妊娠高血压综合征外周血小板活化程度及其临床意义

目的探讨不同程度妊娠高血压综合征(妊高征)患者外周血小板活化程度的改变及其临床意义。方法以3种血小板膜糖蛋白单克隆抗体CD62p、CD61、CD41标记50例正常孕妇和56例妊高征患者外周血小板,应用流式细胞仪检测。结果正常孕妇血小板CD62p、CD61及CD41的检测值分别为7.16%±3.10%、5.60%±2.78%及8.31%±4.31%;妊高征随程度的加重3种成分呈增高趋势,且重度组检测值显著高于正常组和轻、中度组(P<0.05、P<0.01)。结论妊高征外周血小板CD62p、CD61及CD41检测值显著增加,标志着血小板活化程度明显增强,因此能够预示胎儿宫内窘迫的发生。     

糖尿病视网膜病变与血小板活化的关系

目的 :探讨Ⅱ型糖尿病患者血小板活化与糖尿病视网膜病变的关系。方法 :对61例Ⅱ型糖尿病患者 ,其中有糖尿病视网膜病变28例 ,无视网膜病者33例 ,正常对照组32例。应用流式细胞术测定受检者的血小板糖蛋白 ,包括a -颗粒膜蛋白(CD62P)、溶酶体颗粒膜糖蛋白 (CD63)、血小板膜表面糖蛋白 (CD41、CD61、CD42b)、凝血酶敏感蛋白 (TSP) ,同时采用放免法检测血浆内皮素和胰岛素。结果 :血小板CD62P、CD63、TSP)的平均阳性百分率 ,糖尿病有视网膜病变组分别为 (1 89±0 97) %、(7 20±3 24) %、(77 15±11 26) % ,糖尿病无视网膜病变组分别为 (1 49±0 73) %、(6 12±2 82) %、(70 05±9 32) % ,正常对照组分别为 (0 54±0 34) %、(2 84±1 12) %、(66 3±8 4) %。显示有视网膜病变组高于无视网膜病变组 (P<0 005) ,糖尿病组高于正常对照组 (P<0 05)。CD41、CD61的平均荧光道数 (MnX)糖尿病有视网膜病变组分别为 (16 88±7 09) %、(7 91±2 01) % ,糖尿病无视网膜病变组分别为 (14 32±6 28) %、 (6 55±1 90) % ;正常对照组分别为 (9 49±2 10) %、 (5 26±0 99) %。三组结果相比差异均有非常显著意义 (P值均<0 005)。血小板CD62P、CD63、CD61、TSP与血浆内皮素呈显著正相关(r=0.46、0.48、0.37和0.35,P值均<0     

妊娠高血压综合征患者血清中可溶性Fas水平的测定及其临床意义

目的探讨妊高征孕妇血清中可溶性Fas(sFas)的水平及意义。方法采用ELISA法测定42例妊高征孕妇(轻度7例,中度16例,重度19例)血清sFas水平,并与同期30例正常足月妊娠妇女相比较。结果(1)轻度、中度、重度妊高征组和正常妊娠组血清sFas含量分别为676.264±1.312pg/ml、874.563±1.429pg/ml、1106.587±1.287pg/ml和659.354±1.648pg/ml;(2)轻、中、重度妊高征组与正常妊娠组相比较,血清sFas含量差异有非常显著性(P.<0.001);(3)妊高征各组间比较,血清sFas含量差异有非常显著性(P<0.001)。结论随着妊高征病情加重,孕妇血清sFas水平也显著增高。提示妊高征孕妇体内存在Fas/Fas-L介导的淋巴细胞激活诱导的细胞凋亡,导致母体时胚胎的免疫排斥增强或细胞免疫不适当激活,从而导致妊高征的发生。孕妇血清sFas可以作为妊高征的预测指标之一。     

CD62p CD63 vWF在急性冠状动脉综合征中的作用

目的研究血小板活化和内皮功能在急性冠状动脉综合征(ACS)中的作用。方法采用全血流式细胞术测定急性冠状动脉综合征患者50例和正常对照组30名血小板胞质内α-颗粒上的膜糖蛋白(CD62p)、溶酶体膜糖蛋白(CD63),用酶联免疫吸附试验测定血浆血管性血友病因子(vonWillebrandfactor,vWF)。结果急性冠状动脉综合征组血小板表面活性标志蛋白CD62p(11.2±0.8)%、CD63(4.2±0.4)%和vWF(206±20)%表达均显著高于对照组(3.3±0.6)%、(1.5±0.4)%和(96±15)%(P<0.01)。结论急性冠状动脉综合征患者存在血小板活性增强和内皮功能异常,这些变化与急性冠状动脉综合征的病理过程有关。     

