糖皮质激素对细菌性乳腺炎免疫调节及氧化应激的逆转作用

目的利用金黄色葡萄球菌感染致产后小鼠实验性乳腺炎,探讨糖皮质激素对乳腺炎模型小鼠免疫调节及氧化应激的逆转作用。方法采用金黄色葡萄球菌乳头管灌注法制备乳腺炎模型小鼠,腹腔注射不同剂量糖皮质激素,观察小鼠健康状况、乳腺组织病理变化,测定体温、体质量、炎症细胞分类计数、菌落数,测定白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、白介素-17A(Interleukin-17A,IL-17A)、转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1,TGF-β1)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白表达水平及氧化应激指标水平。结果模型组、治疗组小鼠体温、体质量与对照组存在统计学差异(P0.05);随着治疗剂量的增加,各种炎症细胞的数目呈下降趋势;对照组小鼠的乳腺组织结构完整,无异常病理变化,无炎症细胞浸润;模型组、治疗组小鼠乳腺组织出现不同程度病变,模型组乳腺组织被大量炎性细胞浸染;治疗组病变程度减轻;模型组与治疗组小鼠左右乳腺指数与对照组存在统计学差异(P0.05);模型组、治疗组的蛋白表达水平(IL-1β、IL-17A、TGF-β1、TNF-α)、氧化应激指标水平差异显著,模型组表达水平最高,高剂量治疗组最低。结论糖皮质激素可调节细菌性乳腺炎小鼠免疫水平,对氧化应激水平具有调节逆转作用,随治疗剂量增多,免疫相关蛋白及氧化应激指标逐渐趋于正常水平。     

EB病毒感染紫癜性肾炎儿童Treg/Th17平衡与肾损伤程度的关系

目的 探究EB病毒感染紫癜性肾炎(HSPN)儿童调节性T细胞/辅助性T17细胞(Treg/Th17)平衡与肾损伤程度的关系。方法 以2018年3月-2021年4月中国医科大学附属盛京医院收治的150例EB病毒感染HSPN患儿为感染组,并以同期非EB病毒感染的HSPN患儿72例为对照组,分析外周血Treg、Th17细胞比例及相关细胞因子[白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子β1(TGF-β1)]水平对EB病毒感染的诊断价值分析及对肾小管、肾小球损伤程度的评估价值。结果 感染组Treg细胞、Treg/Th17细胞比例及TGF-β1水平低于对照组,Th17细胞比例及IL-17水平高于对照组(P<0.05);外周血Treg细胞、Treg/Th17比例及TGF-β1水平随肾小管间质病理分级的升高呈降低趋势,Th17细胞及IL-17水平随肾小管间质病理分级的升高呈升高趋势(P<0.05);各指标联合检测评估肾小管损伤程度的AUC大于IL-17、TGF-β1水平单独检测(P<0.05);外周血Treg细胞、Treg/Th17比例及TGF-β1水平随肾小球病理分级的升高呈降低...     

老年糖尿病患者口腔颌面部感染病原菌特点及Th17/Treg细胞免疫变化

目的探讨老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染(oral and maxillofacial space infection,OMSI)病原学特点及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞免疫的变化。方法选择三亚市人民医院老年科2017年1月-2019年3月收治的老年糖尿病患者142例作为研究对象,根据患者是否发生OMSI分为感染组82例及非感染组60例。分析感染患者病原菌分布及耐药性,分别采用流式细胞术及酶联免疫吸附法检测两组患者外周血中Th17/Treg及白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)、干扰素-γ(IFN-γ)和转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果感染患者临床标本共检出病原菌87株,其中革兰阳性菌57株,占65.52%,革兰阴性菌30株,占34.48%;检出的主要革兰阳性菌对头孢曲松、头孢噻肟、头孢唑林和氨苄西林耐药率较高;检出的主要革兰阴性菌对左氧氟沙星、环丙沙星、庆大霉素耐药率较高;感染组Th17(17.52±2.18)%、Th17/Treg(3.01±0.24)、IL-17(65.67±18.24)pg/ml、IL-23(42.08±11.39)pg/ml均高于对照组(均P<0.05),Treg(5.83±1.06)%、IFN-γ(18.89±5.22)pg/ml、TGF-β水平(23.24±6.01)pg/ml均低于对照组(P<0.05)。结论老年糖尿病患者口腔颌面部间隙感染病原菌以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血链球菌、普雷沃氏菌和肺炎克雷伯菌检出率较高,可根据耐药性选用合理抗菌药物,感染患者Th17/Treg失衡,Th17细胞及促炎细胞因子表达升高,Treg细胞及抑炎细胞因子表达降低。     

