加味四逆散对慢性应激大鼠海马区5羟色胺2A受体(5-HT2AR)及其mRNA表达的影响

目的:探讨加味四逆散对慢性应激模型大鼠海马区5-HT2A受体及其mRNA表达的影响。方法:选择Open-feild法评分相近的74只成年SD大鼠,随机分为对照组、模型组、氟西汀组、加味四逆散高,中,低剂量组。应用分养和长期不可预见的中等强度应激造成大鼠抑郁模型,以免疫组织化学法和原位杂交法研究大鼠海马区5-HT2AR及其mRNA表达的变化。结果:与对照组比,模型组和加味四逆散高剂量组海马区5-HT2AR表达降低(P0.01,P0.05);模型组、氟西汀组和加味四逆散中剂量组5-HT2AR mRNA表达降低(P0.01,P0.05)。与模型组比,各治疗组5-HT2AR及mRNA的表达均升高(P0.05,P0.01)。各组之间5-HT2AR/mRNA的变化无统计学差异。结论:慢性应激能诱发大鼠轻度抑郁障碍和海马区5-HT2AR及其mRNA的低表达。加味四逆散改善慢性应激大鼠的抑郁症状可能与调节海马区5-HT2A受体系统增高其表达有关。     

益肾填精中药对环境内分泌干扰物染毒大鼠睾酮合成关键酶及雄激素受体表达的影响

目的观察益肾填精中药对邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(di-2-ethylhexylphthalate,DEHP)及氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)染毒大鼠睾酮合成关键酶和雄激素受体(androgen receptor,AR)基因及蛋白表达水平的影响,探讨所用中药拮抗环境内分泌干扰物(environmental endocrine disruptors,EEDs)抗雄激素活性的可能作用机制。方法 70只21日龄雄性SD大鼠随机分为7组,每组10只。对照组(喂饲玉米油)、染毒A组(DEHP 500 mg/kg)、染毒B组(CYP 80 mg/kg)、染毒C组(DEHP 500 mg/kg+CYP 80 mg/kg)及治疗A组、治疗B组、治疗C组,治疗A、B、C组同时喂饲益肾填精中药合剂(40 m L/kg)。每日空腹灌胃给药,疗程为30天。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction,real time-PCR)及免疫印迹方法(Western blot),分别检测St AR、CYP11A1、CYP17A1、3β-HSD、17β-HSD、AR mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,染毒A、B、C组St AR、CYP11A1、CYP17A1、3β-HSD、17β-HSD、AR mRNA表达水平显著下调(P0.05,P0.01)。中药治疗干预可使上述基因表达水平明显上调(P0.05,P0.01)。DEHP、CYP单独及联合染毒可导致CYP11A1、CYP17A1、AR蛋白表达水平显著下调(P0.05,P0.01),而中药治疗干预可使上述蛋白表达水平显著上调(P0.05,P0.01)。结论益肾填精中药可通过使睾丸的AR以及睾酮合成关键酶的表达上调,促进染毒大鼠自身睾酮的生物合成,多水平、多靶点地发挥其对EEDs抗雄激素活性及生殖毒性的拮抗作用。     

肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca2+变化及TRPA1和TRPM8 mRNA表达的影响

目的:观察肉桂醛对0℃冷应激大鼠背根神经节神经细胞胞浆内Ca~(2+)浓度变化,并探讨其对瞬时受体电位通道蛋白A1(TRPA1)和M8(TRPM8)mRNA表达的影响。方法:取大鼠原代背根节神经细胞置于0℃冷应激状态,噻唑蓝(MTT)法检测不同时长冷应激状态下细胞的活性;加入肉桂醛,采用激光共聚焦显微镜观察细胞内外Ca~(2+)分布的变化;另以实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测其TRPA1,TRPM8 mRNA的表达。结果:不同时长的冷应激状态下,细胞存活度无明显差异;冷应激可降低背根神经节(DRG)神经细胞胞浆内Ca~(2+)浓度(P0.05),一定量的肉桂醛则能使Ca~(2+)浓度显著升高(P0.01)。Real-time PCR检测显示,长时间冷应激TRPA1 mRNA表达上调(P0.05);长时间冷应激TRPM8 mRNA表达明显要高于短时冷应激(P0.05);适当浓度的肉桂醛使冷应激大鼠DRG神经细胞TRPA1 mRNA表达升高(P0.05,P0.01),对TRPM8 mRNA的影响尚不明显。结论:冷应激能影响TRPA1,TRPM8 mRNA的表达,降低胞浆内Ca~(2+)浓度,作用机制可能为肉桂醛通过活化TRPA1通道,升高细胞浆内Ca~(2+)浓度。     

