流式细胞仪检测益肺清化膏对荷瘤小鼠瘤组织E-cad CD44v6表达水平的影响

目的:通过流式细胞仪检测使用益肺清化膏后荷瘤小鼠体内移植的Lewis肿瘤细胞表达E-cad、CD44V6的情况.方法:C57BL/6小鼠45只,随机分为中药组、CTX组对照及空白对照组.每只小鼠均右侧腋窝皮下接种肿瘤匀浆液0.2mL/鼠.第2天中药组开始灌胃给药,连续15天;CTX对照组CTX腹腔注射给药,分别于第3、7、11、15天给药1次;空白对照组予洁净自来水灌胃,每天1次,连用15天.第21天颈椎脱臼处死动物,取瘤组织处理后上机检测.结果:中药治疗后瘤组织内的E-cad水平呈高表达状态,阳性表达率达14.77%,优于CTX组内6.16%和对照组2.75%的表达水平.其中中药组与对照组的表达水平比较,有非常显著的差异(P＜0.01);CTX组与中药组比较差异不明显.中药治疗后,瘤组织内的CD44V6水平呈低表达状态,阳性表达率为3.73%,弱于CTX组10.8%和对照组13.48%的表达水平.其中中药组与对照组的表达水平比较有较为显著的差异(P＜0.05);CTX组与中药组比较差异不明显.结论:研究证实,益肺清化膏可有效地提高E-cad的表达,降低CD44V6的表达水平.CTX对照治疗的结果对E-cad、CD44V6的作用不肯定.     

益肺清化膏含药血清对肺癌细胞株的抑制作用

目的:研究益肺清化膏对肺癌细胞的抑制作用.方法:使用血清药理学的方法,体外观察益肺清化膏含药血清对两种不同的肺癌细胞株(PG、PAa细胞株)的抑制作用.结果:益肺清化膏含药血清具有一定的抑瘤效果,抑瘤率为23.0%～36.2%,且以较高浓度时抑瘤作用显著;但总体来说,抑瘤作用要明显弱于化疗药物顺铂.结论:益肺清化膏对肿瘤生长具有一定的抑制作用.     

益肺清化膏对早期非小细胞肺癌术后患者治疗作用的随机对照研究

目的:观察益肺清化膏对早期肺癌术后患者的影响。方法:临床观察Ⅰ~Ⅱ期非小细胞肺癌手术后患者26例服用益肺清化膏6个月,中医症候、生存质量(体重、KPS和NCI-L评分)的变化情况。另设对照组25例,服用人参粉胶囊对比观察。结果:益肺清化膏可有效地改善患者神疲乏力、少气懒言、气短、咳嗽、纳谷少馨、痰中带血、大便干结、口干咽燥、盗汗、五心烦热等症候。其中少气懒言、咳嗽、纳谷少馨、大便干结等证候的改善尤为明显。比较治疗前后NCI-L量表总的得分情况:益肺清化膏可明显提高NCI-L评分水平。治疗后益肺清化膏组患者卡氏评分和体重也较治疗前显著提高。治疗前后免疫指标变化情况:益肺清化膏组治疗以CD3、NK较治疗前的水平提高明显。结论:益肺清化膏可有效地改善患者临床证候,明显改善患者生活质量及提高机体免疫功能。     

益肺清化膏配合放疗治疗中晚期肺癌的临床观察

肺癌近年来发病呈上升趋势,早期多采取手术和化疗,到了中、晚期手术和化疗效果欠佳,任何单一的治疗方法效果较差,笔者采用益肺清化膏配合放疗对中晚期肺癌患者进行综合治疗取得了令人满意的效果。1一般材料1.1年龄与性别:观察的共90例患者均来自于2004年1月至2005年12月本院住院病人,均经X线、B超、CT或MRI、经纤支镜活检病理确诊为中、晚期肺癌患者。其中,益肺清化膏加放疗组50例,男性33例,女性17例,平均年龄60岁;单放组(对照组)40例,男性27例,女性13例,平均年龄58岁,两组比较无明显差异。1.2病理分型:治疗组鳞癌34例,腺癌12例,腺鳞癌4…     

