地黄饮子对海马神经元AD模型细胞凋亡的调控作用

目的 :探讨古方地黄饮子含药脑脊液对 β 淀粉样蛋白 (Aβ2 5～ 35)所致海马神经细胞AD(Alzheimer’sDisease)模型凋亡基因bcl 2、bax和caspase 3表达的影响。方法 :运用中药脑脊液药理学的方法把体外培养成熟的大鼠海马神经细胞分为空白组、模型组、VitE对照组、地黄饮子脑脊液低、中、高剂量组。 6组分别加入正常培养液、正常脑脊液、VitE脑脊液、中药脑脊液低、中、高剂量 ,继续孵育 2h。然后除空白组加入等量培养液外 ,其它各组加入经老化处理的Aβ2 5～ 35(终浓度为 1 0 μmol/L)共同孵育 2 4h ,胰蛋白酶消化 ,离心收集细胞 ,提取总RNA。应用RT PCR和琼脂糖凝胶电泳方法测定bcl 2、bax和caspase 3基因的表达。结果 :地黄饮子脑脊液能剂量依赖性地增强受损海马神经元bcl 2基因的表达 ,降低bax和caspase 3基因的表达。说明对Aβ2 5～ 35所致离体海马神经细胞凋亡有抑制作用 ,其作用机理可能与地黄饮子升高bcl 2 /bax的比值 ,抑制线粒体释放细胞色素C ,控制caspase 3的激活有关     

地黄饮子治疗老年性痴呆症疗效观察

目的:观察地黄饮子治疗老年性痴呆的临床疗效。方法:将62例患者随机分为两组,治疗组32例用地黄饮子治疗;对照组30例给予西药都可喜、脑复康治疗。结果:总有效率治疗组为78.12%,对照组为63.33%。两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。长谷川痴呆量表(HDS)评分治疗组前后比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:地黄饮子治疗老年性痴呆有较好的临床疗效。     

地黄饮子对AD模型大鼠的学习记忆及胆碱能损害的影响

目的：探讨地黄饮子对AD鼠学习记忆及胆碱能损害的影响。方法：模型组以D-半乳糖（D-gal）腹腔注射合并β淀粉样蛋白（Aβ）注射海马制备AD动物模型,各治疗组分别在造模的同时灌胃地黄饮子和抗脑衰胶囊、哈伯因。运用穿梭箱检测各组大鼠的学习记忆能力,采用生化法检测各组大鼠脑匀浆AchE,免疫组化方法观察SYN蛋白的变化。结果：中药治疗组均可使各组大鼠潜伏期降低、主动回避反应阳性率明显升高,被动逃避时间显著降低,表明主动、被动反应水平均有所回升,有显著性差异。灌服中药后各治疗组脑组织AchE活性降低,大鼠海马、皮层神经元SYN蛋白表达增加。结论：地黄饮子对痴呆鼠学习记忆能力的提高及改善神经元损伤的作用,可能与地黄饮子改善鼠脑神经元胆碱能损害,来上调海马和皮层神经元SYN蛋白的表达有关。     

地黄饮子对Aβ诱导的PC12细胞SODmRNA表达影响的研究

目的 研究地黄饮子对β淀粉样蛋白（Aβ）诱导的PC12细胞SODmRNA表达的影响.方法 通过实时荧光定量PCR法检测各组PC12细胞SODmRNA的表达.结果 与空白组比较,模型组相对定量基因表达升高（P〈0.01）,地黄饮子含药脑脊液可升高AD模型细胞SODmRNA的表达（P〈0.05或P〈0.01）,中药低、中剂量组与安理申组比较差异无统计学意义,中药高剂量组与安理申组比较有统计学意义（P〈0.05）.结论 地黄饮子能提高Aβ诱导的PC12细胞SODmRNA的表达,提高对自由基的清除能力.     

地黄饮子加减治疗老年性痴呆50例

我院于１９９０年８月～１９９７年３月以地黄饮子加减治疗老年性痴呆５０例，并与单纯西药治疗４０例对照，效果较为满意，现报道如下。一、临床资料本组病例均为我院住院患者，年龄均在６０岁以上，全部病例均符合中国中医药学会老年医学会、内科学会１９９０年５月在全...     

