石膏-知母药对按不同比例配伍时微量元素含量的变化

目的：探讨中药药对石膏-知母按不同比例配伍时微量元素含量的变化规律。方法：用EDTA滴定法测定石膏、知母按不同比例配伍时药对中钙离子的含量,采用氢火焰原子化法测定该药对按不同比例配伍时钙、镁、铜、铁、锰元素的含量。结果：石膏-知母药对按3：1（m／m）配伍时钙离子含量较高。钙、锰元素的含量随着药对中石膏比例的增大而增高,镁和铜元素的含量变化规律不明显,铁元素在石膏．知母药对按3：1（m／m）配伍时含量最高。结论：该研究有助于探究微量元素的含量与石膏．知母药对药效之间的关系,为中医临床辨证用药提供依据。     

Ca2+浓度振荡变化对突触可塑性影响的数学模型

目的:建立突触可塑性随Ca2+浓度振荡变化而改变的数学模型。方法:用微分方程分析Ca2+浓度振荡变化对NMDA受体下游信号通路的作用,并用数学函数描述了突触可塑性的相应改变。结果:该数学模型深刻阐述了Ca2+浓度变化对突触可塑性的影响。结论:用数学模拟和电生理实验相结合,为深层次研究学习记忆提供新视角。     

基于灰色关联度与TOPSIS模型分析不同配伍比例的知母对石膏中6种无机元素溶出的影响

目的 基于灰色关联度和逼近理想解排序（TOPSIS）法探讨配伍不同比例的知母对石膏中钾（K）、钛（Ti）、锶（Sr）、钡（Ba）、钙（Ca）、镁（Mg）6种无机元素溶出的影响,为临床提供一定参考。方法 建立电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）法同时分析石膏-知母药对中K、Ti、Sr、Ba、Ca、Mg 6种无机元素含量,并用灰色关联度法和TOPSIS综合分析,与不同比例知母配伍前后,石膏中6种无机元素溶出的变化。结果 ICP-MS法测定石膏-知母药对中无机元素的线性、精密度、重复性和稳定性试验结果良好,平均加样回收率为81.78%～104.13%,RSD为2.10%～4.62%(n=6)。与不同比例知母配伍后石膏中6种无机元素的溶出均显著高于石膏单煎（P<0.05）,石膏-知母30∶9配伍比例时石膏中6种无机元素溶出得分最高。结论 ICP-MS法灵敏度高、准确性好,可用于石膏-知母药对中K、Ti、Sr、Ba、Ca、Mg等6种无机元素的溶出量测定。石膏-知母最佳配伍比例为30出,为两者进一步的配伍研究提供依据。∶9时,可有效提高石膏中6种无机元素的溶     

芸香苷对急性胰腺炎大鼠磷脂酶A2和Ca2+浓度的影响

目的探讨芸香苷(Rutoside,Ru)对急性胰腺炎(AP)大鼠磷脂酶A2(PLA2)和Ca2 浓度的影响。方法脱氧胆酸钠逆行胆胰管注射和胆胰管结扎诱发大鼠AP模型。检测造模后6、12 h血清中Ca2 含量和造模后24 h胰腺组织中PLA2和Ca2 含量。结果Ru 60、120 mg.kg-1(sc)可明显升高造模后12 h AP大鼠的血清Ca2 浓度。Ru(30、60、120 mg.kg-1,sc)可明显增加胰腺组织降低的PLA2含量,降低模型大鼠的胰腺组织过高的Ca2 水平。结论Ru提高胰腺组织PLA2含量,提示Ru可能对胰腺组织PLA2的释放及激活具有抑制作用;Ru能有效防止AP大鼠低钙血症的发生,并降低胰腺组织细胞Ca2 超载。     

雌激素对大鼠主动脉组织细胞色素C、线粒体Ca2+、胞浆游离Ca2+水平的影响

目的:研究雌激素对大鼠主动脉组织细胞色素C、线粒体Ca2 、胞浆游离Ca2 水平的影响,以探讨雌激素对心血管系统的保护作用.方法:将30只雌性大鼠随机分为三个组,假手术组(A组)、去卵巢组(B组)及去卵巢 雌二醇治疗组(C组),每组各10只.正常饮食后处死大鼠,对主动脉组织细胞色素C、线粒体Ca2 、胞浆游离Ca2 的水平进行测定.结果:去卵巢模型组同去卵巢 雌二醇治疗组相比,线粒体Ca2 、细胞色素C含量明显降低(P＜0.05;P＜0.01),而胞浆内细胞色素C含量则明显升高(P＜0.05).结论: 雌激素可能是通过调节细胞色素C、线粒体Ca2 、胞浆游离Ca2 水平,清除自由基、从而减少氧化应激对心血管系统的损伤作用.     

