抵当汤及加味方对S180荷瘤小鼠外周血IL-8、TNF-α的影响

目的探讨抵当汤及分别加入柴胡、桂枝、黄芪3个加味方对S180荷瘤小鼠外周血IL-8、TNF-α的影响。方法小鼠造模后随机分为模型组、抵当汤组（4g/kg）、抵当汤加黄芪组（5．67g／kg）、抵当汤加桂枝组（5．5g／kg）、抵当汤加柴胡组（5g／kg）,每组15只,另取正常小鼠10只作正常对照组。各用药组灌胃给予相应药物,正常对照组和模型组给等体积0．9％NaCl溶液,每日1次,连续10d。末次给药后1h于小鼠眶后静脉取血,离心取血清,采用ELISA方法检测IL-8、TNF-α。结果与正常对照组比较,模型组小鼠血清IL-8水平显著升高（P〈0．05）;与模型组比较,抵当汤可明显降低S180荷瘤小鼠血清IL-8水平（P〈O．05）,抵当汤加柴胡组、抵当汤加黄芪组、抵当汤加桂枝组均可明显降低S180荷瘤小鼠血清IL-8水平（P〈0．05,P〈0．01）,其中以抵当汤加柴胡组血清IL-8水平降低最显著（P〈0．01）。与正常对照组比较,模型组小鼠血清TNF-α水平明显降低（P〈0．05）;与模型组比较,抵当汤可明显升高S180荷瘤小鼠血清TNF-α水平（P〈0．05）,抵当汤加柴胡组、加黄芪组、加桂枝组均可明显升高S180荷瘤小鼠血清TNF-α水平（P〈O．05,P〈0．01）,其中以抵当汤加柴胡组血清TNF-α水平升高最显著（P〈0．01）。结论抵当汤及抵当汤加味方能升高S180荷瘤小鼠血清TNF-α水平和降低血清IL-8的表达,其中又以抵当汤加柴胡组效果最为显著。     

3种治法方药诱导H22荷瘤小鼠细胞凋亡的实验研究

目的:观察比较活血化瘀方、清热祛湿方和养阴柔肝方3种不同治法的中药复方对H₂₂肝癌移植瘤抑瘤作用,并初步探讨其机理。方法:采用皮下接种肝癌H22细胞的方法建立荷瘤小鼠模型,分别用上述3种中药复方水煎液ig给药11d,观察各组荷瘤小鼠的肿瘤生长情况,采用缺口末端标记法测定肿瘤细胞凋亡指数,免疫组织化学方法测定凋亡蛋白Bcl-2,Bax的表达情况。结果:与模型对照组比较,3种复方均可抑制H22肝癌移植瘤生长,促进瘤体细胞凋亡,降低瘤体细胞Bcl-2/Bax比值((P<0.01);其中清热祛湿方与养阴柔肝方作用后Bcl-2/Bax分别为0.16±0.04,0.19±0.02,显著低于模型组(2.71±0.06),且与活血化瘀方1.24±0.10比较差异具有统计学意义((P<0.01),但前二者之间比较无统计学意义(P>0.05)。结论:活血化瘀、清热祛湿、养肝柔肝3种方法均可抑制H₂₂肝癌移植瘤生长,其机制与通过调控凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax的表达诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

