Nrf2抑制缺血性脑卒中后铁死亡的研究进展

缺血性卒中是脑血管疾病的主要类型,通常导致全球老龄化人口死亡或残疾。这一事件的发生会引发神经元死亡并造成严重的功能障碍。铁死亡作为一种以脂质过氧化物积累为特征的细胞死亡方式,是缺血性脑卒中后神经损伤的重要原因。核因子E2相关因子2(Nrf2)是细胞抗氧化反应的主调节因子。Nrf2不仅通过缓解氧化应激反应来减轻缺血性卒中造成的神经损伤,还是铁死亡相关基因的重要调节器,提示Nrf2可能抑制缺血性脑卒中后铁死亡。文章以Nrf2抑制铁死亡作为切入点,通过缺血性脑卒中、铁死亡和Nrf2三者之间的联系就Nrf2对缺血性脑卒中后神经损伤的保护作用进行综述。     

脑泰方对血红蛋白诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及机制

目的探讨脑泰方对体外血红蛋白(Hb)诱导的大鼠皮质神经元损伤的保护作用及其机制。方法原代培养新生SD大鼠皮质神经元,采用Hb诱导神经元模拟建立脑出血后神经元损伤细胞模型;实验设正常组、模型组、空白血清对照组、去铁胺组和10%脑泰方含药血清组。采用CCK8法检测各组细胞活力;采用Calcein-AM染色法检测各组细胞内铁含量;采用免疫荧光与高内涵细胞成像分析技术(HCA)检测各组神经元转铁蛋白(Tf)及其受体(TfR)、二价金属离子转运体(DMT-1)蛋白表达情况;采用酶联免疫吸附法检测各组上清液中脂质活性氧自由基(lipid-ROS)含量;采用real-time PCR法检测各组Tf、TfR和DMT-1 mRNA表达水平。结果与正常组比较,模型组神经元细胞活力明显降低(P0.01),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平显著升高(P0.01),Tf、TfR及DMT1蛋白及mRNA表达水平明显上调(P0.01)。与模型组比较,去铁胺组和10%脑泰方含药血清组细胞活力显著提高(P0.01或P0.05),细胞内铁含量、细胞上清液中lipid-ROS水平明显降低(P0.01),Tf、TfR及DMT-1蛋白及其mRNA表达显著下调(P0.01或P0.05),去铁胺组和10%脑泰方含药血清组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论脑泰方可通过调节Hb诱导的大鼠皮质神经元细胞铁代谢,减轻神经元铁超载及lipid-ROS累积,从而提高神经元细胞活力;其作用与铁死亡抑制剂去铁胺一致,提示脑泰方可能通过抑制脑出血后神经元铁死亡而发挥神经保护作用。     

铁死亡在颅脑外伤中的研究进展

颅脑外伤（traumatic brain injury,TBI）是由外力引起的大脑结构和生理功能破坏的损伤性疾病。它是全世界导致患者死亡和残疾的主要原因。颅脑外伤包括原发性和继发性损伤。铁含量的过度积累和铁死亡进程高度参与继发性脑损伤的病理生理过程。铁死亡是一种可调节的程序性细胞死亡,因为脑内铁积累增加导致脂质过氧化、活性氧（reactive oxygen species,ROS）产生、线粒体功能障碍和神经炎症反应,从而导致神经元的损伤。因此,减少铁的过度积累和抑制脂质过氧化等因素可能是一种有前途的治疗方法。铁螯合剂可以消除过量的铁,减轻部分颅脑外伤的临床症状。文章将重点讨论在颅脑外伤中的铁含量和铁死亡的机制,以拓宽对铁螯合剂治疗脑外伤的认识,为进一步的颅脑外伤治疗寻找新的研究方向。     

Effect of Bmk venom microinjected into LS on electric activities of nociceptive neurons in Pf of rat

目的：研究外侧隔核是否是蝎毒产生中枢镇痛作用的重要部分之一。方法：用玻璃微电极记录束旁核的单位放电;通过不锈钢套管向外侧隔核内微量注0.03%蝎毒。结果：外侧隔核内微量注射0.03%蝎毒可以明显地减弱束旁核内的痛兴奋神经元和痛抑制神经元对伤害性刺激的反应。结论：外侧隔核是蝎毒产生中枢镇痛作用的重要部位之一。     

Effect of Bmk venom microinjected into LS on electric activities of nociceptive neurons in Pf of rat

