上皮间质转化在食管鳞状细胞癌转移中的作用

目的：观察上皮间质转化相关标记物E-钙黏蛋白（E-cadherin）和Vimentin基因及其蛋白在食管鳞状细胞癌淋巴结转移组和非转移组中的表达,并分析E-cadherin和Vimentin表达的相关性。方法采用免疫组织化学SP法和实时定量逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）检测47例有淋巴结转移、30例无淋巴结转移的食管癌和20例正常食管组织中E-cadherin和Vimentin基因及其蛋白的表达情况。结果对照组、非转移组与转移组 E-cadherin蛋白表达分别为20/20（100％）、29/30（96．67％）和44/47（93．62％）,组间比较差别有统计学意义（ P＜0．05）。转移组的高表达率22/47（46．8％）低于非转移组18/30（60％）,但差别无统计学意义（ P＞0．05）。Vimentin蛋白在对照组、非转移组、转移组阳性表达率逐渐增高,分别为0/20（0）、11/30（36．67％）、37/47（78．72％）,组间比较差别有统计学意义（ P＜0．05）,转移组与非转移组间比较差别有统计学意义（ P＜0．05）。Vimentin和E-cadherin表达呈显著负相关,相关系数（ r＝-0．377）。qRT-PCR检测显示非转移组和转移组中E-cadherin和Vimentin mRNA表达量与对照组比较差别有统计学意义（P＜0．05）。E-cadherin基因的表达在转移组（0．43±0．23）与非转移组（0．51±0．54）间的差别无统计学意义（ P＞0．05）,而转移组 Vimentin表达（4．05±1．88）明显高于非转移组（2．70±1．73）,差别有统计学意义（ P＜0．05）。结论上皮间质转化相关基因E-cad-herin和Vimentin与食管鳞癌的转移密切相关,可作为预测食管癌转移复发及评估临床预后的有效标记物。     

宫颈鳞癌组织中肿瘤转移基因1、上皮钙黏素mRNA的表达

目的:探讨肿瘤转移基因1( MTA1)、上皮钙黏素(E-cadherin) mRNA表达与宫颈鳞癌发生发展及转移的关系.方法:应用原位杂交方法检测52例宫颈鳞癌组织、34例宫颈上皮内瘤变(CIN)组织和28例正常宫颈上皮组织中MTA1、E-cadherin mRNA的表达.结果:①宫颈鳞癌组织、CIN组织和正常宫颈黏膜组织中MTA1 mRNA的阳性表达率分别为88.5%(46/52)、63.6%(21/34)和7.1%(2/28),差异有统计学意义(P<0.05);宫颈鳞癌组织、CIN组织和正常宫颈黏膜组织中E-cadherin mRNA的阳性表达率分别为44.2%(23/52)、55.9%(19/34)和100.0%(28/28),差异亦有统计学意义(P<0.05).②有淋巴结转移组MTA1 mRNA阳性表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05);有淋巴结转移组E-cadherin mRNA阳性表达率低于无淋巴结转移组(P<0.05).③宫颈鳞癌组织中MTA1与E-cadherin mRNA的表达呈负相关(r=-0.284,χ2=4.204,P<0.05).结论:MTA1 mRNA的高表达及E-cadherin mRNA表达缺失与宫颈鳞癌的发生发展及转移有关.     