加减地黄饮子对所致AD大鼠学习记忆及抗氧化作用的影响

目的：观察加减地黄饮子对实验性痴呆大鼠的防治作用。方法：凝聚态Aβ1-40直接定向注射右侧海马CA1区造成AD大鼠模型，以大鼠跳台实验检测各组大鼠学习记忆行为，测定脑组织中SOD活性、MDA及脂褐素含量，光镜观察海马病理变化。结果：加减地黄饮子可以通过清除自由基，提高抗氧化能力，改善细胞的退化、变性程度，提高Aβ致痴呆鼠的学习记忆能力。结论：加减地黄饮子可以通过影响自由基水平对老年性痴呆大鼠有一定的防治作用。     

地黄饮子对AD模型大鼠定位航行学习记忆的影响

目的:观察中医古方地黄饮子改善老年性痴呆模型大鼠定位航行学习记忆功能的作用强度.方法:应用Morris水迷宫检测地黄饮子对D-半乳糖致亚急性衰老合并右侧海马CA1区注射凝聚态Aβ1-40所致AD模型大鼠定位航行学习记忆改善情况.结果表明:地黄饮子能够改善模型大鼠的定位航行学习记忆能力,缩短模型大鼠在水迷宫中定位航行实验逃避潜伏期,提示地黄饮子对AD模型大鼠的定位航行学习记忆能力有一定的改善作用.     

地黄饮子对老年性痴呆神经保护作用的实验研究

目的:研究地黄饮子对老年性痴呆神经保护作用及其机制.方法:通过细胞免疫法检测各组PC12细胞ChAT、tau的表达.结果:Aβ25-35损伤模型组PC12细胞中ChAT表达明显低于空白组(P<0.01),而加入地黄饮子脑脊液后可提高ChAT的表达(P<0.05或P<0.01),中药组与安理申组比较无显著性差异(P>0.05 ) ; A(325-35损伤模型组PC12细胞中tau表达明显高于空白组(P＜0.01),而加入地黄饮子脑脊液后,可剂量依赖性降低tau的表达(P<0.01),且中高组、中中组疗效较好,与安理申组比较有显著性差异(P<0.01或P<0.05).结论:地黄饮子能明显提高Aβ25-35损伤时PC12细胞ChAT的表达,能抑制细胞微管相关蛋白tau的表达,起到神经保护的作用,从而达到防治AD的目的.     

地黄饮子含药脑脊液对 AD 细胞模型影响的差异蛋白质组学研究

目的：基于差异蛋白质组学研究地黄饮子对 AD 细胞模型的影响。方法：将离体培养的 PC12细胞分为3组,空白对照组、模型对照组和中药地黄饮子组。模型组和中药组分别给予10％空白脑脊液和地黄饮子含药脑脊液,用经孵育老化的 Aβ25-35造成 PC12细胞损伤的 AD 模型,培养箱孵育24h后,收集细胞,提取蛋白质。根据蛋白质等电点和相对分子量不同,应用双向凝胶电泳技术分离组内差异蛋白质,胶内酶切差异明显的蛋白质点并鉴定。结果：在凝胶图像的蛋白点中,同空白组比较,模型组上调的蛋白点有6个,与模型组比较,中药组上调的蛋白有7个。结论：地黄饮子对 AD 细胞模型的蛋白质点表达的调控,提示地黄饮子在 AD 发病早期可能是通过调控细胞中相关的蛋白质点起动对损伤细胞的保护作用。     

地黄饮子对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠学习记忆功能的影响

目的：探讨地黄饮子对阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆功能的影响。方法：选取ICR小鼠40只,随机分成空白组（8只）、AD模型组（32只）,采用D-半乳糖复合给药造模25 d后,将造模成功的小鼠随机分为AD模型组（13只）、地黄饮子组（13只）,地黄饮子组连续灌胃25 d（16 g/kg）,采用水迷宫检测阿尔茨海默病模型小鼠的学习记忆能力。结果：与模型组比较,地黄饮子组与模型组潜伏时间相比P=0.024,给药组与模型组经过目标象限次数相比P=0.009 8,两组之间有显著性差异（P〈0.05）;地黄饮子能缩短潜伏时间,增加经过目标象限次数。结论：地黄饮子能改善阿尔茨海默病模型小鼠学习记忆。     

