鸡胚前脑细胞在各种支持物特别是人羊膜基膜上生长的定量研究

作者采用Ⅰ型胶原、人羊膜基膜(HABM)基质面、Fibronectin(FN)、多聚鸟氨酸(PO)、PO+FN、PO+Laminin(LN)、鼠尾胶原和 HABM 上皮面作为8天鸡胚前脑细胞生长的支持物,观察这些支持物对前脑细胞生存生长的影响。前脑细胞以每个孔不同的细胞密度在 PO、LN 和HABM 上皮面培养。发现每个孔4×10~5细胞密度细胞生长最好。用 MTT 做为线粒体脱氢酶底物的自动比色法,对前脑细胞在各种支持物上的生长进行了定量测定。结果表明,所测光密度值(OD)与细胞生存、生长成正比,且 HABM 上皮面是前脑细胞生长最好的支持物。各种支持物促进前脑细胞生长的顺序浓次是:HABM 上皮面>鼠尾胶原>PO+LN>PO+FN>PO>FN>HABM 基质面>Ⅰ型胶原。HABM 上皮面比基质面促进前脑细胞生长作用明显强(P<0.01);鼠尾胶原比Ⅰ型胶原强(P<0.05);PO+LN 比 PO 作用强(P<0.05)。这提示 LN 很可能是 HABM、鼠尾胶原和 PO+LN 中促进神经生长的主要活性因子。     

几种生物材料对人表皮细胞DNA合成的影响

目的　探讨Ⅰ型胶原、壳聚糖和海藻酸钠对人表皮细胞DNA合成的影响 ,为其在创伤创面的应用提供实验依据。方法　采用正交试验方法 ,以体外培养的人表皮细胞为实验模型 ,用3 HTdR掺入法分别测定各实验组3 HTdR掺入值 ,以反应其DNA合成水平的变化。结果　Ⅰ型胶原、壳聚糖、海藻酸钠处理组3 HTdR掺入值均较对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,Ⅰ型胶原、壳聚糖与海藻酸钠合用可显著提高人表皮细胞3 HTdR掺入值 (P <0 .0 5 )。结论　Ⅰ型胶原、壳聚糖和海藻酸钠对人表皮细胞DNA合成具有促进作用 ,Ⅰ型胶原、壳聚糖与海藻酸钠合用对人表皮细胞DNA合成具有协同作用 ,提示Ⅰ型胶原、壳聚糖和海藻酸钠在皮肤创伤创面的治疗中具有应用前景。     

BMP_2活性多肽/鼠尾Ⅰ型胶原复合物植入异位成骨的实验研究

用动物实验的方法验证鼠尾Ⅰ型胶原支架与自行研制合成的BMP2活性多肽复合后诱导异位成骨的能力与作用。自行提取鼠尾Ⅰ型胶原以及与BMP2活性多肽复合,冻干后低真空模式下电镜观察胶原结构。实验分2组。对照组:单纯鼠尾Ⅰ型胶原组;实验组:BMP2活性多肽/鼠尾Ⅰ型胶原复合物组。将12只大白鼠随机分成2组,每只大白鼠右侧大腿作2 cm的切口,制备股四头肌肌袋模型,将上述材料分别植入肌袋。术后第3周和第6周分别作放射学检查(X-ray,CT),第6周将所有大白鼠处死作组织学(HE染色)检查。鼠尾Ⅰ型胶原冻干后孔径大小合适与BMP2活性多肽复合后无明显改变。术后第3周和第6周放射学检查可见实验组有明显的钙化影形成,且第6周成骨范围要明显大于第3周时所见,而对照组无成骨现象。术后第6周组织学观察可见实验组植入区有成骨细胞和大量新骨形成,而对照组仅见炎性细胞改变。鼠尾Ⅰ型胶原是一种较好的载体支架材料,自行研制合成的BMP2活性多肽与其复合后,具有较强的异位诱导成骨能力。     

