银杏叶提取物对糖尿病大鼠附睾组织活性氧的影响

目的 探讨银杏叶提取物（EGb）对糖尿病大鼠附睾组织活性氧的影响。方法 Wistar雄性大鼠40只，随机分成3组，对照组（C），糖尿病组（DM组）和银杏叶（EGb）治疗组。应用链脲佐菌素（Streptozocin STZ）加高脂高糖饮食制备2型糖尿病模型，治疗组同时给予银杏叶提取物（EGb）10周后，取双侧附睾组织，检测组织中MDA含量、NO含量和SOD、GSH—Px、NOS活性。结果 2型糖尿病模型制备成功，糖尿病组与对照组比较。SOD、GSH—Px活性显著降低（P〈0.01），MDA含量和NO含量及NOS活性明显高于对照组（P〈0.01），而治疗组与糖尿病组比较，SOD、GSH—Px活性显著升高（P〈0．01），MDA含量和NO含量及NOS活性明显低于糖尿病组（P〈0.01）。结论 银杏叶提取物对糖尿病大鼠附睾组织具有保护作用。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞功能及基因表达的影响

目的探讨银杏叶提取物对糖尿病大鼬市泡巨噬细胞功能及诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、CD36与过氧化物酶体增生物激活受体γ（PPAR-γ）基因的影响。方法测定各组大鼠血清葡萄糖、胰岛素含量,检测肺泡巨噬细胞超氧化物歧化酶、一氧化氮合酶活性,丙二醛、一氧化氮含量,用RT-PCR测定iNOS、CD36与PPAR-γ基因表达水平。结果①银杏叶提取物对糖尿病大鼠有降血糖作用（P〈0．05）,并使血清胰岛素水平呈一定程度的升高;②经银杏叶提取物治疗后糖尿病大鼠肺泡巨噬细胞超氧化物歧化酶活性、PPAR-γ mRNA表达升高（P〈0．05）,CD36 mRNA表达增加（无显著差异）,iNOS mRNA表达、一氧化氮合酶潘陛、丙二醛和一氧化氮含量均下降（P〈0．05）。结论推测银杏叶提取物对糖尿病大鼠的治疗作用可能与刺激胰岛β细胞分泌胰岛素,增强巨噬细胞抗脂质过氧化作用,以及促进PPAR-γ mRNA的表达有关。     

银杏叶提取物对1型糖尿病大鼠认知功能及海马神经细胞凋亡的影响

目的： 探讨银杏叶提取物(EGB)对1型糖尿病脑病大鼠海马神经细胞的保护机制。方法: 36只SD雄性大鼠随机分为正常对照组（C组）、糖尿病模型组(DM组)、银杏叶提取物治疗组（EGB组）。用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病动物模型,EGB组腹腔注射银杏叶提取物注射液,其余2组给予同等体积的生理盐水。于12周末通过Morris水迷宫法评价各组大鼠学习记忆能力并测定血清中的血糖和胰岛素浓度;用Image-Pro Plus 6.0图像分析技术检测大鼠海马组织神经细胞密度;Western blotting和免疫组织化学法检测其Bax、Bcl-2和caspase-3蛋白的表达。结果: DM组大鼠血糖浓度(P<0.01)、海马神经细胞中Bax(P<0.01)、caspase-3(P<0.01)蛋白的表达、Bax/ Bcl-2比例 (P<0.01)及Morris水迷宫潜伏期(P<0.01)均高于C组,而胰岛素水平(P<0.01)、海马CA1和CA2区域的神经细胞密度(P<0.05) 及Morris水迷宫搜索策略能力(P<0.01)均低于C组。EGB干预治疗后大鼠胰岛素水平(P<0.05)、海马CA1和CA2区域的神经细胞密度(P<0.05) 及Morris水迷宫搜索策略能力(P<0.01)均高于DM组,而血糖浓度(P<0.01)、海马组织中Bax(P<0.05)、caspase-3(P<0.05)蛋白的表达、Bax/ Bcl-2比例 (P<0.01) 及Morris水迷宫潜伏期(P<0.05)均低于DM组。各实验组大鼠Bcl-2蛋白的表达没有明显变化。结论: 银杏叶提取物提高糖尿病大鼠的空间学习记忆能力,可能通过减少Bax、caspase-3蛋白表达、降低Bax/ Bcl-2比例,从而减少神经细胞的凋亡,提高神经细胞密度而发挥作用。提示通过有效调节神经元凋亡相关基因是EGB治疗糖尿病脑病的的重要作用机制之一。     