益肺清化膏辅助治疗非小细胞肺癌术后患者多中心随机对照临床研究

目的观察益肺清化膏辅助治疗非小细胞肺癌术后患者的临床疗效及安全性。方法采用多中心、大样本、随机对照的临床试验设计方法,将360例I~ⅢA期非小细胞肺癌术后患者随机分为治疗组184例和对照组176例。两组ⅠB~ⅢA期患者术后辅助化疗方案,选择顺铂或卡铂联合长春瑞滨或紫杉醇或吉西他滨,化疗4个周期;ⅢA期及切缘阳性患者术后辅助胸部放疗。治疗组再给予口服益肺清化膏口服,每次20 g,每日3次。两组疗程均为6个月,观察时间为2年。采用美国肺癌患者生存质量测定量表(FACT-L中文版)评价生存质量,观察治疗前后中医证候积分、卡氏评分、体重及免疫功能的变化,判定中医证候疗效。结果剔除脱落及缺失病例后,治疗组117例中中医证候疗效显效22例,有效81例,无效14例,对照组91例中显效8例,有效53例,无效30例,治疗组疗效优于对照组(P0.01)。治疗组治疗3个月开始FACT-L中文版量表身体状况领域评分开始较治疗前逐渐降低,治疗6个月开始社会家庭状况、情感状况、功能状况、附加的关注情况领域评分开始较治疗前逐渐降低(P0.05或P0.01)。治疗组治疗后及随访时各领域评分在一定程度上优于对照组,以身体状况、社会家庭状况及功能状况最明显(P0.05或P0.01)。治疗组治疗后卡氏评分变化、体重变化及免疫功能变化亦优于对照组(P0.05或P0.01)。结论益肺清化膏辅助治疗非小细胞肺癌术后患者疗效确切,可明显改善患者生存质量状况及临床症状,调节患者免疫功能,无严重不良反应。     

应用网络药理学方法探讨益肺清化颗粒治疗肺癌的作用机制

目的：使用网络药理学的方法,探讨益肺清化颗粒(肺瘤平)治疗肺肿瘤的分子机制。方法：利用TCMSP数据库及SwissADME筛选出肺瘤平中的主要有效化合物及其靶点;运用Cytoscape 3.8绘制药物成分-靶点网络;通过Genecards、OMIM数据库检索肺肿瘤相关靶点;通过韦恩图得肺瘤平、肺肿瘤的共同靶点;使用String平台构建化合物-疾病共同靶点的蛋白互作(PPI)网络;使用Metascape数据库进行基因本体(Gene Ontology, GO)分析和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路分析;采用动物模型进行实验验证。结果：本研究共获得肺肿瘤402个活性成分,1260个相关靶点,肺肿瘤相关靶点为1683个,肺瘤平调节肺肿瘤的作用靶点339个,再次筛选得到核心共同靶点131个;GO富集分析共得主要条目中涉及生物过程4397条,细胞组成312条,分子功能490条。KEGG通路分析共得到核心信号通路117条。结论：实验结果显示,肺瘤平可能通过多种有效成分作用于EGFR、COX-2、GSK3β、IL...     

益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠血管内皮细胞生长因子及其受体的影响

目的观察益肺清化颗粒对LewiS肺癌荷瘤小鼠瘤体中的血管内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体（KDR）含量的影响,以期阐明其抑瘤的作用机制。方法80只C57BL／6近交系小鼠右腋皮下接种LewiS瘤细胞悬液0．2mL（细胞浓度为1×10^7个／mL）,随机分为空白组、对照组、益肺清化颗粒低剂量组、益肺清化颗粒中剂量组、益肺清化颗粒高剂量组、吉非替尼组、吉非替尼＋益肺清化颗粒中剂量组、环磷酰胺（CTX）组。每组10只。实验第2日开始给药,除CTX组第3日及第7日给药2次外,其余各组均给药14d。实验第15日处死小鼠,取瘤,以蛋白质印迹法（WesternB10t）检测瘤组织VEGF及其受体KDR的表达。结果益肺清化颗粒低、中剂量组VEGF表达低于对照组（P〈0．01）,吉非替尼组VEGF表达低于对照组（P〈0．05）,益肺清化颗粒高剂量组、吉非替尼＋益肺清化颗粒中剂量组、CTX组VEGF表达低于对照组（P〈0．001）;益肺清化颗粒低、中、高剂量组,吉非替尼组及CTX组KDR表达与对照组比较均有所降低（P〈0．05）。结论益肺清化颗粒可降低VEGF及其受体KDR的表达,进而发挥抑瘤作用。     

益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠VEGF、bFGF、Angiostatin、Endostatin影响的研究

