C-myc,c-erbB-2癌基因在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的 探讨c-myc,c-erbB-2两种癌基因在宫颈癌中表达及其临床意义。方法 应用免疫组化法检测宫颈癌组织与CIN、正常宫颈组织标本中c-myc,c-erbB-2蛋白的表达，分析这两种蛋白表达与临床病理及预后的关系。结果 宫颈癌组织c-myc蛋白表达率：宫颈癌组织为40．00％，正常宫颈组织为10．00％，CIN为20．00％，表达与病理分类有关，腺癌表达率高于鳞癌，但差异无显著性（P＞0．05）；过表达与临床分期及病理学分级相关（P＜0．05）。宫颈癌组织c-erbB-2表达率为37．50％，正常宫颈组织未见阳性表达，仅1例重度CIN弱表达，腺癌表达率（66．67％）高于鳞癌（32．35％），但无显著性差异（P＞0．05），鳞癌过表达与复发有关。C－myc,c-erbB-2两种基因在宫颈癌中表达差异无显著性（P＞0．05）。结论 C-myc表达与宫颈癌发生发展有一定关系；c-erbB-2表达是细胞恶性变的标志，宫颈鳞癌中过表达与复发有关。     

Skp2和p27在子宫颈鳞状上皮内瘤变过程中的表达

目的：探讨宫颈鳞状上皮内瘤变（CIN）、宫颈鳞癌组织中Skp2和p27的表达及相关性。方法：免疫组化二步法检测60例宫颈鳞状上皮内瘤变（CINI、CINⅡ、CINⅢ各20例）、50例宫颈浸润癌中Skp2和p27的表达,20例正常宫颈组织做对照。结果：S期激酶相关蛋白2（S-phase Kinase-associated Protein2。Skp2）促进泛素介导的细胞周期素依赖激酶抑制剂p27蛋白降解,研究发现Skp2过表达参与细胞转化和肿瘤的形成。①Skp2蛋白表达CINⅡ明显高于CINI和正常宫颈组织（P〈0．05）;CINI和正常宫颈组织中差异无统计学意义（P〉0．05）;CINⅢ明显高于CINⅡ（P〈0．05）;宫颈浸润鳞癌明显高于CINⅢ（P〈0．05）。p27蛋白表达CINI与在正常宫颈组织中差异无统计学意义（P〉0．05）,CINⅡ明显低于正常宫颈组织和CINI（P〈0．05）,CINⅢ明显低于CINⅡ（P〈0．01）。宫颈浸润癌明显低于CINⅢ（P〈0．01）。②宫颈癌Skp2与p27蛋白表达呈负相关。③宫颈浸润癌的Skp2蛋白表达和分化程度、淋巴结转移、临床分期呈正相关。结论：Skp2和p27蛋白可能参与宫颈癌的发生及转移,并与分化程度和临床分期有关。检测Skp2和p27蛋白表达对早期诊断宫颈鳞癌、确定肿瘤恶性程度及预后有重要作用。     

ATM蛋白在宫颈癌中的表达及临床意义

目的研究毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白（ATM）在宫颈癌、宫颈上皮内瘤样病变（CIN）和正常宫颈组织中的表达情况,探讨其在宫颈癌发生发展中的作用。方法采用免疫组化SP法检测50例宫颈癌、15例CIN和20例正常宫颈组织中ATM蛋白的表达。结果ATM在宫颈癌、CIN及正常宫颈组织中的阳性率分别为22％、33．3％和60％,在宫颈癌中的表达水平低于正常宫颈组织,差异有统计学意义（P〈0．01）,在正常宫颈组织中的表达水平虽高于CIN但差异无统计学意义（P〉0．01）。结论ATM蛋白在宫颈癌组织中的表达下降,ATM可能在宫颈癌的发生发展中起一定的作用。     

