真皮间充质干细胞治疗皮肤缺损创面的研究进展

大面积深度烧伤、严重创伤及外科手术切除体表恶性组织等均会造成体表皮肤组织的广泛缺损。在目前的临床医疗手段治疗后,创面虽然愈合,但丧失了皮肤的正常结构和外观,严重影响患者的生存质量。近年来,组织工程化人工皮肤的构建和应用为临床的大面积皮肤缺损的修复治疗提供了新的途径和方法。组织工程化皮肤的关键技术之一是种子细胞的选择,目前研究较多的种子细胞有骨髓间充质干细胞、表皮干细胞和真皮间充质干细胞（dermis-delved mesenchymal stem cells,DMSC）。本文就真皮间充质干细胞治疗皮肤缺损的研究进展作一综述。     

复合牙龈间充质干细胞的脱细胞真皮基质修复 SD 大鼠皮肤缺损实验

目的：：探讨牙龈间充质干细胞(GMSCs)复合脱细胞真皮基质(ADM)修复皮肤缺损的实验。方法：以纯化3代 GMSCs 作为种子细胞接种于 ADM,构建组织工程化皮肤替代物。实验分组：18只 SD大鼠随机分成3组：GMSCs 复合 ADM 移植组、单纯 ADM 组和空白对照组。将3组相应材料分别移植于 SD 大鼠背部皮肤缺损处,观察比较创面修复效果。结果：GMSCs 复合 ADM 移植组、单纯 ADM 组和空白对照组皮肤缺损创面愈合时间分别为(15.1±1.3)d、(18.5±2.1)d 和(22.6±2.6)d,差异有显著性意义(P <0.05)。组织学观察显示,GMSCs 复合 ADM 移植组成纤维细胞、新生小血管、胶原纤维均较单纯 ADM 移植组和空白对照组明显增多。结论：GMSCs 复合 ADM 移植构建组织工程化皮肤替代物移植后促进了新生血管形成、缩短了皮肤创面的修复。实验显示 GMSCs 作为种子细胞复合 ADM,移植构建组织工程化皮肤替代物可用于皮肤缺损的修复治疗。     

干细胞培养物对重度豚鼠皮肤缺损疗效观察

[目的 ]探讨采用培养干细胞移植治疗重度皮肤缺损。 [方法 ]将豚鼠随机分为干细胞治疗组 ,培养液对照组和空白对照组。取骨髓组织干细胞 ,经特殊培养方法培养后 ,用于重度缺损的异体豚鼠皮肤创面上 ,以平均愈合时间和平均愈合速度为指标 ,观察各组动物损伤皮肤的修复情况。 [结果 ]干细胞培养物组皮肤修复速度为 (4 0 .4 2± 2 .1 4 )mm2 /d ,平均愈合时间为 (1 2 .4 5± 2 .1 8)d ,明显高于对照组 ,且组织结构完整、瘢痕小。经统计学处理干细胞组与对照组相比差异显著 (P <0 0 5 )。 [结论 ]利用同种异体动物干细胞培养物进行皮肤损伤的治疗有明显的效果 ,为创伤修复、治疗开辟了一条新途径     