大肠埃希菌感染大鼠急性肾盂肾炎MMP-2与MMP-9及TGF-β1水平

目的利用大肠埃希菌感染致大鼠肾盂肾炎,探讨肾盂肾炎模型大鼠肾脏状况及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平变化。方法采用大肠埃希菌菌液膀胱灌注法制备急性肾盂肾炎模型大鼠;将大鼠分为空白组(B)、对照组(C)、感染5天(M1)、感染10天(M2)、感染15天(M3)5个试验组,分别于试验结束时观察各试验组大鼠健康状况、肾脏组织学指标,并测定各试验组大鼠体质量、双肾重量、膀胱液和肾脏菌落数、炎症细胞数量,测定MMP-2、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平,及MMP-2、MMP-9、TGF-β1 mRNA水平。结果 M1、M2、M3试验组的模型大鼠健康状况和肾脏组织学指标均低于B、C试验组大鼠,M1、M2、M3试验组大鼠活跃度降低,食欲不振,抓捕时反抗较无力,肾脏表面苍白且出现瘢痕,纵切面皮髓分界线模糊,肾盂肾盏变形,肾盂黏膜有炎症细胞浸润;模型组大鼠体质量、细菌菌落数、炎症细胞数目与B、C组大鼠存在显著差异(P0.05),且随着感染天数增多,细菌菌落数与炎症细胞数目呈增长趋势;M1、M2、M3试验组大鼠肾脏MMP-2、MMP-9、TGF-β1蛋白表达水平,及MMP-2、MMP-9、TGF-β1 mRNA水平均高于B、C组,差异有统计学意义(P0.05)。结论研究大肠埃希菌感染致急性肾盂肾炎模型大鼠的肾脏状况及MMP-2、MMP-9、TGF-β1水平随感染天数增加的变化情况,为急性肾盂肾炎治疗方案的提升提供参考。     

病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞和调节性T细胞的变化研究北大核心CSCD

目的探讨病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞和调节性T细胞(Treg细胞)的变化情况。方法选择医院2014年1月-2016年12月病毒性心肌炎患者80例,将其分为急性期组43例、恢复期组18例和迁延及慢性期组19例,选择健康体检者80例为对照组。采用流式细胞术测定外周血Th17细胞和Treg细胞水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)、转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期Th17/CD_4^+T、Treg/CD_4^+T、Th17/Treg均高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期Th17/CD_4^+T、Treg/CD_4^+T、Th17/Treg均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组Th17/CD_4^+T、Treg/CD_4^+T、Th17/Treg比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21均高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期TGF-β高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期TGF-β均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组TGF-β比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎患者Th17细胞和Treg细胞呈负相关(P<0.05)。结论病毒性心肌炎急性期、迁延及慢性期患者存在外周血Th17细胞和Treg细胞失衡,以迁延和慢性期最为显著。     