宫颈癌组织中p-ERK和TGF—β1蛋白的表达及其相关性

目的探讨磷酸化的细胞外信号调节激酶（P—ERK）和转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白在宫颈癌组织中的表达及其相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测P～ERK和TGF－β1蛋白在宫颈癌（宫颈癌组,n=50）、宫颈上皮内瘤变（CIN组,n=25）和正常宫颈组织（正常宫颈组,n=25）中的表达情况,并分析P—ERK和TGF－β1的相关性。结果P—ERK蛋白在宫颈癌组、CIN组和正常宫颈组中的阳性表达率分别为84％、48％、20％,宫颈癌组与CIN组、正常宫颈组比较差异有显著统计学意义（均P〈O．01）,后两组比较差异有统计学意义（P〈O05）。TGF－β1蛋白在宫颈癌组、CIN组和正常宫颈组中的阳性表达率分别为86％、44％、12％,宫颈癌组与CIN组、正常宫颈组比较差异均有显著统计学意义（P〈0．01）,后两组比较差异有统计学意义（P〈O．05）。P—ERK和TGF－β1蛋白在宫颈癌组织中的表达呈显著正相关（r=0．457,P〈0.01）。结论P—ERK、TGF－β1与宫颈癌发生有关,两者在宫颈癌组织中的表达呈明显正相关。     

环氧化酶在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的：研究环氧化酶（COX）在正常宫颈上皮组织宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌中的表达,探讨其与宫颈癌临床、痛理特征的关系。方法：采用组织芯片技术结合免疫组织化学PV法分别检测101例宫颈癌、12例宫颈上皮内瘤变和正常宫颈上皮组织中COX-1、COX-2的表达。结果：①COX—1在正常宫颈组织、CIN及宫颈癌中的表达差异无统计学意义（P〉0．05）。COX-2在正常宫颈组织中无表达,在CIN（66．7％）及宫颈癌（87．1％）中的表达率明显高于正常宫颈组织（P〈0．01）,但COX-2在CIN及宫颈浸润癌中的表达率比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。②宫颈癌中COX-1的表达与发病年龄、临床分期、病理分级、宫颈浸润深度及淋巴结转移无关（P〉0．05）;COX-2的表达与发病年龄、临床分期、病理分级及宫颈浸润深度无关（P〉0．05）,而与淋巴结转移有关（P〈0．05）,伴淋巴结转移者COX-2的表达较高。结论：COX-1的表达可能与宫颈癌的发生、发展无直接关系;COX-2过度表达可能参与宫颈癌的发生、发展过程,故可作为反映宫颈癌生物学行为的有效指标之一。     

宫颈癌组织Bcl-2基因的表达与HPV感染的关系

目的研究宫颈癌组织Bcl-2基因的表达与人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系。方法应用免疫组化PV-9000法对正常宫颈组织38例、各级宫颈上皮内瘤样变（CIN）组织106例、宫颈癌组织66例中Bcl-2基因的表达水平进行检测。应用PCR方法对66例宫颈癌组织中HPV表达进行检测及分型。结果Bcl-2在各宫颈组织中均有表达,宫颈癌组Bcl-2阳性表达率（57．6％）,显著高于正常宫颈组（15．8％）和CINI组（19．4％）,P均〈0．01;高于CINⅡ组（28．6％）,P〈0．05;与CINlI组（60．0％）比较差异无统计学意义,P〉0．05。宫颈癌组织中Bcl-2蛋白表达与HPV感染具有相关性,P〈0．05。Bcl-2蛋白在HPVl6／18阳性宫颈癌组织和HPV其他型别阳性宫颈癌组织中表达差异无统计学意义,P〉0．05。结论Bcl-2蛋白的高表达可能在宫颈癌的发生发展中起重要作用。Bcl-2蛋白的高表达与宫颈癌HPV感染相关,但与HPV型别关系不大。Bcl-2蛋白可能成为宫颈癌诊断和治疗的指标。     