目的 观察中药益肺清化颗粒对Lewis肺癌小鼠瘤组织中的血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF）、血管抑素（Angiostatin）、内皮抑素（Endostatin）的影响,探讨益肺清化颗粒的抑瘤机制。方法 70只小鼠随机分为模型组,中药低、中、高剂量组,吉非替尼组,吉非替尼加中药中剂量组,以及环磷酰胺（CTX）组,每组10只。所有小鼠右腋皮下接种Lewis瘤细胞进行造模。模型组给予纯净水0.4 mL灌胃,每天1次;中药低、中剂量组分别给予益肺清化颗粒5、10 g/kg灌胃,每天1次;中药高剂量组给予益肺清化颗粒10 g/kg灌胃,每天2次;吉非替尼组给予吉非替尼100 mg/kg灌胃,每天1次;吉非替尼加中药中剂量组上午给予吉非替尼100 mg/kg灌胃,下午给予益肺清化颗粒10 g/kg灌胃。上述各组均从小鼠接种肿瘤细胞的第2天开始给药,连续14天。CTX组在实验第3、7天给予CTX 60 mg/kg腹腔注射。第15天处死小鼠,取瘤,免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF、bFGF、Angiostatin、Endostatin的表达。结果 与模型组比较,各给药组VEGF表达均显著降低（P<0.01）,Angiostatin、Endostatin表达显著增加（P<0.01）,且吉非替尼组bFGF表达明显降低（P<0.05）。各给药组间VEGF比较,差异无统计学意义（P>0.05）。CTX组 Angiostatin表达显著高于中药低剂量组（P<0.01）。中药高剂量组、吉非替尼加中药中剂量组Endostatin表达明显高于中药低、中剂量组（P<0.01）;吉非替尼加中药中剂量组Endostatin表达明显高于吉非替尼组（P<0.05）。结论 益肺清化颗粒可能通过降低血管生成促进因子VEGF的表达,升高血管生成抑制因子Angiostatin、Endostatin的表达,进而发挥抑瘤作用。     

益肺逐积方联合环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织CD151、整合素α3及β1 mRNA表达水平的影响

目的研究益肺逐积方联合环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织CD151、整合素(integrin,ITG)α_3及ITGβ_1mRNA表达水平的影响。方法 C57BL/6小鼠右前肢腋窝皮下接种Lewis细胞建立肺癌小鼠模型,随机分为模型组、CTX组、益肺逐积方组、联合用药组,每组10只,造模次日益肺逐积方组和模型组分别给予益肺逐积方(14.95g/kg)和等体积生理盐水灌胃,1次/d;CTX组在造模后72h和10d腹腔注射CTX(40mg/kg);联合用药组在CTX组基础上灌胃益肺逐积方。给药期间观察小鼠状态及成瘤情况,给药14d后测量体重、瘤体积计算抑瘤率;常规石蜡切片检测肿瘤组织病理变化;荧光定量PCR检测肿瘤组织CD151、ITGα_3及ITGβ_1mRNA表达。结果与模型组比较,益肺逐积方组与联合用药组肿瘤体积减小(P0.05);抑瘤率由高到低依次为:联合用药组、益肺逐积方组、CTX组。病理学检测结果显示肿瘤组织呈实片状排列并向骨骼肌浸润,肿瘤细胞沿细支气管壁及肺泡壁弥漫性生长。与模型组比较,益肺逐积方组、CTX组及联合用药组CD151mRNA表达降低(P0.01,P0.05),联合用药组ITGα_3mRNA表达量降低(P0.05)。与CTX组比较,益肺逐积方组ITGβ_1mRNA的表达量降低(P0.05)。结论益肺逐积方与CTX联合用药可更有效抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,益肺逐积方可通过下调肿瘤组织CD151和ITGα_3及ITGβ_1mRNA表达水平,达到治疗肺癌的功效。     

补肾益肺解毒法对Lewis肺癌小鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞、Foxp3及B7-H3的影响

目的:研究补肾益肺解毒法对Lewis肺癌小鼠CD4~+CD25~+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)、转录因子Foxp3及共刺激因子B7-H3表达的影响。方法:建立32只6~8周龄C57BL/6雄性小鼠Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型后,将32只造模后小鼠随机分为模型组、中药组、化疗组及综合组,每组各8只,单笼饲养。模型组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;中药组以0.4 m L中药液灌胃14 d,并分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射生理盐水1 m L;化疗组以0.4 m L生理盐水灌胃14 d,分别在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L;综合组以0.4 m L中药液灌胃14 d,在第1天、第3天、第5天腹腔注射DDP溶液1 m L。给予药物干预14d后,观察小鼠的一般状况、饲料消耗量、体质量、去瘤体质量、移植瘤质量等,流式细胞术检测各组小鼠外周血和移植瘤CD4~+CD25~+Treg细胞的比例、Foxp3以及B7-H3的含量。结果:补肾益肺解毒法可改善肺癌小鼠的行为体征,增加饲料消耗量、体质量和去瘤体质量,减少移植瘤重量,与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05)。补肾益肺解毒法治疗可显著降低Lewis肺癌小鼠外周血和移植瘤CD4~+CD25~+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平,与模型组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:补肾益肺解毒法通过降低CD4~+CD25~+Treg细胞、Foxp3以及B7-H3的水平增强机体的抗肿瘤免疫应答发挥抑瘤作用。     