扶正消癥方（含药血清）对H_（22）肝癌荷瘤小鼠IL-8及VEGF的影响

目的：研究扶正消癥方（含药血清）对H22肝癌荷瘤小鼠血清中IL-8和VEGF的影响及对肿瘤生长、增殖的抑制作用。方法：采用肿瘤双植入模型技术制作H22荷瘤小鼠模型及中药含药血清的制备。40只6周龄昆明种小鼠随机均分为4组：正常组,模型组,顺铂组,扶正消癥方组（含药血清）。造模成功后连续3d把已制备好的含药血清分别注入对应组小鼠的右侧接种肿瘤,共给药3次。观测21d,第21天处死小鼠收集血清,检测血清中IL-8和VEGF的含量。结果：与正常组比较,模型组小鼠血清中IL-8和VEGF表达水平明显升高（P〈0.01）,扶正消癥方（含药血清）组及顺铂组可降低小鼠血清中IL-8和VEGF表达水平。与模型组相比,顺铂组和扶正消癥方（含药血清）组均可降低小鼠血清中IL-8和VEGF表达水平,顺铂组（P〈0.01）,扶正消癥方（含药血清）组（P〈0.05）。结论：扶正消癥方（含药血清）对H22荷瘤小鼠具有提高免疫作用,降低血清中IL-8和VEGF的表达水平,具有进一步研究的价值。     

北虫草素对体外小鼠肝癌H22细胞增殖及肝癌鼠血清中IL-2/TNF-α水平的影响

目的探讨北虫草素对体外培养的小鼠肝癌H22细胞的增殖和H22荷瘤肝癌小鼠血清中IL-2和TNF-α水平的影响。方法分别用5,10,20,40,80 mg/L的北虫草素处理H22细胞48 h后,应用MTT法检测细胞的增殖抑制率;采用细胞接种的方法建立H22肝癌小鼠动物模型,随机分成5组,每组8只,双抗体夹心法(ELISA)检测小鼠血清IL-2和TNF-α数值。结果北虫草素呈剂量依赖性抑制H22细胞增殖(F=105.333,P0.001);环磷酰胺组、北虫草素中高剂量组小鼠瘤重显著低于对照组(P0.01),抑瘤率分别为55.60%,32.94%,43.94%。与对照组比较,北虫草素中高剂量组IL-2及TNF-α在血清中的表达均显著升高,差异均有统计学意义(P0.05或0.01)。结论北虫草素能明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,增强机体的免疫功能。     

油茶皂苷抗肿瘤作用研究北大核心CSCD

目的：观察油茶皂苷（SQS）的体内外抗肿瘤作用。方法：采用MTT法观察SQS体外对肿瘤细胞及人肾小管上皮细胞HK-2的影响;并建立S180荷瘤小鼠模型,灌胃给予SQS,1次/d,共10 d,观察SQS对荷瘤小鼠抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数及血清TNF-α和IL-2含量的影响。结果：15.0~120.0 mg/m L SQS在体外呈浓度依赖性抑制人胃癌细胞株MGC803、人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2的增殖,3种肿瘤细胞的治疗指数（TI）分别为6.41、4.00和3.71。60.0、90.0、120.0 mg/kg SQS对S180荷瘤小鼠的抑瘤率分别为2.53%、33.54%和41.77%;SQS中、高剂量组胸腺指数显著高于模型组（P〈0.05）;SQS高剂量组脾脏指数显著高于模型组（P〈0.05）;SQS中、高剂量组S180荷瘤小鼠血清TNF-α、IL-2含量显著高于模型组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：SQS具有抗肿瘤作用,对人胃癌细胞株治疗安全性较大;能抑制S180荷瘤小鼠的肿瘤生长,增强荷瘤小鼠免疫功能,增加TNF-α和IL-2的释放可能是其抗肿瘤作用机制之一。     