HCCR-1、P53在宫颈癌及其癌前病变中的表达及其临床意义

[目的]探讨人宫颈癌致癌基因-1（human cervical cancer oncogene-1,HCCR-1）、P53在宫颈癌及其癌前病变组织中的表达及临床意义。比较人乳头状瘤病毒（human papillomavirus ,HPV）检测与免疫组化法检测HCCR-1蛋白诊断宫颈上皮内瘤样变（cervical intraepithelianeoplasia ,CIN ）和宫颈癌的敏感度和特异度。[方法]采用免疫组化SP法检测 HCCR-1和P53在具有 HPV-DNA检测结果的40例宫颈癌、30例CIN Ⅰ、30例CINⅡ～Ⅲ和10例正常宫颈组织标本中的表达。[结果]① HCCR-1蛋白在正常宫颈组织中无表达,随着宫颈上皮病变的升级而呈现增高的趋势,各组间差异有统计学意义（ P ＜0．05）。②CIN Ⅰ、CIN Ⅱ～Ⅲ和宫颈癌P53表达阳性率显著高于正常宫颈（ P ＜0．05）。③ HCCR-1、P53在宫颈组织中的表达 HCCR-1、P53在宫颈组织的表达相关系数较低（ r ＝0．220,P ＝0．021）,可认为两者没有相关性。④ HCCR-1、HR-HPV在宫颈组织的表达明显呈正相关（ r ＝0．9,P ＝0．000）。⑤免疫组化法检测 HCCR-1诊断CIN和宫颈癌的敏感度和特异度分别为71％和100％。[结论]在宫颈病变进展的过程中受多基因调控。 HCCR-1与突变型p53蛋白的表达随病理级别进展均呈逐步增加的趋势,在宫颈病变的发生发展中可能起着重要的作用。免疫组化法检测宫颈组织中 HCCR-1蛋白表达有望成为宫颈病变的诊断辅助工具。     

AT1R及AT2R在宫颈癌中的表达及其意义

目的探讨血管紧张素Ⅱ受体AT1R、AT2R与宫颈癌发生、发展的关系。方法在正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌组织中，采用免疫组织化学的方法检测血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型（AT1R）和受体Ⅱ型（AT2R）的表达。结果AT1R在宫颈癌各组中的阳性表达率大于正常宫颈组和宫颈上皮内瘤变（CIN）各组（P〈0．01），AT2R在宫颈癌各组和CINⅡ／Ⅲ组中的阳性表达率均大于正常宫颈组、CINⅠ组（P〈0．05）。结论AT1R、AT2R参与宫颈癌的发生、发展。     

KiSS－1和基质金属蛋白酶－9在宫颈鳞癌中的表达及其意义

目的探讨KiSS－1和基质金属蛋白酶－9（MMP－9）在正常宫颈黏膜上皮、宫颈上皮内瘤变及宫颈鳞癌组织中的表达及其意义。方法采用免疫组化sP法检测20例正常宫颈黏膜上皮．45例子宫颈上皮内瘤样病变（CIN）及50例宫颈鳞癌患者组织中KiSS－1和MMP－9蛋白的表达。结果KiSS—1和MMP－9蛋白的阳性表达率在正常宫颈黏膜上皮、CIN及宫颈鳞癌中的表达率分别为85．0％、62．0％、40．0％和10．O％、64．4％、72．0％;KiSS－1蛋白的失表达与宫颈鳞癌的淋巴结转移有关（P〈0．05）,与患者年龄、组织学分级无关（P〉0.05）;MMP－9蛋白的高表达与宫颈鳞癌的淋巴结转移有关（P〈0．05）,与患者年龄、组织学分级无关（P〉0.05）。子宫颈鳞癌组织中KiSS－1和MMP－9的表达呈负相关（r=-0．642,P〈0．01）。结论KiSS－1和MMP－9的表达与宫颈癌的发生发展、浸润和转移有关,两者呈负相关关系,并可作为宫颈鳞癌浸润转移的检测标志。     