压力超负荷大鼠心肌胶原代谢的动态变化

目的:探讨压力超负荷大鼠心肌胶原代谢的动态变化。方法:采用腹主动脉缩窄法制备压力超负荷大鼠模型,并以假手术组为对照,分别于术后第3周、4周、8周和12周取材,称量大鼠体质量、心脏质量和左心室质量,计算心脏质量指数(heart mass index,HMI)和左心室质量指数(left ventricle mass index,LVMI);心肌组织Masson染色观察心肌胶原纤维沉积情况;样本碱水解法检测心肌组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量;ELISA法检测血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(procollagen typeⅠcarboxy-terminal peptide,PⅠCP)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(procollagen typeⅢamino-terminal peptide,PⅢNT)和Ⅰ型胶原C端肽(collagen C telopeptide typeⅠ,CTX-Ⅰ)水平。结果:与假手术组相比,模型组大鼠心肌血管周围及间质可见胶原纤维沉积,心肌胶原容积分数明显增高(P0.01),且随时间延长胶原沉积明显增多;模型组大鼠HMI、LVMI和HYP均明显增加(P0.05),且随时间延长大鼠HYP有升高的趋势;模型组大鼠血清PⅠCP浓度显著升高,在第4、8和12周时差异有统计学意义(P0.05);模型组大鼠血清PⅢNP浓度显著升高,CTX-Ⅰ浓度显著降低,差异均有统计学意义(P0.01)。结论:压力超负荷状态下,心肌胶原代谢紊乱,且随时间的延长心肌呈不同程度的纤维化表现。     

鼠尾胶原联合血小板源性生长因子BB培养内皮细胞

背景:有研究证实,Ⅰ型鼠尾胶原可促进成肌纤维细胞的增加,对内皮细胞的迁移及成管有较为明显的作用,推断胶原可为细胞的生长提供一个较为合适的内环境。目的:探讨鼠尾胶原联合血小板源性生长因子BB抗人脐静脉内皮细胞凋亡的效果及安全性。方法:将第4代人脐静脉内皮细胞培养于铺有鼠尾胶原的培养皿上,用Alamar Blue法检测不同时间点的还原比率。将第4代人脐静脉内皮细胞分为4组培养于24孔板,其中生长因子组是在细胞接种前加入血小板源性生长因子BB蛋白于细胞悬浮液中;联合组需事先加入血小板源性生长因子BB蛋白于鼠尾胶中,铺于板底;最后各组均使用H2O2诱导凋亡,73 h后采用Western blot测定血小板源性生长因子BB、凋亡相关蛋白及抗凋亡蛋白的表达,同时Tunnel检测细胞凋亡阳性率。结果与结论:在铺有鼠尾胶原培养皿中培养人脐静脉内皮细胞的成管数量明显多于正常培养人脐静脉内皮细胞的成管数量(P0.05)。鼠尾胶原培养的细胞与正常对照细胞生长状态相似,说明鼠尾胶原对细胞无明显毒性作用。联合组血小板源性生长因子BB、Bcl-2、p-Akt表达高于其余3组(P0.05),Bax表达低于其余3组(P0.05)。联合组细胞凋亡率低于生长因子组、H2O2组(P0.05)。表明鼠尾胶原对人脐静脉内皮细胞无明显毒性作用,联合血小板源性生长因子BB生长因子后可显著增强抗细胞凋亡效果。     

兔子宫内膜片层体外构建的实验研究

探索以扩增培养的子宫内膜细胞为种子细胞、以液态胶原为支架材料,构建组织工程化子宫内膜片层的可行性。体外分离并规模化扩增子宫内膜上皮细胞与基质细胞,以Ⅰ型液态鼠尾胶原为支架,按自然子宫内膜的结构在体外重建具有两层结构的组织工程化子宫内膜,体外培养14天时进行H.E.染色与免疫组化鉴定。H.E.染色与免疫组化染色结果表明：再造子宫内膜片层在胶原材料中能够较好地维持双层结构,上皮层呈CK18阳性,在某些部位还能够形成极化的柱状上皮。利用体外扩增培养的子宫内膜上皮细胞与基质细胞构建的组织工程化子宫内膜片层具有子宫内膜组织的双层结构与极化上皮特征。     