不同剂量和给药时程对名贵中药组合免疫调节作用的影响

目的：以灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷为例,探讨不同剂量和给药时程联合用药的抗肿瘤作用及对荷瘤小鼠细胞免疫功能的影响。方法：灵芝多糖、红景天苷和西洋参皂苷按10∶10∶1.5比例组合,以SPF级昆明小鼠为实验对象,随机分为正常对照组（A）、模型组（B）、低剂量持续给药组（C）、低剂量预防给药组（D）、高剂量持续给药组（E）和高剂量预防给药组（F）,C～F组灌胃相应剂量的受试组合物,A组和B组灌胃等量生理盐水。连续灌胃4周后,除正常对照组外其余各组小鼠均接种肉瘤S180细胞,持续给药组继续灌胃。接种3周后处死小鼠,检测各组荷瘤小鼠肿瘤大小、细胞免疫功能及血清中IL-2、IFN-γ和TNF-α含量。结果：受试组合物低剂量持续给药和低剂量预防给药均能显著抑制S180实体瘤的生长（P〈0.05）,并明显延长荷瘤小鼠生存期（P〈0.05）,均能显著提高小鼠细胞免疫功能以及血清IL-2、IFN-γ和TNF-α水平,以低剂量预防给药效果最为显著。高剂量预防给药可以抑制S180实体瘤的生长,延长荷瘤小鼠生存期,并能提高细胞免疫功能及血清IL-2、IFN-γ和TNF-α水平,但与模型组相比无显著性差异（P〉0.05）。然而高剂量持续给药却能抑制ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力,降低荷瘤小鼠的血清IL-2、IFN-γ和TNF-α水平,显著缩短荷瘤小鼠生存期（P〈0.05）,具有促进肿瘤生长的趋势。结论：受试组合物在合适剂量和给药时程下可增强荷瘤小鼠的细胞免疫功能,延长荷瘤小鼠生存期,抑制肿瘤细胞生长,但是剂量过大且持续给药会抑制细胞免疫功能,缩短生存期,有促进肿瘤生长的倾向。     

扶正消癥方对小鼠H22移植性肝癌的生长抑制及VEGF、TNF-α表达的影响

目的研究扶正消癥方对肝癌H22荷瘤小鼠的作用。方法以荷肝癌（H22）小鼠为模型,观察扶正消癥方的抗肿瘤作用,分别计算出抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数,并用放免法和酶联免疫吸附实验分别测定血清中TNT-α和VEGF的含量。结果相当于生药3.5、7.1、14.2g/kg的扶正消癥方对肝癌（H22）小鼠的抑瘤率分别为15.95%、32.76%和39.22%。复方低剂量组、中剂量组和高剂量组与模型组的小鼠胸腺指数和脾脏指数比较,差异有显著性意义（P〈0.01）。复方低剂量组、中剂量组和高剂量组与模型组对比血清中VEGF和TNF-α的含量差异有显著性意义（P〈0.01）。结论扶正消癥方对肝癌H22有明显作用,具有提高机体免疫力、诱导肿瘤细胞坏死和抑制肿瘤浸润的的多重效应,具有进一步研究和开发的实验和临床应用价值。     

克癌新对荷瘤小鼠IL-2、IL-6、IL-12和TNF-α水平的影响

目的：研究克癌新对荷瘤小鼠细胞因子水平的影响。方法：建立小鼠肉瘤S180和小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型,采用Elisa法测定细胞因子白介素-2（IL-2）、白介素-6（IL-6）、白介素-12（IL-12）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的水平。结果：克癌新在150、300mg/kg时对小鼠肉瘤S180的生长抑制率分别为38.52%、47.88%,对肝癌H22生长抑制率分别为32.17%、40.18%,且能提高荷瘤小鼠的脾指数和胸腺指数;克癌新能升高荷瘤小鼠细胞因子IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α的水平。结论：克癌新有体内抗肿瘤活性,其抗肿瘤机制可能与升高机体细胞因子水平有关。     