应用组织芯片技术研究人宫颈鳞状细胞癌及宫颈上皮内瘤样变组织中HPV16感染与端粒酶hTERT表达的关系

目的：探讨卸PV16感染与端粒酶hTERT表达在人宫颈鳞癌及其癌前病变中的关系。方法：利用组织芯片技术结合原位杂技术和免疫组织化学方法研究130例正常宫颈组织及宫颈上皮内瘤样变组织和宫颈鳞癌组织中HPV16感染以及端粒酶hTERT表达的情况。结果：①在8／22CINⅠ,7／11CINⅡ,11／13CINⅢ,4／6原位癌,41／52宫颈鳞癌中为HPV16杂交信号阳性,CINⅢ、浸润癌与正常宫颈组织相比,HPV16杂交信号阳性率差异有显著统计学意义（P〈0．05）;②从CINⅡ到CINⅢ到浸润性鳞癌,hTERT表达与正常宫颈组织相比差异皆有统计学意义（P〈0．05）,且阳性程度逐渐增加;③端粒酶hTERT表达在各级CIN、原位癌及浸润癌组织中,与HPV16型的感染率之间呈现正相关性（P〈0．05,r=0．339）。结论：宫颈鳞癌的形成与HPV16的感染、端粒酶hTERT表达之间有重要关系。宫颈鳞癌及其癌前病变组织中HPV16感染与端粒酶hTERT表达之间具有正相关性,检测两者配合细胞学检查,有利于提高宫颈癌及其癌前病变的诊断率。组织芯片技术是高效的研究基因及其表达产物的技术平台。     

浸润性宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中HPV16-E7蛋白和端粒酶的表达及意义

目的探讨16型人乳头瘤病毒E7（HPV16-E7）蛋白和端粒酶在浸润性宫颈癌及宫颈上皮内瘤变组织中的表达以及在宫颈癌发生、发展过程中的作用。方法30例浸润性宫颈癌（ICC组）;90例宫颈上皮内瘤变（CIN）,其中CINⅠ（CINⅠ组）30例,CINⅡ（CINⅡ组）30例,CINⅢ（CINⅢ组）30例。采用免疫组化Elivision二步法检测各组组织标本中HPV16-E7蛋白和端粒酶的表达。另设10例正常宫颈组织标本作为对照组。结果对照组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组和ICC组中的HPV16-E7蛋白阳性表达率分别为30.0%、63.3%、63.3%、76.7%和96.7%,ICC组和CINⅢ组显著高于对照组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;而ICC组与CINⅢ组比较,CINⅢ组与CINⅡ组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。对照组、CINⅠ组、CINⅡ组、CINⅢ组和ICC组的端粒酶阳性表达率分别为30.0%、40.0%、43.3%、70.0%和93.3%,ICC组显著高于CINⅢ组,CINⅢ显著高于CINⅡ组,差异均有统计学意义（均P〈0.05）;而CINⅡ组与CINⅠ组比较,CINⅠ组与对照组比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）。浸润性宫颈癌及宫颈上皮内瘤变患者的HPV16-E7蛋白与端粒酶的表达呈正相关（r=0.376,P〈0.01）。结论HPV16-E7蛋白和端粒酶的表达与宫颈癌的发生、发展有关。     

宫颈癌组织中c-myc、bcat1的表达及其临床意义

目的 探究c-myc、bcat1表达与宫颈癌发生发展及临床特征的关系。方法 采用免疫组织化学方法半定量检测30例正常宫颈组织、30例宫颈上皮内瘤变（CIN）组织、80例宫颈癌组织（40例宫颈鳞癌、40例宫颈腺癌）中c-myc及bcat1蛋白的表达情况,并进行Spearman秩相关分析,分析两者表达水平与宫颈癌临床病理因素间的关系。结果 c-myc在正常宫颈组织、CIN组织、宫颈癌组织中的阳性表达率分别为16.7%（5/30）、43.3%(13/30)、73.8%(59/80);bcat1阳性表达率分别为10.0%（3/30）、23.3%(7/30)、52.5%(42/80);c-myc与bcat1在宫颈鳞癌及腺癌组织中的秩相关系数r_s分别为0.773（P=0.000）、0.369(P=0.019);c-myc阳性表达率与癌组织病理类型（腺癌/鳞癌）、癌组织分化程度、间质浸润深度、有无脉管浸润有关(P<0.05);bcat1阳性表达率与癌组织分化程度、有无脉管浸润及Ki67指数有关(P<0.05)。结论 c-myc的高表达可能促进宫颈癌的侵袭及转移,bcat1的高表达可能促进宫颈癌的增殖、侵袭与转移,两者可能在宫颈癌致病过程中存在协同作用。     