目的 :研究外侧隔核是否是蝎毒产生中枢镇痛作用的重要部分之一。方法 :用玻璃微电极记录束旁核的单位放电 ;通过不锈钢套管向外侧隔核内微量注射 0 .0 3%蝎毒。结果 :外侧隔核内微量注射0 .0 3%蝎毒可以明显地减弱束旁核内的痛兴奋神经元和痛抑制神经元对伤害性刺激的反应。结论 :外侧隔核是蝎毒产生中枢镇痛作用的重要部位之一。     

铁死亡在脑卒中中作用的研究进展

<正>2017年中国疾病预防控制中心系统分析指出，脑卒中、缺血性心脏病、肺癌、慢性阻塞性肺病和肝癌是当年造成死亡损失健康生命年(YLLs)最多的疾病^[1]。脑卒中作为全球第二大死亡原因，也是导致我国成年人死亡和残疾的主要原因，严重威胁人类健康，给患者、家庭和社会带来了沉重负担。脑卒中(Stroke)主要是以脑血管病变损伤并伴有大量神经元死亡的脑血管疾病，尽管目前的治疗方案可立即拯救生命、降低致残率、延缓病情进展，但往往难以逆转神经元损伤^[2]。近来研究发现脑卒中后神经元细胞发生铁死亡，抑制铁死亡可防止神经元细胞死亡并降低脑卒中后继发性脑损伤，改善患者预后^[3]。因此，本文以铁死亡为着眼点，对铁死亡发生机制、铁死亡与出血性和缺血性脑卒中相关性研究进展方面作一综述，以期为靶向铁死亡指导脑卒中的治疗提供方向。     

小胶质细胞在酒精性脑损伤中的作用

饮酒对中枢神经系统有重大影响,小胶质细胞是脑内原位免疫效应细胞,它在乙醇引起的神经毒性中有重要作用,可导致神经元死亡与退行性变;小胶质细胞有利于维持稳态而不是导致神经退行性变,小胶质细胞活化是乙醇引起损害的结果而不是损害的原因。本文对乙醇引起的神经元死亡和退行性变中小胶质细胞的反应及相应机制作一综述。     

铁死亡相关机制在食管癌中的研究进展

近年来食管癌在我国的发病率呈现明显下降趋势，但其发现晚、致死率高仍然是亟待攻克的难题。铁死亡是一种新型调节性的细胞死亡方式，诱导铁死亡的主要方式是游离铁的堆积，自由基的产生以及脂质过氧化物的沉积。本文总结了部分基因和相关的非编码RNA可能成为影响食管癌进展和治疗的生物靶点；在食管癌治疗方面，激活诱导铁死亡有助于减轻化疗耐药以及提高放疗的效应，近年的研究也发现一些中草药能通过诱导铁死亡发挥抗肿瘤作用。同时，本文总结了与食管癌预后相关具有潜在研究价值的铁死亡相关基因。希望通过对铁死亡相关机制的深入挖掘研究，为未来食管癌的预后评估和治疗方向提供新思路。     

自由基损伤与神经系统疾病

该文系国家继续教育课程《自由基清除剂在神经疾病中的治疗作用》学习辅导资料。负责人:天坛医院副院长王拥军教授自由基损伤的机制过氧化物和氧化氮通过许多独立机制介导氧化损伤,产生细胞毒性作用,包括:脂质过氧化物、D N A损伤,激活抗多聚二磷酸核糖腺苷抗体poly(ADP-ribose)和聚腺苷二磷酸核糖基聚合酶polymerase(PARP)。一旦自由基产生,自由基就可能和所有的细胞大分子反应,导致脂质体过氧化、DNA和蛋白质的氧化。导致膜损伤,蛋白质功能失损,诱导细胞凋亡等。脑尤其容易被自由基损伤的原因由于以下几种原因,大脑尤其容易被自由基损伤:首先,它有丰富的多不饱和脂肪酸,多不饱和脂肪酸特别容易被自由基导致的过氧化反应损伤。其次,抗氧化物酶含量低,如过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶。另外,脑组织含有铁,虽然它的铁含量不是很高,但铁离子可以刺激自由基的产生。脑卒中的一般支持治疗和并发症的治疗1.1气道、通气支持和给氧对轻到中度的脑卒中患者,无明显低氧血症的,通常不推荐常规给氧。推荐给低氧患者给氧。在意识水平下降或有气道受累的急性卒中患者的治疗中推荐进行气道支持和辅助通气。1.2血压如有治疗指征,降压治疗亦应谨慎...     