流式细胞术检测阿司匹林对冠心病患者血小板活化标志物的影响

目的：探讨冠心病患者及其服用阿司匹林前后血小板表面糖蛋白的变化及其意义。方法：采用流式细胞仪（flow cytometry，FCM）测定冠心病患者阿司匹林治疗前后的全血中血小板表面糖蛋白（CD62p／PAC-1）的表达率，采用自身对照分析阿司匹林对血小板表面糖蛋白的影响。结果：冠心病组治疗前的血小板表面糖蛋白PAC-1、CD62p的表达率分别为（10.4±6．2）％和（10．7±7．1）％，较健康对照组明显升高（P＜0．01）．经以阿司匹林为基础的抗血小板治疗后CD62p、PAC-1的表达率下降至（4．3±2．1）％和（4．9±2．4）％（P＜0．01），但仍高于健康对照组。结论：CD62p和PAC-1是血小板活化的敏感和特异指标，阿司匹林能够抑制血小板表面糖蛋白的表达．从而抑制血小板活化，抑制血栓形成。     

慢性肺源性心脏病患者血小板糖蛋白CD61、CD62p表达及应用丹红的影响

目的 通过检测慢性肺源性心脏病(简称肺心病)患者在使用丹红治疗前、后血小板CD61、CD62p表达水平变化,探讨丹红注射液在肺心病治疗中的作用.方法 将入选的肺心病患者分为治疗组和对照组,治疗前、后采静脉血,在流式细胞仪下,检测CD61、CD62p阳性血小板百分率,对比两组患者治疗前、后血小板CD61、CD62p表达和血小板活化状态变化.结果 肺心病患者治疗组治疗前CD61、CD62p阳性血小板百分率分别为(85.23±4.51)%,(46.73±6.68)%,丹红治疗7 d后,阳性血小板百分率分别为(79.65±6.74)%,(41.69±7.86)%,肺心病患者对照组治疗前阳性血小板百分率分别为(83.79±4.92)%,(48.25±4.84)%,对照组治疗7 d后,阳性血小板百分率分别为(82.93±5.02)%,(47.41±5.37)%,两组患者治疗前CD61、CD62p阳性血小板百分率无统计学差异,丹红治疗前、差异有统计学意义.结论 丹红注射液可抑制肺心病患者外周血小板表面CD61、CD62p表达,血小板活性下降.     

云南白药对大鼠血小板聚集及膜糖蛋白表达的影响

目的　研究大鼠服用云南白药后,血小板在ADP及花生四烯酸诱导下聚集率的变化,以及血小板糖蛋白CD61及CD62P在静息及ADP诱导条件下在膜表面表达的变化。方法　大鼠ig给药3d后,取血,用血小板聚集仪测定血小板的聚集率以及用流式细胞仪测定CD61和CD62P的表达。结果　无论在ADP或花生四烯酸诱导下,云南白药组的血小板聚集率都显著高于对照组(P<0.01) ;在静息条件下,CD61及CD62P在膜表面的表达虽有少量增加,但与对照组相比没有显著差异(P>0.05) ,但在ADP刺激条件下,给药组CD6 1及CD6 2P表达比对照组都有显著增加(P<0.01)。结论　在诱导条件下,云南白药可以促进血小板聚集及血小板膜上CD61及CD62P的表达,但不会增加静息血小板表面CD41及CD62P的表达,不会形成促血栓倾向。     

妊高征患者应用钙剂与内皮素相关性探讨

目的 :探讨妊高征患者应用钙剂预防或治疗时ET水平的变化。以及对妊高征病情的影响。方法 :选择100例妊娠24～26周预测妊高征试验阳性的孕妇。首次测量血清钙平均(2 20±0 3)mmol/L、血清内皮素 (ET)平均 (58 06±9 78)ng/L、平均动脉压(12 5±0 3)kpa。随机分为两组。50例口服葡萄糖酸钙片1～2g/日 ,治疗的病人为观察组 ;50例未口服葡萄糖钙片治疗的病人为对照组。12周后复查血清钙、血清ET、平均动脉压。结果 :观察100例预测妊高征阳性的病人 ,12周以后妊娠达36～38周。观察组和对照组的血清钙 (2 20±0 2)、(1 97±0 3)mmol/L、血清ET(61 76±18 6)、(132±705 64)ng/L、平均动脉压(12 7±0 3)、(13 6±0 3)kpa。两组比较差异有显著性P<0 05。结论 :血清钙与血清ET平均动脉压之间成负相关系。妊高征患者应用钙剂可达到预防和治疗的作用 ,对妊高征患者的病情有显著影响     

