甲状腺肿瘤患者中辅助性T细胞22及白细胞介素-22的变化及意义

目的 检测甲状腺肿瘤患者外周血及肿瘤组织中辅助性T细胞22 (Th22)及白细胞介素(IL)-22的表达水平,探讨其与患者临床病理特征的关系.方法 选择56例原发甲状腺肿瘤患者和30例健康志愿者,采用流式细胞仪检测外周血Th22细胞水平,酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清中IL-22表达水平,应用免疫组织化学双染色分析正常组织及肿瘤组织中Th22阳性细胞的浸润程度,分析这些参数与临床病理特征间的关系.结果 甲状腺肿瘤患者外周血中Th22细胞及IL-22水平分别为(1.74±0.27)％和(162.7±32.2) ng/L,显著高于对照组[(0.57±0.14)％,t=15.72,P＜0.01;(64.2 ±20.7) ng/L,t=11.31,P＜0.01];甲状腺癌患者的Th22细胞比例及IL-22水平明显高于甲状腺瘤患者[(2.21±0.34)％比(1.39±0.22)％,t=9.14,P＜0.01;(199.1±34.1)ng/L比(129.8±31.3) ng/L,t=6.79,P＜0.01].甲状腺肿瘤患者组织中Th22阳性细胞浸润率为56.25％,而对应正常组织为8.33％,差异有统计学意义(x2=8.167,P＜0.01);甲状腺癌组织中Th22细胞浸润率为78.6％,甲状腺瘤组织为38.9％,差异有统计学意义(x2=5.039,P＜0.05).外周血Th22细胞比例、IL-22的表达水平和肿瘤组织中Th22阳性细胞浸润程度与临床分期、淋巴结转明显相关(P＜0.05),与年龄、性别、病理类型无明显相关(P＞0.05).结论 甲状腺肿瘤患者外周血Th22细胞比例及血浆中IL-22水平显著升高,且与临床分期等病理特征明显相关,表明Th22细胞及IL-22参与甲状腺肿瘤的发生发展.     

肝癌组织辅助性T细胞-2细胞因子强势分泌研究

目的　探讨人肝癌组织中辅助性T细胞亚群 (Th1/Th2 )细胞因子表达模式。方法　收集我科手术切除肝癌组织标本 15例 ,肝良性疾病或肝硬化门静脉高压手术患者肝组织标本 15例作为对照 ,β 肌动蛋白 (β actin)作为参照 ,采用半定量逆转录 聚合酶联反应 (RT PCR)方法检测人肝癌组织中γ 干扰素 (IFN γ)和白细胞介素 4(IL 4)mRNA的表达。结果　人肝癌组织中IFN γmRNA表达 (相对数 :1.18± 0 .3 1)比对照组肝组织中IFN γmRNA表达弱 (相对数 :1.86±0 .5 0 ) ,而IL 4mRNA表达 (相对数 :1.73± 0 .5 1)比对照组强 (相对数 :0 .94± 0 .41,P <0 .0 5 )。结论　人肝癌组织中Th1类细胞因子表达弱 ,Th2类细胞因子表达强 ,呈现Th2细胞因子表达模式 ,肝癌组织局部微环境处于免疫抑制状态 ,肿瘤细胞易发生免疫逃逸     

辅助性T淋巴细胞17在同种异体肾移植排斥中的作用

辅助件T淋巴细胞17是最近发现的CD+4效应T淋巴细胞的新亚群.辅助性T淋巴细胞17可以分泌白细胞介素17、白细胞介素21、白细胞介素22等多种细胞因子,其中白细胞介素17在多种自身免疫疾病和炎性疾病中起关键作用.基于文献中总结出临床和实验证据,我们将对肾移植排斥反应中辅助性T淋巴细胞17介导排斥发病机制进行探讨,为防治对策开辟新的研究思路和方向.     

胃腺癌上皮细胞、癌旁上皮细胞及其浸润淋巴细胞白细胞介素-12和白细胞介素-13的表达

白细胞介素 (IL) 12是一种多功能免疫促进因子[1] ,主要由Th1细胞产生 ,先前对其抗肿瘤的基础和临床 ,尤其是应用于肿瘤的免疫疗法有大量研究 ;近年来 ,发现肿瘤细胞也可表达IL 12。IL 13由Th2细胞产生 ,是多功能免疫抑制因子[2 ] ,为探讨IL 12、IL 13与胃癌的发生发展关系 ,我们应用即用型SABC免疫组织化学法 (SP法 )观察胃癌上皮细胞及其浸润淋巴细胞 (TIL)白细胞介素 12和白细胞介素 13的表达 ,并探讨其意义。一、材料和方法1.材料 :10例胃腺癌组织及其对照癌旁组织 ,均用石蜡标本 ,所有标本术前未经化疗、放疗和免疫治疗。…     

白细胞介素-22对细胞信号转导通路的影响

白细胞介素-22(IL-22)是2000年发现的一种新型细胞因子,主要由活化的T1细胞和NK细胞分泌生成.其受体在人体皮肤、泌尿系统、消化系统及呼吸系统组织中均有较高的表达.研究发现IL-22不仅具有抗微生物感染、诱导急性炎性介质反应、防御及修复损伤、增强天然免疫等作用,最重要的它还能调节肿瘤细胞的增生、分化及凋亡过程,这为我们研究某些肿瘤的靶向治疗提供了新的启示.     