上皮钙粘素与胃癌浸润转移的关系

目的 探讨上皮钙粘素E-cadherin与胃癌浸润转移的关系。方法 选择31例胃癌组织、13例胃炎性病变组织和12例正常胃组织,E－cadherin的检测采用免疫组化法。结果 胃癌组织中E－cadherin高表达占32．26％,明显低于正常胃组织（100％）和胃炎性组织（84．62％）,胃炎性组织E－cadherin表达虽低于正常胃组织,但二者相比无显著差异。伴淋巴结转移的胃癌组织,E－cadherin全部呈低表达,癌细胞侵及浆膜及膜外组织者,E－cadherin表达占21．05％,低于未侵及浆膜组（50％）、结论 胃癌组织中E－cadherin表达明显降低,E－cadherin低表达在胃癌的淋巴结转移和肿瘤的浸润中起重要作用。     

E-钙黏附素、自分泌运动因子受体在乳腺癌中的表达

目的了解E-钙黏附素（E-CD）、自分泌运动因子受体（AMFR）在乳腺癌组织中的表达状况及临床病理意义。方法应用免疫组化SABC方法研究101例乳腺浸润性导管癌组织E—CD、AMFR的表达。结果乳腺浸润性导管癌E-CD表达明显下调,组织学Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级组相比,差异有显著性（P〈0．05）,E-CD表达随级别增高而减弱。E-CD表达水平与淋巴结是否转移相关（P〈0．05）。与正常乳腺组织相比,浸润性导管癌AMFR明显高表达,表达水平与乳腺癌组织学分化差、TNM分期有关（P〈0．05）。E-CD与AMFR表达强度呈负相关（P〈0．05）。结论乳腺浸润性导管癌同时存在E-CD表达下调和AMFR表达上调,联合运用这两项标记对于估计乳腺癌的生物学特性具有重要价值。     

宫颈鳞癌组织中E-钙粘附素的表达

目的探讨宫颈鳞癌组织中E-钙粘附素(E-cad)的表达及其临床意义.方法应用SP免疫组化法观察12例正常宫颈上皮、46例宫颈鳞癌和22例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)组织中E-cad的表达.结果从正常宫颈→CIN→宫颈鳞癌组织,E-cad阳性表达率分别为100%,63.6%和28.2%,差异有统计学意义(χ2=41.16,P＜0.01).宫颈鳞癌病理Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级E-cad阳性表达率分别为57.14%、25.00%和6.25%,差异有统计学意义(x2=10.70,P＜0.05),无淋巴结转移者阳性率30.77%,高于有淋巴结转移者的18.18%(χ2=13.33,P＜0.001),临床Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期阳性表达率之间差异无统计学意义(χ2=1.748,P＞0.05).结论E-cad在宫颈鳞癌的发生发展过程中发挥了重要作用,有望成为判断宫颈鳞癌恶性程度、转移及预后的重要指标.     

钙黏素家族相关基因与涎腺腺样囊性癌转移的关系

目的筛选与涎腺腺样囊性癌转移相关的钙黏素（CDH）家族基因。方法对涎腺腺样囊性癌转移能力不同的两个细胞株的基因表达谱进行生物信息学分析,筛选出可能与转移相关的CDH家族基因,通过荧光实时定量PCR技术对相关基因的表达差异进行验证,并用免疫组织化学技术研究有差异的CDH基因在临床样本中的表达及其与转移的关系。结果生物信息学分析发现,表达谱中有14个CDH家族基因在两个细胞株中的表达有差异,实时定量PCR验证发现CDH4、CDH5、CDH12在两细胞株之间的表达差别有统计学意义（P〈0.05）,免疫组织化学发现CDH12在有转移的临床标本中的表达高于没有转移的标本（（P〈0.05）。结论 CDH12可能与涎腺腺样囊性癌的高转移能力有关。     

宫颈癌微转移实验与临床研究

微转移是指非血液系统的恶性肿瘤在发展过程中,被捕获、侵出血管并种植于特定器官且发生增殖的播散肿瘤细胞灶,常伴有间质反应,只有通过组织学检查才能确定。宫颈癌微转移的检测主要采用免疫组织化学及聚合酶链反应或逆转录-聚合酶链反应检测淋巴结、外周血和活检标本中人乳头瘤病毒、鳞状细胞癌抗原以及血管内皮细胞生长因子C的表达。     

