人参主要成分对大鼠免疫功能的比较研究

人参及其有效成分因具有卓越的增强免疫、调节内分泌及抗氧化应激等作用而著称,然而各成分功效之间的差别并不明确。该文以实验大鼠为对象,研究人参主要有效成分一人参总皂苷、三醇皂苷、二醇皂苷以及人参多糖对机体的影响。结果显示人参二醇皂苷和多糖在提升动物免疫器官质量、血浆白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素6(IL-6)、血浆δ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)方面的作用优于其他组。总皂苷和三醇皂苷可有效增加脾脏天然杀伤细胞(NKC)的含量。二醇皂苷和多糖可以显著增加大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)和促甲状腺激素(TSH)含量。人参总皂苷在增加大鼠脑组织一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)方面优于其他各组。研究表明,人参各成分在增强免疫、调节内分泌及抗氧化应激方面有不同程度的功效,人参二醇皂苷和人参多糖在增强免疫方面体现优势,人参总皂苷在抗氧化应激方面体现优势。     

人参皂苷对慢性应激抑郁模型大鼠行为学及HPA轴、BDNF的影响

目的:探讨人参皂苷对慢性应激所致大鼠抑郁模型的干预作用.方法:通过测定大鼠血清中皮质酮(COR)、糖皮质激素受体(GR)、盐皮质激素受体(MR)和脑组织中神经营养(BDNF)的mRNA表达水平,探讨人参皂苷的抗抑郁机制.结果:与正常组大鼠比较,经过慢性应激6周后大鼠糖水偏好显著下降,强迫游泳测试不动时间明显增加,表明慢性应激导致大鼠产生抑郁样行为.同时,抑郁大鼠的血清COR水平增加,海马GR、海马及皮层BDNF的mRNA表达水平均明显降低.给予人参皂苷(12.5,25,50 mg·kg-1)6周后,发现其能显著改善由慢性应激所致的大鼠抑郁行为及生化指标.各个组间海马MR的mRNA表达水平没有显著差异.结论:人参皂苷的抗抑郁作用机制可能通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴功能,进而提高脑组织BDNF 表达水平.     

枸杞多糖对低雄激素不育模型大鼠影响的药效观察和作用机制研究

目的通过观察枸杞多糖对低雄激素不育大鼠生殖损伤的改善作用,评价枸杞多糖治疗低雄激素雄性不育的药效和可能的作用机制。方法将雄性成年SD大鼠随机分为空白对照组、模型对照组、枸杞多糖低剂量和高剂量组,其中造模给药方式为灌胃给予度他雄胺40 mg/kg,1次/d,连续28 d;在造模的第15天开始枸杞多糖干预灌胃给药,高低剂量组分别给予枸杞多糖80 mg/kg和40 mg/kg,模型对照组给予等量溶媒,1次/d,连续14 d。给药结束时检测睾丸附睾组织学、超微结构、精子活力、交配雌鼠受孕率、血清雄激素水平、附睾雄激素受体(AR)和核转录因子(NF-κB)蛋白表达。结果与模型对照组比较,枸杞多糖高剂量组精子活率和前向运动率显著升高(P0.05);枸杞多糖低剂量组和高剂量组交配雌鼠受孕率分别为37.5%和62.5%,较模型对照组分别上升25%和50%;模型对照组附睾可见附睾上皮连接出现断裂,管内精子聚集;枸杞多糖低剂量组大鼠附睾上皮结构和精子排列有一定的恢复,高剂量组附睾上皮组织和精子基本恢复正常;枸杞多糖给药组血清双氢睾酮(DHT)水平较模型对照组显著升高(P0.05,P0.01);枸杞多糖给药组AR和NF-κB蛋白表达较模型对照组显著升高(P0.05,P0.01)。结论枸杞多糖可以改善低雄激素附睾不育大鼠的生育能力,其作用机制可能与升高血清DHT水平、促进AR和NF-κB表达、发挥雄激素样活性有关。     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑前阿黑皮原mRNA的影响