体外构建胚胎干细胞生长分化的三维研究模型

目的以液态胶原为支架,小鼠胚胎干细胞(ESCs)为细胞模型,构建ESCs胶-原复合体,旨在尝试建立一种能够实现干细胞生长、分化的三维培养体系。方法提取鼠尾胶原,观察ESCs在自制胶原条带内增殖的形态特征,并测定葡萄糖/乳酸活性。以ESCs源心肌细胞为目的细胞,利用免疫组化、RT-PCR及电镜技术评价胶原条带内ESCs进行自发性分化的能力。结果ESCs在胶原条带所提供的三维培养体系内生长、增殖状态良好,且彼此间能够建立细胞连接。胶原条带内部分ESCs能够自发性分化为心肌细胞。该心肌细胞均可表达心肌蛋白cTn-T,心肌转录因子NKX2.5及肌球蛋白轻链MLC-2 vmRNA,且肌小节结构发育成熟。结论以液态Ⅰ型胶原为主体的支架材料可以为ESCs提供良好的生长基质,促进其组织化发育。该实验初步明确了体外构建干细胞生长分化三维模型的可行性。     

骨髓间充质干细胞与复合I型胶原和骨形态发生蛋白2的聚乳酸乙醇酸构建组织工程骨

目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSC)体外分离培养后种植到复合Ⅰ型胶原和重组人类骨形态发生蛋白2(rhBMP-2)的聚乳酸乙醇酸(PLGA)生物支架上,构建组织工程骨的可行性.方法密度梯度离心法提取分离BMSC,倒置显微镜观察细胞形态,流式细胞分析法对细胞表面抗原进行鉴定.相分离法制备多孔三维PLGA生物支架,支架材料上复合Ⅰ型胶原和rhBMP-2,扫描电镜观察其超微结构.将第3代的BMSC接种于复合支架上,扫描电镜观察材料的细胞黏附性,将培养6 h 后的细胞-支架复合体植入SD大鼠肌袋内,于2个月后取材进行HE染色,观察其构建组织工程骨的情况.结果 BMSC可在体外分离扩增,表达CD29、CD44,不表达CD34和CD45.制备的PLGA支架孔隙率为90%,平均孔径为100 μm,与BMSC有较好的黏附性.2个月后动物体内细胞-支架复合体的大体观察和HE染色显示,BMSC种植到复合Ⅰ型胶原和rhBMP-2的PLGA生物支架上可构建骨组织.结论 BMSC可在体外长期、稳定培养,是理想的组织工程种子细胞.PLGA与干细胞有较好的黏附性,可用来做组织工程生物材料.BMSC种植到复合Ⅰ型胶原和rhBMP-2的PLGA生物支架上后,在动物体内可构建组织工程骨.     

肺癌细胞系中肿瘤干细胞的分离鉴定与功能分析

背景:肿瘤干细胞在体外扩增和培养过程中如何保持其干细胞的特性成为肿瘤干细胞研究的重要障碍,从可长期稳定保存的细胞系中分离获得肿瘤干细胞可能成为肿瘤干细胞研究的可靠途径。目的:探讨遗传背景相似、转移特性不同的肺癌细胞中肿瘤干细胞的存在与否及其功能。方法:观察PLA-801D和PLA-801C细胞对鼠尾胶原和纤连蛋白的黏附作用,以考察两株细胞的转移潜能;观察PLA-801D和PLA-801C细胞形成单细胞克隆的种类及每种细胞克隆的亚克隆种类和性能,判断两株细胞中是否存在肿瘤干细胞;采用胶原收缩实验考察两株细胞的生物力学重塑能力,即对细胞外基质的重塑能力。结果与结论:PLA-801D细胞对鼠尾胶原和纤连蛋白的黏附作用均明显强于PLA-801C细胞(P0.01)。PLA-801D可产生4种单细胞克隆,其中1种在传单细胞亚克隆后仍可形成如上4种克隆,而PLA-801C细胞中未发现有完全分化能力的细胞克隆。PLA-801D细胞的生物力学重塑能力也明显高于PLA-801C细胞(P0.05)。结果证实具有高转移潜能的PLA-801D细胞中含有一小群具有自我更新和分化能力的肿瘤干细胞,且该细胞株的生物力学重塑性较好,提示该细胞株对细胞外基质的重塑性能较强。     