虾青素脂质体对小鼠皮肤紫外线损伤干预机制的初步研究

目的 探讨虾青素脂质体对小鼠皮肤中波紫外线（UVB）损伤的干预作用及机制。方法 将40只C57BL/6J小鼠随机分为4组,即空白组（不行UVB照射,不用药）、模型组（UVB光损伤组,只照射不用药）、对照组（照射+虾青素）、实验组（照射+虾青素脂质体）,每组10只。UVB照射（辐照强度为2 mW·cm2,辐照时间为60 s;前5日每日照射1次,后9日隔日照射1次,2周共照射10次）及药物干预（每次辐照前10 min用4 mL 0.2‰虾青素或4 mL 0.2‰虾青素脂质体涂抹于暴露皮肤）2周后,HE染色分别观察皮肤组织病理学改变,免疫组织化学染色观察皮肤 Ki-67抗原、8-羟基-2-脱氧鸟苷（8-OHdG）表达情况,试剂盒测定皮肤超氧化物岐化酶（SOD）活力和血清基质金属蛋白酶-13（MMP-13）质量浓度。结果 模型组和对照组的HE染色显示真皮变薄、真皮胶原纤维细长、排列疏松紊乱,与空白组比较,Ki-67、MMP-13及8-OHdG表达增加以及SOD活力降低,其差异均有统计学意义（P＜0.05）。实验组与模型组相比皮肤组织病理变化得到明显改善,Ki-67、MMP-13及8-OHdG表达减少及SOD活力升高,其差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论 外用虾青素脂质体可改善小鼠皮肤光损伤引起的病理变化及减轻胶原损伤,其强抗氧化作用可能是干预机制之一。     

脱细胞真皮联合骨髓间充质干细胞修复糖尿病大鼠皮肤全层缺损创面的研究

目的研究以骨髓间充质干细胞为种子细胞、脱细胞真皮为支架的组织工程皮肤对糖尿病大鼠皮肤全层缺损创面愈合的影响。方法 36只大鼠随机分为3组,A组：骨髓间充质干细胞＋脱细胞真皮实验组;B组：脱细胞真皮对照组;C组：空白对照组。观察创面愈合及5-BrdU阳性细胞表达角蛋白的表达情况。结果 A组第3、5、7及14 d创面愈合率分别为（19.10%±3.52%）、（29.80%±4.10%）、（56.71%±8.07%）与（88.12%±5.31%）,明显快于B、C两组（P〈0.05）。A组新生皮肤的细胞结合有序,排列紧密,真皮层较厚,有大量皮肤附属器及血管形成,明显多于B、C两组。免疫组化检测BrdU阳性细胞表达角蛋白。结论骨髓间充质干细胞联合ADM可有效促进糖尿病大鼠创面的愈合。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

高温高湿环境下负压伤口疗法对创面组织水肿及病理学变化的影响

目的探讨高温高湿环境下局部负压伤口治疗对兔创面组织水肿及病理变化的影响。方法以兔背部皮肤全层皮肤缺损的急性创面为模型,将24只创伤兔随机分为常温对照组、常温实验组、高温对照组、高温实验组,每组6只。实验组给予局部负压伤口治疗,对照组用纱布覆盖,不给予负压引流,在创伤后0、4、6 h分别通过光镜对创面组织病理形态学进行观察及用干湿法对各组动物的创面组织含水率检测。结果高温组较相应的常温组创面的组织含水率高（P〈0.05）、病理变化严重,实验组较相应的对照组创面的组织含水率低（P〈0.05）、病理变化轻。结论高温高湿创面肌肉组织水肿及病理损伤严重,局部负压伤口疗法可以有效减轻创面水肿及组织损伤程度。     

干扰素-γ对皮肤创伤愈合的影响

目的：探讨干扰素-γ（IFN-γ）对皮肤伤口愈合的影响。方法：选取40只雄性小鼠,制备机械性创伤小鼠模型,随机分为实验组和对照组。实验组给予肌肉注射IFN-γ100万IU/支,隔日1次,每次1支,连续治疗14 d,对照组不做处理。观察两组小鼠的愈合情况。结果：实验组20只小鼠,伤口愈合时间为14～20 d,平均（16.08±1.73）d,对照组为10～15 d,平均（12.75±1.54）d,差异有统计学意义（P〈0.05）。第14天时,实验组动物伤口愈合1只,对照组18只,后者明显多于前者（P〈0.05）。结论：IFN-γ可减慢皮肤创面愈合时间,从而影响创面愈合。     

