肌萎缩侧索硬化培养模型中星形胶质细胞的变化

目的应用脊髓片器官型培养模型制备选择性运动神经元死亡的肌萎缩侧索硬化（ALS）体外模型，探讨星形胶质细胞在ALS发病中的作用。方法脊髓器官型培养采用8日龄SD大鼠的腰段脊髓，在培养液中加入浓度为100μmol／L的苏-羟天冬氨酸（THA），建立ALS脊髓器官型培养模型；用神经元特异的SMI-32和星形胶质细胞特异的GFAP染色，并对细胞计数。结果与对照组相比，THA100μmol／L组的脊髓前角以及周边的白质中星形胶质细胞明显增生，增生的程度随用药时间的延长而增加，且伴随细胞数量的增加，其形态也发生改变。结论THA干预制造的ALS模型中，在前角位置有明显的星形胶质细胞增生，且增生的时间明显早于运动神经元的丢失。     

突触蛋白在肌萎缩侧索硬化转基因小鼠运动神经元上的表达

目的：评估肌萎缩侧索硬化转基因小鼠脊髓前角和大脑运动皮质运动神经元上的突触蛋白在不同疾病阶段的数量变化。 方法：实验于2003—11／2004—06在墨尔本大学HFI研究所脑损伤与修复组完成。表达突变人类超氧化物歧化酶1基因的转基因小鼠36只（肌萎缩侧索硬化组），以及表达B6SJL基因的正常小鼠36只（对照组），两组分别按性别及出生后60，90及120d随机分为每个时间点12只，雌雄各半。①采用荧光金标记法标记腰段脊髓及皮层的运动神经元。②采用免疫荧光方法标记突触蛋白，阳性对照为加入突触蛋白抗体并有阳性表达；阴性对照省略此抗体。③采用共焦计数系统计数并行统计学分析。 结果：①荧光金标记的运动神经元：经荧光显微镜检查确定腰段脊髓及皮层的运动神经元均被荧光金清楚地标记。②运动神经元的突触蛋白计数：在疾病中期出生后90d及后期出生后120d，运动神经元上的突触蛋白的数量呈显著性降低（腰段脊髓细胞体：（0．75&;#177;0．06），（0．59&;#177;0．09）／μm；腰段脊髓树突：（0．71&;#177;0．06）（0．55&;#177;0．03）／μm；大脑皮层运动神经元细胞体：（0．79&;#177;0．03），（0．63&;#177;0．08）／μm；大脑皮层运动神经元树突：（0．76&;#177;0．07），（0．61&;#177;0．08）／μm，P〈0．01）；同组别雌雄对照差异无显著性。 结论：肌萎缩侧索硬化运动神经元突触蛋白数量的降低与疾病及病程的进展有直接关系。     

突触蛋白在肌萎缩侧索硬化转基因小鼠运动神经元上的表达

目的:评估肌萎缩侧索硬化转基因小鼠脊髓前角和大脑运动皮质运动神经元上的突触蛋白在不同疾病阶段的数量变化。方法:实验于2003-11/2004-06在墨尔本大学HFI研究所脑损伤与修复组完成。表达突变人类超氧化物歧化酶1基因的转基因小鼠36只(肌萎缩侧索硬化组),以及表达B6SJL基因的正常小鼠36只(对照组),两组分别按性别及出生后60,90及120d随机分为每个时间点12只,雌雄各半。①采用荧光金标记法标记腰段脊髓及皮层的运动神经元。②采用免疫荧光方法标记突触蛋白,阳性对照为加入突触蛋白抗体并有阳性表达;阴性对照省略此抗体。③采用共焦计数系统计数并行统计学分析。结果:①荧光金标记的运动神经元:经荧光显微镜检查确定腰段脊髓及皮层的运动神经元均被荧光金清楚地标记。②运动神经元的突触蛋白计数:在疾病中期出生后90d及后期出生后120d,运动神经元上的突触蛋白的数量呈显著性降低(腰段脊髓细胞体:(0.75±0.06),(0.59±0.09)/μm;腰段脊髓树突:(0.71±0.06)(0.55±0.03)/μm;大脑皮层运动神经元细胞体:(0.79±0.03),(0.63±0.08)/μm;大脑皮层运动神经元树突:(0.76±0.07),(0.61±0.08)/μm,P<0.01);同组别雌雄对照差异无显著性。结论:肌萎缩侧索硬化运动神经元突触蛋白数量的降低与疾病及病程的进展有直接关系。     

