Numb调控ITGB1促进胃癌细胞对多柔比星敏感性的机制研究

目的 探究细胞命运决定子Numb调控胃癌细胞对多柔比星(ADR)敏感性的作用,并明确Numb介导胃癌细胞化疗敏感性的分子机制。方法 将SGC-7901随机分为对照组、ADR组、pLVX-Numb组、pLVX-Numb+ADR组,经过对应的ADR处理与转染处理后,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法测定细胞内耐药蛋白(P-gp)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Cleaved-caspase3)、Cleaved-caspase9的蛋白表达水平。再使用Numb过表达及其对照慢病毒感染SGC-7901细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞内ITGB1表达变化,免疫共沉淀实验分析细胞内源性Numb与ITGB1结合情况。结果 与ADR组比较,pLVX-Numb+ADR组细胞内浓缩、碎裂的蓝色凋亡体增多,细胞凋亡率升高,且细胞内P-gp和PARP蛋白相对表达量下调、Cleaved-caspase3和Cleaved-caspase9蛋白相对表达量上调(P<0.05)。此外,S...     

共振瑞利散射法测定多柔比星脂质体中游离多柔比星的含量

目的:建立共振瑞利散射法(RRS)测定多柔比星(DOX)脂质体中游离 DOX 含量。方法:在 pH 2.6的 Britton-Robinson(BR)缓冲液中,刚果红(CR)与 DOX 通过分子间作用力形成离子缔合物,在λ_(ex)=λ_(em)=380 nm 波长时能使 RRS 信号显著增强。结果:RRS 法在1～12 μg·mL~(-1)范围内呈线性关系,检出限为0.05~(-1)g·mL~(-1)。对6个不同批号的 DOX 脂质体混悬液中游离 DOX 的含量测定,结果与紫外可见分光光度法相符,RSD(n=6)为1.9%～3.2%,平均回收率为94.3%。结论:此方法灵敏度较高,可以用于测定 DOX 脂质体中游离 DOX 的含量。     

多柔比星的毒性研究进展

多柔比星是一种具有细胞周期非特异性杀伤作用的蒽环类抗肿瘤抗生素,因其具有抗肿瘤谱广、活性强等特性,广泛用于治疗各种肿瘤。多柔比星主要用于急性白血病的治疗,对乳腺癌、肺癌、膀胱癌等多种肿瘤也有一定的疗效,但其强烈的细胞毒性作用对机体可产生广泛的生物化学反应,随着药物累积剂量的增加,其不良反应的发生率也相应增高。f     

用多柔比星治疗儿童癌症可增加心脏病危险

据法国的研究人员报告，多柔比星(doxorubicin)(Ⅰ)治疗在长期随访中发现与心力衰竭及严重心脏异常的发生率增加有关。     

微小RNA-422a在胃癌组织中的表达及参与多柔比星耐药的机制研究

摘 要 目的：研究微小RNA-422a（miR 422a）在胃癌组织中的表达及参与多柔比星耐药的机制研究。 方法: 检测46例胃癌及癌旁组织中miR 422a的表达水平,分析其与胃癌临床特征和预后的相关性。将miR 422a转染到SGC-7901/多柔比星细胞中,检测不同浓度多柔比星对SGC-7901细胞增殖的影响,计算耐药指数（RI）,同时检测miR 422a和肌细胞增强因子2D（MEF2D）的表达以及细胞凋亡情况。 结果: miR 422a在胃癌组织的表达水平显著低于癌旁组织（P＜0.05）;根据miR 422a的表达水平将患者分为高表达组和低表达组,发现miR 422a的表达水平在分化程度、淋巴结转移和TNM分期有显著差异（P＜0.05或P＜0.01）;与预后良好组患者相比,预后不良组患者miR 422a表达显著降低（P＜0.05）;SGC-7901的半抑制浓度（IC50）为0.33 μg·ml-1,SGC-7901/多柔比星的IC50为12.08 μg·ml-1,RI为36.61;miR 422a mimic组的IC50为4.01 μg·ml-1,RI为2.74;通过转染miR 422a mimic,miR 422a显著上调,同时抑制MEF2D,SGC 790/多柔比星细胞在多柔比星诱导的情况下细胞凋亡率显著升高（P＜0.01）。 结论: miR 422a在胃癌组织中低表达,并与胃癌患者预后不良密切相关,上调miR 422a水平可以增加SGC-7901对多柔比星的敏感性,这一发现可能为逆转肿瘤耐药性提供新的治疗靶点。     