地黄饮子对β淀粉样蛋白所致PC12细胞损伤的保护作用

目的：观察地黄饮子对β淀粉样蛋白（Aβ25-35）诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法：通过HE染色、尼氏染色、电镜观察地黄饮子对细胞形态的影响。结果：地黄饮子可显著改善Aβ25-35损伤引起的PC12细胞形态的改变,减轻细胞膜的损伤,减少损伤所致的细胞死亡。结论：地黄饮子对Aβ25-35所致PC12细胞损伤具有较好的保护作用。     

补肾通络涤痰方治疗AD模型大鼠的实验研究

目的：探讨补肾通络涤痰方对AD模型大鼠的治疗作用及作用机理。方法：将动物随机分为6组,即假手术组、模型组、复方高中低剂量组,脑复康组,每组8只。采用D-半乳糖诱导建立阿尔茨海默病（AD）动物模型,观察补肾通络涤痰方对AD模型大鼠学习记忆、脑组织SOD活力、MDA和NO含量的影响。结果：与假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力明显减退,脑组织SOD活力、MDA和NO含量均明显降低,复方组学习记忆能力得到明显改善,脑组织SOD活力、MDA和NO含量均明显得到提高。结论：补肾通络涤痰方能明显改善AD模型动物学习记忆,及抗自由基对脑组织的损伤。     

苓桂术甘汤对阿尔茨海默病（AD）发病机制的实验研究

目的：研究苓桂术甘汤对Aβ诱导小胶质细胞细胞生成和释放致炎因子IL-1β、IL-6及TNF-α的抑制作用。方法：体外培养BV-2小胶质细胞株,Aβ1-42诱导BV-2细胞活化,苓桂术甘汤不同浓度组（10×10-3、1×10-3、0.1×10-3、0.01×10-3、1×10-6、0.1×10-6 kg/L）进行干预,ELISA法检测各组IL-1β、IL-6及TNF-α含量。结果：与模型组比较,苓桂术甘汤组细胞上清中IL-1β、IL-6及TNF-α含量均有降低,以高浓度（10×10-3、1×10-3）最为显著（P〈0.01）。结论：苓桂术甘汤对活化后BV-2细胞IL-1β、IL-6及TNF-α的的分泌有显著的抑制作用,良好的抗炎作用可能是苓桂术甘汤治疗老年性痴呆的重要依据和机理之一。     

针刺对神经干细胞海马内移植痴呆大鼠学习记忆和海马胆碱能系统的影响

目的:观察针刺对神经干细胞(NSCs)海马内移植老年性痴呆(AD)大鼠学习记忆和海马胆碱能系统的影响,探讨针刺治疗老年性痴呆的机制。方法:采用β-淀粉样蛋白(β-AP)向海马CA1区定向注射制做AD模型,将大鼠分为五组:正常组、模型组、移植组、针刺组和移植针刺组,每组各12只。针刺选取百会、大椎、人中三个穴位,并接通电针仪。大鼠跳台检测行为学指标;酶免法检测海马组织胆碱乙酰转移酶(ChAT)、乙酰胆碱酯酶(AchE)含量。结果:移植针刺组大鼠跳台潜伏期比模型组增加(P<0.05),错误次数比模型组减少(P<0.05);海马组织ChAT含量比模型组提高(P<0.05),AchE含量比模型组降低(P<0.05);移植针刺组与移植组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:针刺对大鼠海马胆碱能系统的改善是治疗AD的作用机制之一,针刺结合神经干细胞移植治疗效果更佳。     

加减地黄饮子提取工艺的研究

目的:优选加减地黄饮子的最佳提取工艺.方法:以浸膏得率和毛蕊花糖苷及石斛总碱的含量为指标,采用正交试验对水提和醇提过程中的溶剂用量、提取时间、提取次数等因素进行优选研究,同时采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,根据收油率考查加水量和提取时间.结果:本方最佳提取工艺为肉苁蓉、麦门冬、人参、远志、五味子、山茱萸等用8倍量70%的乙醇回流提取3次,每次2h:生姜、薄荷、石菖蒲加10倍量水6h提取挥发油:方中熟地黄、茯苓、巴戟天、石斛、大枣与醇提取后的药渣及挥发油提取后药渣一同加16倍的水,回流提取3次,每次1h:血竭等原粉入药.结论:用正交试验方法优选此方的提取工艺是可行的.     