乳宁冲剂及拆方对裸鼠移植瘤生长及肺转移的影响

通过体内实验探讨乳宁冲剂及其拆方对裸鼠移植瘤生长及肺转移的抑制作用。选雌性BALB/c裸鼠,以对数生长的体外培养的MDA MB435高转移乳腺癌细胞造模。随机分为模型组、乳宁冲剂组、乳宁冲剂拆方温肾组、乳宁冲剂拆方疏肝活血组、三苯氧胺组(TAM组)、环磷酰胺组(CTX组),给药7周后记录移植瘤直径、瘤重,解剖显微镜下计数肺转移结节,病理切片观察肺转移灶大小及流式细胞仪检测瘤组织细胞周期。结果:乳宁冲剂组对肿瘤生长抑制作用明显;乳宁冲剂组及拆方温肾组、理气活血组对裸鼠乳腺癌移植瘤的肺转移抑制作用分别为46.36%、32.73%、18.2%,乳宁冲剂组作用与CTX组(50.91%)比较无显著差异;乳宁冲剂组可抑制细胞的有丝分裂,增加G0/G1期细胞数量,减少S期细胞数目,与模型组比有统计学意义(P<0.05),温肾组也有此作用趋势。乳宁冲剂全方抑制肿瘤生长及抗转移作用优于拆方,而拆方组以温肾组抗转移作用优于疏肝活血组。乳宁冲剂可能通过调整细胞周期,抑制DNA合成而抑制肿瘤生长及转移。     

补肾方剂对小鼠胎盘单胺氧化酶活性的影响

目的观察补肾方剂对胎儿宫内发育迟缓（IUGR）模型孕鼠胎盘单胺氧化酶（MAO）活性的影响,探讨其作用机理。方法孕鼠随机分为正常组、模型组、左归丸组、右归丸组、五子衍宗丸组、四君子汤组、四物汤组、八珍汤组、正常＋左归丸组,40%乙醇致胎儿IUGR模型,模型组和正常组予生理盐水灌胃,各治疗组分别在造模同时予相应方药水煎液灌胃,11 d后检测各组孕鼠胎盘组织MAO活性。结果 40%乙醇致IUGR的母体胎盘组织MAO活性明显降低（P〈0.01）,补肾阴方左归丸、平补肾方五子衍宗丸及气血双补方八珍汤对IUGR模型孕鼠胎盘组织MAO活性降低有明显回升作用（P〈0.05或P〈0.01）;补气方四君子汤、补血方四物汤、补肾阳方右归丸对IUGR模型孕鼠胎盘组织MAO活性降低无作用。结论平补肾方、补肾阴方和气血双补方可通过对抗酒精抑制的MAO活性,起到保护胎儿、保证胚胎正常发育的作用。     

调补肺肾法对慢阻肺稳定期综合预后指标影响的临床研究

目的:探讨调补肺肾法治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期的临床疗效,评价治疗COPD稳定期患者的预后作用。方法:选取2014年1月至2015年6月在我院就诊的COPD稳定期患者84例,采用随机方法将患者分为治疗组(42例)和对照组(42例),治疗组给予常规治疗和口服调补肺肾方药,而对照组仅给予常规治疗,观察2组临床疗效及综合预后情况。结果:2组治疗后中医症候总积分较治疗前均有所下降,而治疗组较对照组下降幅度明显(P<0.05);治疗组治疗总有效率为92.86%,明显高于对照组的64.29%,治疗组疗效优于对照组(P<0.05);2组治疗后肺功能均有所改善,其中治疗组FEV1和FEV1/预计值(%)、FVC和FVC/预计值(%)等指标改善情况优于对照组(P<0.05);治疗组治疗后呼吸困难情况、6 min行走距离和BODE评价总分均较治疗前有改善(P<0.05),而对照组治疗后6 min行走距离和BODE评价总分亦较治疗前有所改善(P<0.05),但呼吸困难情况改善不明显(P>0.05),治疗组治疗后呼吸困难情况、6 min行走距离和BODE评价总分均较对照组治疗后明显改善(P<0.05)。治疗组治疗后各免疫指标、生活质量指标和急性发作次数较对照组均有所改善(P<0.05)。结论：调补肺肾法能有效治疗COPD稳定期患者,改善患者预后情况。     