银杏叶提取物对实验性2型糖尿病大鼠肝脏的保护作用

目的： 研究银杏叶提取物(EGB)对实验性2型糖尿病大鼠肝脏损伤的影响及机制。方法: 雄性SD大鼠39只，随机分为4组: 正常对照组、高脂组、糖尿病对照组和EGB治疗组。采用高脂饮食加链脲佐菌素（STZ） 诱导2型糖尿病大鼠模型， EGB治疗组给予EGB 8 mg·kg^-1·d^-1治疗8周。用光镜和透射电镜观察EGB对2型糖尿病大鼠肝组织的形态学改变，并检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GSH-PX)和总一氧化氮合酶(NOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性及MDA、NO含量。结果: 糖尿病组光镜下主要表现为肝细胞脂肪变性明显，出现大量脂肪空泡，胞浆内糖原颗粒减少或消失。电镜下主要表现为肝细胞核固缩，胞浆内含大量脂滴，细胞器明显减少，贮脂细胞明显增生，胶原纤维增生。肝组织内GSH-PX、SOD、CAT活性明显低于正常对照组，MDA、 NO含量及总NOS、iNOS 活性显著高于正常对照组； EGB治疗组肝脏组织病理改变较轻，GSH—PX、SOD、CAT 活性明显高于糖尿病组，MDA、NO含量及总NOS、iNOS 活性显著低于糖尿病组。结论: EGB对2型糖尿病大鼠的肝脏具有保护作用、抗脂质过氧化作用和抑制NO的过多产生可能在其中起重要作用。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠视网膜病变的作用

目的:研究银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,GBE)对大鼠糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的影响及初步机制。方法:实验共分为5组,以普通Wistar大鼠作为正常对照组(control组)、Goto-Kakizaki(GK)大鼠作为糖尿病视网膜病变模型组(DR组),给予GK大鼠不同剂量的银杏叶提取物,分为低剂量组(GBEL组),中剂量组(GBE-M组)和高剂量组(GBE-H组);检测各组大鼠的血糖与血-视网膜屏障损伤情况;TUNEL染色法和Western blot法分别检测视网膜组织的神经节细胞凋亡情况,核子因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶(phosphorylation-extracellular regulated protein kinase,p-ERK)、细胞外调节蛋白激酶总蛋白(total extracellular regulated protein kinase,t-ERK)、B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和P53的蛋白水平变化。结果:银杏叶提取物能够降低糖尿病视网膜病变大鼠的血糖,减轻血-视网膜屏障的损伤,并降低视网膜神经节细胞凋亡数,上调细胞内的Nrf2、p-ERK与Bcl-2的蛋白水平,下调P53的蛋白表达,而对t-ERK蛋白的表达水平无显著影响。结论:在糖尿病视网膜病变中,银杏叶提取物能有效地保护视网膜神经节细胞,可能与Nrf2/ERK通路的激活以及Bcl-2与P53蛋白表达有关。     

