斯氏按蚊血淋巴酚氧化酶与约氏疟原虫卵囊黑化的关系

[目的 ]探讨酚氧化酶 (phenoloxidase,PO)与疟原虫卵囊黑化的关系。 [方法 ]以斯氏按蚊 /约氏疟原虫为模型 ,对 4组斯氏按蚊 (不吸血组、吸正常血组、吸感染血组和硝喹组 )血淋巴进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)和凝胶图像分析 ,检测单酚氧化酶 (monophenoloxidase ,MPO)和二酚氧化酶 (diphenoloxidase,DPO)活性。 [结果 ]吸正常血组和不吸血组蚊血淋巴中MPO及o DPO活性无明显差异 ;与吸正常血组或不吸血组相比 ,感染组MPO及o DPO活性无明显变化 ,但用药组d1 0 则显著增加 ,d1 5 显著降低。 [结论 ]斯氏按蚊血淋巴中PO活性变化与约氏疟原虫卵囊黑化在时间上一致。     

感染约氏疟原虫的斯氏按蚊组织化学观察

目的观察蚊媒感染疟原虫后的组织化学变化.方法应用组织化学技术观察对照组和感染约氏疟原虫的斯氏按蚊体内乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、三磷酸腺苷酶(Mg2+-ATPase)活性反应与含量以及糖原含量的变化.结果与对照组相比,感染约氏疟原虫后,蚊体内LDH活性与含量显著增加,SDH和Mg2+-ATPase活性与含量及糖原含量显著降低.结论感染约氏疟原虫可明显影响蚊媒的营养代谢和吸收.     

感染约氏疟原虫的斯氏按蚊组织化学观察

目的 观察蚊媒感染疟原虫后的组织化学变化。方法 应用组织化学技术观察对照组和感染约氏疟原虫的斯氏按蚊体内乳酸脱氢酶（LDH）、珀酸脱氢酶（SDH）、三磷酸腺苷酸（Mg^2 -ATPase)活性反应与含量以及糖原含量的变化。结果 与对照组相比,感染约氏疟原虫后,蚊体内LDH活性与含量显著增加,SDH和Mg^2 -ATPase活性与含量及糖原含量显著降低。结论 感染约氏疟原虫可明显影响蚊媒的营养代谢和吸收。     

诺氏疟原虫子孢子不能侵入菲氏按蚊唾腺

灵长类疟原虫只能在按蚊属蚊虫体内完成孢子增殖,但不是每种疟原虫都能在各种按蚊体内发育。大多数灵长类疟原虫能在菲氏按蚊(A. freeborni)体内完成孢子增殖,而诺氏疟原虫却是例外,这种疟原虫可以在菲氏按蚊的胃壁发育成大量的卵囊,但子孢子不能侵入唾腺。为了观察这种疟原虫在菲氏按蚊体内的命运,作者进行了以下试验。用含大约10~5个诺氏疟原虫H株裂殖体的感染血,静脉接种给健康的罗猴。当原虫血症达到5％～10％红细胞感染时,用羽化     

斯氏按蚊血细胞对约氏疟原虫卵囊黑化的影响

目的　探讨斯氏按蚊血细胞及血细胞PPO对疟原虫卵囊黑化的影响。方法　利用电镜观察蚊血细胞在卵囊黑化中的作用、RT -PCR检测蚊血细胞、蚊胃中PPOmRNA的表达、原位杂交检测血细胞中PPOmRNA的表达。结果　通过RT -PCR和原位杂交 ,发现斯氏按蚊PPOmRNA在血细胞中有表达 ,颗粒细胞可能是其主要的表达细胞 ;硝喹可使约氏疟原虫卵囊发生退行性变 ,卵囊黑化比率明显增加。结论　说明血细胞能够合成PPO ,进一步证实了蚊血细胞 ,特别是硝喹对卵囊的发育有抑制和阻断作用时 ,颗粒细胞在疟原虫卵囊黑化中起重要作用。     

