L型Ca2+通道和心脏

电压依赖性L型Ca2+通道是心肌细胞正常兴奋和兴奋-收缩偶联中允许Ca2+内流的多亚单位跨膜蛋白.多种受体和信号通路参与钙电流(Ca2+current,Ica)的调节,主要通过蛋白激酶A和蛋白激酶C通路调节L型Ca2+通道.Ica的调节存在蛋白激酶A和蛋白激酶C通路的交叉作用.Ica的准确调节需要有正常的心功能,在心脏疾病中这些调节通路改变很重要.     

炎患儿右心室功能与心肌细胞内Ca2+代谢关系的研究

目的 观察肺炎患儿心细胞跨膜L型钙电流与细胞内Ca^2 含量的动态改变,探讨肺炎合并心力衰竭的发生机制。方法 取50日龄Wistar大鼠, 经气管注入金黄色葡萄球菌菌液,建立肺炎模型。急性酶解分离出右室心肌细胞。（1）以Fluo-3-AM标记细胞内的Ca^2 ,分为生理盐水对照组、接种后24h肺炎组、72h肺炎组。应用粘附细胞仪研究肺炎对静息和收缩状态下细胞内Ca^2 含量的影响。（2）另分为接种后24、120h肺炎组及相应对照组,记录各组细胞膜L型钙电流。结果（1）比较静息状态同细胞内Ca^2 含量,24h肺炎组无显著改变,而72h显著增高（P＜0．001）;加入KCl后2．5min,24h肺炎组心肌细胞内Ca^2 含量增加比率显著低于对照组（P＜0．05）。（2）24h肺炎组与对照组电流峰值无差异,120h则显著高于对照组（P＜0．001）。结论 肺炎时右主室心肌细胞发生钱代谢紊乱,使心肌收缩、舒张功能受损。     

慢性缺氧对幼鼠心肌CaM CaMKII及细胞内Ca2+活动的影响

目的：急性缺血缺氧可致心功能受损和心律失常,钙离子在其中起重要作用,慢性缺氧对心功能及心肌细胞内钙离子活动同样产生影响,但机制不同。该研究拟通过慢性缺氧动物模型,研究慢性缺氧对心肌细胞内钙调素（calmodulin, CaM）、钙/钙调素依赖性蛋白激酶II （calcium/calmodulin-dependent protein kinase II ,CaMKII）的表达及其对细胞内Ca2+活动的影响,深入了解慢性缺氧对心脏功能及电活动的影响机制。方法：通过吸入低浓度含氧气体（FiO2：10％）建立慢性缺氧大鼠动物模型。在实验1周和3周时,应用RT-PCR,Western Blot方法分别检测对照组和慢性缺氧组动物心肌细胞内CaM和CaMKIIγ、CaMKIIδ mRNA和蛋白表达;分离并培养正常心肌细胞和缺氧3周细胞,应用激光共聚焦法分别检测两种心肌细胞内Ca2+活动,同时应用CaMKII特异性抑制剂KN-62,观察CaMKII在慢性缺氧下对心肌细胞内Ca2+活动的影响。结果：实验1周和3周时,慢性缺氧大鼠心肌细胞内CaM和CaMKIIγ、CaMKIIδ的mRNA和蛋白表达均较正常动物高（P<0.01）;在缺氧1周和3周组动物间CaM和CaMKIIδ也存在差异（P<0.01）,但CaMKIIγ无差异（P>0.05）。激光共聚焦研究发现,慢性缺氧心肌细胞内Ca2+活动其钙波振幅虽和正常心肌细胞无差异(P>0.05),但钙波时程延长（P<0.01）;应用KN-62后,慢性缺氧动物钙波振幅和时程改变较明显（P<0.01）。 结论：慢性缺氧可使大鼠心肌细胞内CaM和CaMKII合成代偿性增加,保持大鼠心肌细胞内钙稳态,从而在一定时期内维持心功能稳定。但随缺氧时间延长,心功能可受损并可致心律失常。     

[Ca2+]i介导胆红素神经毒性与NMDA受体拮抗剂GAPA治疗作用

探讨胆红素神经毒性脑组织细胞内Ca     

Perinatal and postnatal expression of Cav1.3 α1D Ca²⁺ channel in the rat heart

The novel Cav1.3 (α1D) L-type Ca2? channel plays a significant role in sinoatrial (SA) and atrioventricular (AV) nodes function and in atrial fibrillation. However, the characterization of α1D Ca2? channel during heart development is very limited. We used real-time RT-PCR, Western blotting, and indirect immunostaining to characterize the developmental expression and localization of α1D Ca2? channel in rat hearts. Both protein and mRNA levels of α1D Ca2? channel decreased postnatally. Two forms of α1D Ca2? channel protein (250 and 190 kD) were observed, with the full-length (250 kD) channel protein being predominant in the prenatal stages. Both Western blots and confocal imaging demonstrated that α1D Ca2? channel protein was expressed in both atria and ventricles at fetal and neonatal stages but was absent in the adult ventricles. Interestingly, α1D Ca2? channel was also found at the nucleus/perinucleus of immature but not adult atrial cells. Furthermore, the nuclear staining was reproduced in adult atrial cell line, HL-1 cells, which possess immature properties. The data are first to show that α1D Ca2? channel has unique age-dependent expression profile and subcellular localization in the heart, suggesting a developmental stage-dependent specific function.     