病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞和调节性T细胞的变化研究

目的探讨病毒性心肌炎患者外周血中Th17细胞和调节性T细胞(Treg细胞)的变化情况。方法选择医院2014年1月-2016年12月病毒性心肌炎患者80例,将其分为急性期组43例、恢复期组18例和迁延及慢性期组19例,选择健康体检者80例为对照组。采用流式细胞术测定外周血Th17细胞和Treg细胞水平,酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-21(IL-21)、转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期Th17/CD_4~+T、Treg/CD_4~+T、Th17/Treg均高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期Th17/CD_4~+T、Treg/CD_4~+T、Th17/Treg均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组Th17/CD_4~+T、Treg/CD_4~+T、Th17/Treg比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21均高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组IL-1β、IL-6、IL-17、IL-21比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎急性期和迁延及慢性期TGF-β高于病毒性心肌炎恢复期和对照组(P<0.05);病毒性心肌炎迁延及慢性期TGF-β均高于病毒性心肌炎急性期(P<0.05);病毒性心肌炎恢复期和对照组TGF-β比较差异无统计学意义;病毒性心肌炎患者Th17细胞和Treg细胞呈负相关(P<0.05)。结论病毒性心肌炎急性期、迁延及慢性期患者存在外周血Th17细胞和Treg细胞失衡,以迁延和慢性期最为显著。     

急性哮喘并发肺部感染危险因素及STAT3和STAT5表达

目的 探究急性哮喘患儿并发肺部感染危险因素及辅助性T细胞17(Th17)、调节性T细胞(Treg)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)mRNA、信号转导和转录激活因子5(STAT5)mRNA表达水平。方法 选取2017年3月-2019年3月武汉市第三医院收治的急性哮喘发作患儿为病例组,其中并发肺部感染85例为感染组,单纯哮喘急性发作388例为非感染组,另选取健康体检儿童60名为对照组。探究急性哮喘发作患儿肺部感染危险因素。检测各组外周血Th17、Treg、白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-17、转化生长因子β1(TGF-β1)水平及外周血单个核细胞STAT3和STAT5的相对表达量。结果 预防性使用抗菌药物次数和抗哮喘药物使用次数是哮喘患儿并发肺部感染的独立危险因素(P<0.05)。与对照组比较,病例组Th17水平和Th17/Treg比值均升高,Treg水平降低(P<0.05);与非感染组比较,感染组Th17水平和Th17/Treg比值更高,Treg水平更低(P<0.05)。与对照组比较,病例组IL-2水平下降,IL-6、IL-17和TGF-β1水平升高(P...     

强直性脊柱炎患者外周血Th1,Th17,Treg细胞含量及相关细胞因子表达水平研究

目的探讨强直性脊柱炎(AS)患者辅助型T细胞1(Th1)、Th17和调节性T细胞(Treg)含量和相关细胞因子的表达变化及意义。方法选取2016年5月—2017年5月济宁医学院附属医院收治的30例AS患者为观察组,另选取同期30名健康人群为对照组。两组均检测Th1细胞、Th17细胞及Treg细胞在外周血淋巴细胞中的百分率,外周血中白介素1β(IL-1β)、IL-2、IL-6、IL-10、IL-17、IL-23及干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)指标水平;分析上述指标与AS活动度指数(ASDAS)的相关情况及指标之间相关性。结果观察组Th17细胞百分率和血清中IL-1β、IL-6、IL-17、IL-23等水平高于对照组(P<0.05),Th1细胞与Treg细胞百分率低于对照组(P<0.05)。IL-17、IL-23与ASDAS呈显著正相关(r=0.60、0.63,P<0.01),IL-10、TGF-β与ASDAS呈显著负相关(r=-0.37、-0.39,P<0.05);IL-17与IL-23呈显著正相关(r=0.91,P<0.01)。结论 AS患者外周血淋巴细胞Th17、Treg和Th1百分率变化导致T细胞亚群比例失调,从而导致发病或病情进展,并且与AS发病机制、活动性密切相关。     