糖皮质激素受体遗传多态性与2型糖尿病相关性研究

目的 探讨糖皮质激素受体(GR)单核苷酸多态性与2型糖尿病(T2MD)易感性及人体体型的相关性.方法 采用病例-对照研究设计,从解放军总医院健康体检中心的体检患者中,募集40例T2MD患者和127例对照.结合三种不同的SNP位点选择方法,采用上海天昊生物科技有限公司的iMLDRTM多重SNP分型技术对入选SNP位点进行基因分型.采用非条件Logistic回归,校正年龄、性别、吸烟、饮酒后,分析基因型与T2MD易感性的关系.得到的阳性位点,进一步采用协方差分析,校正年龄、性别、吸烟、饮酒后,评价其与体重指数(BMI)和腰臀比(WHR)的相关性.结果 共选取14个SNP位点,其中rs10052957突变型在病例组中频率为零,故未纳入统计分析.所有的13个SNP位点在病例和对照组中的基因分型均符合Hardy-Weinberg平衡.rs9324924 TT基因型(OR [95％CI]=3.12[1.06 ～9.17],P=0.039)和rs9324921 AA基因型(OR [95％CI]=14.92[1.39～160.60],P=0.026)发生T2DM的风险较野生型增高,且两基因型的BMI[P=0.023 (rs9324924);P=0.002(rs9324921)]、WHR[P=0.033 (rs9324924);P=0.003(rs9324921)]也较野生型明显增高.结论 在本研究中,GR基因rs9324924、rs9324921与T2DM易感性和体型有关,其中纯和突变型T2DM发病风险明显增加,且更具有肥胖倾向.     

银杏叶提取物对肥大细胞活化的影响

目的： 观察银杏叶提取物（EGB）对肥大细胞活化脱颗粒的影响。方法：动物实验分为6个组,分别是正常对照组、空白对照组、EGB高（30 mg/kg）、中（10 mg/kg）、低（3 mg/kg）剂量组及阳性药物对照组（氮卓斯汀,5 mg/kg）,通过大鼠被动皮肤过敏反应（PCA）实验,用比色测定法检测EGB在体内对肥大细胞(MC)影响;细胞实验分为6个组,分别是正常对照组、空白对照组、EGB高（200 mg/L）、中（100 mg/L）、低（50 mg/L）剂量组及阳性药物对照组（氮卓斯汀,30 mg/L）,然后分别将其加入抗原致敏的（DNP-HSA, 200 μg/L 培养过夜）RBL-2H3细胞中,观察EGB对RBL-2H3细胞脱颗粒、炎症介质释放及Akt、p38磷酸化的影响。结果： 动物实验显示,EGB高（30 mg/kg）、中（10 mg/kg）剂量组能明显抑制大鼠PCA。细胞实验显示,EGB高（200 mg/L）、中（100 mg/L）、低（50 mg/L）剂量组均能抑制RBL-2H3细胞脱颗粒;EGB高（200 mg/L）、中（100 mg/L）剂量组能抑制RBL-2H3细胞释放组胺、白细胞三烯C4（LTC4）、白细胞介素4（IL-4）及肿瘤坏死因子α(TNF-α);EGB高（200 mg/L）、中（100 mg/L）剂量组能抑制Akt和p38的磷酸化。结论： EGB的抗过敏作用与其能抑制肥大细胞的脱颗粒以及抑制组胺、白细胞三烯C4、肿瘤坏死因子α、白细胞介素4炎症介质释放有关;EGB抑制肥大细胞的活化可能与其抑制Akt和p38的活性相关。     

糖皮质激素受体对大鼠中性粒细胞粘附的影响

本文通过Percoll梯度离心法分离获得大鼠中性粒细胞(PMNS)后,采用PMNS与玻璃珠粘附的模型,通过给予Dex及糖皮质激素受体(GR)阻断剂Mifepristone(RU_(38486))研究大鼠PMNS粘附过程中GR的作用。结果显示,Dex可以明显抑制PMNS的粘附,其作用随着Dex浓度的增大而增强;单纯给予不同浓度的RU_(38486)未发现明显的PMNS粘附增强,说明RU_(38486)本身对离体的PMNS粘附没有明显的作用;若同时给予Dex和RU_(38486),则Dex抑制PMNS粘附的作用逐渐减小,直至完全逆转。该结果强烈提示:糖皮质激素(GC)具有抑制PMNS粘附的作用,其作用是通过GR介导的,当GR被阻断时,这一抑制作用减弱,甚至消失。     