目的探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)的作用机理。方法取新生SD雌性大鼠随机分为3组，于9日龄时注射丙酸睾丸酮，制成ASR模型，用中药天癸方治疗14天，于106日龄左右(动情前期)处死，并取血清，用放免法测定总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)，下丘脑前阿黑皮原mRNA(POMCmRNA)。结果模型组大鼠均无排卵，对照组(未造模)大鼠均排卵，中药组大鼠排卵率为58%。TT和FT模型组均明显高于对照组和中药组(P＜0.01)。3组大鼠在下丘脑弓状核神经元雄激素受体(AR)和β-内啡肽(β-EP)共存。下丘脑POMCmRNA水平模型组高于对照组(P＜0.01)，中药组降至基本正常。结论ASR模型的血清雄激素水平升高，有可能通过下丘脑β-EP神经元上的AR引起POMCmRNA表达增加，中药天癸方可使血清雄激素水平和下丘脑POMCmRNA下降。     

菊花总黄酮含药血浆对干眼症细胞模型Bax mRNA及Bcl-2mRNA表达的影响

目的观察菊花总黄酮含药血浆对大鼠泪腺上皮细胞干眼症模型中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA表达的影响。方法将培养生长状态良好的大鼠泪腺上皮细胞随机分为无雄激素培养组(空白组)、雄激素培养组(雄激素组)、无雄激素培养黄酮组(菊花总黄酮组),分别加入空白血浆、丙酸睾酮、菊花总黄酮含药血浆干预48 h,然后加入100μmol/L H_2O_2继续培养60 min诱导细胞凋亡。RT-PCR法检测泪腺上皮细胞中Bax mRNA及Bcl-2 mRNA的表达情况。结果雄激素组和菊花总黄酮组Bax mRNA表达量均明显低于空白组(P均0.05),Bcl-2 mRNA表达量均明显高于空白组(P均0.05),雄激素组和菊花总黄酮组比较差异均无统计学意义(P均0.05)。结论菊花总黄酮含药血浆有可能通过抑制泪腺上皮细胞中Bax mRNA表达及促进Bcl-2 mRNA表达的途径,起到抑制泪腺上皮细胞凋亡的作用。     

中药天癸方对雄激素致不孕大鼠下丘脑前阿黑皮原mRNA的影响

目的 :探讨中药天癸方对雄激素致不孕大鼠 (ASR)的作用机理。方法 :取新生SD雌性大鼠随机分为 3组 ,于 9日龄时注射丙酸睾丸酮 ,制成ASR模型 ,用中药天癸方治疗 14天 ,于 10 6日龄左右 (动情前期 )处死 ,并取血清 ,用放免法测定总睾酮 (TT)、游离睾酮 (FT) ,下丘脑前阿黑皮原mRNA(POMCmR NA)。结果 :模型组大鼠均无排卵 ,对照组 (未造模 )大鼠均排卵 ,中药组大鼠排卵率为 58%。TT和FT模型组均明显高于对照组和中药组 (P <0 0 1)。 3组大鼠在下丘脑弓状核神经元雄激素受体 (AR)和 β 内啡肽( β EP)共存。下丘脑POMCmRNA水平模型组高于对照组 (P <0 0 1) ,中药组降至基本正常。 结论 :ASR模型的血清雄激素水平升高 ,有可能通过下丘脑β EP神经元上的AR引起POMCmRNA表达增加 ,中药天癸方可使血清雄激素水平和下丘脑POMCmRNA下降     

补肾中药对雄激素致不孕大鼠胰腺及卵巢雄激素受体的影响

目的:探讨补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制。方法:新生SD雌性大鼠随机分为3组,ASR模型组:9日龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮;中药组:ASR模型在80日龄起每日灌服天癸方;对照组:9日龄SD雌性大鼠皮下注射中性茶油。在106日龄左右(动情前期),放免法测定血Δ4-雄烯二酮(Δ4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、雌二醇(E2)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),RT-PCR方法检测胰腺及卵巢雄激素受体(AR)mRNA表达水平,并观察中药治疗前后上述指标的变化。结果:ASR模型血Δ4-A、TT、FT、E2、Ins、C-P均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),胰腺、卵巢的AR mRNA表达水平明显升高(P<0.01),中药天癸方治疗后,排卵率为58%,各项血激素及胰腺AR mRNA表达水平明显下降,与对照组比较有显著性差异(P<0.05),卵巢AR mRNA水平与治疗前相比无明显改变。结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、卵巢的AR mRNA表达,引起高胰岛素血症和无排卵。天癸方可降低血雄激素和胰岛素,使胰腺AR mRNA表达水平下降,纠正ASR模型的内分泌-代谢失调状态,虽然卵巢的AR mRNA表达水平仍较高,但在正常的激素环境下仍出现了排卵。     