嗅鞘细胞移植治疗运动神经元病／肌萎缩侧索硬化的初步报告

目的：探讨嗅鞘细胞移植治疗运动神经元病／肌萎缩侧索硬化的安全性及有效性。方法：对8例运动神经元病／肌萎缩侧索硬化患者在脊髓病变处分两点共注入50μL嗅鞘细胞悬液，细胞数共约10&;#215;10^5个。结果：术前肌萎缩侧索硬化功能评分(ALSFRS)[(18．6&;#177;7．9)分]分别与术后2～4周【(21．8&;#177;7．6)分]比较，差异有显著性意义(t=-2．376，P=0．049)，与术后3～6个月[(21．5&;#177;7．6)分]比较，差异无显著性意义(t=-2.025，P=0.083)，8例患者的神经功能均稳定或改善。术后行肌电图检查的患者显示术后自发电位减少或消失，收缩时肌电波幅较术前明显降低，电位密度明显增加。结论：嗅鞘细胞移植安全可行，术后2～4周和3～6个月均能阻止或逆转运动神经元病／肌萎缩侧索硬化的病情恶化。     

嗅鞘细胞移植治疗运动神经元病/肌萎缩侧索硬化的初步报告

目的:探讨嗅鞘细胞移植治疗运动神经元病/肌萎缩侧索硬化的安全性及有效性。方法:对8例运动神经元病/肌萎缩侧索硬化患者在脊髓病变处分两点共注入50μL嗅鞘细胞悬液,细胞数共约10×105个。结果:术前肌萎缩侧索硬化功能评分(ALSFRS)犤(18.6±7.9)分犦分别与术后2～4周犤(21.8±7.6)分犦比较,差异有显著性意义(t=-2.376,P=0.049),与术后3～6个月犤(21.5±7.6)分犦比较,差异无显著性意义(t=-2.025,P=0.083),8例患者的神经功能均稳定或改善。术后行肌电图检查的患者显示术后自发电位减少或消失,收缩时肌电波幅较术前明显降低,电位密度明显增加。结论:嗅鞘细胞移植安全可行,术后2～4周和3～6个月均能阻止或逆转运动神经元病肌萎缩侧索硬化的病情恶化。     

肌萎缩侧索硬化干细胞治疗研究进展

<正>肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是一种成年起病的致死性的慢性进行性神经变性疾病,临床上肢体和延髓的上、下运动神经元损害并存。除利鲁唑(riluzole)可延长存活时间数月外,目前尚无其他确切有效的临床治疗方法,患者诊断后平均存活期2.5~5.0年,最终死于呼吸衰竭。鉴于ALS的确切发病和进展的机制尚不明确,针对性靶向治疗的研究至今难以取     

干细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化的可能机制

肌萎缩侧索硬化(ALS)是一种运动神经元病,可侵犯脊髓前角、脑干及皮质运动神经元等,而致上下运动神经元合并受损。ALS人群患病率(0.8～7.3)/106,年发病率约(0.2～2.4)/106,男女之比为(1.4～2.5):1,平均存活时间一般为31～43个月[1]。ALS主要为散发型,5%～10%为家族型,在20%的家族型患者中,有明确的SOD1基因突变。关于ALS的病因假说主要包括兴奋性氨基酸假说、遗传基因假说、自体     

肌萎缩性侧索硬化1例分析

对肌萎缩性侧索硬化1例分析如下。1病历摘要男,76岁。主因双上肢无力4 a,腹部烧灼感10 d余,加重2h入院,4 a前,逐渐出现双上肢无力,活动不灵,肌肉颤动,呈进行性加重。5个月前逐渐出现声音嘶哑,饮水呛咳,吞咽费力,双上肢肌无力及肌萎缩进行性加重,不能持物,抬举不能,尚能独立行走,10 d余前,出现腹部烧灼感,无返酸,无腹泻,无恶心呕吐,无二便失禁,及意识障碍,2 h前,腹部烧灼感加重,入住承德医学院附属医院神经内科。患者既往脑梗死病史10 d余,未遗留明显后遗症,否认高血压、冠心病病史。查体:T 36.8℃、R28次/m in、P 106次/m in、BP 130/80 m…     

肌萎缩侧索硬化的分子遗传学

肌萎缩侧索硬化（amyotrophic lateral sclerosis,ALS）是一种进展性神经肌肉疾病,因上、下运动神经元变性导致球部、四肢、躯干、胸部及腹部肌肉逐渐无力和萎缩.     

