淫羊藿苷介导PI3K/Akt信号通路干预大鼠早期激素性股骨头坏死的研究

目的 探讨淫羊藿苷调控磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路干预大鼠早期激素性股骨头坏死的作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、模型组和淫羊藿苷10、20、40mg/kg组,每组10只。除对照组外,其余各组ip脂多糖和im甲泼尼龙制备激素性股骨头坏死大鼠模型。淫羊藿苷组大鼠分别ig10、20、40mg/kg的淫羊藿苷,对照组、模型组均ig等量生理盐水,每天1次,连续6周。采用Micro-CT评估造模是否成功并分析骨密度（BMD）、骨体积密度（BV/TV）、骨表面积密度（BS/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁分离度（Tb.Sp）;ELISA法检测血清中血管内皮生长因子（VEGF）、一氧化氮（NO）水平;Western blotting法检测股骨头PI3K、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组BMD、Tb.Th、BV/TV、Tb.N、BS/TV、VEGF和NO水平明显降低,Tb.Sp明显增高（P＜0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷组的BMD、Tb.N、BV/TV、Tb.Th、BS/TV、VEGF和NO水平明显增高,Tb.Sp明显降低（P＜0.05）。与对照组比较,模型组PI3K和p-Akt蛋白表达均减少（P＜0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷组PI3K和p-Akt蛋白表达均增加（P＜0.05）。结论 淫羊藿苷能够有效缓解激素性股骨头坏死的进展,其机制可能与调节血清中VEGF、NO水平和增加骨组织中PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达有关,从而诱导血管修复与新生,促进骨形成和愈合。     

辛伐他汀对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及其相关信号通路研究

目的 探讨辛伐他汀对大鼠胫骨骨折愈合的促进作用及其相关信号通路。方法 建立64只SD大鼠右侧胫骨骨折模型,随机分为短期用药组、渐撤量给药组、连续用药组和对照组。术后第1,2,3,4周,每组随机选择4只大鼠处死,分别从X线检查、骨组织HE染色、血清RANKL、OPG水平分析差异。结果 X线检查：术后4周,渐撤量给药组与连续用药组骨折线愈合良好,仅有少量骨痂残留;短期用药组仍可见明显骨痂及骨折线。骨组织HE染色：术后2周,用药组可见编制样骨开始形成,并可见造血细胞灶;术后4周,短期用药组有板层样骨形成,但骨排列方向紊乱,渐撤量给药组可见骨基质中大量骨细胞沉积。血清RANKL水平：术后2周,短期用药组血清RANKL水平明显低于对照组（P<0.05）;连续用药组血清RANKL水平随时间逐渐下降的趋势最明显;术后第3周,短期用药组血清RANKL水平达到峰值,显著高于其他3组。血清OPG水平：术后第2周,各用药组血清OPG水平显著高于对照组（P<0.05）,术后第4周,短期用药组血清OPG水平最高（P<0.05）。结论 辛伐他汀对骨折愈合有一定的促进作用,但骤然停药对骨折愈合会造成明显的不良影响。     

基于RANKL/RANK/OPG信号通路探讨土贝母苷甲对糖尿病性骨质疏松大鼠骨质流失的影响

目的 探讨土贝母苷甲对糖尿病性骨质疏松(OP)大鼠骨质流失及核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/核因子κB受体活化因子(RANK)/骨保护蛋白(OPG)信号通路的影响。方法 采用高脂高糖饮食+链脲佐菌素腹腔注射法构建大鼠糖尿病性OP模型，将60只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、土贝母苷甲低剂量组(1μmol/L)、土贝母苷甲高剂量组(5μmol/L)、OPG组(3 mg/kg)、土贝母苷甲高剂量+OPG组(5μmol/L土贝母苷甲+3 mg/kg OPG)。酶联免疫吸附(ELISA)法测定大鼠血清核心结合因子α1(CBF-α1)、Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)、骨钙素(OC)水平；Micro-CT测定骨密度(BMD)及骨小梁微结构参数；TRAP染色测定股骨表面破骨细胞数量(N.Oc/BS);HE染色观测大鼠骨组织病理变化；qRT-PCR法与Western blot法分别测定骨组织RANKL、RANK、OPG mRNA与蛋白水平。结果 与对照组相比，模型组大鼠血清CBF-α1、PINP、OC水平、股骨最大负荷、断裂挠度、BMD、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、OPG m...     