孕烯醇酮唾液酸苷对β-淀粉样蛋白致神经元损伤的保护

阿尔茨海默病(AD)是一种老年神经系统退行性疾病。有学者认为:β-淀粉样蛋白(Aβ)形成聚集,产生聚集依赖的(aggregation-dependent)神经元毒性作用是产生AD的关键步骤[1]。Aβ的一个片段Aβ25-35可产生自由基和氧化应激,增加神经元对NMDA的敏感性,造成神经元内Ca2+常态水平的不稳定,使胞内[Ca2+]升高,从而产生神经元细胞膜的损伤和神经变性,因此实验研究中常以Aβ25-35作为损伤物质,造成对神经元等的损伤。唾液酸是细胞表面的一个九碳糖,与糖蛋白和糖脂结合,参与维持细胞完整性、神经营养和细胞轴束生长作用,但它不易透过血-脑屏障。…     

大剂量一氧化氮合酶抑制剂在局灶性脑缺血中对神经细胞凋亡的影响

目的：研究一氧化氮(NO)在局灶性脑缺血再灌流过程中对神经细胞的作用机制及NO与细胞凋亡的关系。 方法：利用光镜、电镜观察N-硝基-左旋-精氨酸（N-nitro-L-arginine,NNLA）干预后局灶脑缺血大鼠脑组织的病理学改变。结果：大剂量给予NNLA干预后,手术侧电镜下半影区神经细胞改变较手术对照组明显,神经细胞核周水肿、溶解和小胶质细胞核染色质凝集,以细胞坏死为主。结论：过多的NO可能通过两种方式导致神经细胞损伤,其一是过量NO以活性氧自由基(ROS)表达式直接攻击神经细胞,是神经细胞损伤的直接毒性分子。其二是过少的NO不足以维持脑血管的基础张力,脑血流下降,导致缺氧,引起神经细胞损伤。     

C57black/6小鼠全脑缺血模型Fas-L和Caspase-3的表达

目的应用C57black/6小鼠制备全脑缺血模型,观察脑缺血后大脑皮质、丘脑、下丘脑杏仁核部位Fas-L和Caspase-3基因的表达。方法双侧颈总动脉夹闭(bilateral common carotid artery occlusion,BCCAO)15 min,造成全脑缺血,24 h后取脑组织进行Fas-L和Caspase-3免疫组织化学染色。结果Fas-L阳性细胞广泛分布在大脑皮质、丘脑、下丘脑、杏仁核。除丘脑外,缺血组其他部位Fas-L阳性神经元细胞密度均显著高于假手术组(P<0.01);缺血组各区域细胞染色灰度值均显著低于假手术组(P<0.01)。Caspase-3阳性细胞在大脑皮质、丘脑、下丘脑均有表达,缺血组各区域阳性神经元细胞密度均显著高于假手术组(P<0.05,P<0.01);缺血组各区域细胞染色灰度值均显著低于假手术组(P<0.01)。结论双侧颈总动脉夹闭法可复制C57black/6小鼠全脑缺血模型,缺血再灌注24 h后,Fas-L和Caspase-3基因在多个区域表达增加。提示该全脑缺血模型中,神经元死亡信号传导需要Caspases基因家族成员表达的加强,且存在缺血后神经元死亡信号传导的外源性通路。     

脑室内出血后凝血酶对脑室周围组织的毒性损伤

目的 探讨脑室内出血后凝血酶对脑室周围组织是否存在毒性损伤作用。方法 将凝血酶溶液注入鼠脑室内后，测定基底节与丘脑区域的脑血流量、血脑屏障通透性，另外，将鼠脑细胞置入含有凝血酶的培养液中培养，测定培养液中孔酸脱氢酶的浓度。结果 凝血酶导致血脑屏障的破坏与脑细胞死亡，而对脑血流量没有明显影响。结论 脑室内出血后，凝血酶对脑室周围组织存在性损伤，血脑屏障的破坏与细胞毒性作用可能是这一损伤的主要病理机制     

铁缺乏对学习记忆能力的影响及其机理的实验研究

用低铁饮食建立铁缺乏大鼠模型，观察铁缺乏对大鼠学习记忆能力的影响及脑组织生化、超微结构的改变。结果：１．铁缺乏非贫血大鼠学习记忆能力有降低趋势，而缺铁性贫血大鼠学习记忆能力明显降低；２．铁缺乏非贫血大鼠脑组织铁含量及单胺氧化酶活性显著低于对照组，大脑皮层去甲肾上腺素及５－羟色胺含量高于对照组，海马５－羟吲哚乙酸含量低于对照组，缺铁性贫血大鼠除以上改变更加明显外，海马去甲肾上腺素也明显高于对照组；３．铁缺乏非贫血大鼠海马ＣＡ３区神经胶质细胞足突肿胀，细胞器稀疏，缺铁性贫血大鼠神经胶质细胞变性更加严重，并且神经细胞的结构也受到破坏。提示脑组织单胺类神经递质的代谢异常及超微结构的改变可能是铁缺乏大鼠学习记忆障碍的物质基础之一；     