整合素和N-钙黏素协同调控间充质干细胞极性的力学生物学机制研究

目的 研究整合素和N-钙黏着糖蛋白（N-钙黏素）介导的力学黏附对间充质干细胞极性的协同调控作用,并探索其力学生物学机制。方法 构建双层聚乙二醇（polyethylene glyeol, PEG）水凝胶,分别修饰RGD和HAVDI多肽,实现与整合素和N-钙黏素的力学黏附,模拟整合素介导的细胞-细胞外基质间以及N-钙黏素介导的细胞-细胞间力学相互作用。通过免疫荧光染色表征整合素力学黏附、N-钙黏素力学黏附以及不同细胞内力作用下,有无接触HAVDI多肽的单细胞的极性蛋白磷酸肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K）和磷酸化肌动蛋白轻链（phosphorylated myosin light chain, pMLC）,并用Image J分析其表达强度和极性分布情况。结果 整合素力学黏附诱导接触组中PI3K和pMLC蛋白的极性强度高于非接触组,并使得接触组中PI3K蛋白与β-连环蛋白的极性夹角集中在135°～180°之间,pMLC与β-连环蛋白的极性夹角集中在0°～45°之间。抑制整合素的功能会抑制接触组中PI3K的极性分布,但不会改变pMLC蛋白的极...     

宫颈鳞状细胞癌中E-钙黏附素的表达研究

目的:研究E -钙黏附素(E -cadherin ,E -Cad)在宫颈鳞状细胞癌中的表达及其与浸润和转移的相关性。方法:应用免疫组化方法检测4 8例宫颈浸润性鳞状细胞癌患者手术切除石蜡包埋标本中E -Cad的表达,以正常、炎症、非典型性增生的宫颈组织各30例作为对照。结果:①从正常宫颈组织发展到浸润性鳞状细胞癌,E -Cad阳性表达率呈下降趋势,P <0 .0 1。②E -Cad在无淋巴结转移的原发癌灶中阳性表达率是6 1. 76 % ,明显高于有淋巴结转移的癌灶(14 . 2 9% ) ,P <0 . 0 1。③在原发癌灶和淋巴结转移癌灶中、E -Cad阳性率分别是14 .2 9%和5 8. 82 % ,P <0 .0 5。结论:E -Cad的异常表达均促进了其恶性细胞的浸润性生长。E -Cad的低表达可促进恶性肿瘤细胞的转移,E -Cad在转移灶中的表达提示其与恶性肿瘤在转移灶中的生长有着密切关系。     

VEGF和上皮钙黏蛋白在膀胱移行细胞癌组织表达

①目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)和上皮钙黏蛋白(E-cadherin)在膀胱移行细胞癌(TCCB)中的表达及其与肿瘤生物学行为之间的关系。②方法采用免疫组化SP法检测68例TCCB和10例正常膀胱黏膜标本VEGF和E-cadherin的表达。③结果正常黏膜VEGF不表达,在TCCBⅠ级(G1)、Ⅱ级(G2)、Ⅲ级(G3)和浅表性(Tis~T1)、浸润性(T2~T4)肿瘤的阳性表达率分别为23.07%、58.62%、84.61%和43.75%、77.77%;VEGF的阳性率在不同组织学分级及不同临床分期的TCCB中差异有极显著性(χ2=14.11、8.29,P<0.01);在复发组与未复发组的阳性表达率分别为78.94%和40.00%,差异有极显著性(2χ=10.77,P<0.01)。正常黏膜E-cadherin呈阳性表达,在TCCBG1、G2、G3和Tis~T1、T2~T4肿瘤的异常表达率分别为15.38%、55.17%、80.77%和37.50%、75.00%;E-cadherin的异常表达率在不同组织学分级及不同临床分期的TCCB中差异有极显著性(χ2=15.27,P<0.01);在复发组与未复发组的阳性表达率分别为73.68%和36.67%,差异有极显著性(χ2=9.40,P<0.01)。④结论VEGF阳性表达和E-cadherin异常表达与TCCB病理分级、浸润及复发关系密切,VEGF和E-cadherin可以作为判定TCCB恶性程度及复发的参考指标。     