不同证候小鼠肾上腺皮质激素与细胞因子表达的关系

目的 研究细胞因子在不同证候小鼠肾上腺中的表达及其与血清皮质激素的关系。方法 采用实验小鼠及其标准化四诊及辨证方法,对60只正常小鼠与190只H22肝癌荷瘤小鼠予以辨证分型,用ELISA方法检测血清皮质酮、醛固酮含量,以及实时荧光定量PCR技术检测肾上腺细胞因子表达。结果 获得正常无证、正常气盛证、正常气虚证小鼠,以及邪毒壅盛证、邪毒居中证、邪毒微弱证、邪毒气虚证荷瘤小鼠。荷瘤小鼠血清皮质激素显著高于正常小鼠（P<0.05),荷瘤小鼠4个证候组间,以邪毒壅盛证升高最显著（P<0.05)。相对于正常小鼠而言,白细胞介素（IL)-1β、IL-2、IL-6、IL-10、IL-12α、IL-12β和肿瘤坏死因子-α（TNF-α)等细胞因子在荷瘤小鼠不同证候中表达升高,仅IL-1α和IL-5在荷瘤小鼠中表达下降,而IL-13和转化生长因子-β1（TGF-β1)表达呈无规律性。其中IL-4与干扰素-α（INF-α)在正常与荷瘤小鼠肾上腺中均未检测到其表达。值得注意的是,邪毒程度越严重者,皮质酮与醛固酮水平及IL-6表达越高,而IL-1β、IL-2、IL-5、IL-12α、IL-12β、TNF-α表达越低。结论荷瘤小鼠血清皮质激素水平升高可能是在肿瘤慢性应激诱导下,部分细胞因子参与肾上腺皮质激素的合成与分泌,其中IL-6可能正向调控邪毒证荷瘤小鼠皮质激素分泌,而IL-1β、IL-2、IL-5、IL-12α、IL-12β、TNF-α则可能起到负性调控作用。     

不同治法方药抑制肝癌H22荷瘤小鼠瘤细胞增殖的实验研究

目的:观察比较活血化瘀方、清热祛湿方和养阴柔肝方3种不同治法中药复方对H₂₂荷瘤小鼠瘤细胞增殖的影响。方法:采用皮下接种肝癌H_{22P<0.01),3个给药组之间两两比较差异亦具有统计学意义(P<0.01)。结论:3种治法中药复方在抑制瘤细胞增殖方面以活血化瘀方作用最为显著;3者均可以明显抑制肝癌细胞CyclinD1表达,推断3种方法能够抑制肝癌细胞增殖活性的分子机制,可能是通过降低肝癌细胞内CyclinD1的阳性表达,阻断CyclinD1-CDK4-Rb通路,降低细胞周期转换速度实现的。}     

五味子多糖对肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其免疫学机理初探

目的:明确五味子多糖对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用,并初步探索其免疫学机理。方法:采用H22荷瘤小鼠,五味子多糖给药1周后称重处死,剥离瘤体,摘取脾脏和胸腺,计算抑瘤率、脾脏指数和胸腺指数。结果:①五味子多糖高、中、低三个剂量组的抑瘤率分别为52.83%、28.54%和22.39%,高、中剂量组与模型组差异分别呈极显著(P0.01)和显著(P0.05),低剂量组不显著(P0.05);②与正常组小鼠相比,模型组小鼠脾脏指数没有显著的改变,胸腺指数显著降低;五味子多糖高剂量组小鼠脾脏指数极显著地高于正常组小鼠和模型组小鼠(P0.01),胸腺指数与模型组小鼠没有显著区别(P0.05)。结论:①五味子多糖高、中剂量对小鼠H22肝癌移植瘤具有抑制作用;②五味子多糖高剂量可在器官水平上增强H22荷瘤小鼠的免疫能力,从而起到间接抗肿瘤作用。     

黄芪多糖对免疫性肝损伤小鼠协同刺激分子的影响研究

目的:观察黄芪多糖对免疫性肝损伤小鼠的肝功能和协同刺激分子及其受体的影响,探讨黄芪多糖治疗病毒性肝炎的作用机制,为其在临床上的应用提供理论依据。方法:小鼠随机分为4组:正常对照组、模型对照组、胸腺肽组、黄芪多糖组(0.2 g/kg),尾静脉注射卡介苗和脂多糖建立免疫性肝损伤小鼠模型。各组小鼠给予不同因素干预,造模结束后各组小鼠摘眼球采血,脱椎处死取肝脏。检测血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT),流式细胞术检测脾脏中淋巴细胞表面CD28、CD80、ICOS、B7H2的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测脾组织中B7H3 mRNA含量。结果:黄芪多糖可降低血清中的ALT(P<0.05),模型对照组小鼠淋巴细胞表面的协同刺激分子表达均显著性增高(P<0.01或P<0.05)。黄芪多糖组CD28、CD80均显著降低(P<0.05),ICOS、B7H2无明显变化(P>0.05),B7H3 mRNA明显降低(P<0.01)。结论:黄芪多糖对免疫性肝损伤模型具有一定的保护肝脏和免疫调节作用,改善肝功能,可通过对部分协同刺激分子的影响调节免疫功能。     