R—dl—型维拉帕米调低KBv200肿瘤细胞对长春新碱和多柔比星的多？…

目的：研究Ｒ－型维拉帕米对多药耐药的降低和及其急性动物毒性,并与消旋维闰帕米的相应结果作比较。方法：细胞毒性的测定用ＭＴＴ法;细胞内多柔比星积累的测定用萤光分光光度计法。急性毒性试验用ＢＡＬＢ－ｃ小鼠腹腔注射法。结果：Ｒ－型维拉帕米部分调低ＫＢｖ２００细胞对长春新碱和多柔比星的耐区性,其调低效应与作用肖度和作用时间有关。     

盐酸多柔比星制剂研究进展

目的：介绍盐酸多柔比星（Dox）各种剂型的研究进展.方法：根据国内外文献,综述了目前Dox的微球、脂质体、纳米粒、胶束、埋植小棒、凝胶等各种剂型的设计原理、制备方法、体内外研究概况以及部分制剂的临床研究结果和上市产品.结果：由于Dox的不良反应限制了其临床使用,因此其载体制剂得到了广泛研究.这些制剂大部分改变了Dox的生物分布,提高了其在局部肿瘤组织中的含量,其中脂质体制剂已经成功应用于临床,显示了一定的优越性.结论：药物载体在体内的代谢的进一步研究,提高了Dox在体内循环过程中的稳定性及对肿瘤细胞的靶向性.     

DNA多柔比星结合能力评价骨肉瘤的化学治疗敏感性

目的研究核DNA多柔比星结合能力评价(adriamycin binding assay，ABA)方法检测骨肉瘤多药耐药(MDR)基因表型的可行性及可信性。方法将手术切除的10位骨肉瘤患者的肿瘤标本行ABA检测和骨肉瘤细胞核DNA同多柔比星结合率测定，并同肿瘤标本切片后MDR探针原位杂交的结果进行比较，考察两实验结果的相关性。结果10例患者中有3例患者的多柔比星结合率＞80.0%［平均为(93.3±2.5)%］， 6例患者的原位杂交结果MDR表达阳性。等级相关分析结果表明二者呈负相关(rs＝－0.711， P＜0.05)，MDR mRNA阳性患者的多柔比星结合率为31.0%，而MDR阳性患者的平均多柔比星结合率为81.0%，差异有显著性(P＜0.05)。结论 ABA法操作简单，实验周期短，结果高度可信，可以用于临床指导骨肉瘤术后化疗，但确切结果仍需要进一步扩大实验样本。     

多药耐药基因与肺癌氨柔比星耐药的相关性

目的探讨肺癌氨柔比星耐药与多药耐药基因(MDR1)的相关性。方法收集本院近年的肺癌标本,荧光定量PCR检测肺癌组织中MDR1基因的表达,MTT细胞毒实验检测氨柔比星对肺癌耐药细胞的生长抑制率。结果 MDR1基因在肺癌标本中的阳性表达率为37.5%,其中MDR1基因的表达在鳞癌和腺癌中高于小细胞肺癌(P<0.05),鳞癌与腺癌之间没有统计学差异(P>0.05),MDR1的表达在临床病理分级之间没有显著性差异(P>0.05),肺癌MDR1的表达量与氨柔比星对肺癌细胞的半数生长抑制浓度呈正相关(r=0.91)。结论肺癌对氨柔比星的耐药与MDR1基因的表达密切相关,MDR1基因可作为氨柔比星疗效果评价的一个生物分子标记。     