转移宫颈鳞癌中Ets基因表达差异的研究

目的　使用cDNA芯片技术研究转移宫颈鳞癌中Ets突变基因表达的变化。方法　应用Ets突变基因的cDNA表达谱基因芯片技术测定IB期浸润性宫颈鳞癌的基因表达水平 ,比较正常、未转移和淋巴转移的三组宫颈组织中Ets突变基因的差异表达。结果　与无淋巴转移癌组织比较 ,有淋巴转移癌组织中Ets突变基因的表达上调了 2倍。结论　使用基因芯片技术检测癌组织中Ets突变基因的表达水平可以作为预测宫颈癌淋巴转移和判断宫颈癌预后的指标。     

术前血清鳞状细胞癌抗原水平与早期子宫颈鳞状细胞癌淋巴结转移的关系

目的:探讨术前血清鳞状上皮细胞癌抗原(SCCAg)水平与早期子宫颈鳞状细胞癌淋巴结转移的关系.方法:对391例行根治性手术的早期子宫颈鳞状细胞癌患者的临床病理资料进行回顾性分析,检测术前SCCAg水平,并将其与各临床病理参数的关系进行统计学分析.结果:术前SCCAg水平在FIGO分期、肿瘤直径、肌层浸润深度、子宫颈旁有无受侵及淋巴结有无转移间差异均有统计学意义(P<0.01),而在肿瘤的组织学分级和脉管有无浸润间差异均无统计学意义(P>0.05).仅有肿瘤直径(P=0.001 5)和淋巴结转移(P=0.000 1)是影响SCCAg水平的独立危险因素,且淋巴结转移比肿瘤直径对SCCAg水平影响更大.在Ⅰb1期,当选择截断值为2.5 ng/ml时,有较好的灵敏度(0.54)和特异度(0.83),Youden指数(0.37)最高,预测效果最佳;而在Ⅰb2和Ⅱa期,当选择截断值为4.5 ng/ml时,有较好的灵敏度(0.55)和特异度(0.79),Youden指数(0.34)最高,预测效果最佳.结论:术前SCCAg水平对评估淋巴结转移有一定的价值.在Ⅰb1期和Ⅰb2+Ⅱa期,分别选择截断值为2.5 ng/ml和4.5 ng/ml时,有最佳预测效果.     

HPV16基因联合细胞角蛋白对宫颈鳞癌淋巴结微转移检测的意义

目的探讨高危型人类乳头状瘤病毒16(HPV16)和细胞角蛋白(cyto keratin,CK)对宫颈鳞癌淋巴结微转移的诊断价值。方法以HPV16 E6/E7特异引物通过PCR方法,检测81例宫颈鳞癌组织及435枚盆腔淋巴结中HPV16DNA;采用免疫组化SP法检测上述组织中CK的表达。结果①宫颈鳞癌组织中HPV16的检出率为62.96%(51/81);CK的表达率为100%(81/81)。②HE染色有转移的淋巴结中,HPV16阳性检出率为90.38%(47/52),CK阳性表达率为100%(52/52);HE染色无转移的淋巴结中,HPV16阳性检出率为11.75%(45/383),CK阳性表达率为7.05%(27/383)。③盆腔淋巴结中HPV16存在和CK表达与患者的FIGO分期、年龄、宫颈肌层浸润深度、宫颈肿瘤大小、大体类型、肿瘤分化程度等临床病理特征均无相关性(P>0.05)。结论宫颈鳞癌中HE染色无转移的淋巴结内存在HPV16基因和CK阳性表达可以提示淋巴结微转移。     

Establishment of cervical lymph node metastasis model of squamous cell carcinoma in the oral cavity in mice