白细胞介素-15对放射线诱导T淋巴细胞凋亡的保护作用

目的观察重组人白细胞介素(rhIL)-15对放射线照射的T淋巴细胞损伤的保护作用。方法从30例正常人的骨髓分离淋巴细胞,随机分为实验组及对照组各15例。实验组加入100μg/L的IL15,两组分别放射线照射,流式细胞术和细胞核形态检测等方法观察照射前后T细胞亚群、bclXL、bax和bcl-2蛋白水平变化和淋巴细胞凋亡率。结果放射线照射后淋巴细胞出现大量凋亡;实验组的淋巴细胞凋亡率较对照组明显降低,T细胞亚群表达率较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);实验组的细胞凋亡相关基因bcl2、bclXL的表达水平较对照组上调,bax表达则较对照组下调(P<0.01)。结论IL-15能抑制放射线引起的淋巴细胞凋亡,改善急性放射病引起的免疫损伤。     

细胞因子白细胞介素-35研究进展

近年来,有关细胞因子研究的诸多进展对于人们深刻理解和认识机体免疫反应的生理功能与病理意义具有重要作用。2007年,Collison等首次描述了白细胞介素-35（inter—leukin-35,IL-35）的组成及其功能,发现IL-35是小鼠体内专一由调节性T细胞（regulatory T cells,Treg）分泌,并对免疫功能发挥调控效应的重要细胞因子。新近的资料证实,IL-35参与了宿主免疫反应的调节过程,对其的研究日益受到高度关注。现就有关研究进展进行综述。     

小干扰RNA对特异性沉寂淋巴细胞白细胞介素-2基因表达和功能的影响

目的 探讨体外转录法合成的小干扰RNA（siRNA）对大鼠淋巴细胞白细胞介素（IL）-2基因的表达和功能的影响。方法 设计并合成3条siRYA（siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3）在阳离子脂质体的介导下转染淋巴细胞。于转染后0、24、48h收集细胞，用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测IL-2mRNA的变化；酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测IL-2表达的变化。结果 体外合成的3条siRNA通过脂质体转染淋巴细胞后，均能不同程度地抑制I[,-2的表达。转染后24h的ELISA方法检测显示siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3组的抑制率分别为（79．20±1．83）％、（66．50±1．42）％、（43．90±1．22）％，以siRNA-1的IL-2抑制作用最强。半定量RT-PCR方法检测显示siRNA-1、6iRNA-2、siRNA-3转染后的IL-2mRNA均受到不同程度的抑制，其中siRNA-2组的抑制作用最明显（82，10±1．85）％。结论 siRNA可特异性的抑制淋巴细胞IL-2基因的转录和表达，为研究siRNA在移植免疫耐受及防移植物抗宿主病（GVHD）方面的应用提供了依据。     

转染增殖细胞核抗原肽表位融合白细胞介素-18基因的树突状细胞对T细胞增殖的影响

目的 观察转染增殖细胞核抗原(PCNA)肽表位、白细胞介素(IL)-18融合基因的树突状细胞(DCs)对T淋巴细胞增殖的诱导作用.方法 实验分为DCs组、空载体组、PCNA肽表位基因转染组、PCNA肽表位融合IL-18基因转染组共4组,分别将空质粒(pIPES-EGFP)、PCNA肽表位质粒[pIPES-EGFP-PCNA(6)]和PCNA肽表位融合IL-18基因质粒[pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18]通过脂质体转染DCs.每组按照DCs∶T淋巴细胞1∶1、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80的比例分为4个浓度梯度,将DCs与T淋巴细胞共培养.采用CCK-8法检测T细胞增殖.结果 各组DCs均能刺激T淋巴细胞增殖,DCs∶T为1∶10时,转染pIPES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激指数为2.62,优于DCs组(1.70)、空载体组(1.78)和pIPES-EGFP-PCNA(6)组(1.93).结论 转染pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激T淋巴细胞增殖的作用最强,DCs:T为1∶10时最佳.