缺氧性肺动脉高压新生儿血清HIF-1α、ET-1及Ca2+变化及意义

目的：探讨血清缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、内皮素-1（ET-1）及血清钙（Ca2+）水平在新生儿缺氧性肺动脉高压（HPH）中的变化及意义。方法：HPH组75例（轻度29例、中度25例、重度21例）,对照组为非HPH住院新生儿22例,所有新生儿均于生后24 h内行超声心动图测定肺动脉收缩压（PASP）,用ELISA法测定血清HIF-1α、ET-1水平,离子选择电极法测定血清Ca2+浓度。结果：HPH 3组患儿血清HIF-1α及ET-1水平较对照组明显增高（P<0.01）,并随PASP增加而递增,分别和PASP呈正相关(rHIF-1α=0.75, P<0.01;rET-1=0.56, P<0.05);重度HPH患儿血清Ca2+水平明显低于对照组（P<0.05）,HPH患儿血清Ca2+水平与PASP无相关性。结论：HPH新生儿血清HIF-1α、ET-1水平与PASP存在相关性,HIF-1α、ET-1参与了HPH的发生,重度HPH血清Ca2+水平较对照组明显降低,提示血清Ca2+在重度HPH的形成过程中发挥了一定的作用。     

胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2+含量的变化及MgSO4的拮抗作用

目的　探讨胆红素诱导原代培养神经细胞内Ca2 + 含量的变化 ,以及MgSO4 的拮抗作用。方法　采用胎鼠大脑皮层细胞作原代神经细胞培养 ,观察 10 0 μmol/L胆红素对不同成熟程度神经细胞内Ca2 + 含量的影响。原代培养神经细胞经Fura- 2 /AM负载 ,荧光图像分析测定细胞内Ca2 + 含量。结果　未成熟神经细胞 (培养2天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 75 .3nmol增加到 32 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 增加到 40 0 .7nmol;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 不能逆转。成熟神经细胞 (培养 8天 )暴露于 10 0 μmol/L胆红素 4h ,细胞内Ca2 + 从 70 .6nmol增加到 15 0 .8nmol;继续暴露 4h ,细胞内Ca2 + 不再增加 ;去除胆红素暴露 ,细胞内Ca2 + 浓度可显著降低。培养液中Mg2 + 加至 2mmol/L可减轻胆红素诱导的神经细胞内Ca2 + 含量变化。结论　胆红素可诱导原代培养的、未成熟的神经细胞Ca2 + 超载 ,MgSO4 可拮抗胆红素诱导的神经细胞Ca2 + 超载。     

左向右分流型先天性心脏病合并心力衰竭患儿肌浆网Ca2+-ATP酶mRNA表达的研究

婴幼儿左向右分流型先天性心脏病 (简称先心病 )合并心力衰竭 (简称心衰 ,ＣＨＦ)是儿科临床常见的心血管疾病 ,特别是中、重度心衰患儿具有较高的病死率。除血流动力学改变外 ,造成心衰的分子机制尚不明确。新近研究资料表明 ,心肌细胞肌浆网Ｃａ2 + ＡＴＰ酶基因表达水平的改变可能是心衰发生的关键因素 ,但国内尚未见有关婴幼儿先心病合并心衰时肌浆网Ｃａ2 + ＡＴＰ酶ｍＲＮＡ表达变化的研究报道。对象1 .患儿资料 :48例先心病 (房间隔缺损 1 7例、室间隔缺损 31例 )患儿均系武汉市儿童医院 1 999年 4月～ 2 0 0 0年3月住院接受心脏直…     

Einige Studien über Ca und anorganischen P in Serum und Ultrafiltrat bei parenteraler Zuführung verschiedener Stoffe

Ohne Zusammenfassung     

短周期动态压应力通过Ca2+通道调控生长板软骨细胞Sox9及Ⅱ型胶原表达

目的 研究短周期动态压应力对体外培养的大鼠生长板软骨细胞Sox9、Ⅱ型胶原mRNA及蛋白表达水平的影响,探讨L-型钙离子通道是否参与该力学信号转导过程.方法 分离并体外培养两周龄SD大鼠生长板软骨细胞,传代后的生长板软骨细胞分为4组:对照组、单纯压应力组、硝苯地平组及压应力联合硝苯地平组.其中对照组不施加力学及药物干预,单纯压应力组通过四点弯曲力学加载仪予以周期性压应力(2 000με,1.0 Hz)干预,硝苯地平组添加L-型钙离子拮抗剂硝苯地平(10 μmol/L)但不施加力学干预,压应力联合硝苯地平组添加硝苯地平(10 μmol/L)并施加周期性压应力干预(2000με,1.0 Hz).实验处理6h,运用荧光定量PCR及Western blot方法检测各组细胞的Sox9、Ⅱ型胶原mRNA和蛋白表达情况.各组细胞行Fluo-3/AM染色,激光共聚焦显微镜观察并分析细胞内钙离子的荧光强度.使用SPSS17.0软件对数据进行统计学分析.结果 单纯压应力组生长板软骨细胞的Sox9的mRNA与蛋白表达水平较对照组分别增加(82.97±24.95)％和(79.67±26.03)％,差异有统计学意义(P＜0.05);Ⅱ型胶原的mRNA与蛋白表达水平较对照组分别增加(118.93±34.40)％和(95.93±29.87)％,差异有统计学意义(P＜0.05).压应力联合硝苯地平组生长板软骨细胞的Sox9、Ⅱ型胶原的mRNA与蛋白表达水平低于单纯压应力组(P＜0.05),但高于硝苯地平组(P＜0.05).激光共聚焦显微镜能清晰观察到细胞内钙离子染色后产生的荧光,但各组平均荧光强度差异无统计学意义(P＞0.05).结论 适当的短时间周期性压应力能上调生长板软骨细胞Sox9及Ⅱ型胶原mRNA与蛋白的表达水平,钙离子通道可能参与该力学信号转导过程.