组织工程皮肤修复动物皮肤缺损的实验研究

目的利用表皮细胞复合脱细胞真皮构建组织工程皮肤，探讨其用于修复动物皮肤缺损的可行性。方法将扩增的人表皮细胞复合异种（猪）脱细胞真皮支架构建组织工程皮肤，将制备的人工皮肤移植于裸鼠全层皮肤缺损，观察创面愈合情况并进行直接免疫荧光鉴定。结果构建的组织工程皮肤可用于修复裸鼠全层皮肤缺损，创面愈合良好，新生的表皮由移植的人表皮细胞增殖形成。结论利用表皮细胞复合脱细胞真皮构建的组织工程皮肤可用于修复动物全层皮肤缺损。     

负压封闭引流技术在肢体皮肤严重撕脱伤回植术中的应用

目的 探讨负压封闭引流技术在肢体皮肤严重撕脱伤患者中的应用效果.方法 选取我院2008年1月至2012年12月收治的80例肢体皮肤严重撕脱伤患者为研究对象,应用随机数字表法将肢体皮肤严重撕脱伤患者分为对照组和实验组,对照组患者进行传统打包加压植皮法治疗,实验组患者在肢体皮肤撕脱伤回植术中联合应用负压引流术进行治疗,观察两组患者平均住院时间、平均住院费用、皮片存活率、创面愈合时间和感染发生率.结果 实验组患者平均住院时间和平均住院费用分别为（12.16±5.59）d和（7253.76±623.85）元,对照组患者分别为（18.89±6.16）d和（9534.65±684.82）元;实验组患者平均创面愈合时间为（10.18±5.53）d,对照组患者为（20.47±5.37）d;实验组无感染发生,对照组感染发生率为12.50％;实验组皮片存活率为97.50％,对照组为85.00％.两组患者以上各项指标比较差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论 肢体皮肤撕脱伤回植术联合负压封闭引流技术能够明显缩短患者的住院时间和减少住院费用,促进患者术后愈合,减少术后感染的发生,提高皮片存活率,提高治疗效果,值得在临床推广应用.     

辐照猪皮覆盖削痂创面分期植皮治疗重度烧伤

目的:探讨和总结辐照猪皮治疗重度烧伤创面的方法及疗效.方法:对283例以深Ⅱ度创面为主的重度烧伤患者早期削痂覆盖辐照猪皮和功能部位切(削)痂分期植皮,观察创面愈合的情况及时间.结果:283例全部治愈.休克期过渡平稳,感染期全身毒性反应轻,创面愈合快,瘢痕增生不明显,远期效果好.结论:辐照猪皮有保护间生态组织和促进上皮化作用.分期手术可减轻创面感染及全身毒性反应,适用于基层医院治疗重度烧伤患者.     

异种皮作微粒皮移植覆盖物治疗深度烧伤效果观察

目的:探讨深度烧伤治疗中异种皮作微粒皮移植覆盖物的临床应用效果。方法:选取80例深度烧伤患者,依据随机数字表法分为观察组和对照组各40例。对照组采用异体皮作微粒皮移植覆盖物治疗,观察组采用异种皮作微粒皮移植覆盖物治疗,对2组患者术后第4周微粒皮成活率和创面愈合时间进行分析。结果:观察组患者的术后创面愈合时间显著短于对照组(P<0.01),但2组患者术后第4周微粒皮成活率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:深度烧伤治疗中异种皮作微粒皮移植覆盖物安全可行,术后愈合快,疗效与异体皮作微粒皮移植覆盖物治疗相当。     