淋巴细胞主动免疫治疗对不明原因复发流产患者 Treg/Th17平衡的影响

目的：探讨淋巴细胞主动免疫治疗（LIT）对不明原因复发流产（URSA）患者的 Treg／Th17免疫平衡的影响。方法应用流式细胞学技术及 ELISA 法测量 URSA 患者 LIT 治疗前、后外周血 Treg、Th17细胞所占淋巴细胞比例和血清 IL-10、IL-17、TGF-β1水平,并对比及分析关联性。结果40例 URSA 患者 LIT 治疗后外周血CD4＋CD25＋Treg、CD4＋CD25＋CD127 low Treg 细胞所占比例高于治疗前,CD8-CD3＋IL-17A ＋Th17细胞所占比例低于治疗前,且与前两者的改变分别呈负相关（r ＝－0.724,P ＜0.01;r ＝－0.571,P ＜0.01）,Treg／Th17比例高于治疗前,差异有统计学意义。LIT 治疗后血清 IL-10、TGF-β1水平较治疗前升高,且分别与 CD4＋CD25＋Treg 细胞比例的改变呈正相关（r ＝0.654,P ＜0.01;r ＝0.658,P ＜0.01）,IL-17水平降低,且与 CD8-CD3＋IL-17A ＋ Th17细胞比例的改变呈正相关（r ＝0.693,P ＜0.01）,差异有统计学意义。结论 LIT 可能影响 URSA 患者的 Treg／Th17免疫平衡,提高 Treg 细胞亚群的数量、功能,降低 Th17细胞亚群的数量、功能,以此发挥治疗作用。     

人乳头瘤病毒感染宫颈病变患者外周血辅助性T17细胞、调节性T细胞和炎症因子的变化及临床意义

目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染宫颈病变患者外周血辅助性T17细胞(Th17)、调节性T细胞(Treg)和炎症因子的变化及临床意义。方法选取2015年8月-2017年6月在湖南省肿瘤医院接受治疗的宫颈病变患者152例为研究对象,根据宫颈病变程度分为宫颈癌组43例、宫颈上皮内瘤变组56例和慢性宫颈炎组53例,所有患者均采用聚合酶链反应(RCP)扩增和杂交分型技术行HPV检测,并根据HPV感染情况分为高危组和低危组。比较不同宫颈病变程度和不同HPV感染情况患者Treg、Th17及IL-17、TGF-β水平,分析宫颈癌患者Treg、Th17水平与临床病理特征的关系,并分析Treg、Th17与IL-17、TGF-β水平、宫颈病变和HPV危险程度的关系。结果宫颈癌组Treg、Th17及IL-17、TGF-β水平高于宫颈上皮内瘤变组和慢性宫颈炎组,宫颈上皮内瘤变组高于慢性宫颈炎组(P0. 05)。高危组Treg、Th17及IL-17、TGF-β水平显著高于低危组(P0. 05);宫颈癌患者Treg、Th17水平与FIGO分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关(P0. 05),与血管浸润无关(P0. 05); Treg、Th17与IL-17、TGF-β水平均呈正相关关系(P0. 05),Treg和Th17也与宫颈病变和HPV危险程度存在一定关联。结论 HPV感染宫颈病变患者外周血Th17、Treg、炎性因子水平随宫颈病变和HPV危险程度增加而升高,Th17、Treg与炎性因子水平呈正相关关系,且HPV高危感染者中Th17、Treg与FIGO分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移有关,提示Th17、Treg水平与宫颈病变的发生、发展密切相关。     

小檗碱对流感病毒感染小鼠免疫功能的影响

目的探究小檗碱对流感病毒感染小鼠免疫功能及炎症反应的调节作用。方法选取60只小鼠分为正常对照组、流感病毒组和小檗碱组,20只/组;除正常对照组外各组使用流感病毒滴鼻制成流感病毒小鼠模型;使用1 mg/ml小檗碱给小鼠灌胃0.4 ml/d。检测肺泡灌洗液中白细胞总数及各类白细胞数;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺组织病理改变情况;采用流式法检测辅助性T细胞(Th)1/Th2及Th17/调节性T细胞(Treg)比例;检测血清中白细胞介素(IL)-6、IL-4和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;使用蛋白质免疫印迹法检测视黄酸诱导基因蛋白-1(RIG-1)、线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)及核因子(NF)-κB蛋白表达情况。结果HE染色显示,流感病毒组肺组织炎性细胞增多、肺泡结构被破坏,小檗碱组小鼠炎性细胞数目减少。相比正常对照组,流感病毒组小鼠肺泡灌洗液中白细胞总数及各类白细胞数、Th1/Th2、Th17/Treg、IL-6、TNF-α、RIG-1蛋白、MAVS蛋白及NF-κB蛋白水平均升高,IL-4水平降低(P<0.05);相比流感病毒组,小檗碱组小鼠肺泡灌洗液中白细胞总数及各类白细胞数、Th1/Th2、Th17/Treg、IL-6、TNF-α、RIG-1蛋白、MAVS蛋白及NF-κB蛋白水平均降低,IL-4水平升高(P<0.05)。结论小檗碱可以通过影响RLH信号传导通路的活化,调节T淋巴细胞亚群比例,同时抑制炎症反应来实现抗流感病毒的作用。     