银杏叶提取物减轻糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤

目的探讨银杏叶提取物(EGb761)对糖尿病(DM)大鼠急性肾缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制。方法将大鼠随机分为对照组(NC组)、DM组、DM-IR组、EGb761-100组和EGb761-200组,后两组分别在IR造模前灌胃给予EGb761 100和200 mg/(kg·d) 14 d(每组n=10)。测定大鼠血肌酐、胱抑素-C及尿肾损伤分子-1(KIM-1),观察肾组织病理改变及炎性因子TGF-β1、TNF-α、IL-6、氧化指标SOD和MDA的变化,免疫组化法测定肾组织Bax和Bcl-2表达,检测血清、尿和肾组织抗衰老基因Klotho蛋白及肾组织Klotho mRNA表达。结果同DM-IR组相比,EGb761能降低血肌酐、胱抑素-C、尿KIM-1及肾小管Paller评分(P0. 05),抑制炎性反应并减轻氧化应激(P0. 05),减少肾组织Bax表达(P0. 05),增加Bcl-2表达(P0. 05),减轻Klotho蛋白下降程度,EGb761-200组效果更加明显。结论 EGb761可能通过抑制炎性反应、减轻氧化应激、抗凋亡及增加Klotho蛋白表达减轻DM大鼠IR导致的肾损害。     

补肾定喘汤对哮喘大鼠糖皮质激素受体的影响

采用放射性配基竞争结合法，测定连续激光哮喘大鼠服用补肾定喘哮汤后第１、３、７天肺组织糖皮质激素受体（ＧＣＲ）。观察结果发现：激发后第１天中药组大鼠肺组织ＧＣＲ较正常对照组显著升高（Ｐ〈０．０１）；第３天中药组大鼠肺组织ＧＣＲ仍维持较高水平，与模型组比差异显著（Ｐ〈０．０１）；第７天中药组及中药加西药组大鼠肺组织ＧＣＲ水平较模型组均有显著差异（Ｐ〈０．０１），提示中药补肾定喘汤大鼠肺组织ＧＣＲ水平具     

银杏叶提取物对2型糖尿病大鼠肾脏结构和功能的影响

目的：研究银杏叶提取物（GBE）对2型糖尿病（T2DM）大鼠肾脏结构和功能的影响。方法：SD大鼠随机分为正常对照组、高脂组、糖尿病组（高脂饮食+STZ造模）及糖尿病GBE治疗组（GBE 8 mg·kg-1·d-1），8周后处死大鼠,检测体重、肾重、尿量、24 h尿蛋白和N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平；电镜观察肾脏超微结构；RT-PCR法测定基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）、Ⅳ型胶原的基因表达水平。结果：糖尿病组大鼠肾皮质TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA表达高于正常对照组，MMP-9 mRNA表达低于正常对照组，肾重指数、尿量、24 h 尿蛋白、NAG均高于对照组。电镜下见肾小球基底膜增厚，厚薄不均匀，足细胞突起肿胀，变短，并可见足突融合，球囊壁层细胞内线粒体扩张，肾小球内胶原纤维增多。而糖尿病GBE治疗组肾小球基底膜及足细胞病变明显较轻，肾皮质MMP-9表达高于糖尿病组，Ⅳ型胶原mRNA表达低于糖尿病组，尿量、24 h尿蛋白、NAG均低于糖尿病组。TIMP-1 mRNA表达无明显差异。结论：GBE可改善2型糖尿病大鼠肾脏的结构和功能，其作用机制与降低TIMP-1、Ⅳ型胶原mRNA表达，升高MMP-9 mRNA表达，阻止ECM的堆积有关。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠膈肌的保护作用

目的:研究银杏叶提取物(EGb)对糖尿病大鼠膈肌的保护作用。方法: 用光镜和透射电镜观察EGb对糖尿病大鼠膈肌的形态学改变,并测定膈肌线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性,一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)的含量。结果:糖尿病大鼠膈肌线粒体SDH、SOD活性下降,NOS活性及MDA、NO含量增高;电镜下主要表现为膈肌线粒体扩张,嵴变短,空泡化。EGb治疗组病变明显减轻。与糖尿病组比较,膈肌线粒体SDH、SOD活性升高,NOS活性及NO、MDA含量下降。结论: EGb通过减轻自由基和过量一氧化氮对膈肌线粒体造成损伤,提高SDH活性,改善线粒体呼吸链的功能,从而对糖尿病大鼠膈肌起到保护作用。     