孕妇血清瘦素水平与妊娠晚期体质指数的关系

目的 :探讨孕妇血清瘦素水平与妊娠晚期体质指数的关系。方法 :采用酶联免疫吸附法(ELISA) ,测定 4 0例孕妇 ,其中妊娠高血压综合征 2 0例 (妊高征组 ) ,正常妊娠 2 0例 (妊娠组 )和正常非孕妇女 2 0例 (正常组 )的血清瘦素水平 ,并将瘦素水平与妊娠晚期体质指数的关系进行相关分析。结果 :妊高征组血清瘦素水平为 ( 2 2 .0± 1 3.2 ) μg/L ,略高于妊娠组的 ( 1 9.8± 7.8) μg/L( P >0 .0 5) ,妊高征组及妊娠组明显高于正常组的 ( 7.1± 5.1 ) μg/L( P <0 .0 1 )。妊高征组和妊娠组孕妇血清瘦素与妊娠晚期体质指数均无相关性。正常组血清瘦素水平与体质指数呈显著正相关 (r =0 .61 ,P <0 .0 0 1 )。结果提示 ,妊娠期间瘦素的调节机制不同于非妊娠妇女 ,妊娠妇女瘦素水平与妊娠晚期体质指数无相关性。     

妊高征患者止凝血分子标志物的检测及其临床意义

目的 :观察妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者的血管内皮损伤、血小板活化状态、抗凝及纤溶系统部分功能指标的变化 ,探讨其临床意义。方法 :检测正常非孕妇女、正常晚期妊娠妇女各20例和62例妊高征患者的血管性血友病因子 (vWF)、血小板α_颗粒膜蛋白 (GMP_140)、抗凝血酶_III(AT_III)、蛋白C系统筛选 (ProCGlobal)、纤溶酶原 (PLG)、组织纤溶酶原激活物 (t_PA)及其抑制物 (PAI)和D_二聚体 (D_Dimer)的含量。结果 :与正常非孕组及正常晚期妊娠组比较 ,妊高征组vWF、GMP_140水平均显著增高 ,并随病情加重而呈增高趋势 (P<0.01) ,而AT_III、ProC活性均显著下降 (P<0.01) ,病情越重下降越明显 ;妊高征组PLG、D_Dimer、PAI均显著增高 (P<0.01) ,中重度患者尤其明显 ,而t_PA无显著性改变 (P>0.05)。结论 :正常晚期妊娠妇女血液处于高凝状态 ,而妊高征患者存在明显血栓前状态 ,因此产前测定凝血和纤溶功能指标 ,对监测病情、指导治疗、改善预后具有一定价值     

妊娠高血压综合征患者凝血功能和血小板活化标志物的检测和临床意义

目的探讨妊娠高血压综合征患者凝血功能和血小板活化标志物的改变及其临床意义。方法采用全自动血凝仪和流式细胞仪,检测健康非妊娠妇女60名、健康晚期妊娠60名和妊娠高血压综合征患者58例的凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶原时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体(D-dimer)、抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)、CD62p和血小板激活复合物(PAC)-1。全自动血凝仪采用凝固法检测PT、APTT、TT、FIB,免疫比浊法检测D-dimer,发色底物法检测AT-Ⅲ。应用流式细胞术检测CD62p和PAC-1。结果与健康非孕组比较,健康晚孕组及妊娠高血压综合征患者各组PT、APTT明显缩短、AT-Ⅲ明显降低、FIB和D-dimer明显升高,CD62和PAC-1表达明显增加,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与健康晚期妊娠组比较,妊娠期高血压组、轻度子痫前期组和重度子痫前期组PT、APTT明显缩短、AT-Ⅲ明显降低、FIB和D-dimer明显升高,CD62和PAC-1表达明显增加,差异亦具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。妊娠高血压综合征随病情加重,FIB、AT-Ⅲ、D-dimer、CD62p和PAC-1有增高趋势。TT差异无统计学意义(P>0.05)。结论妊娠期凝血功能指标和血小板活化标志物检测对妊娠高血压综合征病情监测,早期防治具有一定意义。     

