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高效液相色谱电化学法直接测定血浆中同型半胱氨酸 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]建立以高效液相色谱电化学检测法(HPLC-ECD)直接测定血浆中同型半胱氨酸的方法。[方法]同型半胱氨酸被四氢硼酸钠还原后,利用色谱分离技术,以0.02mol/L醋酸盐缓冲液为流动相,电化学检测电极电位为 800mV,用外标法定量。并对其回收率、线性范围、最低检查限度、重复性进行实验。[结果]同型半胱氨酸的平均回收率为92.0%-96.5%,在2-160μmol/L内成线性,最低检查限度为0.5μmol/L批内与批问平均变异系数分别低于3.7%和4.7%。[结论]该法具有较新、简便、快速和直接的特点,适用于临床检测。 相似文献
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高效液相色谱荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸 总被引:1,自引:0,他引:1
[目的]建立使用高效液相色谱、等度洗脱、荧光检测法测定血浆同型半胱氨酸的方法。[方法]血浆同型半胱氨酸经Tris(2-Carboxyethyl)phosphate(17CEP)还原后,与7-Fluoro-benzo-2-oxa-1.3-diazole-4-sulohonate(SBD-F)衍生化,以胱氨为内标,C18反相色谱柱分离、等度洗脱,荧光检测器测定,以峰面积比进行定量。[结果]线性范围可达100μmol/L,最低检测限0.3μmol/L,批内不精密度1.2%-2.4%,批间不精密度1.4%-2.5%,平均回收率96.3-103%。[结论]本方法洗脱条件简单,准确性、特异性好,适用于临床实验室测定血浆同型半胱氨酸的含量。 相似文献
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高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸 总被引:21,自引:1,他引:21
目的 建立测定血浆同型半胱氨酸的高效液相色谱(HPLC)方法。方法 血浆同型半胱氨酸经巯基乙醇还原后用碘乙酸封闭巯基,。再与邻苯二甲醛(OPA)反应完成衍生化,以磺在同型半胱氨酸为内标,经C18反相柱进行色谱分离,荧光检测器测定结果。结果测定线性范围达150μmol/L,最低检测限为1.0μmol/L日内不精密度3.7-4.2%,日间不精密度3.8-4.3%;方法回收率93-102%。结论本方法 相似文献
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目的 评价以5-氟尿嘧啶(5-FU)作内标的反相高效液相色谱(HPLC)测定血清尿酸(UA)的方法 ,拟初步推荐其作为血清UA测定的候选参考方法 ;并应用此方法 评价常规酶比色法测定血清UA的结果 偏倚.方法 对测定血清UA的反相HPLC内标法进行方法 学评价;通过测定有证参考物质(SRM)、参加国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)参考实验室考察活动,验证此方法 的准确性及可靠性.以反相HPLC内标法为比较方法 ,以6种常用检测系统中的酶比色法作为实验方法 ,对61份血清样本进行测定.组成6个比对组,对每组比对数据作散点图、偏倚图,计算线性方程和相关系数(R2),进行偏倚评估.结果 反相HPLC内标法测定UA线性范围达1 190 μmol/L,批内变异系数(CV)<2.1%,日间CV<3.9%,绝对回收率为96.2%~101.0%,平均相对回收率为95.1%~99.4%.测定SRM的平均相对偏倚为-8.29%;测定IFCC参考实验室考察活动提供的样本,其结果 与同位素稀释质谱(ID-MS)法的相对偏倚范围为-3.45%~-1.26%;在Beckman、Roche、Dade、Vitros封闭系统及Beckman、Roche开放系统中的酶比色法分别与反相HPLC内标法比较,各组中2种方法 均相关良好(R2=0.996 9、0.997 2、0.995 2、0.996 7、0.997 3、0.994 7),在UA为120、470L、630 μmol/L时,预期相对偏倚范围分别为-14.6%~4.3%、-0.4%~8.0%、0.8%~8.8%,其中Beckman封闭系统测定结果 与反相HPLC内标法的一致性好,Roche封闭系统低值偏低,Dade和Vitros封闭系统高值偏高,封闭系统比开放系统结果 略好.结论 拟推荐以5-FU为内标的反相HPLC法作为血清UA测定的候选参考方法 .酶比色法在不同检测系统中所测结果 存在一些差异. 相似文献