基于Micro-CT技术分析淫羊藿苷和朝藿定C对糖皮质激素性骨质疏松症小鼠骨组织微结构的影响

目的 应用Micro-CT技术观察淫羊藿苷和朝藿定C对糖皮质激素性骨质疏松症（GIOP）小鼠模型骨组织骨量、骨微结构的影响。方法 8周龄C57/BL6雄性小鼠随机分为4组：对照组、模型组、淫羊藿苷（200 mg/kg）组和朝藿定C（200 mg/kg）组,除对照组外,其他3组小鼠im地塞米松5 mg/kg,0.125 mg/次,每周3次,制备GIOP模型,对照组im等体积的生理盐水,造模同时,每天ig给药1次,连续60 d后取材,采用micro-CT方法对胫骨近端骨微结构进行三维分析;HE染色病理切片观察胫骨近端骨组织病理形态。结果 骨量参数：与对照组比较,模型组骨矿物质含量（BMC）、骨矿物质密度（BMD）、组织矿物含量（TMC）、组织矿物质密度（TMD）均显著下降（P<0.05、0.01）;与模型组比较,淫羊藿苷组、朝藿定C组BMC、BMD、TMC、TMD指标均显著提高（P<0.05）;其中朝藿定C组各指标均较淫羊藿苷组显著升高（P<0.05）。与对照组比较,模型组相对骨体积（BV/TV）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁厚度（Tb.Th）指标均显著下降（P<0.05）,骨小梁分离度（Tb.Sp）、结构模型指数（SMI）均显著提高（P<0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷、朝藿定C组BV/TV、Tb.N、Tb.Th显著升高,Tb.Sp、SMI显著下降（P<0.05）,其中朝藿定C组各指标均较淫羊藿苷组改善显著（P<0.05）。HE染色病理切片示,模型组骨小梁数目明显减少,稀疏断裂,大部分不能连接成网状,骨髓腔明显增大,骨小梁结构出现较大的空白区域;淫羊藿苷及朝藿定C组小鼠骨小梁明显宽厚,数目也显著增加,骨小梁断裂较少,骨小梁光滑,接近对照组,其中朝藿定C组增加较淫羊藿苷组明显。结论 地塞米松诱导的骨质疏松小鼠模型成功建立,朝藿定C和淫羊藿苷抗骨质疏松活性明显,主要通过增加骨量和改善骨小梁微结构来最终提高骨强度,其中朝藿定C抗骨松作用更强;Micro-CT技术与传统的检测方法相比,在中药干预GIOP骨微结构参数分析上具有便捷、高效,经济,图像多维、全面,准确的优势。     

淫羊藿药渣对去势雄性大鼠的壮骨作用

目的 研究淫羊藿水提后药渣对去势雄性大鼠的壮骨作用。方法 雄性SD大鼠去睾丸造成激素缺乏型骨质疏松模型,造模12周后,连续ig给予淫羊藿水提物及药渣8周,给药浓度为0.5、1.0 g/kg（以生药计）。给药结束后处死动物并进行血清生化和骨微结构检测。结果 给药8周,淫羊藿药渣0.5 g/kg组血清I型前胶原N端前肽（P1NP）含量较模型组明显升高（P<0.05）,发挥促进骨形成作用;血清尿素氮（BUN）、肌酐（Crea）、N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（NAG）、天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、血糖（GLU）水平均呈降低趋势,肝肾毒性不明显;CT扫描结果显示,与模型组比较,淫羊藿药渣0.5 g/kg组胫骨直径显著升高（P<0.05）;水提物0.5 g/kg、药渣1.0 g/kg组骨总体积（TV）显著升高（P<0.05）,各给药组骨小梁的体积（BV）均呈升高趋势,骨表面积（BS）、骨小梁数量（Tb.N）均显著升高（P<0.05、0.01）;药渣1.0 g/kg组骨小梁分离度（Tb.Sp）显著降低（P<0.01）。结论 0.5和1.0 g/kg淫羊藿药渣对去势诱导的雄性大鼠骨质疏松有治疗作用,效果不低于水提物且没有显著毒性。     