复合皮移植与皮肤软组织扩张术在烧伤整形治疗中的应用效果对 比简

目的 对比分析复合皮移植与皮肤软组织扩张术在烧伤整形治疗中的应用效果.方法 选择成都市第二人民医院2011年1月～2013年1月收治的烧伤患者100例,随机分为两组,即观察组50例,对照组50例.对照组患者行复合皮移植治疗,观察组患者行皮肤软组织扩张术治疗.治疗后分别对两组患者的临床治疗效果进行评价.同时,观察并统计两组患者创面皮肤血运恢复时间、创面愈合时间及术后并发症发生率.结果 观察组患者临床治疗总有效率为96％（48/50）,对照组为76％（38/50）,两组比较,差异有高度统计学意义（P＜0.01）.观察组患者平均创面愈合时间及创面皮肤血运恢复时间依次为（12.6±3.2）、（18.4±4.2）d;对照组依次为（16.4±4.4）、（23.5±5.2）d,两组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.观察组患者术后并发症总发生率为10％,对照组为20％,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 皮肤软组织扩张术在烧伤整形治疗中的应用效果优于复合皮移植,能有效促进患者皮损创面愈合及创面皮肤血运恢复,且术后并发症少,值得临床推广与应用.     

补阳还五汤促进大鼠慢性难愈性创面修复愈合的作用及机制

目的：探讨补阳还五汤促进大鼠慢性难愈性创面修复愈合的作用及机制。方法：在54只雄性SD大鼠背部制造全层皮肤缺损开放性创面,除正常对照组外,大鼠肌肉注射醋酸氢化可的松建立难愈性创面模型,并随机分为模型组、补阳还五汤组。观察各组大鼠创面愈合率,愈合时间;并通过免疫组织化学和图像分析等技术,观察各组大鼠创面肉芽组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达情况和微血管数（microvessel count,MVC）。结果：模型组与正常对照组比较,创面愈合率低（P〈0．01,P〈0．05）,愈合时间明显延长（P〈0．01）;补阳还五汤组与模型组比较,创面愈合率显著提高（P〈0．01）,愈合时间明显缩短（P〈0．01）。模型组VEGF表达和MVC明显低于正常对照组（P〈0．01）;补阳还五汤组与模型组比较,VEGF表达和MVC均显著升高（P〈0．01）。结论：补阳还五汤能明显促进大鼠慢性难愈性创面的愈合,其作用机制可能与上调VEGF表达,诱导血管新生有关。     

负压封闭引流技术联合植皮治疗严重皮肤软组织缺损伴特殊感染创面

目的：探讨负压封闭引流（vacuumsuctionndrainage,VSD）技术联合植皮治疗严重皮肤软组织缺损伴特殊感染创面的疗效。方法：对皮肤软组织缺损伴特殊感染创面18例患者,彻底清创后VSD敷料覆盖创面,定期抗生素药液冲洗创面,待肉芽生长,创面新鲜后行网状中厚皮片植皮,再次用VSD敷料覆盖,负压吸引并给予植皮创面0．9％氯化钠注射液慢滴治疗。结果：伤口感染控制,创面肉芽新鲜,渗血明显,表面平坦,无组织坏死及异常渗出,给予植皮治疗后移植皮片存活良好,色泽淡红,血运正常,创面愈合时间平均为14d,平均应用VSD2．5次。结论：VSD联合植皮是治疗皮肤软组织缺损伴特殊感染创面的有效方法。     

脱细胞人胎羊膜在促进大鼠皮肤全层切口愈合中的作用机制

目的研究脱细胞人胎羊膜（HAM）对大鼠皮肤全层切口愈合过程中转化生长因子β（TGF-β）及凝血酶敏感蛋白1（TSP-1）表达的影响,探讨其促进全层切口愈合及无瘢痕愈合的发生机制。方法建立Sprague．Dawley大鼠全层皮肤缺损模型,然后将大鼠分为对照组和HAM组,每组15只。对照组大鼠切口用生理盐水冲洗后纱布包裹,HAM组大鼠切口外敷HAM并用纱布包裹。应用免疫组织化学技术分析切创后不同时相大鼠皮肤组织中TGF-β及TSP-1的表达。结果切口处理后第3天对照组大鼠皮肤组织TGF-β及TSP-1表达高于HAM组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论HAM可减少大鼠皮肤全层切口早期愈合过程中TGF—β及TSP-1的表达,促进切口愈合,减少瘢痕增生。     