脂质体多柔比星药物动力学研究进展

综述了脂质体多柔比星药物动力学的研究进展。脂质体多柔比星改变了多柔比星的药物动力学参数和组织分布 ,降低了多柔比星的毒副作用 ,并具有肿瘤靶向性。     

多柔比星磷脂复合材料脂质体的制备

先用界面聚合法制备了多柔比星（１）聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒（２）,再用磷脂与之复合制备了１磷脂复合材料脂质体（３）,用ＨＰＬＣ测定其１含量与包裹率,电子显微镜负染法测定粒径大小,经３个月不同温度（２０,３０,４０℃）加速试验后表明,３具有比１脂质体与２更好的稳定性。     

多柔比星／沙利度胺联用增加重度静脉血栓形成的危险

美国的研究者报道 ,用多柔比星 /沙利度胺作为抗肿瘤治疗剂与重度静脉血栓形成 (ＤＶＴ)的发生率增加有关 ,为了考察用多柔比星 /沙利度胺治疗与ＤＶＴ之间的关系 ,研究者分析 2个研究组中的 1组登记的有症状的多样骨髓瘤患者中ＤＶＴ的发生率 ,并接受不同的协议治疗 ,第一研究组中的患者接受地塞米松 ,沙利度胺、顺铂、环磷酰胺和依托泊苷 (ＤＥＣＰ -Ｔ ;ｎ =4 0 ) ,第二研究组中的患者接受类似的剂量 ,将上述药物与多柔比星联用 (ＤＴ -ＰＡＣＥ ;ｎ =192 ) ,随访患者≥9个月。在ＳＥＣＰ -Ｔ组 (ｐ =0 .0 2 ) ,31名 (16 % )接受多柔比星…     

多柔比星温热化疗诱导A549细胞凋亡实验研究

目的 研究多柔比星(DRB)温热化疗诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的效果，探讨其作用机制。方法对照组A549细胞不经处理，37 ℃培养箱中常规培养；化疗组A549细胞分为4组，DRB 浓度分别为0.5，1.0，2.0和4.0 μg·mL 1，均37 ℃培养箱中常规培养；热疗组A549细胞采用水浴加温法，温度设定为42.5 ℃，加热时间30 min，然后在37 ℃孵箱中培养；DRB温热化疗组（热疗+化疗）DRB浓度同化疗组，处理方法同热疗组。四氮甲唑蓝（MTT）比色法测定各组细胞抑制率， 流式细胞仪(FCM法)测定细胞内DRB荧光强度及 Fas蛋白水平变化，比色法检测细胞内Caspase 3活性变化。结果DRB温热化疗可明显增强DRB对A549细胞的抑制作用并诱导细胞凋亡;FCM分析显示，化疗组、DRB温热化疗组细胞内DRB浓度升高，且呈浓度依赖性;DRB温热化疗组细胞内DRB浓度高于化疗组（P＜0.01）。细胞周期分析显示，化疗组和DRB温热化疗组G1期细胞所占比例降低，S期细胞比例增高，细胞被阻滞于S期。化疗组和DRB温热化疗组Fas蛋白表达上调，Caspase 3活性增强。结论DRB温热化疗可增加A549细胞凋亡，其机制可能是通过激活Fas依赖的Caspase 3诱导凋亡起作用。     