基于肾虚痰瘀阻络病机探讨脑灵汤对轻、中度老年性痴呆患者的临床疗效

目的:观察基于"肾虚痰瘀阻络"病机的脑灵汤对轻、中度肾虚痰浊瘀阻型老年性痴呆患者的临床疗效以及认知生活能力的改善。方法:73例轻、中度老年性痴呆患者,随机分为对照组和治疗组,对照组35例,治疗组38例。采用简易精神状态量表(MMSE)、改良长谷川量表(HDS)、日常生活能力评分量表(FAQ),分别在治疗前和治疗后6个月进行评定,然后进行临床疗效评价,最后进行相关生化指标分析。结果:对照组有效率为65.71%(23/35),治疗组总有效率为86.84%(33/38),两者比较有显著性差异(P<0.05)。两组治疗前后比较,治疗组简易智能精神状态量表(MMSE)评分和HDS量表评分明显提高(P<0.05),且优于对照组(P<0.05);两组社会功能活动问卷(FAQ)评分下降显著(P<0.05)。治疗后,两组患者的Hcy、UA、TG、LDL-C水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05),治疗组治疗后Hcy、UA、LDL-C水平与对照组治疗后相比,明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:基于"肾虚痰瘀阻络"病机,运用脑灵汤联合盐酸多奈哌齐治疗临床效果显著,能改善轻、中度痰浊瘀阻型老年性痴呆患者认知功能和日常生活能力,能够降低Hcy、UA、TG、LDL-C水平。     

加减地黄饮子对老年性痴呆模型大鼠Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

目的观察β-淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)大鼠海马双侧注射后大脑组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的变化及加减地黄饮子的干预作用。方法采用大鼠海马立体定向注射凝聚态Aβ1-40诱导老年性痴呆(Alzheimer’s disease,AD)动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型组Bax2-ΔΔCt显著升高,而Bcl-22-ΔΔCt显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,盐酸多奈哌齐组、加减地黄饮子组Bax2-ΔΔCt显著降低(P<0.05),而加减地黄饮子组Bcl-22-ΔΔCt显著升高(P<0.05)。结论海马注射Aβ1-40可诱导大鼠脑组织BaxmRNA表达上调和Bcl-2表达下调,而加减地黄饮子可通过抑制海马组织BaxmRNA的表达和促进Bcl-2mRNA表达,进而起到减少神经细胞凋亡的作用。     

补气活血方对多因素损伤老年痴呆大鼠血清β淀粉样蛋白及生长因子水平的影响

目的建立多因素损伤老年性痴呆（AD）大鼠模型，探讨补气活血方对AD大鼠血清β淀粉样蛋白（β-AP）、转化生长因子（TGF-α）及类胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF-Ⅱ）水平的影响及其作用机理。方法采用腹腔注射D-半乳糖、氢溴酸东莨菪碱注射液（SCOP），喂饲A1C1，，喹啉酸（QA）海马区注射相结合的方法建立多因素损伤AD大鼠模型，随机分为正常组（A组）、假损伤组（B组）、模型组（C组）、补气活血方组（D组）、喜得镇组（E组）。D、E组分别灌胃给予补气活血方和喜得镇，A、B、C组给予等容积的生理盐水。治疗3周后，放免法观测大鼠血清β-AP、TGF-α及IGF-α水平变化。结果模型组大鼠血清β-AP、TGF-α及IGF-Ⅱ水平明显升高，经补气活血方和喜得镇治疗后，血清β-AP、TGF-α及IGF-Ⅱ水平明显降低。结论补气活血方可能通过调节TGF-α、IGF-Ⅱ的水平，影响β-AP生成，从而达到治疗AD作用。