神经纤维在胎兔皮肤无瘢痕愈合中的变化

目的 探讨周围神经在无瘢痕愈合中的作用。方法 在建立胎兔背部皮肤全层切割伤模型的基础上，采用免疫荧光方法，用蛋白基因相关产物9．5(proteingene product 9．5，PGP9．5)标记外周神经纤维，观察胎兔背部皮肤伤口愈合状况及神经纤维在无瘢痕愈合中的动态变化特点。结果 胎兔皮肤愈合快，在伤后3～5d均已完全无瘢痕愈合。成兔伤后第7天瘢痕愈合。胎兔皮肤伤后1～2dPGP9．5阳性神经纤维减少，第1天最明显，为正常胎兔的75．5％，以后逐渐增生至正常。成兔皮肤伤后1～2d，神经纤维明显减少，为正常成兔的33％。3～5d神经纤维增生，于第7天增生达峰值，为正常成兔皮肤的186％，第14天降至正常。结论神经纤维的“惰性”是胎兔皮肤无瘢痕愈合机制特点之一。     

内踝上逆行岛状筋膜皮瓣修复足踝部皮肤软组织缺损

目的: 探讨足踝部皮肤软组织缺损并骨外露或跟腱外露的修复方法.方法: 应用内踝上逆行岛状筋膜皮瓣转移修复13例由车祸外伤、疤痕溃疡、肿瘤等所致的足踝部皮肤软组织缺损并骨外露或跟腱外露.修复皮肤软组织缺损最大面积6cm×14cm, 跟骨外露最大面积5cm×10cm.结果: 共切取内踝上逆行岛状筋膜皮瓣13块,其中1例岛状筋膜皮瓣术后坏死,行游离背阔肌肌皮瓣移植修复愈合,其余内踝上逆行岛状筋膜皮瓣及供瓣区所植皮片均完全成活,术后随访6月～ 4年,效果满意.结论:内踝上逆行岛状筋膜皮瓣移植是修复足踝部皮肤软组织缺损并骨外露或跟腱外露的理想方法之一.     

改良封闭式负压引流联合点状植皮在压疮治疗中的疗效观察

目的探讨促Ⅳ期压疮患者治疗的有效方法。方法选取我科2011年7月～2012年5月期间收治的Ⅳ期压疮患者30例,随机分为实验组和对照组,每组患者15例,实验组采用改良封闭式负压引流治疗至创面床准备完毕后联合点状植皮;对照组采用改良封闭式负压引流治疗至创面床准备完毕后辅予牵拉后继续负压治疗。比较两组患者的创面愈合率、创面愈合时间。结果实验组与对照组相比,创面愈合率明显增加、创面愈合时间明显缩短,两组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。结论改良封闭式负压引流治疗压疮至创面床准备完毕后联合点状植皮可促进创面愈合,缩短创面愈合时间。     

砂仁叶油的化学成分分析及促进创面愈合作用研究

目的 分析砂仁叶油的化学成分,并考察其对家兔皮肤创面愈合过程的影响.方法 采用水蒸气蒸馏法提取砂仁叶油并用气质联用法分析挥发油的组分,应用峰面积归一化法计算各组分的相对质量分数.建立家兔皮肤缺损创伤模型,分别在术后第3、7、13天测量并计算家兔创面愈合率,伤口愈合后再切取创面组织进行HE染色观察.结果 从砂仁叶油中测出45种组分,检定出43种化合物.砂仁叶油能显著缩短家兔创面愈合时间,促进创面愈合,其效果与呋喃西林相当.创面愈合后组织切片HE染色观察显示,砂仁叶油促进创伤愈合后,新生表皮完好,炎性细胞少,组织病变少.结论 砂仁叶油的主要成分为伪柠檬烯(质量分数41.12％)、3-蒈烯(24.17％)、d-柠檬烯(3.25％)和桃金娘烯醇(3.18％),具有促进家兔皮肤创面愈合作用.