在斯氏按蚊唾液中检测恶性疟原虫和伯氏疟原虫子孢子和环子孢子蛋白

唾液是疟原虫子孢子从蚊体进入宿主的载体。由唾液排出的子孢子量可能与唾液总     

大劣按蚊和斯氏按蚊对约氏疟原虫不同易感性的遗传多态性研究

目的 比较分析对约氏疟原虫易感的斯氏按蚊和不易感的大劣按蚊的基因组DNA的多态性，探讨媒介按蚊与疟原虫遗传基因间的相互关系。方法 设计5条随机引物，应用随机扩增多态性DNA（random amplified polymorphic DNA，RAPD）技术对斯氏按蚊、大劣按蚊成蚊（未感染蚊和感染蚊）及其幼虫的基因组DNA进行随机扩增，扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后分析。结果 5条随机引物对2种按蚊扩增的条带数不同，其中P5对斯氏按蚊扩增的效果较好，共16～17条带型，长度为200～1800bp；P4对大劣按蚊扩增效果较好，出现17条带型，长度为180～1500bp；P1对大劣按蚊无扩增产物。用P3对2种按蚊扩增，感染前后的扩增产物电泳条带数相同，但亮度不同；成蚊与幼虫带型数量不同，斯氏按蚊成虫与幼虫有3条相同带型（400、650、850bp），大劣按蚊成虫与幼虫有4条相同带型（350、500、750、800bp）；大劣和斯氏按蚊成蚊带型分别为10和13条，其中相同带型6条（300、350、400、550、600、800bp）。结论 斯氏按蚊和大劣按蚊之间存在基因差异。同种未感染蚊和感染蚊基因带型仅存在亮度差异，而幼虫与成虫的基因差异较大。     

对氨苯甲酸对斯氏按蚊传播约氏疟原虫及伯氏疟原虫的影响

本文报道对氯苯甲酸(PABA)对疟原虫在蚊虫体内的发育及其传播的影响。实验用约氏疟原虫17x株和伯氏疟原虫NK65株,以雄性小鼠为宿主。小鼠在室温为22±2℃、相对湿度为50%的环境中饲养。媒介为斯氏按蚊,饲养于温度为24±2℃、相对湿度为75±10%的恒温室内。实验时使用6天龄的雌蚊,在吸血感染前24小时断食。供血鼠用60mg/kg的戊巴比妥进行麻醉。用血传后第4天的感染鼠给蚊虫吸吮1小时。为了观     

2.约氏疟原虫约氏亚种在斯氏按蚊体内的发育及三种按蚊敏感性的观察

作者于1980年冬至1981年春,通过20批斯氏按蚊的感染实验,解剖了千余只蚊虫,观察了约氏疟原虫约氏亚种在蚊体内的发育规律及各期形态特征。此外,用阳性供血鼠同时感染斯氏按蚊、中华按蚊和大劣按蚊,比较三种按蚊的敏感性。     

感染约氏疟原虫的斯氏按蚊可溶性蛋白含量及酯酶...

In this paper, the system of Anopheles stephensi and Plasmodium yoelii yoelii was used as animal model. The soluble protein and esterase isozymes of adult female mosquitoes at various times after taking noninfected and plasmodia-infected blood meal were investigated. The result shows that the amount of soluble protein in plasmodia-infected mosquitoes was lower than that in noninfected ones (P less than 0.01); the activity and electrophoretic patterns of EST in infected mosquitoes being also different from those of the noninfected ones.     

斯氏按蚊感染约氏鼠疟原虫后自然飞行活动的变化

作者用声学运动记录仪对 BEECH 株斯氏按蚊感染约氏鼠疟原虫后未加任何人工干预的自然飞行活动进行了17天的监测。结果,感染蚊虫从卵囊发育成熟开始破裂时起,活动量明显降低,约为对照组的2/3。斯氏按蚊羽化     

大劣按蚊感染约氏疟原虫血淋巴相关蛋白的筛选和鉴定

目的 筛选并鉴定大劣按蚊感染约氏疟原虫后血淋巴的相关蛋白．为进一步的功能研究和蚊先天性免疫研究奠定基础。方法 以大劣按蚊一约氏疟原虫为实验模型，利用二维电泳技术分离和比较饱吸约氏疟原虫感染的鼠血和正常鼠血后24h的大劣按蚊血淋巴蛋白，获得差异蛋白．并对差异蛋白进行N端氨基酸测序和生物信息学分析,从而推测差异蛋白的功能。结果 获得清晰二维电泳图，并筛选获得37个差异蛋白点。对其中比较明显的差异蛋白1进行氨基酸测序后发现，该蛋白可能为一翻译延伸因子。结论 成功分离和筛选获得了大劣按蚊感染约氏疟原虫血淋巴相关蛋白。并进行了初步鉴定。     