卡托普利逆转压力负荷增加大鼠左室重构的机理研究

目的观察卡托普利逆转压力负荷增加大鼠左室重构的作用及其机理。方法36只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、卡托普利组。建立腹主动脉狭窄所致充血性心力衰竭左室重构大鼠模型 ,观察左室质量指数 (LVMI) ,采用免疫组织化学染色方法观察心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原的改变 ,采用RT-PCR方法观察心肌Ⅰ型和Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,并采用放射免疫分析方法检测血浆和心肌血管紧张素Ⅱ (AngⅡ ) ,血浆心钠素 (ANF) ,血清醛固酮 (ALD)水平。结果模型组LVMI、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Ⅰ型胶原mRNA表达明显高于假手术组 (P<0.001,P<0.01 ,P<0.05) ,卡托普利组LVMI、Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、Ⅰ型胶原mRNA表达与模型组比明显下降 (P<0.05 ,) ;模型组Ⅲ型胶原mRNA与假手术组比较有显著升高(P<0.05) ,卡托普利组较模型组下降无显著差异(P>0.05)。模型组血浆AngⅡ、左室心肌AngⅡ、血浆ANF和血清醛固酮水平较假手术组显著升高 (P<0.001 ,P<0.01) ,卡托普利组明显降低血浆AngⅡ、左室心肌AngⅡ、血浆ANF和血清醛固酮水平 (P<0.01 ,P<0.001)。结论压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA的表达增加 ,具有左室重构的改变。卡托普利降低压力负荷增加大鼠心肌Ⅰ和Ⅲ型胶原及其mRNA的表达 ,具有逆转左室重构的作用。卡托普利逆转左     

低营养及低氧状态下NIH3T3细胞增殖及细胞周期的变化及对bFGF的影响

目的： 体外模拟慢性创面缺氧、低营养环境，观察成纤维细胞在该状态下增殖及细胞周期的变化及对外源性生长因子（bFGF）的反应,探讨低氧、低营养条件下成纤维细胞的病理生理变化。方法: 单纯缺氧环境采用厌氧培养箱，通入混合气，氧分压（PO₂）分为27 mmHg和44 mmHg 2个水平；低营养环境则控制培养液新生牛血清（NCS）浓度。用MTT法检测细胞活性以及其对外源性生长因子的反应，用流式细胞仪检测细胞周期。结果: PO₂ 44 mmHg时细胞增殖速度较同期对照组无明显差异；PO₂ 27 mmHg时，细胞增殖速度较同期对照组明显减慢（P<0.01），细胞被阻滞于G₀期，S期细胞比例明显减少，bFGF未显示促增殖作用。NCS浓度为0.5%的低营养状态下细胞增殖速度较同期对照组明显减慢（P<0.01），细胞被阻滞于G₀-G₁期（P<0.01）；bFGF能明显改善低营养状态下的增殖减慢（P<0.01），使G₂-M期细胞比例增加（P<0.05）。结论: 27 mmHg PO₂或NCS浓度为0.5%的低营养环境使细胞阻滞于G₀-G₁期，影响成纤维细胞增殖；bFGF可以改善低营养条件下细胞增殖减慢的状态，但对极度缺氧条件下的成纤维细胞增殖障碍无明显作用。     

三氧化二砷纳米粒子对直肠癌作用的实验研究

目的 探讨三氧化二砷纳米粒子在体外、体内对直肠癌的抗癌作用.方法 Annexin V-FITC/PI染色流式细胞术检测三氧化二砷纳米粒子诱导直肠癌细胞HR8348凋亡情况;建立HR8348细胞裸鼠皮下移植瘤模型,监测给药后肿瘤体积的变化,并通过对肿瘤组织标本Ki67染色和TUNEL染色检测肿瘤细胞增殖和凋亡情况.结果 流式细胞术结果显示,4.0 μmol/L三氧化二砷纳米粒子诱导直肠癌细胞凋亡率为7.02%,高于对照组(1.76%),P＜0.05,三氧化二砷纳米粒子体外可诱导直肠癌细胞的凋亡.在体内,三氧化二砷纳米粒子可抑制HR8348裸鼠皮下移植瘤的生长,4.0 μmol/L三氧化二砷纳米粒子组增殖指数(31.61%)低于对照组(66.75%),而凋亡指数(19.21%)高于对照组(6.47%),P＜0.05.可抑制肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡.结论 在直肠癌中,三氧化二砷纳米粒子通过抑制增殖,诱导凋亡而发挥抗癌作用,是直肠癌治疗的良好药物.     