γ干扰素在小鼠生殖道沙眼衣原体感染中的作用机制

目的利用鼠衣原体感染小鼠生殖道,探讨γ干扰素(IFN-γ)在小鼠生殖道沙眼衣原体感染中的作用机制。方法通过对小鼠进行鼠衣原体阴道接种得到生殖道感染模型,观察野生型小鼠、IFN-γ基因缺陷小鼠的生存状态,测定体温、体质量、血细胞分类及计数、鼠衣原体(Cm)包涵体计数,观察生殖道组织病理损伤情况,分析外周血中T淋巴细胞亚群水平(CD3⁺、CD4⁺、CD8⁺、CD4⁺/CD8⁺),免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)及白细胞介素(IL-1β、IL-17A、IL-12)表达水平。结果小鼠被Cm感染2周后,生存状态差,无干扰基因缺陷组小鼠体温显著高于野生组和注射IFN-γ的基因缺陷组小鼠(P<0.05),体质量低于野生组和注射IFN-γ的基因缺陷组小鼠(P<0.05);无干扰基因缺陷组巨噬细胞水平低于野生组和注射IFN-γ的基因缺陷组(P<0.01);无干扰基因缺陷组Cm包涵体计数最高,野生组次之,注射IFN-γ的基因缺陷组最低(P<0.01),无干扰基因缺陷组外周血中的IL-17A、IgG、IgM水平最低,注射IFN-γ的基因缺陷组的免疫因子水平与野生组接近(P<0.05)。结论IFN-γ通过影响巨噬细胞活化水平,介导沙眼衣原体生殖道感染后的免疫应答,促进IL-1β、IL-17A分泌量﹐达到沙眼衣原体清除的目的。     

乳腺癌术后放射性肺炎合并肺部感染病原菌及Th17/Treg水平

目的探讨乳腺癌术后放射性肺炎合并肺部感染病原菌及辅助型T细胞17(Th17)和调节型T细胞(Treg)的改变分析。方法选择绍兴文理学院附属医院普外三科2017年1月-2019年12月收治的乳腺癌术后放射性肺炎合并肺部感染患者36例作为研究对象,纳入感染组。选择同期医院收治的乳腺癌术后无放射性肺炎患者30例,纳入非感染组,选择同期医院收治的良性乳腺肿瘤患者30例纳入对照组。对感染组患者病原菌进行分析。采用酶联免疫吸附法检测三组研究对象血清中白细胞介素-17(IL-17)、IL-23、干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)水平,并进行比较。结果 36例放射性肺炎合并肺部感染的乳腺癌患者共检出病原菌41株,其中革兰阴性菌23例占56.10%,革兰阳性菌16株占39.02%,真菌2株占4.88%。感染组IL-17、IL-23为(68.64±18.29)pg/ml、(89.07±23.20)pg/ml高于非感染组(48.58±14.27)pg/ml、(70.28±21.82)pg/ml及对照组,IFN-γ、TGF-β为(14.67±5.51)pg/ml、(18.37±6.40)pg/ml低于非感染组(27.24±11.21)pg/ml、(29.40±12.08)pg/ml及对照组(P均<0.001),非感染组及对照组之间IL-17、IL-23、IFN-γ、TGF-β水平差异无统计学意义。放射性肺炎0~1级12例、2级16例、3~4级8例,3~4级患者IL-17、IL-23为(83.86±16.04)pg/ml、(103.25±17.80)pg/ml高于2级患者(69.60±14.69)pg/ml、(87.68±16.20)pg/ml及0~1级患者,IFN-γ、TGF-β为(9.85±3.52)pg/ml、(11.37±2.99)pg/ml低于2级患者(14.97±5.50)pg/ml、(15.07±3.81)pg/ml及0~1级患者(P均<0.05),2级患者IL-17、IL-23水平高于0~1级患者、IFN-γ、TGF-β水平低于0~1级患者(P<0.05)。结论乳腺癌术后放射性肺炎感染病原以革兰阴性菌为主,应根据病原培养结果进行针对性用药,通过IL-17、IL-23、IFN-γ、TGF-β水平用于2级以上放射性肺炎诊断具有一定的临床价值。     