Background Oral squamous cell carcinoma （OSCC） is the most prevalent malignant tumor in the head and neck region, comprising more than 90% of all oral malignancies. A feasible approach for an animal model to study OSCC lymph node metastasis was established and biological behaviors of three oral squamous cell carcinoma cell lines were compared. Methods After implanting three kinds of cell lines （GDC185, Tca8113, Tca83） into three different anatomical sites in nude mice, namely the tongue, floor of the mouth, and axillary fossa, we observed the tumorigenicity and the metastatic capacity, which was confirmed by histopathology under a surgical microscope. Results The animal model injected with GDC185 cells into the floor of the mouth had the highest rate of neck lymph node metastasis （55.6%） and the cell lines had significantly different biological behaviors. Conclusions Nude mice injected with GDC185 cells into the floor of the mouth could be used as a feasible animal model to study neck metastasis of oral squamous cell carcinoma.     

子宫颈鳞癌组织中基质金属蛋白酶9表达的意义

目的:探讨基质金属蛋白酶MMP-9与宫颈鳞癌的发生、发展及转移的关系.方法:免疫组化SP法测定MMP-9的表达及分布;明胶酶谱法测定活性型MMP-9蛋白的含量;RT-PCR技术检测MMP-9 mRNA表达水平.结果:在宫颈鳞状上皮癌(SCC)组织和高度鳞状上皮内损害(HSIL)中MMP-9蛋白的表达量均高于低度鳞状上皮内损害(LSIL) (P＜0.05);宫颈SCC组织中淋巴结转移组MMP-9的阳性率为78.3%,高于无淋巴结转移组63.3% (P＜0.01);MMP-9的表达在不同的病理分级与临床分期之间差异无统计学意义. 而SCC和HSIL中的MMP-9酶活性均高于LSIL (P＜0.01). 而SCC和HSIL中的MMP-9 mRNA的表达情况亦与上述结果相似.结论:MMP-9与宫颈SCC的早期浸润及转移有关,MMP-9表达量的增高,尤其是其酶活性的增高有助于正确评估患者预后和制定适当的临床治疗方案.     

ZEB1的表达与肺鳞状细胞癌侵袭及转移的关系

目的：探讨锌指E-盒结合同源异形盒-1 (ZEB1)在肺鳞状细胞癌组织中的表达,分析ZEB1 mRNA和蛋白的表达水平与肺鳞状细胞癌侵袭及转移的关系。方法：选择45例肺鳞状细胞癌行外科手术切除的患者,根据所取组织与肿瘤的距离不同分为肺鳞状细胞癌组织和癌旁正常肺组织,采用RT-PCR和Western blotting方法检测肺鳞状细胞癌组织和癌旁正常肺组织中ZEB1 mRNA和蛋白的表达情况,并分析肺鳞状细胞癌不同临床病理特征ZEB1 mRNA和蛋白的表达差异;构建ZEB1特异性siRNA载体,感染肺癌NCI-H2170细胞,设未转染对照组、转染照组和ZEB1 siRNA转染组,应用Western blotting方法从蛋白质水平检测各组干扰质粒对ZEB1基因的干扰效果,通过Transwell侵袭小室观察各组NCI-H2170细胞侵袭能力的变化。结果： ZEB1 mRNA在肺鳞状细胞癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁正常肺组织（P＜0.05）;在淋巴结转移、远处转移阳性者肺癌组织中的阳性表达率显著高于其在淋巴结转移、远处转
移阴性者肺癌组织中的表达（P<0.05）;但ZEB1 mRNA的表达与肺鳞状细胞癌患者的性别、年龄及肿瘤大小及分化程度无关(P>0.05)。肺鳞状细胞癌组织中ZEB1蛋白的表达与ZEB1 mRNA的表达结果类似,ZEB1蛋白在肺鳞状细胞癌组织中的表达量显著高于癌旁正常肺组织（P<0.05）;在淋巴结转移和远处转移阳性者癌组织中的表达显著高于其在淋巴结转移和远处转移阴性者癌组织中的表达（P<0.05）。下调NCI-H2170细胞中ZEB1蛋白的表达后,NCI-H2
170细胞的侵袭及转移能力明显降低（P<0.05）。结论：ZEB1在肺鳞状细胞癌组织中高表达,表达变化与肺鳞状细胞癌的病理特征密切相关;运用RNA干扰技术有效沉默NCI-H2170细胞的ZEB1基因后,可显著降低NCI-H2170细胞的侵袭及转移能力,提示ZEB1在肺癌的发生发展中起重要作用,抑制ZEB1的表达可能成为一种治疗肺癌的方法。
     