补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠胰腺及卵巢雄激素受体的影响

目的:探讨补肾中药天癸方对雄激素致不孕大鼠(ASR)促排卵的作用机制。方法:新生SD雌性大鼠随机分为3组,ASR模型组:9d龄SD雌性大鼠皮下注射丙酸睾丸酮;中药组:ASR模型在81d龄起每日灌服天癸方;对照组:9d龄SD雌性大鼠皮下注射中性茶油。在106d龄左右(动情前期),放免法测定血Δ4-雄烯二酮(Δ4-A)、总睾酮(TT)、游离睾酮(FT)、雌二醇(E2)、胰岛素(Ins)和C-肽(C-P),RT-PCR方法检测胰腺及卵巢雄激素受体(AR)mRNA表达水平,并观察中药治疗前后上述指标的变化。结果:ASR模型血Δ4-A、TT、FT、E2、Ins、C-P均显著高于对照组(P<0.05,P<0.01),胰腺、卵巢的AR mRNA表达水平明显升高(P<0.01);中药天癸方治疗后,排卵率为58%,各项血激素及胰腺AR mRNA表达水平明显下降,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),卵巢AR mRNA水平与治疗前相比无明显改变。结论:ASR模型血雄激素水平升高,上调胰腺、卵巢的AR mRNA表达,引起高胰岛素血症和无排卵。天癸方可降低血雄激素和胰岛素,使胰腺AR mRNA表达水平下降,纠正ASR模型的内分泌-代谢失调状态,虽然卵巢的AR mRNA表达水平仍较高,但在正常的激素环境下仍出现了排卵。     

人参多糖对LPS诱导小鼠巨噬细胞炎症因子生成的抑制作用及其机制

目的:研究人参多糖对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制作用及机制。方法:细胞以2×104个/m L的密度接种于6孔培养板,将细胞分为空白组,LPS组,LPS+地塞米松组,LPS加人参多糖组(质量浓度分别为31.25,62.6,125,250,500 mg·L-1)。用LPS(1 mg·L-1)刺激生长良好的RAW264.7细胞24 h建立体外细胞炎症模型,Griess试剂法检测一氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测一氧化氮(NO),TNF-α和IL-6 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞K基因结合核因子抗体核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白的表达。结果:与空白组比较,LPS模型组细胞因子NO,TNF-α,IL-6表达量显著升高(P0.01),炎症模型建立成功。给予人参多糖干预后,与LPS组比较,31.25~500 mg·L-1的人参多糖可以明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放炎症因子NO,TNF-α和IL-6水平(P0.05,P0.01),抑制i NOS,TNF-α和IL-6 mRNA的转录(P0.05,P0.01),与LPS组比较,125~500μmol·L-1可以显著抑制细胞核内NF-κB p65的表达(P0.05,P0.01)。结论:人参多糖能明显抑制巨噬细胞炎症因子NO,TNF-α和IL-6过度表达,从而抑制炎症反应,其机制可能与抑制相关炎症因子和mRNA的表达和抑制NF-κB信号通路相关。     

人参多糖对HCG诱导黄体与颗粒细胞功能的影响

目的研究人参多糖对大鼠卵巢功能的作用。方法采用体外细胞培养观察人参多糖对HCG诱导的黄体与颗粒细胞分泌孕酮与cAMP的影响,并检测了卵母细胞的存活率。分离培养黄体、颗粒与卵母细胞,设对照组与不同浓度人参多糖实验组,采用放免分析方法测定孕酮与cAMP生成含量,细胞存活率检测采用MTT法。结果与对照组比较,孕酮含量:黄体细胞为(6573.46±185.14)与(4509.55±126.82)pmol,颗粒细胞为(197.16±42.87)与(320.42±12.46)pmol。cAMP:黄体细胞为(31.20±17.13)与(65.26±15.93)fmol,颗粒细胞为(121.15±19.96)与(296.42±27.28)fmol。结论人参多糖抑制HCG诱导黄体细胞孕酮分泌,促进HCG诱导颗粒细胞孕酮分泌。而协同黄体细胞与颗粒细胞cAMP生成,人参多糖使卵母细胞生长抑制率降低,呈区间剂量依赖关系。