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目的评价以5-氟尿嘧啶(5-FU)作内标的反相高效液相色谱(HPLC)测定血清尿酸(UA)的方法,拟初步推荐其作为血清UA测定的候选参考方法;并应用此方法评价常规酶比色法测定血清UA的结果偏倚。方法对测定血清UA的反相HPLC内标法进行方法学评价;通过测定有证参考物质(SRM)、参加国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)参考实验室考察活动,验证此方法的准确性及可靠性。以反相HPLC内标法为比较方法,以6种常用检测系统中的酶比色法作为实验方法,对61份血清样本进行测定。组成6个比对组,对每组比对数据作散点图、偏倚图,计算线性方程和相关系数(R2),进行偏倚评估。结果反相HPLC内标法测定UA线性范围达1190μmol/L,批内变异系数(CV)<2.1%,日间CV<3.9%,绝对回收率为96.2%~101.0%,平均相对回收率为95.1%~99.4%。测定SRM的平均相对偏倚为-8.29%;测定IFCC参考实验室考察活动提供的样本,其结果与同位素稀释质谱(ID-MS)法的相对偏倚范围为-3.45%~-1.26%;在Beckman、Roche、Dade、Vitros封闭系统及Beckman、Roche开放系统中的... 相似文献
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心血管疾病包括冠心病和中风是导致美国人死亡的主要病因。血浆高半胱氨酸 (Hcy)升高 ,特别当血浆Hcy水平 >15μmol/L时 ,一般明确表示是心血管疾病的一种单独危险性因素。目前还不知道Hcy是否是动脉粥样硬化的原因或标记物。新近美国心脏病协会营养委员会报告书的结论是目前还不推荐广泛群众性的Hcy筛检工作 ,直到获得临床试验的结果为止。然而 ,有关实验室内试验方法等的变化得出的资料对在临床上使用Hcy试验所起的作用是有限的。CDC于 1998年 7~ 9月进行了若干实验室的研究来评价实验室之间和在实验室内变化的H… 相似文献
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血浆高半胱氨酸检测及其临床意义 总被引:1,自引:0,他引:1
血浆总高半胱氨酸(homocysteine,简称HCY)是指血浆中所有形式的HCY,包括游离的和结合的HCY。本文比较和评价了几种测定总血浆HCY的方法,并阐述了测定HCY的临床意义。总血浆HCY正常参考范围为5~15μmol/L,维生素B12和叶酸缺乏的病人,总血浆HCY明显升高,并且总血浆HCY也是早期心血管疾病的一个独立的危险因子。检测总血浆HCY对于诊断维生素B12、叶酸缺乏症和心血管疾病均有重要意义。 相似文献
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高效液相色谱法测定血浆中同型半胱氨酸 总被引:3,自引:0,他引:3
目的 高同型半胱氨酸血症是周围血、脑、冠状血管阻塞性病变的独立危险因素,同型半胱氨酸测定对预测心血管病具有重要意义。方法 用高效液相色谱法(HPLC)测定血浆中同型半胱氨酸。结果 该法线性范围为0-40μmol/L,相关系数r=0.998(Y=0.02 0.006X),批内变异系数为4.7%,批间变异系数为6.4%。正常值为5.98-15μmol/L。结论 方法简单、灵敏、准确、精密度较高,无干扰峰影响,是一种理想的测定方法。 相似文献
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血浆高半胱氨酸检测及其临床意义 总被引:3,自引:0,他引:3
杨沛 《国外医学:临床生物化学与检验学分册》1996,17(6):256-259
血浆总高半胱氨酸是指血浆中所有形式的HCY,包括游离的和结合的HCY。本文比较和评价了几种测定总血浆HCY的方法,并阐述了测定HCY的临床意义。 相似文献
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目的建立柱前衍生化反相高效液相色谱-荧光检测法测定血浆中同型半胱氨酸(Hcy)浓度的方法。方法以tris-(2-carboxylethyl)-phosphine hydrochloride(TCEP)为还原剂,以7-fluorbenzo-2-oxa-1,3-diazole-4-sulfonate(SBD-F)为衍生剂,色谱柱为Xterra RP18柱,柱温35℃,流动相为甲醇︰磷酸二氢钠缓冲液(pH值3.0)=3︰97,激发波长380 nm,发射波长510 nm,外标法定量。结果 Hcy浓度在1.95~125μmol/L范围内线性关系良好(r=0.999 8)。日内和日间相对标准偏差均<7%,方法回收率为103.2%~111.9%。结论此方法准确、灵敏、快速,是一种适合于实验室研究和临床检测血浆中Hcy浓度的方法。 相似文献
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同型半胱氨酸 (HCY)是一种含硫氨基酸 ,是蛋氨酸和半胱氨酸代谢的重要产物。作者应用IMX自动荧光偏振免疫分析仪及试剂盒测定了 1 92例正常人和 5 5例冠心病病人 ,对实验方法和结果分析评价如下。1 临床资料1 .1 研究对象1 .1 .1 冠心病组 本院经临床及冠状动脉造影确诊的冠心病病人 5 5例 ;男 31例 ,女 2 4例 ,平均年龄6 4(5 5~ 81 )岁。1 .1 .2 对照组 来自 7个体检单位的受检者 1 92名 ,其中男 1 0 7名、女 85名 ,平均男性年龄 4 9(2 7~71 )岁 ,女性 4 7(31~ 6 9)岁 ,均为身体健康、体检各项指标正常 ,排出各种急、慢性疾病… 相似文献