盐酸多柔比星脂质体注射液药效学研究

目的比较盐酸多柔比星脂质体注射液与市售楷莱注射液的体内抗肿瘤作用。方法建立小鼠实体型S180肿瘤模型、小鼠腹水型S180、L1210肿瘤模型和静脉注射L1210的小鼠肝转移模型,探讨盐酸多柔比星脂质体与市售楷莱注射液的抗肿瘤作用。结果盐酸多柔比星脂质体注射液与市售楷莱注射液单次以16.0mg/kg静脉注射,对小鼠S180实体型的抑瘤率分别为95.4%和87.9%,二者差异无统计学意义(P>0.05);单次以8.0和12.0mg/kg静脉注射,仅盐酸多柔比星脂质体注射液12.0mg/kg对腹水型S180小鼠有治疗作用,且疗效明显优于市售楷莱注射液组(P<0.05);单次以8.0和12.0mg/kg静脉注射,与空白组相比均可显著延长腹水型L1210肿瘤模型和肝转移模型小鼠的生存时间,二者差异无统计学意义(P>0.05),但与等剂量的盐酸多柔比星注射液组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论相同给药剂量下,盐酸多柔比星脂质体注射液的体内抗肿瘤作用与市售楷莱注射液等效,并显著优于盐酸多柔比星注射液。     

多柔比星临床使用注意事项

目的：为了更好发挥多柔比星的抗肿瘤作用,尽可能避免此药物不良反应对机体的损害。方法：本文从静脉药液配制、静脉给药方法、骨髓抑制的预防、心脏毒性预防及治疗、脱发的处理、消化道反应的处理、外渗后的治疗及在操作过程中注意的事项、不同剂型治疗的效果九个方面进行阐述说明。结果：多柔比星的不良反应可减少对机体的损害,可较大程度提高此药物的治疗效果。结论：可极大降低多柔比星不良反应的发生。     

多柔比星纳米载药系统逆转肿瘤多药耐药的研究进展

多柔比星是治疗乳腺癌、肺癌的1种有效的化疗药物。现存的主要问题是临床使用时肿瘤细胞产生多药耐药。为克服多药耐药,研究者们报道了一些利用纳米载药系统传递多柔比星的方法。纳米载药系统生物相容性好,稳定性高,具有药物控释和靶向性的优点,在药物传递中应用广泛。纳米载药系统可分为无机物纳米系统、基于脂质的纳米系统和聚合物纳米系统3种类型,在多柔比星载药中均有应用。综述近年来有关纳米载药系统最新研究文献,对其研究进展作了分析,并展望了其发展前景。     

奥美拉唑增强多柔比星对K562细胞的毒性作用

目的 探讨质子泵抑制剂奥美拉唑增强多柔比星对人白血病细胞系K562的毒性作用.方法 奥美拉唑预处理K562细胞0 h、24 h,MTT法观察多柔比星对K562细胞的毒性作用,计算多柔比星对K562细胞的IC<,50>值.奥美拉唑5μg/ml预处理K562细胞24 h后,流式细胞术检测细胞内的多柔比星浓度.结果 与无奥美拉唑预处理比较,奥美拉唑(终浓度为1.0、2.0、5.0,10.0μg/ml)预处理0h,多柔比星对K562细胞的IC50值无明显变化;奥美拉唑(终浓度为2.0、5.0、10.0μg/ml)顶处理24 h,多柔比星对K562细胞的IC50值明显降低(P<0.01);奥美拉唑5μg/ml预处理24 h.细胞内多柔比星摄入量有明显增加(P<0.05).且排出量明显降低(P<0.05).结论 奥美拉唑预处理K562细胞,可以增强多柔比星对K562细胞的毒性作用.其机制之一可能是奥美拉唑逆转了细胞的酸性环境,使细胞内发挥作用的多柔比星增多.     