Enhanced blood pressure responses to loud noise in offspring of monkeys with high blood pressure

Sixteen unanesthetized immature Macaca fascicularis monkeys, 18-43 months of age, were tested for mean arterial blood pressure (MBP) and heart rate (HR) responses to 30 minutes of continuous broadband noise (95 dB). Eight animals (OH group) were offspring of monkeys with high blood pressure (parents' MBP = 115.5 +/- 1.0 (SEM) mmHg), and eight (OC group) were offspring of control animals with normal blood pressure (parents' MBP = 96.6 +/- 1.7 mmHg). Resting MBP during a 17-24 hour period prior to the experiment in the OH group was 100.6 +/- 1.9 mmHg, significantly higher (p less than 0.05) than the MBP of the OC group (94.3 +/- 2.2 mmHg.) Immediately prior to noise exposure, MBP in the OH group was stable for 30 minutes, at 104 +/- 3 mmHg. During noise exposure, MBP increased significantly to 108 +/- 4 mmHg. In the OC group, MBP during the 30 min baseline interval was 95 +/- 2 mmHg, and during noise exposure was not significantly changed at 94 +/- 3 mmHg. Heart rate decreased significantly during noise in the OC group and did not change in the OH group. The results indicate that the offspring of monkeys with high blood pressure had higher resting MBP than control animals and showed significant MBP increases in response to loud noise. Control animals showed no change in MBP and decreases in HR in response to noise.     

骨髓基质细胞衰老对造血细胞衰老的影响

目的探讨骨髓基质细胞(BMSCs)衰老对骨髓造血细胞衰老的影响及其可能的机制。方法贴壁培养大鼠骨髓基质细胞,传代BMSCs至P3代时分组。对照组:常规培养;衰老组:常规培养基础上加入D-半乳糖(D-Gal)诱导BMSCs衰老,两组细胞分别培养48h。收集培养上清液,ELISA法检测细胞因子:粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干细胞因子(SCF)、白细胞介素(IL)-6、IL-1β,IL-2和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,CCK-8检测细胞增殖能力,衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测BMSCs衰老。分离提取正常骨髓单个核细胞(BMMNCs),在衰老组与对照组BMMSCs上种植正常BMMNCs共培养24h,收集上层悬浮BMMNCs。CCK-8法测定细胞增殖能力;多向造血祖细胞集落(CFU-Mix)半固体培养法检测细胞增殖及分化能力;SA-β-Gal染色观察衰老细胞百分率;流式细胞术分析细胞周期与细胞凋亡;DCFH-DA荧光染色检测细胞活性氧簇(ROS)水平;酶学法检测细胞内丙二醛(MDA)含量和总超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果衰老组BMSCs增殖能力显著下降,SA-β-Gal染色阳性细胞百分率增加,细胞分泌GM-CSF、SCF、IL-6、IL-1β水平明显降低,IL-2、TNF-α水平显著升高。与衰老BMSCs共培养后,BMMNCs的增殖能力显著下降,SA-β-Gal染色阳性细胞百分率显著上升,BMMNCs形成CFUMix集落数量明显降低,细胞周期呈现阻滞且细胞凋亡率上升,细胞内ROS、MDA含量上升,SOD含量下降。结论本实验中D-Gal成功复制了BMSCs衰老,衰老的BMSCs可诱导骨髓造血细胞衰老,其机制可能与BMSCs导致造血细胞氧化损伤有关。     