电刺激小脑顶核在脑缺血大鼠中的内源性神经保护机制

成熟神经元不可再生,完全缺血5 min即可导致神经元不可逆性死亡。电刺激小脑顶核具有脑保护作用,能提高脑缺血大鼠对缺血、缺氧的耐受性,但其具体机制不明。主要从抑制炎性反应、降低缺血半暗带的电兴奋性、抑制神经元凋亡、促进结构重建、功能恢复、促进内源性神经干细胞生长等方面就电刺激小脑顶核的内源性神经保护机制进行阐述,尤其关注到它促进内源性神经干细胞生长对缺血性脑血管病的意义。     

益气活血药对脑缺血再灌注模型脑水肿及超微结构的影响

为探讨益气活血方药治疗缺血性中风的药理机制,根据益气活血法选用北芪、益母草、毛冬青等组成益气活血口服液,观察其对大鼠缺血善灌注大脑中动脉闭塞（MCAO）模型的脑水肿及超微结构、神经病学评分的影响。结果：益气活血口服液能不同程度降低缺血后脑组织含水量,减轻脑缺血再灌注早期所致的神经损伤症状,减轻脑组织超微结构的损害。提示：益气活血药可通过保护血管内皮细胞功能、基膜的完整性,改善微循环,从而减轻脏水肿程度,并对迟发性神经元坏死有保护作用;也为益气活血口服液的临床应用提供了实验依据。     

葛根素对急性缺血脑神经细胞损伤的保护及对HSP70蛋白表达的干预作用

目的探讨葛根素对大鼠急性脑缺血损伤的保护作用和对HSP70表达的影响及其作用机制。方法采用闭夹大脑中动脉造成局部脑缺血模型,对实验标本作HE染色及用免疫组化SP法作HSP70染色,观察其组织病理学改变及HSP70表达情况。结果葛根素干预组死亡神经元数明显少于单纯缺血组,脑水肿程度较轻,而HSP70表达强度显著强于单纯缺血组。葛根素干预暴露因素与神经细胞死亡呈显著负相关（P〈0．01）。结论葛根素对大鼠急性脑缺血损伤有保护作用,其作用机制与上调HSP70的表达有关。     

血黏度增高大鼠血清对脑细胞的毒性作用

目的探讨血黏度增高（HBV）大鼠血清致脑细胞钙超载及死亡的毒性作用。方法高分子右旋糖酐制作HBV动物模型，HBV持续不同时间的大鼠血清为干预因素，分别干预原代培养大鼠脑细胞，激光共聚焦显微技术观察脑细胞内游离钙离子变化及致脑细胞死亡情况。结果HBV1—5d的大鼠血清干预脑细胞内游离钙离子荧光强度30S后达到高峰，荧光强度及其持续时间与HBV的持续时间呈正相关，并出现碘化丙啶着色的细胞核，其数量随HBV的持续时间而增多。结论右旋糖酐性HBV大鼠血清含有致体外培养脑细胞毒性因素，持续钙超载是导致脑细胞死亡的机制之一。     

缺血性脑卒中的铁死亡作用机制研究进展*

缺血性脑卒中是一种发病率和致残率都较高的疾病，但其发生机制尚不明确，治疗手段也很有限。铁死亡是一种依赖于铁的新型细胞死亡方式，近年来的研究结果表明铁死亡在缺血性脑卒中的损伤过程中介导着神经细胞的死亡，能诱发和加重脑缺血后的损伤，而抑制铁死亡会显著改善和减轻脑缺血诱发的神经功能损伤。本文综述了铁死亡的主要机制、铁死亡对缺血性脑卒中的影响，以及通过调控铁死亡改善缺血性脑卒中后损伤的研究，以期为缺血性脑卒中的临床研究和治疗提供新的方向。     

垂体腺苷环化酶激活肽对大鼠创伤性脑损伤的保护作用

目的观察损伤后给予不同剂量的垂体腺苷环化酶激活肽（PACAP）对大鼠脑创伤引起的神经凋亡等继发性损伤的影响。方法采用创伤性脑损伤（TBI）模型,侧脑室注射PACAP,观察脑组织含水量,丙二醛（MDA）含量,超氧化物歧化酶（SOD）活性,流式细胞术（FCM）检测神经细胞凋亡。结果与对照组相比,PACAP治疗组减轻脑水肿,降低MDA含量,提高SOD活性,降低神经细胞凋亡的比例。不同剂量PACAP治疗组的结果有差异。结论PACAP对大鼠脑创伤后的继发性损伤具有保护作用。