银杏叶提取物对肺源性心脏病患者血小板功能的干预作用

目的 探讨慢性肺源性心脏病(肺心病)患者急性加重期血小板功能的变化及银杏叶提取物的干预作用.方法 选择门诊健康体检者20例作为正常对照组.选择慢性肺心病急性加重期患者40例,随机分常规治疗组(A组)和银杏叶提取物治疗组(B组)2组.所有受试对象分别于治疗前后抽取清晨空腹静脉血,采用流式细胞仪检测血小板胞浆内游离钙离子、血小板表面α颗粒膜糖蛋白(CD62p),同时检测血清一氧化氮(NO)含量,观察上述指标治疗前后的变化.结果 慢性肺心病患者急性加重期血小板胞浆内游离钙离子、血小板表面CD62p均显著高于对照组(P＜0.01),血清NO显著低于对照组(P＜0.01).B组治疗后血小板胞浆内游离钙离子、血小板表面CD62p明显低于A组,NO显著高于A组(P＜0.01).结论 银杏叶提取物含有强有力的血小板活化因子拮抗剂,可阻止血小板活化因子介导的血小板聚集,能有效对抗肺心病患者肺动脉血栓的形成.     

心肺转流中氨甲环酸对血小板的保护作用

目的探讨氨甲环酸(TA)在心肺转流(CPB)中对血小板的保护作用。方法在26例心脏手术患者CPB中,随机分为TA组(14例)及生理盐水组(NS组,12例),在全身肝素化前及后10 min、转流30 min、转流结束肝素中和后10 min及术后24 h分别检测了血小板的各项指标。结果肝素化前2组各项指标均无明显差异。肝素化后10 min CD62p阳性率和平均荧光强度(MFI),TA组明显低于NS组(P<0.05);转流30 min和转流结束肝素中和后10 min,TA组PLA、MPAR及CD42a的MFI与NS组相比明显增高(P<0.05~0.001),而CD41a、CD61、CD62p的MFI及其阳性率明显减低(P<0.05~0.001)。术后24 h,TA组PLT、MPAR及CD42a、CD61、CD62p的MFI及其阳性率与NS组相比仍有明显差异(P<0.05~0.001)。NS组术后24 h与肝素化前比较,PLT、MPAR及CD42a、CD61、CD62p的MFI及其阳性率均存在明显差异(P<0.05~0.001);TA组术后24 h与肝素化前比较,只有MPAR及CD62p阳性表达率存在明显差异(P<0.05~0.001)。结论TA在CPB术中可以起到保护血小板、减少术后出血的作用。     

AoGDW肽抑制血小板聚集的作用机制

目的研究RGD(精氨酸-甘氨酸-天门冬氨酸)肽衍生物-AoGDW(ω-氨基辛酸-甘氨酸-天门冬氨酸-色氨酸)抑制血小板聚集的作用机制。方法采用双色荧光标记以及流式细胞技术检测AoGDW肽对CD41抗体与血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合的抑制作用以及对血小板膜上P-选择素表达的影响。结果随着AoGDW肽浓度的增加,CD41抗体与活化血小板GPⅡb/Ⅲa受体结合率呈现下降趋势,相对于阴性对照组,P<0.01。但CD41抗体与静止血小板GPⅡb/Ⅲa受体的结合率以及CD62p抗体与静止血小板P选择素的结合率与阴性对照组相比,P>0.05。结论AoG-DW肽是通过占据血小板上纤维蛋白原的结合位点即活化的GPⅡb/Ⅲa受体而发挥抑制血小板聚集的作用,并且不具有活化血小板的作用,是一种选择性的GPⅡb/Ⅲa受体拮抗剂。     

Clinical study on the related markers of blood coagulation in the patients with ANFH after SARS

The aim of this research was to investigate the blood coagulation function in the patients with avascular necrosis of the femoral head (ANFH) after severe acute respiratory syndrome (SARS). The expression of CD31, CD61, CD62p, CD63 and PAC-1 on platelet membrane was measured respectively by flowcytometry, and the plasma prothrombin time (PT), activated partial thromboplastin time (APTT), thrombin time (TT) and fibrinogen (Fbg) were measured by blood clotting instrument in 26 patients with ANFH after SARS and in 17 healthy adults. The expression of CD31, CD61, CD 62p, CD63 and PAC-1 on platelet membrane in 26 patients was all lower than that in 17 healthy subjects (P < 0.01). The levels of PT, APTT, TT and Fbg in 26 patients were all normal. There is no significant difference (P > 0.05) in those markers between patients and 17 healthy adults. The blood may not be in hypercoagulable state in patients with ANFH after SARS. __________ Translated from Chinese Journal of Nautical Medicine and Hyperbaric Medicine, 2006, 13(1): 39–41 [译自: 中华航海医学与高气压医学杂志]     