p16,Rb蛋白在子宫颈鳞状细胞癌组织中的表达

目的 :研究抑癌基因在宫颈鳞癌中的作用。方法 :应用免疫组化SP法检测宫颈鳞癌中p16和Rb的蛋白表达。结果 :①p16蛋白的阳性反应主要在细胞浆 ,其阳性表达率随宫颈鳞癌的病理分级 (G1～G3 )和临床分期 (Ⅰ～Ⅲ )而递减 (P<0 .0 5 ) ;②Rb蛋白的阳性反应在细胞核 ,其阳性表达率随病理分级G1～G3 递增 (P <0 .0 5 ) ,随临床分期Ⅰ～Ⅲ递减 (P >0 .0 5 )。③p16和Rb蛋白的阳性表达率呈负相关 (r =- 0 .430 1,P <0 .0 5 )。结论 :p16和Rb蛋白失活在宫颈鳞癌的发生发展中起重要作用 ,其共同失表达可能为晚期事件 ,与不良预后有关。     

汉族、维吾尔族宫颈癌相关基因谱对比分析研究

目的：探讨汉族、维吾尔族官颈癌组织中基因表达的差异及子宫颈癌发病机理。方法：应用含有2048条人类全长基因cDNA表达谱芯片，对临床手术切除的3例汉族及3例维吾尔族（维族）宫颈鳞癌组织及自身部分正常宫颈组织标本的基因表达谱进行对比分析。站杲：3例汉族宫颈癌组织中有2条共同差异表达的基因，均为表达减少（下调）的基因。3例维吾尔族宫颈癌组织中有共同差异表达的基因64条。6例宫颈癌组织中无共同差异表达的基因，但在5例宫颈鳞癌组织中共同差异表达的基因3条，4例宫颈癌组织中共同差异表达基因49条。结论；宫颈癌的发生与多种肿瘤相关基因有关。汉、维族宫颈癌组织中有基因表达的差异，推测汉、维族宫颈癌的生存在差异。     

VEGF在口腔鳞癌组织中表达及其与淋巴结转移相关性的系统评价

目的系统评价VEGF蛋白在口腔鳞癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法计算机检索Cochrane Library、PubMed、Embase、CNKI、CBM等数据库,按照纳入与排除标准选择研究文献,并对文献进行异质性检验,以病例组及对照组比值比（OR值）为效应评价指标,然后应用Meta分析RevMan5.0.1软件对各研究原始数据进行系统评价。结果共有25篇病例对照文献纳入研究,其中病例组1 385例,合并对照组908例,Meta分析结果显示VEGF在OSCC及合并对照组中的阳性表达差异有统计学意义（OR=10.73,95%CI：7.26～15.86,P〈0.00001）;同时,VEGF在OSCC淋巴结转移组中的阳性表达也明显高于非转移组（OR=3.98,95%CI：2.09～7.59）,差异具有统计学意义（P〈0.0001）。结论根据目前研究推测,VEGF在人类口腔鳞癌的发生、发展及淋巴结转移中起到了重要作用,可作为口腔鳞癌诊断和治疗的一个很有价值的临床生物指标蛋白。