酶的活性及其与凹空细胞分型的关系

目的 研究宫颈上皮内瘤样病变（CIN）及宫颈癌的组织和脱落细胞中端粒酶的活性变化,探索端粒酶激活与凹空细胞分型及人乳头状瘤病毒（HPV）感染之间的关系。方法 采用端粒酶重复扩增技术（TRAP）,检测24例正常宫颈、34例宫颈炎症、78例CIN及16例宫颈癌的宫颈组织和脱落细胞中端粒酶的活性。同时采用双盲法检测上述宫颈病变组织中凹空细胞的分布,并将其分为Ⅰ型和Ⅱ型。结果 组织中端粒酶阳性率分别为：正常宫颈组织为16.7%（4／24）,炎症组织为17.6%（6／34）,CIN1组织为51.6%（16／31）,CIN2组织为72.0%（18／25）,CIN3组织为86.4%（19／22）,宫颈癌组织为100％（16／16）。端粒酶阳性率CIN明显高于正常宫颈及炎症组织（P＜0.01）;宫颈癌组织明显高于CIN组织（P＜0.05）;CIN3高于CIN1（P＜0.05）;而正常宫颈与炎症组织比,CIN1与CIN2比,CIN2与CIN3比较,差异均无显著意义（P＞0.05）。相应的宫颈脱落细胞中端粒酶阳性率同组织标本比,差异无显著意义（P＞0.05）。含Ⅰ型、Ⅱ型凹空细胞的宫颈病变组织中端粒酶阳性率分别为66.7%和100％,两者差异有显著意义（P＜0.01）。结论 （1）端粒酶的激活与宫颈癌及CIN的发展有密切关系。端粒酶可作为宫颈癌及CIN的标志物。（2）宫颈脱落细胞可以替代组织标本进行端粒酶活性检测。（3）端粒酶的激活与Ⅱ型凹空细胞的出现及HPV16／18感染有密切关系。     

EGFR和p16在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达

目的:探讨EGFR和p16表达在宫颈上皮瘤样病变(CIN)及宫颈癌中表达的意义。方法:对正常宫颈上皮、CIN和宫颈癌组织共99例,采用免疫组化S-P法,对宫颈癌变过程中EGFR和p16蛋白进行研究,将结果进行统计学分析。结果:EGFR在CIN和宫颈癌的表达高于正常宫颈上皮;p16蛋白在CIN和宫颈癌的表达高于正常宫颈上皮。结论:EGFR和p16蛋白的表达与宫颈癌的发生有关,可作为评价子宫颈癌恶性程度的指标。     

人端粒酶逆转录酶在喉鳞状细胞癌中表达与c-myc的相关性

目的研究人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA在喉鳞状细胞癌中和病理分级、临床参数的关系以及和c-myc的相关性。方法用原位杂交法检测40例喉鳞状细胞癌中hTERT mRNA的表达，用免疫组织化学法检测c—myc蛋白。结果喉正常组织、不典型增生、鳞癌组织中hTERT mRNA的阳性率分别为0％（0／10）、10％（1／10）、80％（32／40），喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织（P〈0．05）和不典型增生（P〈0．05），hTERT mRNA水平与c—myc的表达呈显著相关（r=0．5422，P〈0．01）。喉鳞癌中hTERT mRNA表达水平与病理分级不相关（P〉0．05），与年龄、性别、TNM分期和淋巴结转移情况不相关（P〉0．05）。结论喉鳞癌中hTERT mRNA的阳性率明显高于正常组织和不典型增生，有助于喉部良恶性病变的鉴别，c-myc的过度表达可能是喉鳞癌端粒酶活性升高的一个重要机制。     