硝喹对斯氏按蚊体内不同时期约氏疟原虫发育的影响

目的　观察硝喹对斯氏按蚊体内不同时期约氏疟原虫发育的影响。方法　在感染约氏疟原虫1 d前给予常规蔗糖水或硝喹蔗糖水（含100 μmol/L硝喹）供斯氏按蚊吸食,停糖水24 h后用感染约氏疟原虫的昆明鼠血餐,观察硝喹处理后约氏疟原虫在蚊胃内的卵囊数量变化。感染6、14 d后停常规蔗糖水24 h,随后给予常规蔗糖水或硝喹蔗糖水供斯氏按蚊吸食,观察斯氏按蚊血淋巴及唾液腺中的约氏疟原虫子孢子数量变化。结果　感染前1 d将斯氏按蚊暴露于硝喹蔗糖水后,感染第7天蚊胃中约氏疟原虫卵囊数量[（119.2 ± 16.1）只]较常规蔗糖水组[（207.3 ± 21.8）只]显著降低（t = 3.207,P < 0.05）。感染第6天停常规蔗糖水24 h,将斯氏按蚊暴露于硝喹蔗糖水后,按蚊血淋巴中约氏疟原虫子孢子数量峰值[（952.3 ± 22.7）只]在感染第14天出现,常规蔗糖水组按蚊血淋巴中子孢子数量峰值[（1 287.0 ± 39.0）只]在感染第12天出现;感染第17天,硝喹蔗糖水和常规蔗糖水组按蚊唾液腺中子孢子数量分别为（9 467.0 ± 1 304.0）只和（10 533.0 ± 758.7）只,差异无统计学意义（t = 0.707,P = 0.506）。感染第14天停常规蔗糖水24 h,将斯氏按蚊暴露于硝喹蔗糖水后,按蚊唾液腺中约氏疟原虫子孢子数量[（21 900.0 ± 2 613.0）只]较常规蔗糖水处理组[（10 533.0 ± 732.3）只]显著增加（t = 4.188,P < 0.05）。结论　在斯氏按蚊感染疟原虫不同时期给予硝喹处理对其体内约氏疟原虫发育影响不一,未感染斯氏按蚊经硝喹处理后可减少疟原虫传播。     

对氨基苯甲酸对斯氏按蚊传播约氏鼠疟原虫和伯氏鼠疟原虫的影响

作者实验室中的几种鼠疟原虫均以斯氏按蚊来进行生活史循环,但经常发现斯氏按??蚊的手孢子阳性率不稳定。作者通过研究证明,对氨基苯甲酸(PABA)是影响疟原虫在蚊体内孢子增殖的重要因素。作者用约氏鼠疟原虫17X株和伯氏鼠疟原虫NK65株和无球状附红细胞体感染的小鼠(Tucks TFW)在22±2℃、相对湿度     

抗蚊中肠抗体对斯氏按蚊体内约氏疟原虫卵囊发育的影响

[目的 ]研究抗斯氏按蚊中肠抗体对约氏疟原虫蚊期的抑制作用。 [方法 ]在感染血中加入抗蚊中肠抗体 ,羊膜饲蚊 ,在蚊虫血餐后 14h、9和 12d ,分别检查蚊虫中肠动合子、卵囊及唾液腺中子孢子 ;并观察抗体浓度和蚊虫血餐抗体次数对卵囊的抑制作用。 [结果 ]抗蚊中肠抗体可降低蚊体内卵囊的感染率和子孢子的进腺率 ,尚可降低动合子的感染度和卵囊指数 (P <0 0 5 ) :且抗体浓度越高、蚊虫血餐抗体次数越多 ,卵囊数量越少。 [结论 ]抗蚊中肠抗体对疟原虫的动合子、卵囊发育有抑制作用 ,但对卵囊的抑制作用最明显 ,抗体的浓度高和维持时间长 ,抑制作用越明显。     