造血移植物中CD3~+CD8~(low)和CD3~+CD4~-CD8~(low)细胞亚群的检测及分析

目的检测造血移植物(正常人骨髓、脐血及动员后外周血)中CD3+CD8low和CD3+CD4-CD8low细胞亚群,探讨其促进造血干/祖细胞植入异基因骨髓的功能,以期拓宽脐血移植的应用范围。方法直接三色免疫荧光标记流式细胞术检测。结果CD3+CD8low和CD3+CD4-CD8low细胞亚群占CD3+细胞亚群的比例在骨髓中最高,为(8.61±1.40)%,动员后外周血次之,为(5.11±0.76)%,脐血最低,为(3.31±0.88)%(P<0.01);"初始"T(CD45RA+CD45RO-)细胞亚群占CD8low细胞亚群的比例为脐血(94.26±2.46),骨髓(58.68±7.57),动员后外周血(73.21±3.60),"初始"T占CD8high细胞亚群的比例为脐血(82.63±3.16),骨髓(38.69±3.24),动员后外周血(51.58±4.23),各移植物中"初始"T细胞亚群占CD8low细胞亚群的比例均高于其占CD8high细胞亚群的比例(P<0.01),CD8low细胞亚群中"初始"T与"记忆"T(CD45RA-CD45RO+)细胞亚群的比例均高于二者在CD8high细胞亚群的比例。结论脐血CD8low和CD8lowCD4-细胞占CD3+细胞的比例明显低于骨髓,可能是脐血移植植入延迟的原因之一;"初始T与"记忆"T细胞亚群的比例增高,可能与CD3+CD8low细胞亚群维持和诱导免疫耐受,不引起移植物抗宿主病有关。     

云南白药对大鼠血小板聚集及膜糖蛋白表达的影响

目的研究大鼠服用云南白药后,血小板在ADP及花生四烯酸诱导下聚集率的变化,以及血小板糖蛋白CD61及CD62P在静息及ADP诱导条件下在膜表面表达的变化.方法大鼠ig给药3d后,取血,用血小板聚集仪测定血小板的聚集率以及用流式细胞仪测定CD61和CD62P的表达.结果无论在ADP或花生四烯酸诱导下,云南白药组的血小板聚集率都显著高于对照组(P<0.01);在静息条件下,CD61及CD62P在膜表面的表达虽有少量增加,但与对照组相比没有显著差异(P>0.05),但在ADP刺激条件下,给药组CD61及CD62P表达比对照组都有显著增加(P<0.01).结论在诱导条件下,云南白药可以促进血小板聚集及血小板膜上CD61及CD62P的表达,但不会增加静息血小板表面CD41及CD62P的表达,不会形成促血栓倾向.     

磷酯酶C对人血小板细胞质游离钙离子浓度的影响

目的　测定磷酯酶C(phospholipaseC ,简称PLC ,下同 )对静息状态和激活状态下人血小板胞质游离钙离子浓度的影响 ,从而进一步阐明PLC抗血小板聚集作用的机制。方法　将健康成人的洗涤血小板用荧光指示剂Fura 2 /AM进行负载 ,分别用生理盐水、ASA和不同剂量的PLC处理荧光负载后的血小板 ,采用双波长荧光分光光度法分别测定经过不同处理后的血小板在静息状态和以ADP为诱导剂时的激活状态下的胞质游离钙离子浓度 [Ca2 + ]i。结果　以健康成人血为样品时 ,经生理盐水、ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1处理后的血小板 ,在静息状态下测得的胞质游离 [Ca2 + ]i 浓度 (nmol·L-1)分别为15 2 5 5± 15 0 7,131 6 3± 15 5 8,14 0 2 7± 12 0 3,139 4 8± 1 73,12 1 11± 9 5 8,116 6 2± 15 96和 10 7 2 0± 17 0 7,而以ADP为诱导剂激活血小板后测得的胞质游离 [Ca2 + ]i(nmol·L-1)分别为 90 2 6 2± 94 74 ,6 87 99± 6 2 86 ,810 99± 72 37,70 1 73± 2 1 37,4 2 9 6 7± 71 5 9,342 82± 4 4 86和 2 6 3 2 7± 2 5 4 6。以生理盐水作为对照 ,ASA 334μmol·L-1、2 5、3 75、5、10和 2 0UPLC·ml-1剂量组对激活状态下血小板胞质 [Ca2 + ]i 的抑制率I(% )分别为 2 5 8