蛇床子素对生殖系统损伤小鼠血清睾酮和AR表达的影响

目的:研究蛇床子素对环磷酰胺致生殖系统损伤雄性小鼠血清睾酮和睾丸雄激素受体(AR)表达的影响。方法:建立环磷酰胺致生殖系统损伤雄性小鼠模型,灌胃蛇床子素20天后,用放免法测定血清睾酮水平,用免疫组化法测定AR含量,计算性器官脏器系数。结果:蛇床子素高剂量可显著升高环磷酰胺致生殖系统损伤雄性小鼠血清中睾酮的含量(P<0.05),免疫组化结果显示,高剂量可增加睾丸肌样细胞AR阳性细胞表达百分率,高、低剂量可增加精液囊的脏器系数。结论:蛇床子素可升高环磷酰胺致生殖系统损伤小鼠血清睾酮含量的降低;增强睾丸肌样细胞AR的表达。     

电针足三里对吗啡戒断大鼠μ受体mRNA表达的影响

目的探讨电针改善吗啡戒断症状的作用机制。方法建立自然吗啡戒断大鼠模型，运用RT—PCR方法测定脑组织μ受体mRNA的表达，观察电针足三里对吗啡戒断大鼠体重及μ受体mRNA表达的影响。结果电针组大鼠体重比戒断组增加明显（P〈0．05），戒断组和电针组比正常组脑组织中μ受体mRNA表达降低，治疗后电针组比戒断组脑组织中μ受体mRNA表达明显增加。结论电针足三里具有提高吗啡戒断大鼠体重、改善大鼠吗啡戒断症状的作用。电针调节吗啡戒断大鼠海马、下丘脑μ受体mRNA的表达，可能是电针改善大鼠吗啡戒断症状的作用机制之一。     

疏肝理肺法对应激条件下哮喘大鼠海马糖皮质激素受体mRNA表达的影响

支气管哮喘属于呼吸系统心身疾病范畴,其发病受生物、心理和社会三方面因素的影响,其中精神心理因素在哮喘的发生、发展和转归中起着重要作用.本研究通过建立束缚应激条件下哮喘大鼠模型,探讨疏肝理肺方药对血浆皮质酮和海马GRmRNA表达的影响.     

滋阴清热方对金黄地鼠血清性激素及雄激素受体mRNA表达的影响

目的: 探讨滋阴清热方对金黄地鼠血清性激素及雄激素受体表达的影响。 方法: 选用成年雄性金黄地鼠侧腹皮脂腺斑作为动物模型,随机分为4组,分别予生理盐水、滋阴清热方高剂量(18 g·kg^-1)、滋阴清热方低剂量(9 g·kg^-1)、安体舒通(10 mg·kg^-1)灌胃给药,每天1次。 4周后,采用ELISA法检测各组血清睾酮(T)、雌二醇(T₂)的水平,实时荧光定量PCR法检测各组皮脂腺斑处雄激素受体(AR)mRNA的表达水平。 结果: 滋阴清热方高、低剂量组与空白组比较,能降低血清T水平,但无显著性差异;高剂量组血清E₂水平升高,与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。4组皮脂腺斑处AR mRNA的表达水平有显著性差异(P<0.05),清热滋阴方高剂量组与空白组比较有显著性差异(P<0.05)。 结论: 滋阴清热方可能是通过改善金黄地鼠血清雌二醇水平,并抑制局部雄激素受体mRNA的表达,而影响皮脂腺的增生。     

电针镇痛时炎症痛大鼠PAG部位I型白细胞介素-1受体mRNA表达的变化

目的 :本实验观察炎症痛和针刺镇痛时 ,大鼠中脑导水管周围灰质 (PAG)部位I型白细胞介素 1受体基因 (IL 1RImRNA)表达的变化。方法 :实验分正常组、炎症痛组、假电针组、电针组。正常对照组大鼠脚掌注射生理盐水 ,炎症痛各组大鼠脚掌注射 2 %角叉菜胶 ( 1 0 0 μL)造成炎症痛模型。在角叉菜胶注射 3hr后大鼠处于一种稳定的痛敏状态。电针组大鼠于造模前电针将致炎侧“足三里”和“昆仑”穴 3 0min ,假电针组大鼠给予同样处理但不通电。实验采用原位杂交技术 ,观察脚掌注射角叉菜胶 3hr后大鼠中脑导水管周围灰质 (PAG)部位IL 1RImRNA表达的变化及针刺对其的影响。结果 :致炎后 3hr大鼠痛阈显著降低 ,大鼠PAG部位的IL 1RImRNA表达显著增加 ,假电针组大鼠该部位的IL 1RImRNA表达与炎症痛组相比无显著变化 ,而电针组大鼠该部位的IL 1RImRNA阳性细胞数与假电针组相比显著减少。结论 :炎症痛可引起大鼠PAG部位的IL 1RImRNA表达增加 ,而电针镇痛则抑制炎症痛引起的大鼠PAG部位IL 1RImRNA表达     