感染约氏疟原虫的斯氏按蚊可溶性蛋白含量及酯酶同工酶的分析研究

以约氏疟原虫—斯氏按蚊系统为模型,对感染疟原虫后不同时期蚊媒的可溶性蛋白和酯酶同工酶进行了初步研究。结果表明,在所观察的大多数时期,每只蚊的平均可溶性蛋白含量低于同期对照蚊(P<0.01);感染疟原虫后,酯酶同工酶谱发生改变,同时酶活力亦存在差异(P<0.05)。     

伯氏鼠疟原虫子孢子通过斯氏按蚊涎腺的途径的电子显微镜研究

子孢子侵入蚊虫涎腺是疟原虫生活史中的一个实质部分,子孢子完成侵入的程度决定着能否使适当的脊椎动物宿主发生疟疾感染。本文作者用电子显微镜研究了伯氏鼠疟     

革兰氏阴性细菌抑制斯氏按蚊体内恶性疟原虫子孢子发育

为了发展新的控制疟疾方法,观察了四种革兰氏阴性细菌(大肠杆菌H243株和HB101株、绿脓杆菌、Ewingella americana)和两种革兰氏阳性细菌(金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌)对斯氏按蚊体内恶性疟原虫子孢子发育的抑制作用。上述试验的菌种中E.americana是作者从实验室饲养蚊虫中分离,其余五种细菌由美国标准培养收集所提供。     

斯氏按蚊PPO1基因克隆及其与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

目的克隆和分析斯氏按蚊前酚氧化酶基因与约氏疟原虫卵囊黑化关系。方法根据其他昆虫前酚氧化酶基因的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊RNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm-T载体,测定插入片段序列,对序列进行BLAST检索和鉴定。根据序列设计相应基因的特异引物,然后分别从血淋巴细胞或中肠扩增目的基因,并进行不同食源条件下前酚氧化酶基因的半定量、原位核酸分子杂交定位及与约氏疟原虫卵囊黑化关系的分析。结果获得了1种斯氏按蚊血淋巴前酚氧化酶基因cDNA部分序列,即AsPPO1(600bp),分别与冈比亚按蚊PPO1和大劣按蚊PPO2基因很相似,其编码的氨基酸序列均包含PO保守的铜结合位点CuA(HHWHWHLVYP)序列。在中肠和血淋巴内也获得相同的目的基因片段,半定量分析显示约氏疟原虫感染或诱导卵囊黑化呈现之前的表达明显增强,原位核酸分子杂交技术也进一步证实血淋巴有AsPPO1mRNA表达。结论As-PPO1很可能与疟原虫感染或约氏疟原虫卵囊黑化相关。     

斯氏按蚊PPO1基因克隆及其与约氏疟原虫卵囊黑化关系的研究

目的克隆和分析斯氏按蚊前酚氧化酶基因与约氏疟原虫卵囊黑化关系. 方法 根据其他昆虫前酚氧化酶基因的保守氨基酸序列设计简并引物,以斯氏按蚊全蚊RNA为模板,进行RT-PCR扩增,PCR产物纯化,克隆入pUCm-T载体,测定插入片段序列,对序列进行BLAST检索和鉴定.根据序列设计相应基因的特异引物,然后分别从血淋巴细胞或中肠扩增目的基因,并进行不同食源条件下前酚氧化酶基因的半定量、原位核酸分子杂交定位及与约氏疟原虫卵囊黑化关系的分析. 结果 获得了1种斯氏按蚊血淋巴前酚氧化酶基因cDNA部分序列,即AsPPO1（600 bp）,分别与冈比亚按蚊PPO1和大劣按蚊PPO2基因很相似,其编码的氨基酸序列均包含PO保守的铜结合位点CuA（HHWHWHLVYP）序列.在中肠和血淋巴内也获得相同的目的基因片段,半定量分析显示约氏疟原虫感染或诱导卵囊黑化呈现之前的表达明显增强,原位核酸分子杂交技术也进一步证实血淋巴有AsPPO1 mRNA表达. 结论 AsPPO1很可能与疟原虫感染或约氏疟原虫卵囊黑化相关.