慢性染铅对大鼠海马区神经细胞Ca2+浓度及Ca2+-ATP酶活性的影响

目的：观察慢性染铅对大鼠海马区神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性的影响。方法：用０．１５％醋酸铅饲养大鼠建立慢性染铅动物模型,参照Ｄｉｌｄｙ法和徐友涵法测定海马神经细胞Ｃａ２＋浓度及Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性。结果发现：细胞内Ｃａ２＋浓度,染铅组（２０３．８３±３０．５０）ｎｍｏｌ／Ｌ,对照组（９７．６２±１９．８３）ｎｍｏｌ／Ｌ,ｔ＝８．３１Ｐ＜０．００５;Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性,染铅组（３２６．４２±４０．０６）ｎｍｏｌ（Ｐｉ）·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１,对照组（２５３．０７±２５．４０）ｎｍｏｌ（Ｐｉ）·ｍｇ－１·ｍｉｎ－１,ｔ＝３．５４,Ｐ＜０．０１。结论：慢性染铅可使大鼠海马区神经细胞内Ｃａ２＋浓度升高,Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性增强     

知母皂甙E1和E2

应用硅胶柱色谱、高效液相色谱等分离手段,从中药知母(Anemarrhena asphodeloides Bge.)分离得到2种新的呋甾皂甙,经光谱(IR,ESI MS,¹HNMR,¹³HNMR)分析和化学反应,鉴定其结构分别是:(25S)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-羟基-5-β-呋甾-3β,15α,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖甙(1),(25S)-26-O-β-D-吡喃葡萄糖基-22-甲氧基-5β-呋甾-3β,15α,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)-β-D-吡喃半乳糖甙(2)。(1)是新化合物,命名为知母皂甙E1;(2)是(1)的甲醚化人工产物,命名为知母皂甙E2。对知母皂甙-I(A)的结构分析作了简单说明。     

参麦注射液与氨茶碱对膈肌细胞Ca2+浓度的影响

目的 :探讨参麦注射液与氨茶碱对膈肌细胞内游离Ca2 浓度的影响。方法 :体外培养大鼠膈肌细胞 ,荧光光度法测定参麦注射液与氨茶碱处理前后细胞内Ca2 浓度的变化。结果 :氨茶碱可使膈肌细胞内的Ca2 浓度明显升高(P<0.01) ,维拉帕米或预先去除培养液中Ca2 可消除该作用。参麦注射液对膈肌细胞内Ca2 浓度无明显影响(P>0.05)。缺氧24h即可致膈肌细胞内Ca2 浓度明显升高(P<0.01) ,参麦注射液对缺氧24h所致的膈肌细胞内Ca2 浓度升高有抑制作用。结论 :细胞外Ca2 是氨茶碱导致细胞内Ca2 升高的关键因素 ,氨茶碱可通过促进细胞外Ca2 内流导致细胞内Ca2 升高。参麦注射液可抑制缺氧所致的膈肌细胞内Ca2 超载 ,对细胞有一定的保护作用。以上作用分别参与了二者抗膈肌疲劳的机制     

次乌头碱对心肌细胞内Ca2＋及L-Ca通道mRNA表达的影响

目的：观察次乌头碱对SD乳鼠心肌细胞内Ca2＋浓度及细胞膜L-Ca通道mRNA的影响。方法：原代培养SD乳鼠心肌细胞,给予不同浓度的次乌头碱,采用流式细胞技术分别检测给药后15min、30min、60min心肌细胞内钙浓度的变化,并分析次乌头碱对心肌细胞内钙浓度的作用与L-Ca通道mRNA表达的相互关系。结果：30-120μM／L次乌头碱引起心肌细胞内游离Ca2＋浓度升高,细胞“钙超载”出现在给药后15min（P〈0．01）,且呈一定的剂量依赖性,但无明显的时间依赖性;60μM／L次乌头碱与心肌细胞作用5min即能增加L—Ca通道mRNA表达（P〈0．05）,随着次乌头碱浓度的增加,L—Ca通道mRNA的表达也增多,但亦未表现出明显的时间依赖性。结论：次乌头碱为附子中的主要成分之一,其可能通过增加心肌细胞膜L-Ca通道开放数量而导致细胞内钙增加,发生钙超载,并最终导致心律失常的发生。     