清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响

目的:研究清暑解表方对流感病毒FM1感染小鼠的肺组织及肺、胸腺指数的影响。方法:48只小鼠随机分为正常组、模型组、利巴韦林组、清暑解表方高、中、低剂量组,共6组,用流感病毒FM1滴鼻建立小鼠感染模型。观察肺组织病理变化情况,并测定肺、胸腺、脾指数。结果:与正常组比较,模型组肺指数明显升高(P0.05),胸腺指数明显降低(P0.05)。清暑解表方高剂量组能降低肺指数(P0.05),中剂量组能升高胸腺指数(P0.05),但3个剂量组对脾指数均无显著性差异(P0.05)。结论:清暑解表方能改善FM1感染小鼠的肺部病变,降低肺指数并升高胸腺指数。     

平调饮对小鼠H_(22)肝癌模型凋亡基因的影响

目的:研究平调饮对H22荷瘤小鼠Bcl-2、P53和Bax凋亡基因的影响,从而探讨平调饮治疗原发性肝癌的作用机制。方法:昆明种雄性小鼠80只,接种H22肝癌细胞后,随机分为生理盐水组、中药组、西药组及中西医结合四组,每组20只。造模第2d灌胃给药,连续7d,第8d脱颈处死。将肿瘤取出制作小鼠肿瘤细胞切片,进行HE染色,观察病理变化;用免疫组织化学方法对肿瘤中的Bcl-2、P53和Bax蛋白进行染色。用SPSS12.0软件统计结果。结果:造模后西药组小鼠状态较差,其体重明显低于中药组及荷瘤组(P0.01)。HE染色中药组的肿瘤细胞体积缩小,核固缩,核分裂相明显少于模型组,肿瘤组织可见片状坏死区。中药组和中西医结合组的Bcl-2和P53蛋白表达率明显降低,Bax蛋白的表达率则明显增高,与对照组比较有显著性差异(P0.01)。结论:平调饮对肝癌细胞具有抑制作用,其机制可能为通过对肿瘤细胞内P53、Bcl-2、Bax蛋白表达的改变,使肝癌细胞发生细胞凋亡,从而抑制肿瘤生长。     

土鳖虫多肽溶液抗肿瘤作用研究

目的：研究土鳖虫多肽溶液抗肿瘤作用。方法：以H22肿瘤小鼠为动物模型,给药10天后处死,取肿瘤、脾脏、胸腺并称重,计算抑瘤率、脾脏系数和胸腺系数;取肝脏检测MDA水平和SOD活性。结果：土鳖虫多肽溶液对H22肿瘤小鼠的抑瘤率为46．79％,脾脏系数和胸腺系数均较模型对照组升高（P〈0．05）;土鳖虫多肽能使肿瘤小鼠肝脏MDA水平降低和SOD活性升高,与模型组比较有差异（p〈0．05）。结论：土鳖虫多肽溶液对H22肿瘤小鼠有抗肿瘤作用。     

华蟾素注射液对小鼠肝癌组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响

目的:观察华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因(mRNA)及蛋白表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,华蟾素注射液低、高剂量组,顺铂(DDP)组。观察各组小鼠肿瘤生长情况变化。采用荧光定量RT-PCR方法和Western Blot检测方法检测各组H22肝癌小鼠肿瘤组织中Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白表达的影响。结果:华蟾素低剂量组不能有效抑制肿瘤的生长,而华蟾素高剂量组、DDP组的抑瘤率分别为41.67%、52.78%,具有明显的抑制肿瘤生长作用(P<0.01)。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3表达无明显差异,而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌组织中的Caspase-8、Caspase-3的mRNA的表达升高(P<0.05)及蛋白表达明显升高(P<0.01)。结论:华蟾素注射液具有抑制肝癌细胞生长的作用,其分子机制可能是上调肿瘤组织Caspase-8、Caspase-3基因及蛋白的表达,从而促进肝癌肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用。     