Abstract：

Objective To investigate the proliferation activity of T lymphocytes induced by dendritic cells modified by proliferating cell nuclear antigen (PCNA)-Epitope and interleukin (IL)-18 genes.Methods The experiment was divided into four groups, including DCs group, empty vector group, PCNAEpitope transfection group and PCNA-Epitope plus IL-18 gene group, and every group was assigned to four EGFP), PCNA-Epitope plasmid [pIRES-EGFP-PCNA(6)] and plasmid loaded PCNA-Epitope and IL-18 gene [pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18] were transfected into peripheral blood-derived dendritic cells, then cocultured with T lymphocytes respectively. T lymphocytes proliferation was determined by CCK-8 assays.Results The index of stimulation of the pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18 group was 2. 62 when the ratio transfection group (1. 93). Conclusion DCs treated with the PCNA-Epitope and IL-18 gene could stimulate T lymphocytes proliferation more effectively,and the optimal rio of DCs:T was 1:10.     

Characterization,quantification, and localization of passenger T lymphocytes and NK cells in human liver before transplantation

Quantification and localization of the main lymphocyte populations were studied in the livers of normal (n=8) and brain dead (n=8) subjects. Cytometric analysis performed on mononuclear cell suspensions obtained from liver biopsies was compared to an automatic image analysis of immunostained sections. The overall number of liver associated lymphocytes was in the usual range of peripheral blood content (2 to 9 · 10⁹ cells). Phenotypic analysis showed predominant NK and CD8+ cells that highly expressed class II antigen and CD25 and CD69 activation markers. Quantitative mapping of these activated lymphocytes revealed their preferential localization in the portal tract and the perisinusoidal area as compared to the pericentrolobular zone, especially in donor livers. This strategic localization could suggest a possible early cooperation between donor lymphocytes and initial infiltrating cells from the recipient and could explain the special immunological status of allografted livers.     

活化的脐血T淋巴细胞胞内细胞因子特性研究

目的通过对人脐血中CD4+和CD8+T淋巴细胞经特异抗原刺激后,胞内细胞因子γ-IFN和IL-4分泌水平的研究,探讨人脐血干细胞移植后急、慢性移植物抗宿主病(GVHD)发生低下的可能机制.方法15份脐血和15份健康成人外周血中T淋巴细胞在莫能霉素存在的情况下,体外经十四烷酰拂波醇乙脂和离子霉素刺激后,分别进行CD4-FITC、CD8-FITC荧光单抗染色和γ-IFN-PE、IL-4-PE荧光单抗胞内染色,最后进行流式细胞仪分析.结果脐血中CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞胞内γ-IFN分泌水平均明显低于成人外周血中CD4+和CD8+T细胞,而脐血CD8+T细胞胞内IL-4分泌水平与成人外周同类细胞差异无显著性.结论人脐血中T淋巴细胞受特异抗原刺激后,胞内不能产生正常的Th1/Tc1样细胞因子谱,即活化的脐血T淋巴细胞Th1/Tc1样反应低下,这可能是脐血移植后GVHD发生低下的原因之一.     

胰腺癌患者外周血CD4-CD8-T细胞及白细胞介素-2、-6、-7水平测定的研究

目的 检测60例胰腺癌患者及60例正常人外周血CD4-CD8-T细胞及白细胞介素(IL)-2、IL-6、IL-7水平,探讨其与胰腺癌的关系.方法 采用流式细胞仪检测60例胰腺癌患者外周血CD4 - CD8 -T细胞水平;酶联免疫吸附试验( ELISA)法检测60例胰腺癌患者外周血清IL-2、IL-6、IL-7水平,并与60名健康人群进行对照比较.结果 胰腺癌患者外周血CD4 - CD8 -T细胞占CD3+T细胞的比例为(3.43±0.88)％,低于正常人群(5.66±1.23)％(P＜0.05);胰腺癌患者外周血中IL-2水平为(2.00 ±0.42) ng/L,低于正常对照组(5.50 ±0.64) ng/L(P＜0.05);IL-6水平为(210.68±10.82) ng/L,高于正常对照组(1.77 ±0.22) ng/L(P＜0.05);IL-7水平为(1.89±0.32) ng/L,低于正常对照组(6.35 ±0.56) ng/L(P ＜0.05).结论 胰腺癌患者外周血中CD4-CD8-T细胞的比例降低,IL-2、IL-7水平降低及IL-6水平升高可能与胰腺癌的发生有关.     

Caroli's病的研究现状

Caroli's病是一种罕见的常染色体隐性遗传病,由于该病发病率低,临床医师认识不足,临床表现隐匿且复杂,常容易导致误诊及漏诊.为了更好的认识此病,本文对本病的病因、分型、病理、临床表现、诊断和治疗现状做以综述.     