脂质体多柔比星与多柔比星治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的比较研究

目的：比较脂质体多柔比星（PLD）和多柔比星治疗弥漫大 B 细胞淋巴瘤（DLBCL）的疗效及心脏毒性。方法本试验采用开放式、随机、对照的方法进行研究。将50例弥漫大B细胞淋巴瘤（ DLBCL）患者随机分成A组（环磷酰胺、脂质体多柔比星、长春新碱、泼尼松治疗组）、B组（环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松治疗组）;A组PLD剂量为40mg／m2,其余环磷酰胺、长春新碱和泼尼松采用标准 CHOP 方案中的剂量。 B组环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松采用标准CHOP方案中的剂量。均建议联合应用利妥昔单抗化疗。每2周期化疗后复查评价疗效;每周期评价血液学、肝肾毒性、心脏毒性等。结果入组病例中A组完成25例、B组完成25例。6～8个疗程后A组有效率84．0％,B 组为76．0％,但差异无统计学意义（P＞0．05）。中位随访24．2（0．9～40．5）个月,A组总生存率及无进展生存率分别为80．0％及72．0％,B组总生存率及无进展生存率分别为84．0％及68．0％。差异无统计学意义（ P＞0．05）。化疗最常见的不良反应为脱发、手足综合征、血小板减少、粒细胞减少、贫血、肝功能损害、心脏毒性、胃肠道反应（恶心、呕吐与腹痛、腹泻）、乏力、口腔炎。手足综合征仅见于A组。 B组的脱发、血小板减少、Ⅳ度粒细胞减少、贫血、肝功能损害、心脏毒性、恶心呕吐、口腔炎发生率大于A组,两组发生率的差异有统计学意义（P＜0．05）。 B组乏力、腹痛腹泻的发生率高于A组,但是两组乏力、腹痛腹泻的发生率差异无统计学意义（ P＞0．05）。两组神经毒性的发生率相近,差异无统计学意义（ P＞0．05）。结论与多柔比星相比,含脂质体多柔比星的类似CHOP方案能明显减轻化疗所致的脱发、心脏毒性、肝脏损害、血液学毒性、口腔炎,两组化疗所致的疗效相当。     

下调survivin表达对HL-60耐多柔比星细胞株耐药性的逆转作用

AIM: To investigate the ability of an antisense RNA eukaryotic expression plasmid pcDNA3.1/survivin in downregulating the expression level of survivin mRNA and survivin protein and reversed multidrug resistance (MDR) in adriamycin-resistant HL-60/ADR cell line. METHODS: The expression of survivin mRNA was measured by RTPCR and the expression of survivin protein was measured by Western blot. Caspase-3 activity was determined by Phar Mingen colorimetric assay kit. Apoptosis was assessed by flow cytometry. The chemosensitivity of HL-60/ADR cells to adriamycin (ADR) was measured by MTT assay. RESULTS: pcDNA3.1/survivin down-regulated the expression level of survivin mRNA and survivin protein obviously, and induced apoptosis of HL-60/ADR cells in a time-dependent manner during 12-48 h. After transient transfection with pcDNA3.1/survivin for 48 h, survivin mRNA decreased by 67 %, survivin protein decreased by 57 %, caspase-3 activity increased 4.37 times, and the apoptosis rate increased by 4.41% compared with control. Compared with ADR alone, pcDNA3.1/survivin significantly reversed MDR in HL-60/ADR cells, the chemosensitivity of HL-60/ADR cells to ADR was increased to 5.36 folds. CONCLUSION: pcDNA3.1/survivin down-regulated the expression level of survivin mRNA and survivinp rotein obviously, the threshold of apoptosis was decreased and MDR was reversed.     

褪黑素对多柔比星所致肾病的保护作用

本研究旨在观察褪黑素 ( MT)对大鼠“阿霉素肾病”的保护作用 .将所有受试动物分为 5组 ,即正常组 ,MT( d0 - d7,5mg·kg-1·d-1,ig)组 ,多柔比星模型组 ( d 1 ,Dox,5mg· kg-1,iv)组和MT( d 0 - d 7,0 .5,5mg· kg-1· d-1) + Dox( d 1 ,5mg· kg-1,iv)组 .检测大鼠 d7,d1 4,d2 1和 d2 8时尿蛋白 ,尿丙二醛排泄量和 d 2 8时血浆生化指标 .结果显示 ,Dox组大鼠呈典型的肾病综合征 ,MT+ Dox组大鼠尿蛋白减少 ,血浆蛋白明显回升 ,血脂降低 ;同时 ,Dox组动物尿丙二醛显著增加 ,MT+ Dox组丙二醛降低 .这些结果表明 ,MT可减轻“阿霉素肾病”大鼠肾损害 .