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高效液相色谱直接衍生化法测定血清游离脂肪酸组成 总被引:1,自引:0,他引:1
目的脂肪酸摄入和代谢在高血压的发病和进展中发挥作用,但血清游离脂肪酸(FFA)组成测定方法尚未统一,本研究探讨高效液相色谱直接衍生化法测定空腹血清游离脂肪酸组成的可靠性。方法社区筛选出原发性高血压患者103例,其中肥胖患者65例,非肥胖患者38例,和血压正常个体128例,其中肥胖个体70例,非肥胖者58例,年龄35~59岁,各组饮食习惯相近。采空腹静脉血离心取上清分成两个1.5ml,用75%的乙醇60℃下除去血清中与FFA结合的白蛋白,无需常规的分离步骤,应用2-硝基苯肼盐酸盐(2-NPH·HCI)作为衍生试剂,在1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基碳化二亚胺)盐酸盐(1-EDC·HCI)的催化下,直接衍生血清中的FFA,形成不挥发的能在紫外-可见光区产生吸收的脂肪酸的肼盐衍生化物,再用磷酸缓冲液酸化增加各种脂肪酸的分离度,衍生化的脂肪酸用正己烷萃取法与其它的酰肼和干扰成分分离出来,氮气吹干后甲醇定容,应用C18反向色谱柱进样30min内洗脱分析测定。结果共测定血清中主要的9种脂肪酸,从C16:0到C22:6,未鉴定的峰少于总量的1%。脂肪酸组成以个体脂肪酸浓度表示,浓度单位μmol/L。应用C17:0作内标,各脂肪酸测定的线性范围为2.6~200.0μmol/L,回收率在87.8%~120.5%之间,重复性检验变异系数〈10%,相关系数为0.973~0.999,批内RSD范围为2.78%~12.90%,批间RSD范围为为0.95%~15.4%。与血压正常个体比较,原发性高血压患者血清游离多不饱和脂肪酸(PUFA)水平降低(P=0.004),饱和脂肪酸(SFA)水平有增高趋势(P=0.06),P/S比值降低(P=0.000)。结论高效液相色谱直接衍生化法测定空腹血清FFA组成重复性、准确性良好,可作为血清游离脂肪酸组成常规检测的有用的工具。 相似文献
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高效液相色谱法测定血浆肝素含量 总被引:23,自引:0,他引:23
为探讨高效液相色谱(HPLC)法直接测定血浆游离肝素含量的可行性及其意义,用HPLC分离血浆普通肝素(unfractionatedheparin)钠,肝素钙以及低分子量肝素(LMWH),探讨HPLC法所选色谱方法为C-18反相柱分离,流动相为甲醇与醋酸铵,外标法定量,紫外肖吸收波长为215nm,回收率为90.4%~96.8%,血浆肝素含量在100~6500U/L之间呈良好线性关系,最低检测限为30 相似文献
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目的:建立测定人血浆中头孢地尼含量的高效液相色谱(HPLC)方法。方法:血浆样品用高氯酸沉淀蛋白,采用Ulti-mate C18色谱柱(5μm,2 504.6mm),以乙腈:0.025mol.L-1磷酸二氢钠缓冲盐溶液(pH3.24)=15∶85作为流动相进行分离,检测波长为286nm,流速为1.0mL.min-1。结果:头孢地尼血药浓度30~2 500ng.mL-1范围内线性关系良好,最低检测浓度为30ng.mL-1。方法回收率(n=5)分别为76.41%,63.78%,66.44%,日内和日间精密度均小于15%。结论:该法操作简单、灵敏、准确、重现性好,适用于头孢地尼临床药代动力学研究。 相似文献
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高效液相色谱快速测定尿假尿苷 总被引:1,自引:0,他引:1
介绍一种不用苯硼酸亲和柱的高效液相色谱法快速测定尿假尿甙。本法只需简单的标本预处理,使用PH3.3磷酸盐缓冲液动相和268nm检测,每个标本测定只需12分钟,批内和批间变异分别为3.27%和4.86%,线性范围超过1700μmol/L,常见的10种抗肿瘤药物不干扰测定。 相似文献
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高效液相色谱检测胆红素及其临床应用 总被引:1,自引:0,他引:1
由于常规的血清胆红素检测方法不能灵敏,准确的测定结合胆红素。笔者参考国外文献采用国产填料和试剂建立了敏感和特异的高效液相色谱胆红素测定法,结果表明本法可对血清胆红素作出较为灵敏和准确的测定,未结合胆红素批内和批间变异系数(V)值分别为9.8%~10.9%和7.3%~12.7%,结合胆红素批内和批弹CV值分别为2.5%~9.2%和9.7%~11.0%;未结合和结合胆红素的最低检出浓度分别为0.05μ 相似文献
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