Toll样受体7激动剂对荷瘤小鼠肾癌的抑制作用及免疫机制

目的　研究Toll样受体7激动剂Imiquimod对荷瘤小鼠肾癌的抑制作用及免疫机制。方法　用Renca肾癌细胞构建BABL/c小鼠肾癌模型,实验分为control组、imiquimod组和sorafenib组。观察3组小鼠肿瘤体积及重量、抑瘤率,qPCR法检测肿瘤组织中炎性相关因子肿瘤坏死因子α（Tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素1β（Interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（Interleukin-6,IL-6）、干扰素α（Interferon-α,IFN-α）、干扰素β（Interferon-β,IFN-β）、干扰素γ（Interferon-γ,IFN-γ）及Toll样受体通路相关因子Toll样受体7（Toll-like receptor 7,TLR7）、髓样分化因子88（Myeloid differentiation primary response gene 88,MyD88）、核因子κB （Nuclear factor κB,NF-κB）mRNA表达,Western blot法检测瘤组织中TLR7、MyD88、NF-κB蛋白表达。流式细胞术检测脾脏中CD4+T、CD8+T、CD4+IFN-γ和CD8+IFN-γ细胞比例。结果　与control组比较,imiquimod组和sorafenib组小鼠的肿瘤体积及瘤体重量降低（P＜0.05）;与control组相比,imiquimod组TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-α、IFN-β、IFN-γ及TLR7、MyD88、NF-κB mRNA水平升高（P＜0.05）,而sorafenib组各因子略有上升（P＞0.05）;与control组和sorafenib组比较,imiquimod组CD4+T、CD8+T细胞比例有不同程度的升高（P＞0.05）,CD4+IFN-γ和CD8+IFN-γ细胞比例增加（P＜0.05）。结论　Toll样受体7激动剂通过活化TLR7-MyD88-NF-κB信号刺激多种炎性细胞因子分泌,并上调CD4+T、CD8+T比例及功能,对荷瘤小鼠肾癌发挥抑制作用。     