肌萎缩侧索硬化的研究进展

肌萎缩侧索硬化是选择性侵犯运动神经元的进行性神经系统变性疾病。目前对于其发病机制有较多理论 ,但都并非结论性的 ,而且至今尚未发现可阻止其病情发展的有效治疗方法。本文对肌萎缩侧索硬化的发病机制及治疗方法的研究进展作一综述。     

Novel genome-editing-based approaches to treat motor neuron diseases: Promises and challenges

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运动神经元病及运动神经元病综合征

目的探讨运动神经元病综合征(MNDS)的病因、发病机制、诊断。方法回顾性分析90例运动神经元病(MND)及MNDS的临床特点和诊疗过程。结果MND38例(42.4%),对症及支持治疗,总有效率21.4%;MNDS52例(57.8%),病因为主治疗,总有效率61.5%。两者疗效差异显著(P<0.01)。结论明确MNDS的病因,对治疗及预后极为重要。     

经颅磁刺激运动诱发电位在肌萎缩侧索硬化中的应用

目的：探讨经颅磁刺激运动诱发电位（TMS—MEP）在肌萎缩侧索硬化（ALS）患者上运动神经元损害评价中的作用。方法：对符合E1 Escorial诊断标准的20例ALS患者（ALS组）和15名健康对照者（健康对照组）进行双小指展肌、胫前肌TMS-MEP测定。运动诱发电位（MEP）中枢性损害的判断标准为中枢运动传导时间（CMCT）延长、安静状态双侧皮层刺激MEP未引出或易化状态至少一侧皮层刺激MEP未引出;CMCT侧间差增大为可疑异常。对两组患者的MEP中枢异常进行比较。结果：ALS患者小指展肌易化状态、安静状态CMCT、胫前肌易化状态CMCT与对照组比较显著延长。ALS患者TMS—MEP中枢性损害的出现率为60％,主要表现为CMCT延长和MEP引不出,分别占50％（10／20）和50％（10／20）,如将CMCT侧间差增大者计入,则总异常率提高到75％。按诊断级别分组后,临床确诊、拟诊和可能的ALS患者的MEP中枢性损害出现率分别为87．5％、71．4％和60．0％,单纯CMCT侧间差增大而无其他异常,仅见于拟诊或可能的ALS患者。结论：对于拟诊或可能的ALS,MEP中枢性异常可以帮助确立上运动神经元受累。单纯CMCT侧间差增大可能发生于早期患者,有助于发现轻度或亚临床上运动神经元病损。     

运动负荷对去卵巢大鼠关节软骨细胞Cx43蛋白表达影响的初步研究

目的探讨运动负荷对去卵巢大鼠关节软骨细胞中间隙连接蛋白Connexin43(Cx43)蛋白表达的影响。方法3月龄Sparague-Dawley(SD)大鼠30只,均分为(1)A组(卵巢切除组):行双侧卵巢切除术(n=10);(2)B组(卵巢切除+立即运动组):双侧卵巢切除术后第2周起至第21周,大鼠在小动物跑步台上运动(20m/min×60min/d×6d/周×20周)(n=10);(3)C组(卵巢切除+延迟运动组):双侧卵巢摘除后第14周起至第21周,大鼠在小动物跑步台上运动(20m/min×60min/d×6d/周×8周)(n=10)。各组大鼠均于术后21周末取材膝关节胫骨端,进行Cx43免疫组织化学染色观察,结合图象分析系统及分析软件,观察和分析关节软骨细胞中Cx43蛋白表达及阳性面积百分比(%)。结果Cx43阳性表达定位于相邻软骨细胞的胞浆和/或胞膜上。A组中关节软骨出现退变,软骨细胞数目减少,Cx43阳性表达主要分布于同源软骨细胞群中。B组关节软骨基质较丰厚,软骨细胞数量多,分布清晰,浅层较幼稚的软骨细胞及其深层的同源软骨细胞群中均可见Cx43蛋白阳性表达,尤以关节软骨负重区为典型。C组关节软骨退行性变、基质菲薄、创伤、溃疡,软骨下骨外露、硬化,关节软骨细胞明显减少、退变、形态不规则、分布紊乱,主要残存于关节周缘非负重区,部分尚存的软骨细胞中表达Cx43。A、B、C3组Cx43阳     