淫羊藿苷对脂多糖诱导成骨细胞骨架F-actin损伤的保护作用

目的 考察淫羊藿苷对成骨细胞骨架F-actin损伤的保护作用及其对相关信号通路的调控。方法 采用脂多糖诱导大鼠成骨细胞损伤模型。实验分为空白对照组、模型组和0.1,1,10 μg·mL^-1淫羊藿苷组,MTT法观察淫羊藿苷对成骨细胞活性的影响,TRITC-Phalloidin荧光染色观察淫羊藿苷对细胞骨架的影响,ELISA法测定各组成骨细胞中F-actin的含量,RT-PCR法测定细胞骨架Rho A和Cofilin的mRNA表达量。结果 与空白对照组比较,100 μg·mL^-1脂多糖能显著降低成骨细胞存活率（P<0.01）;与模型组比较,1~10μg·mL^-1淫羊藿苷预处理后能显著提高细胞存活率（P<0.05或P<0.01）;而0.1 μg·mL^-1淫羊藿苷则无显著影响。与模型组比较,1~10μg·mL^-1淫羊藿苷能显著抑制成骨细胞F-actin解聚（P<0.05）,抑制Rho A的mRNA表达（P<0.05或P<0.01）,0.1~10 μg·mL^-1淫羊藿苷能抑制Cofilin的mRNA表达（P<0.01）。结论 淫羊藿苷对脂多糖诱导的细胞骨架F-actin损伤具有保护作用,其机制与抑制细胞骨架相关因子Rho A和Cofilin的mRNA表达有关。     

槲皮素对去卵巢大鼠股骨OPG与RANKL表达的影响

目的观察槲皮素对去卵巢大鼠股骨骨保护素（osteoprotegerin, OPG）及核因子κB受体活化子配体（ligand of receptor activator of NF κB,RANKL）表达的影响。方法健康雌性SD大鼠48只,按体质量随机分为6组：假手术组（SHAM组）、单纯去卵巢组（OVX组）、17β-雌二醇组（ERT组,0.1 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）、高剂量槲皮素组（QH组,300 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）、中剂量槲皮素组（QM组,150 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）、低剂量槲皮素组（QL组,75 mg&#8226;kg^-1&#8226;d^-1）。除假手术组外其余各组均切除双侧卵巢,术后1周开始给药,给药 16周后处死所有大鼠,测定腰椎及股骨骨生物力学性能：弹性模量（ELASTIC） 、刚度（STIFFNESS）、最大应力（M STRESS）及最大承载力（M LORD）,用免疫组织化学染色方法观察股骨OPG、RANKL表达情况。结果 槲皮素高、中剂量均能上调股骨OPG、下调RANKL表达,部分改善股骨、腰椎生物力学性能。结论 槲皮素可通过调节骨组织中OPG、RANKL的相对含量而抑制骨吸收,防止骨质疏松。     

姜黄素调控NF-κB信号通路对糖尿病模型大鼠胰岛细胞形态和功能的影响

目的 探讨姜黄素通过核因子-κB（NF-κB）信号通路对高糖高脂饮食诱导的糖尿病模型大鼠胰岛细胞形态和功能的影响。方法 采用高糖高脂饲料＋ip链脲佐菌素法制备糖尿病大鼠模型,将模型成功 SD大鼠随机分为5组：模型组、二甲双胍（200 mg·kg^-1,阳性药）组和姜黄素低、中、高剂量（50、150、250 mg·kg^-1）组,对照组不造模。ig给药,每天1次,连续6周,对照组同时注射等量无菌磷酸盐缓冲液（PBS）。观察SD大鼠体质量变化;血糖仪检测空腹血糖;ELISA法检测血清C肽水平;生化分析仪检测血清中糖化血红蛋白、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBil）、血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、尿酸（UA）水平;取胰腺进行 HE 染色,于光镜下观察胰岛形态学改变;免疫组化染色法观察胰岛 NF-κB 的阳性表达;Western blotting法检测NF-κB信号通路相关蛋白表达;提取胰岛细胞,免疫荧光染色观察胰岛素分泌,葡萄糖刺激的胰岛素分泌（GSIS）实验检测胰岛素分泌量。结果 与模型组比较,各给药组体质量在治疗第2周时开始缓慢增长,第3、4周体质量显著升高（P＜0.05）;血糖水平显著降低（P＜0.05）,血清 C 肽水平显著升高（P＜0.05）;糖化血红蛋白、TG、TC、LDL-C、ALT、AST、Scr、BUN、UA水平显著降低（P＜0.05）,HDL-C水平显著升高（P＜0.05）;胰岛大小和形态逐渐恢复正常,胰岛细胞依次变得更清晰完整,导管系统内的囊性扩张也逐渐减少;NF-κB阳性细胞减少;p-P65蛋白表达显著降低（P＜0.05）,p-IκBα蛋白表达显著升高（P＜0.05）;胰岛原代细胞分泌胰岛素显著增加（P＜0.05）。结论 姜黄素可以保护糖尿病大鼠胰岛细胞正常形态,维持胰岛细胞功能,减轻糖尿病大鼠症状,其机制可能与调控NF-κB信号通路有关。     

磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶信号通路参与核因子-κB受体活化因子配体诱导的MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移

目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞迁移中的作用。方法 Transwell法测定RANKL刺激后MDA-MB-231细胞迁移能力的改变。蛋白印迹法检测MDA-MB-231细胞表面RANK蛋白的表达及RANKL刺激后pAkt及Akt的表达;检测数据用x珚±s表示,采用SPSS 16.0软件进行t检验。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强,RANKL的圈套受体骨保护素(OPG)可阻断RANKL诱导的细胞迁移(P<0.01)。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Akt表达升高,PI3K抑制剂LY294002抑制RANKL诱导的细胞迁移(P<0.01)。结论 PI3K/Akt信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移。     

商陆皂苷甲抑制TLR4/NF-κB信号通路改善大鼠动脉粥样硬化的作用研究

目的 研究商陆皂苷甲（EsA）对动脉粥样硬化（AS）大鼠的作用及机制。方法 将SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、辛伐他汀片（SIMT,10mg·kg^-1,阳性对照）组和EsA高、低剂量（10、2.5mg·kg^-1）组,每组6只。对照组给予普通饲料,其余各组以高脂饲料联合ip7×10⁵U·kg^-1维生素D₃（在第3天注射）制备AS模型。造模的同时ip给药,每天1次。采用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和白细胞介素-1β（IL-1β）水平;HE染色法观察胸主动脉病理变化;Western blotting法检测胸主动脉Toll样受体4（TLR4）和髓样分化因子88（MyD88）蛋白表达;免疫组化法检测胸主动脉核因子κB（NF-κB） p65阳性细胞表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠血清中TC、TG、LDL-C、TNF-α、IL-6和IL-1β水平显著升高（P＜0.01）,HDL-C水平显著降低（P＜0.01）;胸主动脉血管内皮损伤严重,可见明显蓝色钙状斑块;胸主动脉TLR4和MyD88蛋白表达以及NF-κB p65阳性细胞表达显著升高（P＜0.01）。与模型组比较,EsA高、低剂量组大鼠血清血脂和炎性因子水平明显改善（P＜0.05、0.01）;胸主动脉血管内皮大致恢复正常,蓝色钙状斑块减少;胸主动脉TLR4和MyD88蛋白表达以及NF-κB p65阳性细胞表达显著降低（P＜0.05、0.01）。结论 EsA可能通过抑制TLR4/NF-κB信号通路对大鼠AS发挥改善作用。     

Spotlight from the American Society for Preventive Cardiology on Key Features of the 2018 AHA/ACC/AACVPR/AAPA/ABC/ACPM/ADA/AGS/APhA/ASPC/NLA/PCNA Guidelines on the Management of Blood Cholesterol