T淋巴细胞亚群及Th1/Th2细胞因子谱早期鉴别细菌尿源性脓毒症

目的探究尿源性脓毒症患者T淋巴细胞亚群及辅助性T细胞1(Th1)/Th2细胞亚群细胞因子谱水平变化及其对革兰阳性菌、革兰阴性菌的鉴别价值。方法选择2015年2月-2020年3月遵义医科大学附属医院收治的98例尿源性脓毒症患者、80例常规泌尿系统感染患者及100名查体的健康志愿者作为研究对象,分别纳入脓毒症组、局部感染组、对照组。对脓毒症组患者进行病原菌分析,检测T淋巴细胞亚群比例及白细胞介素-2(IL-2)、IL-4、IL-6、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)等细胞因子水平。结果入组脓毒症患者中,革兰阴性菌引起的尿源性脓毒症患者共53例(检出革兰阴性菌53株),以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌为主;革兰阳性菌引起的尿源性脓毒症患者共45例(检出革兰阳性菌45株),以表皮葡萄球菌、粪肠球菌、金黄色葡萄球菌、溶血葡萄球菌为主。脓毒症组患者CD₃⁺T淋巴细胞亚群比例、CD₄⁺T淋巴细胞亚群比例、CD₄⁺/CD₈⁺分别为(59.84±7.41)%、(34.84±5.26)%、(1.42±0.65),低于局部感染组、对照组,而IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-γ分别为2.69(0.98,16.23)pg/ml、2.49(0.74,22.74)pg/ml、88.41(10.24,188.52)pg/ml、25.63(1.74,74.15)pg/ml、3.25(1.01,16.96)pg/ml、7.11(1.22,15.63)pg/ml,高于局部感染组、对照组(P<0.05)。革兰阳性菌感染患者CD₃⁺、CD₄⁺、CD₄⁺/CD₈⁺分别为(64.15±4.71)%、(37.41±5.41)%、(1.53±0.34),高于革兰阴性菌感染患者,IL-6、IL-10、TNF-α分别为70.12(15.26,152.37)pg/ml、10.89(2.22,35.96)pg/ml、2.88(1.01,15.27)pg/ml,低于革兰阴性菌感染患者(P<0.05)。CD₃⁺、CD₄⁺、CD₄⁺/CD₈⁺、IL-6、IL-10等指标鉴别革兰阳性菌感染及革兰阴性菌感染的曲线下面积分别为0.651、0.681、0.656、0.769、0.758,当截点值为61.70%、35.10%、1.47、77.41 pg/ml、17.16 pg/ml时约登指数最大。结论尿源性脓毒症患者存在T细胞亚群及Th1/Th2细胞因子谱水平的失衡,且革兰阳性菌及革兰阴性菌脓毒症患者存在一定差异,临床可根据这些指标进行早期诊断及病原菌类型的鉴别。     

Recombinant Mycobacterium bovis bacillus Calmette–Guérin expressing Ag85B-IL-7 fusion protein enhances IL-17A-producing innate γδ T cells

Interleukin 7 (IL-7) has an important function in the development and maintenance of IL-17A+ γδ T cells. We here constructed a recombinant Mycobacterium bovis bacillus Calmette–Guérin expressing antigen 85B (Ag85B)-IL-7 fusion protein (rBCG-Ag85B-IL-7). The Ag85B-IL-7 fusion protein and IL-7 were detected in the bacterial lysate of rBCG-Ag85B-IL-7. rBCG-Ag85B-IL-7 was the same in number as control rBCG expressing Ag85B (rBCG-Ag85B) in the lung at the early stage after intravenous inoculation, whereas the numbers of IL-17A+ γδ T cells and Ag-specific Th1 cells were significantly higher in the lungs of mice inoculated with rBCG-Ag85B-IL-7 than those inoculated with rBCG-Ag85B. The Ag-specific Th1 cell response was impaired in mice lacking IL-17A+ γδ T cells after inoculation with rBCG-Ag85B-IL-7. Thus, rBCG-Ag85B-IL-7 increases the pool size of IL-17A+ γδ T cells, which subsequently augment the Th1 response to mycobacterial infection.     

EV71感染手足口病不同程度患儿T细胞亚群、免疫球蛋白水平变化探讨

目的探析感染EV71重症手足口病细胞因子水平与免疫球蛋白水平的变化。方法入选我院2012年1月至2013年11月EV71感染的手足口神经系统受累期患儿104例,按病情严重程度分入A组（重症急性期患儿）、B组（普通组）,每组52例,应用ELISA法检测所有研究对象的IL-6、IL-10、TNF—α／、TGF-β血清浓度,比较两组患儿的免疫球蛋白水平、T细胞亚群水平变化。结果A组的IgA、IgG、IgM等指标水平显著高于B组（P＜O．05）;A组重症手足口病患儿的T细胞亚群CD3＋、CD4＋、CD4＋／CD8＋水平显著低于B组,差异具有统计学意义（P＜0．05）。结论重症手足口病患儿血清免疫球蛋白指标呈高浓度状态,T细胞亚群指标呈现低浓度状态。结合患儿的临床表现．更准确地早期识别重症病例。     

Profiling of cellular immune responses to Mycoplasma pulmonis infection in C57BL/6 and DBA/2 mice