运动神经元病患者神经传导阻滞的研究

目的 探讨运动神经元病(MND)患者神经传导阻滞(CB)的诊断标准。方法对86例确诊的MND患者(MND组)、60例正常人(正常组)，14例多灶性运动神经病患者(MMN组)分别进行运动神经传导速度(MCV)测定，采用由近端至远端分段刺激，记录各段刺激引发的复合肌肉动作电位(CMAP)的波幅、时限、面积，并根据不同的诊断标准判定CB。结果MND组中，根据美国电诊断医学会(AAEM)标准有10条神经存在CB(3％)，传统标准有2条神经存在cB(0．5％)，Gustav Pfeiffer标准无神经存在CB；MMN组在各种标准下均存在CB(阳性率分别为96．4％，89．3％，83．9％)；正常组均无CB。结论对MND患者进行CB判定时，根据CMAP波幅的不同，所采用的标准也应不同。     

大鼠延髓呼吸性神经元向脊髓膈运动神经元投射的实验观察

目的观察大鼠延髓呼吸性神经元向脊髓膈运动神经元的直接投射。方法 2 5只Wistar大鼠分为 3组 :脊髓定位组(5只 )、延髓投射组 (15只 )和对照组 (5只 )。运用辣根过氧化物酶 (HRP)逆追踪法 ,于脊髓定位组膈神经干注入HRP ,确定膈运动神经元在脊髓中的位置 ,然后延髓投射组于逆行性标记细胞位置 ,对照组于脊髓后角分别注入HRP ,观察延髓呼吸性神经元的标记情况。结果在脊髓定位组的注射同侧观察到 ,C3 —C5节段的前角中间部出现逆行性标记细胞 ,为典型的前角运动神经元。在延髓投射组观察到 ,逆行性标识神经元出现在延髓疑后核和面后核的腹内侧部。对照组在上述位置未见标识神经元。结论大鼠膈运动神经元位于C3 -C5节段 ,其投射神经元主要分布在以延髓疑后核和面后核区为主轴的一个长的细胞柱上     

脊肌萎缩症家系运动神经元生存基因微小突变的鉴定

目的 建立一套运动神经元生存(SMN)基因微小突变检测体系,以评价其用于脊肌萎缩症(SMA)家系的价值.方法 采用RNA水平和基因组DNA水平双途径检测策略,用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)、位点特异性PCR、多重连接依赖性探针扩增(MLPA)和T克隆测序技术对2个SMA家系共7个成员行SMN基因微小突变分析.结果 用MLPA和T克隆测序技术检测家系A的SMA患者有1个拷贝的SMN1基因,其第228位密码子上存在1个无义突变L228X,该突变来源于患者父亲;家系B的SMA患者父亲有2个SMN1基因,其中1个SMN1基因存在移码突变22_23 insA.其余家系成员均为有1个SMN1基因拷贝的SMA携带者.结论 建立的SMN微小突变检测体系成功鉴定了2个SMN微小突变,为SMA家系的遗传咨询提供了可靠依据.     

Adaptive equipment use by people with motor neuron disease in Australia: a prospective,observational consecutive cohort study

Purpose: People with motor neuron sisease require adaptive equipment to enhance life quality. This study aimed to examine total and concurrent equipment items prescribed with phenotype consideration.

Methods: A prospective, observational consecutive cohort study was undertaken. Data regarding Amyotrophic Lateral Sclerosis Functional Rating Scale-Revised, phenotype, symptom onset and Functional Independence Measure (inpatients only) was recorded. Equipment utilized was coded by therapist as: speech devices; transfer devices; mobility devices (including power wheelchairs); orthoses; activities of daily living equipment; assisted technology and home modification equipment.

Results: Two hundred and seventy-three people with motor neuron disease participated, mean age 67?years, mean amyotrophic Lateral Sclerosis Functional Rating Scale-Revised score 32, a moderate level of disability. Equipment items per participant ranged from 0 to 20, median 5. The electric lift recliner chair was the most commonly used equipment item, used by 51.2% of the cohort. There was a statistically significant difference in equipment use between flail leg and bulbar (Md 11, 3 items, respectively; p?=?.005), and flail leg and cervical phenotypes (Md 11, 3.5 items respectively; p?=?.009).

Conclusions: People with motor neuron disease have high equipment needs to optimize quality of life. Information regarding phenotype relative to equipment requirement, and most frequently prescribed equipment items can assist health-care providers anticipate equipment needs, burden and intensity for those with motor neuron disease.

• Implications for rehabilitation

• People with motor neuron disease have high concurrent equipment needs.

• Electric recliner lift chairs are the most frequently prescribed equipment item by those with motor neuron disease.

• There is variation in concurrent equipment needs relative to motor neuron disease phenotype.