增殖细胞核抗原短发夹状RNA对人骨肉瘤细胞生长的影响

目的构建增殖细胞核抗原(PCNA)短发夹状RNA表达载体,检测其对人骨肉瘤细胞PCNA表达、细胞增殖及细胞凋亡的影响。方法体外构建PCNAshRNA表达载体pSilence2.1neo-PCNA,转染人骨肉瘤细胞系MG63,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测转染前后PCNAmRNA表达,免疫组织化学(SP)法检测转染前后PCNA蛋白的表达,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法及克隆形成试验检测细胞增殖活性,3H胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)细胞掺入试验检测细胞DNA合成,流式细胞仪检测细胞周期分布,吖啶橙染色法检测细胞凋亡情况。结果pSilence2.1neo-PCNA载体转染能显著抑制PCNAmRNA及蛋白的表达,转染后mRNA表达抑制率为80.51%、增殖指数值为空白组的25.68%。转染组48h细胞增殖抑制率为61.78%,转染组3H-TdR掺入率明显低于空白组(P<0.01)。细胞周期分析显示,siRNA转染组G0G1期细胞含量显著增加,而S期细胞含量显著减低。转染组凋亡率为16.54%。结论pSilence2.1neo-PCNA可显著抑制MG63细胞PCNA的表达及细胞增殖活性,促进细胞凋亡。     

细胞外信号调节激酶1/2的阻断剂PD98059对小鼠淋巴细胞增殖的影响

目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的特异性阻断剂PD98059对小鼠淋巴细胞体外增殖的影响。方法分离小鼠淋巴结细胞,藉羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色,用多克隆刺激剂刀豆A蛋白(ConA)或者佛波醇酯(PDB)加离子霉素(Ion)刺激,以流式细胞术分析PD98059对淋巴细胞增殖的影响;利用碘化丙锭(PI)染色分析PD98059对细胞周期的影响。结果CFDA-SE染色分析显示,当浓度为5、10、20、30、40μmol/L时,PD98059对ConA诱导的淋巴细胞增殖具有明显的抑制作用,并呈现明显的剂量依赖关系(r=0.985,P<0.01)。选择最佳浓度30μmol/L的PD98059,观察其对不同时间淋巴细胞增殖的影响,结果发现,随着时间的延长,PD98059对淋巴细胞增殖的抑制作用明显降低(P<0.01),但抑制率随时间的延长而明显升高。细胞周期分析进一步表明,PD98059可阻止ConA刺激的淋巴细胞进入S期和G2/M期,而亚二倍体峰变化并不明显。PD98059对PDB Ion刺激的淋巴细胞细胞周期的影响与ConA刺激相似,不同的是S期和G2/M期的变化较ConA的作用更明显。结论PD98059对小鼠淋巴细胞的增殖有明显地抑制作用,并可阻止其进入S期和G2/M期,提示ERK1/2信号通路的活化在淋巴细胞增殖中起重要作用。     

Change in intrathoracic pressure in rats with spontaneous and controlled ventilation during microgravity by parabolic flight

We previously reported that the intrathoracic pressure (ITP) decreases and the transmural pressure of the aortic wall (TMP) increases during 4.5 s of microgravity (muG) induced by free drop. To examine the ITP response to a longer period of muG in the absence of the respiratory rate (RR) decrease, i.e., bradypnea, which occurs at the onset of muG, we measured the aortic blood pressure at the diaphragma level (AP) and ITP. We then calculated the TMP at the aortic arch level during 20 s of muG induced by parabolic flight in anesthetized rats (n = 7) with either spontaneous ventilation (SPN-V) or controlled ventilation (CONT-V). In the SPN-V group, the bradypnea was observed in all rats after the onset of the muG (RR change -13.9 +/- 2.9/min). The ITP during muG (-9.3 +/- 0.9 mmHg) was significantly lower than that during 1 G (-7.7 +/- 0.9 mmHg), and the TMP was significantly increased during muG (112 +/- 6 mmHg) compared to 1 G (103 +/- 5 mmHg). Similar changes in ITP and TMP were observed in the CONT-V group: During muG and 1G, respectively, the ITP was -8.4 +/- 0.6 mmHg and -5.9 +/- 0.7 mmHg, and the TMP was 112 +/- 6 mmHg and 101 +/- 6 mmHg, whereas no change in RR was observed because of the controlled ventilation. These results show that the ITP decreases and the TMP increases during muG, and they are not affected by a disturbance of respiratory rhythm.     