Mycoplasma infections cause respiratory tract damages and atypical pneumonia, resulting in serious problems in humans and animals worldwide. It is well known that laboratory inbred mouse strains show various susceptibility to Mycoplasma pulmonis (M. pulmonis) infection, which causes murine respiratory mycoplasmosis. In this study, we aimed to demonstrate the difference in cellular immune responses between resistant strain, C57BL/6NCrSlc (B6) and susceptible strain, DBA/2CrSlc (D2) after challenging M. pulmonis infection. D2 mice showed higher amount of bacterial proliferation in lung, higher pulmonary infiltration of immune cells such as neutrophils, macrophages, and lymphocytes, and higher levels of interleukin (IL)-1β, IL-6, IL-17A, and tumor necrosis factor-α in bronchoalveolar lavage fluid than did B6 mice. The results of this study suggest that D2 mice are more susceptible than B6 mice to M. pulmonis infection due to a hyper-immune inflammatory response.     

肠道菌群失调对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨肠道菌群失调对流感病毒感染小鼠急性肺损伤的影响及作用机制。方法 BALB/c小鼠随机分为正常对照组、流感病毒对照组、甲硝唑模型组,每组12只。甲硝唑模型组小鼠用甲硝唑（18 mg/mL）连续灌胃8 d,于d9滴鼻甲型流感病毒A/PR/8/4稀释液（103pfu/鼠）,构建肠道菌群失调小鼠感染流感病毒的模型。观察各组小鼠肺组织及盲肠的病理变化,检测肺组织中脂多糖LPS及炎性相关因子肿瘤坏死因子 - α（Tumor necrosis factor - α,TNF - α）、白介素 - 1β（Interleukin - 1β, IL - 1β）、白介素 - 6（Interleukin - 6,IL - 6）、干扰素 - β（Interferon - β,IFN - β）水平,并采用免疫组织化学染色法定位肺组织Toll样受体4（Toll - like receptor 4, TLR4）表达情况。结果 甲硝唑模型组小鼠肺及盲肠组织炎症损伤和病理改变情况较比病毒对照组更加严重,同时小鼠肺组织中LPS含量显著增加,差异有统计学意义（P＜0.05）,TNF - α、IL - 1β、IL - 6、IFN - β水平明显升高（P＜0.05）。TLR4在甲硝唑模型组小鼠肺组织中的表达明显高于病毒对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 肠道菌群失调引起LPS/TLR4通路激活,从而上调小鼠肺组织流感病毒所致的炎性风暴,进一步加重流感病毒引起的组织病理改变。     

Immunization with PCEP microparticles containing pertussis toxoid, CpG ODN and a synthetic innate defense regulator peptide induces protective immunity against pertussis

We investigated the efficacy of a novel microparticle (MP) based vaccine formulation consisting of pertussis toxoid (PTd), polyphosphazene (PCEP), CpG ODN 10101 and synthetic cationic innate defense regulator peptide 1002 (IDR) against Bordetella pertussis in mice. We studied whether encapsulation of these IDR-CpG ODN complexes into polyphosphazene-based microparticles further enhanced their immunomodulatory activity compared to soluble formulations containing PCEP (SOL), or without PCEP (AQ). In vitro stimulation of murine macrophages showed MP induced significantly higher levels of pro-inflammatory cytokines. When assessed in a B. pertussis infection challenge model, a single immunization with MP formulation led to significantly lower bacterial loads compared to other formulations and non-vaccinated animals. ELISPOT of splenocytes showed that MP group mice had significantly higher number of antigen-specific IL-17 secreting cells. The cytokine profile in lung homogenates of MP group mice after challenge showed significantly higher amounts of MCP-1, TNF-α, IFN-γ, IL-12 and IL-17 and significantly lowered IL-10 levels suggesting a strong Th1 shift. Protection was observed against challenge infection with B. pertussis. On the other hand protective immune responses elicited in Quadracel^® immunized mice were Th2 skewed. Hence, we conclude that formulation of PTd, PCEP, CpG ODN and IDR into MP generates a protective immune response in mice against pertussis emphasizing the potential of MP as a delivery vehicle for the potential development of single-shot vaccines.