软骨藻酸对H4细胞氨基酸释放和Ca2+浓度的影响

目的　研究软骨藻酸 (domoicacid)对H4细胞的兴奋性、抑制性氨基酸释放和胞内游离Ca2 ( [Ca2 ]i)浓度的影响。方法　应用高效液相色谱 (HPLC)和荧光分光光度计检测 0、0 0 64、0 64和 6 4μmol/L软骨藻酸作用于细胞 2h后的兴奋性、抑制性氨基酸释放和 [Ca2 ]i浓度。结果　天冬氨酸和谷氨酸 :中、高剂量组均高于对照组 ,差异有显著性(P <0 0 5 ) ;甘氨酸 :仅高剂量组高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;γ 氨基丁酸 :低、中和高剂量组均低于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;兴奋性氨基酸 /抑制性氨基酸 :低、中和高剂量组均高于对照组 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。胞内[Ca2 ]i :低、中和高剂量组分别为 ( 2 0 8 65± 11 0 1)、( 3 42 3 1± 15 0 8)和 ( 5 81 3 6± 17 2 4)nmol/L ,高于对照组 [( 14 3 2 5±11 97)nmo1/L] ,差异有显著性 (P <0 0 1)。兴奋性氨基酸与 [Ca2 ]i浓度有显著的正相关性 (r =0 93 2 0P <0 0 1)。结论　软骨藻酸能引起H4细胞兴奋性和抑制性氨基酸释放和胞内 [Ca2 ]i变化 ,这种变化可能是软骨藻酸兴奋性神经毒性的重要机制     

基于熵权法结合灰色关联法和TOPSIS法的不同产地知母及盐知母质量评价研究

目的 利用熵权法结合灰色关联法和TOPSIS法建立知母质量评价模型,评价不同产地知母及其炮制品盐知母的质量。方法 以水分、芒果苷、知母皂苷BⅡ、多糖总糖、糖蛋白及糖醛酸的含量和多糖得率作为检测指标,以熵权法计算权重,结合灰色关联法与TOPSIS法对各项指标进行统计分析,建立知母质量评价模型,综合考察忻州、安国和汉中3个产地共15个批次的知母及其炮制品盐知母的质量。结果 不同产地不同批次的知母各指标水平大不相同;将知母炮制前后各项指标进行对比,发现盐炙后水分降低,皂苷减少,多糖含量增加;15批知母及炮制品盐知母质量排序结果TOPSIS与灰色关联分析基本一致。结论 基于熵权法的灰色关联法-TOPSIS法建立的质量评价模型方便有效,可用于知母质量评价。     

不同炮制方法对知母中多糖含量的影响

目的比较不同炮制方法对知母中多糖含量的影响。方法采用苯酚硫酸法测定各供试样品中知母的多糖含量。结果不同炮制方法处理后知母中多糖含量高低依次为盐炙品〉清炒品〉酒炙品〉麸炒品〉生品。结论知母经炮制后均有利于多糖的溶出,其中以盐炙品含量最高。     

二仙汤中知母黄酮及皂苷含量测定

目的:以高效液相色谱法测定二仙汤中知母黄酮含量及以比色法测定知母皂苷含量。方法:HPLC法测定采用C18-ODS反相色谱柱,流动相:乙腈-25mmoL/LKH2PO(4pH=3.0)=1:9,检测波长:317nm,流速:0.8mL/min。比色法测定采用紫外可见分光光度计,检测波长:590nm。结果:知母新芒果苷、芒果苷分别在1.0μg/mL～100.0μg/mL及50.0μg/mL～1000.0μg/mL的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.9992,r=0.9997),回收率分别为97.656%、99.008%(RSD=1.54%,RSD=1.28%);知母总皂苷在8.0μg/mL～40.0μg/mL范围内呈良好的线性关系(r=0.9995),回收率为100.84%(RSD=1.29%)。结论:本方法简便、准确、灵敏度高、重现性好,可用于二仙汤的质量控制。     

知母盐制后增量成分对HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响

目的：通过探讨知母盐制后增量成分知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷对HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响,进一步验证知母盐炙后降糖作用增强的炮制原理。方法：将HepG-2细胞分为空白对照组、知母皂苷AⅢ组、知母皂苷BⅢ组、芒果苷组、二甲双胍组,在5% CO₂培养箱中培养24 h,饥饿12 h,再加入不同浓度相应的含药或不含药血清培养基,采用葡萄糖试剂盒检测培养液中的葡萄糖含量,葡萄糖消耗实验之后,加入cck-8试剂培养2 h,用酶标仪测定吸光度（OD）;采用胰岛素诱导建立胰岛素抵抗HepG-2细胞模型,同上法比较知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ以及芒果苷对胰岛素抵抗HepG-2细胞葡萄糖消耗的影响。结果：知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷对正常组和胰岛素抵抗HepG-2细胞的葡萄糖消耗量和细胞增殖均有显著增加（P<0.05）。结论：知母皂苷AⅢ、知母皂苷BⅢ、芒果苷均具有降糖活性,尤其对胰岛素抵抗的HpeG-2细胞作用明显,是盐知母降糖作用的物质基础。     