电针镇痛时炎症痛大鼠PAG部位Ⅰ型白细胞介素-1受体mRNA表达的变化

目的：本实验观察炎症痛和针刺镇痛时，大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)部位Ⅰ型白细胞介素-1受体基因(IL-1RI mRNA)表达的变化。方法：实验分正常组、炎症痛组、假电针组、电针组。正常对照组大鼠脚掌注射生理盐水，炎症痛各组大鼠脚掌注射2％角叉菜胶(100μL)造成炎症痛模型。在角叉菜胶注射3hr后大鼠处于一种稳定的痛敏状态。电针组大鼠于造模前电针将致炎侧“足三里”和“昆仑”穴30min，假电针组大鼠给予同样处理但不通电。实验采用原位杂交技术，观察脚掌注射角叉菜胶3hr后大鼠中脑导水管周围灰质(PAG)部位IL-1RI mRNA表达的变化及针刺对其的影响。结果：致炎后3hr大鼠痛阈显著降低，大鼠PAG部位的IL-1RI mRNA表达显著增加，假电针组大鼠该部位的IL-1RI mRNA表达与炎症痛组相比无显著变化，而电针组大鼠该部位的IL-1RI mRNA阳性细胞数与假电针组相比显著减少。结论：炎症痛可引起大鼠PAG部位的IL-1RI mRNA表达增加，而电针镇痛则抑制炎症痛引起的大鼠PAG部位IL-1RI mRNA表达。     

慢性束缚应激模型大鼠海马脑啡肽mRNA和前强啡肽mRNA的表达及中药复方的影响

目的:探讨中药复方逍遥散、四君子汤、金匮肾气丸抗慢性束缚性应激的机理。方法:采用单纯束缚的方法建立慢性束缚性应激的大鼠模型,提取海马总RNA,采用RT-PCR反应扩增脑啡肽和前强啡肽基因,比较二者在海马中的表达情况。结果:显示慢性束缚应激时大鼠海马内脑啡呔mRNA和前强啡肽mRNA的表达明显增强,并且时间越长增强越明显。逍遥散和四君子汤都能降低海马内脑啡肽mRNA的表达,三个复方都能降低前强啡肽mRNA的表达,逍遥散的作用明显优于金匮肾气丸。结论:脑啡肽和前强啡肽都参与了海马对应激的调控,对内源性阿片系统的调节是三个中药复方调节应激的重要途径之一。     

房颤病人心房肌浆网RyR2受体mRNA表达变化的研究

目的:研究心房颤动(房颤)患者肌浆网钙释放通道ryanodine受体(ryanodine receptor type2,RyR2)mRNA表达的改变,探讨房颤电重构与结构重构的发生机制.方法:38例风心病二尖瓣狭窄接受外科手术者,手术时取右心房及右心耳各约100 mg,通过逆转录-聚合酶链反应技术,以GAPDH为内参照,测量肌浆网RyR2受体的mRNA的变化.结果:房颤者肌浆网RyR2受体mRNA较窦性心律者上调,心房不同部位无差别.结论:房颤患者RyR2受体mRNA上调,说明肌浆网Ca2 超负荷与肌浆网钙库的释放增加有关.     

电针对创伤后应激障碍大鼠行为学和海马糖皮质激素受体表达的影响

目的:观察电针对创伤后应激障碍(PTSD)模型大鼠的治疗作用并探讨其可能的作用机制,为临床针灸治疗PTSD提供依据。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和电针组,每组10只。采用国际上公认的单程长时应激方法制作PTSD模型。电针组大鼠给予"百会"与"足三里"2Hz电针刺激,30min/次,每日治疗1次,连续1周。通过Morris水迷宫实验观察3组大鼠的学习记忆能力;采用免疫组织化学方法检测糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)在各组大鼠海马的表达。结果:模型大鼠的逃避潜伏期明显延长,电针治疗能显著缩短PTSD模型大鼠的逃避潜伏期(均P<0.05);模型组大鼠海马GR表达明显高于正常组,电针组大鼠海马GR表达显著低于模型组(均P<0.05);模型组大鼠海马MR表达明显低于正常组,电针组大鼠海马MR表达显著高于模型组(均P<0.05)。结论:电针改善PTSD模型大鼠空间学习记忆能力可能与电针影响其海马MR和GR的表达有关。     

针刺对实验性缓慢性心律失常大鼠延髓Gs基因表达的影响

目的：探讨针刺“内关”穴调节缓慢性心律失常的效应机理。方法：电针异搏定所致的心律失常模型大鼠双侧“内关”穴,观察针刺前后心律（率）变化;用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法测定延髓中激动性G蛋白（Gs）mRNA的相对含量。结果：针刺治疗组与模型组相比有显著变化（P〈0．01）。结论：缓慢性心律失常可能和延髓中G蛋白基因表达障碍有关;G蛋白在针刺“内关”穴对心律失常的调节中有重要作用。