润深度、淋巴转移密切相关(P<0.05)。在VEGF高表达的区域,Flt-1和KDR的表达亦增强,三者呈正相关(P<0.05)。VEGF表达水平与MVD之间也有正相关性(P<0.05)。结论VEGF及其受体Flt-1、KDR在胃癌中广泛表达,与胃癌患者的病理特征和微血管生成关系密切。胃癌组织中VEGF的表达与受体Flt-1、KDR的表达呈正相关;这些结果提示VEGF、Flt-1、KDR在肿瘤组织的血管生成和侵袭转移中可能起重要作用。     

苦参碱调节IL-6/STAT3信号通路对炎症性肠病大鼠肠黏膜损伤的影响

【目的】观察苦参碱调节白细胞介素6(IL-6)/信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路对炎症性肠病（IBD）大鼠肠黏膜损伤的影响。【方法】以三硝基苯磺酸（TNBS）结肠灌注法构建IBD大鼠模型,随机分为模型组,苦参碱低、高剂量组,苦参碱高剂量+colivelin(STAT3激活剂)组,每组10只;再选10只大鼠结肠灌注等体积生理盐水作为正常组。经苦参碱和colivelin处理后,检测各组大鼠体质量和疾病活动指数（DAI）,采用苏木素-伊红（HE）染色法检测大鼠结肠黏膜组织病理学变化,透射电镜观察大鼠结肠黏膜组织超微结构变化,采用酶联免疫吸附分析（ELISA）和比色法分别检测大鼠血清和结肠黏膜组织白细胞介素6(IL-6)、C-反应蛋白（CRP）,超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,采用蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测大鼠结肠黏膜组织IL-6/STAT3通路相关蛋白表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织发生严重病理损伤且其超微结构受损明显,DAI,结肠黏膜组织病理评分,血清和结肠黏膜组织CRP、IL-6、MDA水平,结肠黏膜组织IL-6蛋白表达...     

Ets-1在不同食管病变组织中的表达及意义

目的 探讨Ets-1在食管不同病变组织中的表达及意义.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting 方法检测62例食管鳞癌、20例癌旁不典型增生组织及40例食管正常黏膜组织中Ets-1 mRNA和蛋白的表达情况.结果 Ets-1 mRNA和蛋白在正常食管黏膜、癌旁不典型增生及食管鳞癌组织中的相对含量均依次升高,组间比较差异有统计学意义(0.728±0.097、0.751±0.084、0.779±0.046,P＜0.05;0.023±0.011、0.208±0.010、0.733±0.015,P＜0.05).结论 Ets-1在食管鳞癌组织中表达显著升高.     

溃疡性结肠炎患者JAM-1蛋白与STAT3信号通路关系的研究

目的 探讨溃疡性结肠炎对肠道紧密连接蛋白JAM-1表达的影响,并分析JAM-1蛋白与STAT3信号通路的关系。 方法 组织标本来自2017年1月-2018年1月之间在蚌埠医学院第一附属医院内镜室进行电子结肠镜检查,其肠镜标本表现和病理诊断为溃疡性结肠炎的患者,诊断标准参考《炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2012)》,收集40例标本作为实验组;同时收集手术室正常肠黏膜组织(胃肠外科肠道切除物边缘正常组织,以下所有正常肠黏膜组织为同一来源)20例作为对照组。采用组织病理学分级来评估溃疡性结肠炎的严重程度。采用免疫组织化学法(IHC)检测结肠组织中JAM-1、STAT3和pSTAT3的表达。 结果 组织病理学结果显示,实验组结肠黏膜JAM-1染色强度较对照组减弱,染色细胞数量减少,分布不规则;STAT3染色强度无明显变化;pSTAT3染色强度明显增强,染色细胞数增多。免疫组织化学结果显示,与对照组相比,实验组JAM-1蛋白表达下降,pSTAT3表达上升(P<0.05),差异有统计学意义,STAT3表达比较差异无统计学意义。 结论 溃疡性结肠炎患者肠紧密连接蛋白JAM-1的表达较正常人下降,pSTAT3表达较正常人上升,两者成负相关关系。      

钙卫蛋白在溃疡性结肠炎患者结肠黏膜及粪便中的表达及临床意义

目的:研究溃疡性结肠炎结肠黏膜及粪便中钙卫蛋白含量与疾病活动性的关系,以及临床使用粪便钙卫蛋白作为炎症活动性标志物的可能性.方法:选取溃疡性结肠炎患者42人和正常对照20人,采用抗钙卫蛋白单克隆抗体对结肠黏膜的钙卫蛋白进行免疫组化分析,同时采用ELISA方法测定粪便中钙卫蛋白含量.溃疡性结肠炎组织学严重程度根据Truelove-Witts标准判断.结果:免疫组化染色显示活动期溃疡性结肠炎的结肠黏膜中有不同强度的钙卫蛋白表达,表达强度与组织学严重程度显著相关(r=0.89,P=0.000 1);缓解期结肠黏膜无或仅有微弱的表达,缓解期与活动期相比差异有统计学意义(P<0.01).ELISA方法测定结果显示,粪便钙卫蛋白含量与结肠黏膜的钙卫蛋白表达强度呈显著相关(r=0.90,P=0.000 7),并且粪便钙卫蛋白含量与组织学严重程度亦显著相关(r=0.849,P<0.01).结论: 溃疡性结肠炎结肠黏膜中的钙卫蛋白可以反映炎症的组织学严重程度,也是粪便中钙卫蛋白的来源,因此检测粪便中的钙卫蛋白可以反映炎症的组织学严重程度.该检测方法简便可行.     

血管内皮生长因子及其双受体系统在鼻咽癌中的表达

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)及其双受体系统串珠素、Flt-1在鼻咽癌(NPC)中的表达,探讨它们与NPC的增生、浸润及转移的关系。方法应用反转录-聚合酶链反应方法检测26例NPC及相应癌旁组织和10例正常鼻咽黏膜组织中VEGF、串珠素和Flt-1 mRNA的表达。结果 VEGF、串珠素和Flt-1 mRNA在NPC组织中的表达高于在癌旁组织和正常鼻咽黏膜组织中的表达(P<0.01)。VEGF、串珠素和Flt-1 mRNA在癌旁组织和正常鼻咽黏膜组织中的表达比较,差异无统计学意义(P>0.05)。VEGF、Flt-1和串珠素mRNA在有淋巴结转移的NPC组织和无淋巴结转移NPC组织中的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF及其双受体系统串珠素和Flt-1与NPC的生长、浸润有密切关系。