宫颈癌癌变过程中Caspase-3、Fas/FasL的表达及其临床意义

目的:探讨宫颈癌癌变过程中Caspase-3、Fas/FasL蛋白表达的变化。方法:用免疫组织化学SP法检测42例宫颈癌、13例宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraep ithelial neop lasia,C IN)和8例正常宫颈组织中Caspase-3、Fas/FasL蛋白的表达。结果:Caspase-3蛋白在正常宫颈组织、C IN及宫颈癌组织中的阳性表达率依次降低(P<0.05)。而Fas及FasL在C IN及宫颈癌组织中的表达与在正常组织中表达相比均有显著性差异(PFas<0.05;PFasL<0.05)。结论:宫颈癌组织能通过Caspase-3、Fas的表达及FasL高表达逃逸机体免疫监视以促使肿瘤发生发展及转移。     

p16和PCNA在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达

目的探讨p16和PCNA表达产物在宫颈上皮瘤样病变及宫颈癌中表达的意义。方法对正常宫颈鳞状上皮、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织共95例,采用免疫组织化学S-P法,对宫颈癌变过程中p16和PCNA蛋白进行研究,将结果进行统计分析。结果p16蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01);PCNA蛋白在CIN中的表达高于正常宫颈上皮(P<0.01),在宫颈癌中的表达也高于正常宫颈上皮(P<0.01)。p16和PCNA两种蛋白在CIN和宫颈癌中的表达无明显差异。结论p16和PCNA蛋白的表达与宫颈癌的发生有关,提示这两种蛋白有可能成为高危人群早期筛查的一种免疫组化指标。     

Bmi-1及端粒酶在宫颈癌变过程中的表达及意义

目的:探讨Bmi-1、端粒酶蛋白在正常宫颈、癌前病变、子宫颈癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组化(SP)方法对20例正常宫颈、50例宫颈上皮内瘤变(CN)、35例宫颈癌中的Bmi-1、端粒酶蛋白表达情况进行检测。结果:在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变、宫颈癌中,Bmi-1的表达率依次增高,端粒酶的表达率也能依次增高,均有统计学意义(P<0.05)。Bmi-1和端粒酶的表达与年龄、有无淋巴结转移无关,和临床分期有关(P<0.05)。宫颈癌组织中的Bmi-1和端粒酶蛋白明显高于癌旁组织(P值分别为0.004,0.000)。结论:联合检测Bmi-1和端粒酶的表达水平,一定程度上揭示它们与宫颈癌发生发展的关系,同时可以显示宫颈上皮内瘤变向宫颈癌转变的潜能。     

Telomerase activity in cervical intraepithelial neoplasia

Background It was reported that telomerase expression is closely associated with cellular immortality and cancer. This study was designed to investigate the relationship between telomerase expression and the carcinogenesis of cervical cancer, the possible use of telomerase as a marker of cervical intraepithelial neoplasia (CIN) progression or regression, and the natural history of CIN.Methods Telomeric repeat amplification protocol (TRAP) assay was used to measure telomerase activity in cervical scrapings and biopsy samples obtained from 105 cases affected with various cervical conditions, including chronic cervicitis (n =20), CIN (n =64, 16 cases of CIN Ⅰ , 20 cases of CIN Ⅱ, and 28 cases of CIN Ⅲ）, and invasive squamous cell carcinoma ( n =21 ).Results In exfoliated cell samples, telomerase activity was detected in 5 of 20 (25.0%) cases of cervicitis, 10 of 16 (62.5%) cases of CIN Ⅰ , 11 of 20 (55.0%) cases of CIN Ⅱ, 23 of 28 (82. 1%) cases of CIN Ⅲ, and 13 of 21 (61.9%) cases of carcinoma. In cervical biopsy samples, telomerase activity was detected in 6 of 20 (30.0%) cases of cervicitis, 8 of 16 (50.0%) cases of CIN Ⅰ, 9 of 20 (45. 0%) cases of CIN Ⅱ, 27 of 28 (96.4%) cases of CIN Ⅲ, and 20 of 21 (95.2%) cases of carcinoma. Telomerase activation was significantly higher in CIN samples than in cervicitis samples.Telomerase activity was detected at similar frequency in samples from cervical scrapings and cervical biopsies.Conclusion These results seem to suggest that telomerase expression may be associated with carcinogenesis of the cervix. TRAP assay of cervical scraping samples could be used to monitor and predict the development of CIN in clinical practice.