不同干燥加工方法对知母化学成分含量的影响

目的:揭示各种干燥加工方法对知母有效成分含量的影响。方法:分别采用晒干、阴干、烘干、远红外干燥、微波干燥的方法对知母进行干燥加工,以菝葜皂苷元、知母皂苷AⅢ、芒果苷、新芒果苷为指标,通过高效液相色谱法(HPLC),分析各种干燥加工条件下知母中各类指标成分的含量变化情况。其中菝葜皂苷元、知母皂苷AⅢ采用高效液相蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)进行检测,用外标两点法对数方程计算含量,芒果苷、新芒果苷采用高效液相紫外检测法(HPLC-UV)检测。结果:采用烘干、远红外干燥、微波干燥方法加工后,知母菝葜皂苷元、知母皂苷AⅢ、芒果苷含量与晒干、阴干相比均有不同程度上升,新芒果苷含量与晒干、阴干相比有所下降。结论:从有效成分保存方面考虑,不同干燥方法的优劣顺序为微波干燥>远红外干燥>烘干>晒干≈阴干。     

复合离子盐对老年人细胞内Na+、K+、Ca2+的影响及其机制

目的：观察复合离子盐对老年人细胞内Na^＋、K^＋、Ca^2＋及红细胞膜钠泵和钙泵活性的影响。方法：在天津市河东区社区中抽取226例老年人作为研究对象．其中高血压者112例。正常血压者114例。两者再随机分为离子盐组和普通加碘盐组．分别给予复合离子盐和普通加碘盐摄入，6个月后观察研究对象细胞内Na^＋、K^＋、Ca^2＋及钠泵、钙泵活性的变化。结果：6个月时高血压患者中离子盐组细胞内钠、钙离子浓度低于基线水平（P〈0．05），但钾离子无明显变化。离子盐组钠泵、钙泵活性均明显高于基线水平（P〈0．05），但在正常血压者中，2组与基线水平比较差异无统计学意义。结论：复合离子盐可增强钠泵、钙泵活性，使细胞内的钠、钙含量减少。     

基于指纹图谱结合网络药理学的知母质量标志物预测分析

目的 基于指纹图谱及化学计量法综合分析不同产地知母质量差异,根据质量标志物的理论依据,进一步结合网络药理学对知母质量标志物进行预测分析。方法 采用HPLC建立6个产地20批知母药材的指纹图谱,对其进行相似度评价,结合聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)及正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least squares discriminant analysis,OPLS-DA)筛选组间主要差异成分;基于质量标志物“五原则”,对差异性成分进行分析,进一步利用网络药理学方法筛选知母药材成分的相关靶点和通路,构建“成分-靶点-通路”网络图,预测知母药材的质量标志物。结果 建立了20批知母药材的指纹图谱,标定10个共有峰,共指认出7个共有峰,分别为新芒果苷、芒果苷、异芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷BⅢ、知母皂苷Ⅰ、知母皂苷AⅢ,相似度均>0.934。HCA、PCA和OPLS-DA将20批样品分为2类,河北、内蒙古为一类,山西、安徽、陕西、山东为一类。OPLS-DA筛选出新芒果苷、芒果苷、知母皂苷AⅢ为不同产地知母药材的差异性成分。运用网络药理学分析预测芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ可能通过NFKB1、TNF、PPP1CC、IL1B、ATP1A3、ATP1A2、ATP1A1等靶点,调控神经活动配体-受体相互作用、缝隙连接、钙信号通路、cAMP信号通路、cGMP-PKG信号通路发挥治疗神经系统疾病、心脑血管疾病和癌症的作用。结合质量标志物理论分析,芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ可作为知母药材潜在的质量标志物。结论 建立的知母药材指纹图谱能够直观反映出不同产地知母化学成分信息,结合网络药理学筛选出芒果苷、知母皂苷BⅡ、知母皂苷AⅢ 3个化学成分可作为知母的质量标志物。     

萘哌地尔衍生物(BWYJ)对血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响

目的:观察萘哌地尔衍生物(BWYJ)对家兔血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响,对其血管活性进行机理探讨,进一步明确其作用机制。方法:采用钙荧光指示剂Fura-2/AM负载的培养家兔胸主动脉平滑肌细胞,观察该药对NA、5-HT和高钾所致的[Ca2 ]i的升高的影响。结果:Fura-2/AM负载血管平滑肌细胞的实验中,静息时各浓度的BWYJ对[Ca2 ]i无明显影响,但其对NA和5-HT所引起的血管平滑肌[Ca2 ]i增加均有明显的抑制作用,而不影响高钾所致血管平滑肌[Ca2 ]i的增加。结论:BWYJ通过阻断细胞膜上的α1受体或5-HT2A受体,抑制这些受体中介的钙内流,从而抑制细胞内Ca2 的释放,使血管平滑肌[Ca2 ]i降低。