The 2018 AHA/ACC/AACVPR/AAPA/ABC/ACPM/ADA/AGS/APhA/ASPC/NLA/PCNA Guideline on the Management of Blood Cholesterol retains focus on recommendations for statin treatment in the original four statin-eligible groups [those with atherosclerotic cardiovascular disease (ASCVD), diabetes, low-density lipoprotein cholesterol (LDL-C) ≥ 190 mg/dL, and higher risk primary prevention] without the use of treatment initiation or target LDL-C levels from the earlier 2013 American College of Cardiology/American Heart Association (ACC/AHA) guideline, but has several new features. First, patients with primary prevention are divided into those who are at low (< 5%), borderline (5% to < 7.5%), intermediate (7.5% to < 20%), and high (≥ 20%) risk based on the ASCVD risk estimator. Moreover, the new guideline goes further to consider a wider range of factors [now called “risk enhancers”—premature family history of ASCVD, persistently high LDL-C, chronic kidney disease (CKD), metabolic syndrome, conditions specific to women, inflammatory diseases, and high-risk ethnicities] that can be used to better inform the treatment decision. Moreover, more detailed recommendations on how the results of coronary calcium scanning can be used to inform the treatment decision are provided, including how it may be used to “de-risk” certain patients for delaying or avoiding the use of statin therapy. There are also specific sections for cholesterol management in other patient subgroups including women, children, certain ethnic groups, those with CKD, chronic inflammatory disorders and HIV, as well as discussion on the management of hypertriglyceridemia. Importantly, for persons with known ASCVD, a distinction is made for those who are at “very high risk” based on having had two major ASCVD events or one major event and two or more other high risk conditions, such as diabetes or other major risk factors, or bypass surgery or percutaneous intervention. Finally, the concept of a threshold LDL-C for initiating a non-statin therapy (after considering highest tolerated statin dosage) is provided, with ezetimibe recommended as the key non-statin to be added if the LDL-C still remains ≥ 70 mg/dL for all ASCVD patients, and in those who are at “very high risk”, further consideration for using a proprotein convertase subtilisin/kexin type 9 (PCSK9) inhibitor. While the new guideline does have greater detail (and arguably, complexity), the refinements provide a strategy for guiding the clinician to target both statin and non-statin therapy to those most likely to derive benefit.     

蜘蛛香的化学成分研究

目的：研究蜘蛛香Valeriana jatamansi的化学成分。方法：通过各种色谱手段（Silica gel、ODS、HPLC）对蜘蛛香甲醇提取物进行分离纯化,通过¹H-NMR、¹³C-NMR等波谱技术确定化合物的结构。结果：分离并鉴定了4个含氯元素的环烯醚萜类化合物,分别为rupesin B（1）、chlorovaltrate（2）、volvaltrates B（3）、1,5-dihydroxy-3, 8-epoxyvalechlorine A（4）。结论：化合物1～3为首次从植物蜘蛛香中分离得到。     

锁阳药理作用的研究进展

锁阳为我国传统补肾类中药,是锁阳科植物锁阳Cynomorium songaricum Rupr.的肉质茎。锁阳中含有多种化学成分,具有增强组织耐低氧能力、抗疲劳、保肝护肝、抗骨质疏松及对神经系统的保护等多种药理作用。综述了锁阳药理作用的研究进展,为今后锁阳的进一步研究提供参考。     

杜鹃素在大鼠体内的药动学研究

目的 研究杜鹃素在正常大鼠体内的药动学特征。方法 杜鹃素单剂量ig给予大鼠后,采用HPLC法测定给药后不同时间点大鼠血浆中的杜鹃素,通过DAS软件程序模拟计算,得出杜鹃素在大鼠体内相应的药动学参数。结果 杜鹃素在大鼠体内的药动学模型符合二室模型,主要药动学参数为：t_1/2α＝（0.33±0.10）h,t_1/2β＝（15.22±8.98）h,CL/F＝（14.89±3.45）L/(h?kg),C_max＝（1.61±0.14）mg/L,T_max＝（0.25±0.01）h,MRT_(0-t)＝（2.35±0.08）h,AUC_(0-t)＝（3.06±0.16）mg?h/L。结论 本研究建立的HPLC方法专属性强,简便、准确,可用于杜鹃素在大鼠体内的药动学研究;大鼠ig给予杜鹃素后,其在血浆中分布较快,半衰期较短。     

药动药效联合模型定量分析方法的研究现状

药动药效联合模型在药理学研究中正在发挥越来越重要的作用。本文介绍了近年来该领域定量计算方面的一些新概念和新进展，包括药动学和药效学模型、药动药效联合模型的四个属性、Sheiner效应室理论应用时应该注意的问题及药动药效联合模型的计算程序等。