健脾柔肝汤对荷肝癌H22小鼠肿瘤组织VEGF表达的影响

目的：观察健脾柔肝汤对荷肝癌H22小鼠肿瘤的抑制作用,并初步探索其作用机制。方法：BALB/c荷H22肝癌小鼠50只,随机分为生理盐水对照组,健脾柔肝汤低、中、高剂量组,5-FU组,观察健脾柔肝汤对小鼠肿瘤的抑制作用;采用荧光定量RT-PCR法测定健脾柔肝汤对荷肝癌H22小鼠肿瘤组织血管内皮生长因子（VEGF）基因的表达。结果：健脾柔肝汤低、中、高剂量组,5-FU组的抑瘤率分别为20.56%、50.58%、23.34%、77.52%,与生理盐水组比较,健脾柔肝汤中剂量给药组和5-Fu给药组瘤重均有显著性差异（P〈0.05）,健脾柔肝汤低、高剂量给药组无显著性差异（P〉0.05）;健脾柔肝汤中、高剂量组能明显降低BALB/c小鼠H22肝癌肿瘤组织中VEGF的表达水平（P〈0.05）,以中剂量组最明显（P〈0.01）。结论：健脾柔肝汤对H22肝癌荷瘤小鼠具有明显的抑瘤作用,其机理可能是通过下调荷瘤小鼠肿瘤组织VEGF表达,从而抑制肿瘤组织新生血管生成,抑制肿瘤细胞增殖,达到其抗肿瘤作用。     

加味当归补血汤对肿瘤化疗所致小鼠免疫功能低下的影响

目的研究加味补血汤对荷瘤小鼠进行环磷酰胺(CY)化疗所致小鼠免疫功能低下的正向调节作用,筛选最佳治疗剂量。方法采用全自动血象分析仪检测RBC、WBC水平,采用MTT法测定淋巴细胞增殖程度、酶联免疫吸附法检测G-CSF活性观察加味当归补血汤对荷瘤小鼠CY化疗后免疫功能抑制的调节作用。结果 1)肿瘤组各项检测指标均下降,与空白组相比较有显著性差异(P<0.01或P<0.05);2)荷瘤小鼠腹腔注射CY后与肿瘤组小鼠相比较差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05);3)各给药组小鼠的RBC、WBC、Hb水平G-CSF活性及T淋巴细胞增殖程度与模型组相比较,大部分存在差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),其中加味当归补血汤的中剂量治疗效果更加显著(P<0.01)。结论加味当归补血汤对肿瘤化疗所致小鼠免疫功能低下有上调作用,能有效的抑制CY导致免疫功能低下,中剂量效果最佳。     

补骨脂醇提物和水煎物抗疲劳药效比较研究

目的：研究补骨脂醇提物和水煎物抗疲劳活性的差异.方法：采用小鼠游泳疲劳模型,以小鼠负重游泳时间、血乳酸（BLA）、血清尿素氮（BUN）及肝糖原为指标比较补骨脂醇提物和水煎物抗疲劳活性的差异.结果：与空白对照组比较,醇提补骨脂组小鼠负重游泳时间显著延长（P＜0.05）,BLA水平显著降低（P＜0.05）,肝糖原水平显著升高（P＜0.05）,差异均具有统计学意义;水煎补骨脂组小鼠仅肝糖原水平较对照组显著升高（P＜0.05）,差异具有统计学意义.结论：补骨脂醇提物具有缓解疲劳的作用,且其作用强度大于水提物.