益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏和母胎界面CD4~+CD25~+T细胞表达的影响

目的 观察益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏和母胎界面CD4+CD25+ T淋巴细胞表达的影响。     

肺瘤平膏及其拆方对Lewis肺癌小鼠树突状细胞影响的实验研究

目的观察中药复方肺瘤平膏及其拆方对Lewis肺癌荷瘤小鼠血中、脾中及瘤体中的树突状细胞(DC)含量的影响,以期阐明不同治则方药对机体免疫调节功能可能的作用机制。方法观察肺瘤平膏及其各拆方对Lewis肺癌小鼠血中及脾中DC含量的影响,并用免疫组化观察各组瘤组织中S-100蛋白的表达情况。结果 Lewis肺癌荷瘤小鼠的外周血及脾中DC含量(‰)较正常组明显降低(P0.01),分别为:0.43±0.26vs4.68±0.90,0.32±0.16vs3.68±1.58,瘤组织中S-100蛋白的表达较弱;肺瘤平膏可明显提高其外周血及脾中DC含量(P0.01),分别为:2.55±0.29,2.70±0.63,并明显上调S-100蛋白表达水平;拆方研究表明,肺瘤平膏中的益气类方药对Lewis肺癌荷瘤小鼠DC含量及表达的升高作用最为显著。结论在扶正培本为主要治则的肺瘤平膏抗肿瘤作用明确,其作用机制可能是通过提高荷瘤小鼠DC含量及表达,增强机体的抗肿瘤免疫功能,进而发挥抑瘤作用。     

生精益气汤治疗精液异常不育症临床研究

目的：观察生精益气汤治疗精液异常不育症的临床疗效。方法：将120例精液异常不育症患者随机分为两组，对照组60例给予口服黄精赞育胶囊治疗；治疗组60例煎服生精益气汤治疗，疗程均为90d。结果：临床总有效率治疗组为86．67％，对照组为83．33％，精液各项参考指标两组治疗后，差异均没有统计学意义（P〉0．05），治疗组治疗前后差异有极显著性差异（P〈0．01）。结论：生精益气汤治疗精液异常不育症疗效显著，可明显提高精子数量、活力及成活率。     

补肾化痰方对肾虚模型裸鼠乳腺癌骨转移的影响

目的:补肾化痰方对肾虚模型裸鼠乳腺癌骨转移的影响.方法:将30 只雌性裸鼠随机分为对照组、模型组及治疗组[补肾化痰方(3.67 g·kg-1)],每组10 只.模型组及治疗组皮下注射氢化可的松制成肾虚模型.肾虚模型制成3 d后,以左心室注射肿瘤细胞法制成骨转移模型.对比3 组裸鼠体质量变化、瘤体质量、骨转移部位数、骨转...     

消痰散结方对胃癌组织细胞粘附分子CD44、CD49的影响

目的:探讨消痰散结方对胃癌的抑制作用及其可能的作用机制。方法:用流式细胞仪检测消痰散结方和化疗药环磷酰胺(CTX)对胃癌组织细胞粘附分子表达的影响。结果:消痰散结方的抑瘤率达45.2%,且消痰散结方能降低 CD44、CD49 d 的表达。结论:消痰散结方可能通过影响肿瘤组织间质中某些粘附分子的表达而起到阻滞肿瘤生长转移的作用。     

益气补肾中药对自然流产模型小鼠NK细胞的影响

目的:观察益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏、母胎界面组织NK细胞表达的影响。方法:以雌性CBA/J和雄性DBA/2为模型,孕0天始灌服益气补肾中药,并与环孢素A(CSA)对照,孕9天、14天流式分析脾脏、母胎界面NK细胞的表达。结果:孕9天各用药组NK细胞在脾脏及母胎界面的表达较阴性对照组明显降低(P<0.01或P<0.05);孕14天各用药组NK细胞在脾脏的表达较阴性对照组明显降低(P<0.05);孕14天中西医结合组NK细胞在母胎界面的表达较阴性对照组明显降低(P<0.05),而中药组、CSA组与阴性对照组比较无明显差异(P>0.05)。结论:益气补肾中药可下调自然流产模型小鼠孕9天及14天脾脏NK细胞表达及孕9天母胎界面NK细胞表达;益气补肾中药与CSA协同可下调自然流产模型小鼠孕14天母胎界面NK细胞表达,具有一定的免疫调节作用。