The effects of increased intra-abdominal pressure on bacterial translocation

In this study, we investigated the effect of different values of intra-abdominal pressure on bacterial translocation. Twenty-four Wistar-Albino rats were divided into four groups. The animals belonging to the Control group were not subjected to any increased intra-abdominal pressure. In groups I, II and III, an intra-abdominal pressure of 14, 20, and 25 mmHg, respectively, was established by carbon dioxide pneumoperitoneum for a period of 60 minutes. Four hours after the pneumoperitoneum, all animals were sacrificed to evaluate the degree of bacterial translocation at this time. Liver, spleen and mesenteric lymph nodes were excised under sterile conditions. Bacterial growth was assessed using standard bacteriological techniques and compared statistically. The Kruskal-Wallis and Mann-Whitney U tests were used for the statistical analysis. Different amounts of bacterial growth were found in all of the animals subjected to increased intra-abdominal pressure, except for the controls. Bacterial translocation was detected at an intra-abdominal pressure of 14 mmHg but this finding was not statistically significant (p > 0.05). There was a significant increase in bacterial growth in animals subjected to an intra- abdominal pressure of 20 mmHg or above (p < 0.001). As a result, we found that bacterial translocation started when the intra-abdominal pressure reached a level of 14 mmHg. Patients should be closely monitored for septic complication risks following laparoscopic procedures in which the intra-abdominal pressure exceeds 20 mmHg.     

特异性siRNA体外抑制HDGF基因对人大肠癌细胞凋亡的影响

目的：了解HDGF基因在体外是否对大肠癌细胞凋亡具有调控作用。方法设计特异性小干扰RNA抑制HDGF基因表达,本试验分为3组：空白对照组、非特异性siRNA转染的阴性对照组及HDGF特异性siRNA干扰组。通过AnnexinV?FITC流式双染, Hoechst 33258荧光染色等方法检测转染前后细胞凋亡变化,运用免疫印迹法检测转染HDGF?siRNA前后相关凋亡蛋白的变化情况。结果与2个对照组相比, HDGF?siRNA处理组细胞早期凋亡率明显上升至（14．1±1．24）％,差异具有统计学意义（P＜0．05）,在形态学上有20％的细胞出现染色质浓染的凋亡小体,而对照组基本未见;此外与2个对照组相比, HDGF?siRNA处理组细胞中bcl?2及Survivin蛋白含量均有明显下调,而Bax明显上调、 Cyt?c从线粒体释放到胞浆、 caspase?9及caspase?3被激活。结论 HDGF?siRNA能在体外有效诱导大肠癌胞发生凋亡,线粒体凋亡途径在HDGF基因介导的凋亡调控中起重要作用,这暗示HDGF将可能成为大肠癌基因治疗的一个极佳的分子靶点。     

金雀黄素抑制人乳腺癌细胞系体外增殖作用机理的实验研究

目的 研究金雀黄素抑制人乳腺癌细胞株体外增殖作用的机理。方法 选用2种不同的人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-23l体外培养，MTT法检测细胞增殖作用，Giemsa染色观察细胞形态学改变，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率，同时进行了原位细胞凋亡的检测。结果 金雀黄素对MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞体外生长具有明显的抑制作用。Giemsa染色显示，金雀黄素处理的MCF-7细胞呈明显的凋亡形态改变，细胞固缩、发泡，染色质凝集呈块状，并沿核周分布。流式细胞仪检测在G1峰前可见凋亡峰，且随用药时间的延长，凋亡比率递增。而金雀黄素处理的MDA-MB-231细胞未见明显的凋亡形态改变和凋亡峰的出现，细胞周期明显地阻滞于G2～M期。结论 金雀黄素通过诱导细胞凋亡或阻滞细胞于G2-M期，从而抑制乳腺癌细胞的体外增殖，为其减缓人乳腺癌细胞的体内生长提供理论依据。