粘弹性物补充疗法的研究进展

目的对粘弹性物补充疗法进行全面客观的评价,以提供对其临床疗效的实际判断依据并展望发展趋势与方向。方法查阅国内外文献,重点是国际相关咨询机构和保险公司对粘弹性物补充疗法所做的评估以及临床所进行的循证医学研究。结果粘弹性物补充疗法目前已逐步被接受。尽管临床上对该疗法采用的玻璃酸钠相对分子质量大小、注射剂量及适应证等方面的意见尚未达成共识,但通过关节腔内注射玻璃酸钠治疗骨关节病的方法已获得一致认可。结论 粘弹性物补充疗法是临床治疗骨关节病方法之一。玻璃酸钠治疗膝关节炎和肩周炎疗效已证实,髋关节注射也逐步获得认可,其他小关节注射正逐步展开。     

转染增殖细胞核抗原肽表位融合白细胞介素-18基因的树突状细胞对T细胞增殖的影响

目的 观察转染增殖细胞核抗原(PCNA)肽表位、白细胞介素(IL)-18融合基因的树突状细胞(DCs)对T淋巴细胞增殖的诱导作用.方法 实验分为DCs组、空载体组、PCNA肽表位基因转染组、PCNA肽表位融合IL-18基因转染组共4组,分别将空质粒(pIPES-EGFP)、PCNA肽表位质粒[pIPES-EGFP-PCNA(6)]和PCNA肽表位融合IL-18基因质粒[pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18]通过脂质体转染DCs.每组按照DCs∶T淋巴细胞1∶1、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80的比例分为4个浓度梯度,将DCs与T淋巴细胞共培养.采用CCK-8法检测T细胞增殖.结果 各组DCs均能刺激T淋巴细胞增殖,DCs∶T为1∶10时,转染pIPES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激指数为2.62,优于DCs组(1.70)、空载体组(1.78)和pIPES-EGFP-PCNA(6)组(1.93).结论 转染pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激T淋巴细胞增殖的作用最强,DCs:T为1∶10时最佳.     

转染增殖细胞核抗原肽表位融合白细胞介素-18基因的树突状细胞对T细胞增殖的影响

目的 观察转染增殖细胞核抗原(PCNA)肽表位、白细胞介素(IL)-18融合基因的树突状细胞(DCs)对T淋巴细胞增殖的诱导作用.方法 实验分为DCs组、空载体组、PCNA肽表位基因转染组、PCNA肽表位融合IL-18基因转染组共4组,分别将空质粒(pIPES-EGFP)、PCNA肽表位质粒[pIPES-EGFP-PCNA(6)]和PCNA肽表位融合IL-18基因质粒[pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18]通过脂质体转染DCs.每组按照DCs∶T淋巴细胞1∶1、1∶10、1∶20、1∶40、1∶80的比例分为4个浓度梯度,将DCs与T淋巴细胞共培养.采用CCK-8法检测T细胞增殖.结果 各组DCs均能刺激T淋巴细胞增殖,DCs∶T为1∶10时,转染pIPES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激指数为2.62,优于DCs组(1.70)、空载体组(1.78)和pIPES-EGFP-PCNA(6)组(1.93).结论 转染pIRES-EGFP-PCNA(6)/IL-18的DCs刺激T淋巴细胞增殖的作用最强,DCs:T为1∶10时最佳.     

Value of measuring subpopulations of T and B lymphocytes in patients with musculoskeletal tumours

BACKGROUND: Aims of our study were to assess the clinical value of measuring subpopulations of T and B lymphocytes in patients with musculoskeletal tumours as an immunodiagnostic procedure in the primary diagnosis of tumours. METHODS: In this prospective study, blood samples were obtained from 145 patients aged 04-98 years with musculoskeletal tumours. CD3, CD4, CD8, Helper/Suppressor ratio and CD19 subpopulations of lymphocytes were measured in specimens of whole blood in EDTA, upon the principle of Ortho Cytoron Absolute flow cytometry. Histological tumour diagnosis was obtained by the histopathology investigation of biopsy sample and lymphocytes values allocated accordingly. RESULTS: Out of 145 patients, osteomyelitis was diagnosed in 15 (10.34%). Median values of subpopulations of lymphocytes were: CD3 2456, CD4 1479, CD8 929, Helper/Suppressor ratio 1.8 and CD19 560 and all were raised above normal values in patients with osteomyelitis. Results were also calculated for osteosarcomas, Ewing sarcomas, giant cell tumours, chondrosarcomas and other tumours. These causes had median values within normal reference levels. To confidently out rule or confirm diagnosis of osteomyelitis, we measured the cut off point values and they were: CD3 2420, CD4 1400, CD8 873 and CD19 550. CONCLUSIONS: The main clinical use of measuring subpopulations of lymphocytes is in establishing the correct diagnosis between suspected osteomyelitis and other musculoskeletal tumours. Levels of measured subpopulations of lymphocytes above the presented cut off values are important and accurate confirming factor for the clinical diagnosis of suspected osteomyelitis. LEVEL OF EVIDENCE: II.