银杏叶提取物对糖尿病大鼠睾丸损伤的作用

目的:研究银杏叶提取物(GBE)对糖尿病所致的睾丸损伤的作用及其机制。方法:用光镜及透射电镜观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病1个月大鼠睾丸的形态学改变,并测定睾丸组织丙二醛(MDA)、NO产物NO₂^-/NO₃^-的含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)的活性。 结果:①糖尿病大鼠睾丸组织光镜下主要表现为睾丸曲细精管萎缩、变形及生精上皮脱落,透射电镜下主要见到支持细胞浆内内质网扩张、脂滴空泡形成,溶酶体明显减少,银杏叶组大鼠睾丸组织光镜、透射电镜下上述病变明显改善。②睾丸组织的MDA、NO₂^-/NO₃^-含量及tNOS和iNOS活性银杏叶组低于糖尿病组,SOD活性银杏叶组高于糖尿病组。 结论:GBE对糖尿病所致的睾丸损伤有明显的保护作用,其作用机制与提高SOD活力减少MDA产生,抑制iNOS活力减少NO产生有密切关系。     

银杏叶提取物对局灶性脑缺血再灌注后GFAP表达的影响

目的研究银杏叶提取物(extract of Ginkgo biloba,EGB)对局灶性脑缺血再灌注后星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。方法大脑中动脉插线法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。75只Wistar大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、EGB治疗组。缺血2h再灌注48h后,采用免疫组织化学法检测脑组织内GFAP蛋白的表达。结果缺血再灌注后可诱导脑组织GFAP表达增强,EGB可抑制缺血再灌注后GFAP的表达(P<0.05)。结论局灶性脑缺血再灌注后,可诱导脑组织GFAP表达增强,EGB可抑制脑缺血后星形胶质细胞GFAP的高表达,提示EGB可能对缺血诱导的星形胶质细胞活化具有抑制作用,这可能是EGB抗脑缺血损伤保护神经元作用的机制之一。     

银杏叶提取物对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制

目的:研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba,EGB)对转化生长因子β1(transforming growth factor-β1 TGF-β1)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human tubular epithelial cells)转分化的影响及其机制。方法:复苏并传代培养HK2细胞,应用10μg/LTGF-β1诱导HK2细胞向间充质的转分化,给予EGB干预。应用West-ern印记法检测HK2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、NADPH氧化酶p67phox以及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的表达,检测细胞培养液上清中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量。结果:EGB显著抑制TGF-β1诱导的E-cadherin下调(P<0.05)和α-SMA上调(P<0.05);EGB显著抑制TGF-β1诱导的p67phox表达增加(P<0.05),显著抑制TGF-β1诱导的SOD表达降低(P<0.05);同时,TGF-β1显著促进了MDA的产生(P<0.05),EGB可以部分抑制TGF-β1刺激的MDA浓度的升高(P<0.05)。结论:EGB显著抑制TGF-β1诱导的HK2细胞转分化,其机制可能是EGB抑制了TGF-β1诱导的p67phox上调并上调SOD的表达。     

银杏叶提取物对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制

目的：研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba, EGB)对转化生长因子β₁(transforming growth factor-β₁ TGF-β₁)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human tubular epithelial cells)转分化的影响及其机制。方法:复苏并传代培养HK2细胞，应用10 μg/L TGF-β₁诱导HK2细胞向间充质的转分化，给予EGB干预。应用Western印记法检测HK2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α- 平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、NADPH氧化酶p67phox以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的表达，检测细胞培养液上清中丙二醛（malondialdehyde, MDA）的含量。结果:EGB显著抑制TGF-β₁诱导的E-cadherin下调(P＜0.05)和α-SMA上调(P＜0.05)； EGB显著抑制TGF-β₁诱导的p67phox表达增加(P＜0.05)，显著抑制TGF-β₁诱导的SOD表达降低(P＜0.05);同时，TGF-β₁显著促进了MDA的产生(P＜0.05),EGB可以部分抑制TGF-β₁刺激的MDA浓度的升高(P＜0.05)。结论:EGB显著抑制TGF-β₁诱导的HK2细胞转分化，其机制可能是EGB 抑制了TGF-β₁诱导的p67phox上调并上调SOD的表达。