大鼠烫伤早期肠黏膜组织热休克蛋白HSP70和HSP90的表达

目的 研究烧伤早期肠黏膜组织热休克蛋白HSP70和HSP90的表达、组织含量和分布的变化规律,探讨烧伤早期肠黏膜组织细胞的热休克反应在机体的病理生理反应中的意义。方法 以烫伤大鼠为模型,利用ELISA、免疫印迹分析和免疫组织化学方法,分析和研究肠黏膜组织HSP70和HSP90的表达、组织含量和分布及其功能状态。结果 (1)大鼠烫伤早期肠黏膜游离HSP70的含量有非常显的短暂降低;(2)肠黏膜组织HSP70和HSP90的总体含量在烧伤后有显升高;(3)烧伤早期肠黏膜组织HSP70的分子结构存在显的不均一性。结论 肠黏膜组织细胞中两种热休克蛋白表达、含量和分布的规律性变化,在肠黏膜组织细胞的应激反应、进而在肠道的黏膜屏障机制中,可能有重要的意义。     

热休克蛋白90在门静脉高压症内脏高动力循环中的作用

目的:研究热休克蛋白90(heat shock protein 90,HSP 90)在门静脉高压症(portal hypertension,PHT)内脏动脉中的表达变化,探讨其在高动力循环形成中的作用及可能的机制。方法:检侧四氯化碳(CCl4)诱导的肝硬化PHT组(n=7)和对照组(n=7)大鼠的门静脉血流速度(portal vein blood flow velocity,PBV)、门静脉直径、门静脉血流量(portal vein blood flow,PBF)和门静脉压力(portal vein pressure,PP),离体肠系膜微动脉对去甲肾上腺素(norepinephrine,NE)的反应性、HSP 90特异性抑制剂格尔德霉素(geldanamycin,GA)对离体肠系膜微动脉收缩反应的影响以及肠系膜动脉内HSP 90和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的蛋白表达变化。结果:①PHT组大鼠PBV和PBF明显低于对照组,门静脉直径在PHT组与对照组之间无统计学差异,GA对PHT组PBV及PBF无明显改善;②PHT组大鼠PP明显高于对照组,GA对PHT组PP并无明显降低作用;③PHT组大鼠肠系膜微动脉对NE的收缩反应性明显降低,50%作用浓度明显增大,GA能部分改善这种低反应性;④PHT组大鼠肠系膜动脉内HSP 90和eNOS的蛋白水平较对照组明显上调,GA明显降低PHT组肠系膜动脉HSP 90表达的同时,也降低了eNOS的表达。结论:CCl4诱导肝硬化PHT肠系膜动脉中过度生成的HSP 90可能是通过增加eNOS的表达降低肠系膜动脉对NE的反应性参与内脏高动力循环的形成。     

门静脉高压大鼠局部肾素血管紧张素系统活性的改变

本研究应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测门静脉高压(PH)大鼠肝、肾脏局部肾素、血管紧张素原mRNA的表达,以探讨其在门静脉高压内脏血流动力学紊乱中的作用。1.材料与方法:(1)动物模型的制作:选取30只健康SD大鼠随机数字法分为PH组18只和假手术(SO)组12只。采用门静脉部分缩窄法建立门静脉高压动物模型。SO组只游离而不结扎门静脉。术后,PH组死亡4只,SO组死亡1只,所余25只用于本实验研究。(2)取材和检测:3周后颈椎脱臼法处死两组动物,剖腹取肾脏及肝脏组织,立即置于-80℃液氮保存备用。应用RT-PCR技术检测大鼠肝、肾脏局…     

谷氨酰胺诱导大鼠热休克蛋白70mRNA的表达

热休克蛋白(heat shock protein,HSP)是感染或非感染(如创伤、休克)等致病因素作用于机体后,诱发机体细胞合成的一组高度保守的蛋白质,谷氨酰胺(Glu-tam ine,Gln)作为体液中最丰富的氨基酸之一,对机体多个脏器有保护作用。一些研究表明,Gln在体外可促进果蝇Kc细胞HSP的表达[1];Gln诱导的HSP表达对肠道上皮细胞有保护[2]。但Gln是否能在动物的各个脏器引起HSP的表达及时间和量效关系如何,尚未见明确报道。本研究对此进行了实验观察,拟为临床应用提供理论依据。1材料和方法1.1主要试剂力太(批号J20020081,Fresennius Kabi公司,德国),…     

热休克蛋白27在血管病变中的潜在作用

本文综述了热休克蛋白27的表达部位、诱导因素、功能及其在血管病变中的潜在作用.     

热休克蛋白90α在人胃癌组织中的表达及临床病理分析

目的研究热休克蛋白90α在人胃癌组织和正常胃黏膜组织中的表达,并探讨其表达与胃癌的发生、发展及生物学行为的关系。方法收集临床46例胃癌组织和相应的正常胃黏膜组织标本,应用SP免疫组化法检测HSP90α的表达情况,结合患者的临床病理资料分析检测结果。结果HSP90α在胃癌组织中的阳性表达率为82．6％,明显高于正常胃黏膜组织中的表达（21．7％）;胃癌组织中HSP90α阳性表达率与患者年龄、性别、肿瘤大小及分化程度等无明显相关性。HSP90α在肿瘤浸润至肌层或越过肌层者的阳性表达率（89．5％）明显高于肿瘤局限于黏膜或黏膜下层者（50．0％）。淋巴结转移7个以上（即N2、N3期）的病例中HSP90α阳性表达率明显高于淋巴结转移为N0和N1的病例（96．2％vs65．0％,P〈0．05）;TNM分期Ⅲ、Ⅳ期阳性表达率也要高于Ⅰ、Ⅱ期（92．9％VS66．7％,P〈0．05）。结论HSP90α在胃癌组织中呈现高表达,并且在浸润深的肿瘤或淋巴结转移多和越晚期的胃癌组织中表达越高。提示HSP90α可作为胃癌预后判定监测指标。     

热休克蛋白70在大鼠急性打击损伤脊髓中的表达

目的观察急性打击损伤大鼠脊髓组织中热休克蛋白70（heat shock protein70，HSP 70）的表达。方法65只大鼠随机分为3组：正常对照组5只、手术对照组和脊髓损伤组各30只，采用改良Allen法建立脊髓损伤动物模型。手术对照组和脊髓损伤组分别于处置后的2h、6h、12h、24h、48h、72h这6个时间点各采集5只大鼠的脊髓。应用免疫组织化学染色方法观察不同时点各组脊髓中热休克蛋白的表达变化。结果在大鼠正常胸段脊髓中没有基础性HSP70的表达。打击造成急性脊髓损伤后2h，脊髓组织内出现HSP70的表达，损伤后24～48h脊髓组织中HSP70染色达到高峰，并维持至损伤后72h。结论在遭遇损伤性刺激后，脊髓组织在随后的2～72h内HSP70的表达明显增加；HSP70可能在阻止脊髓的继发性损伤方面发挥一定的作用。     

热休克蛋白90在人精子冻融前后的表达及其意义

目的　研究热休克蛋白 90 (HSP90 )在人精子中的定位及其在冻融前后的变化。方法　应用间接免疫酶细胞化学技术定位HSP90在人精子中的部位 ,联合使用计算机图像分析技术对 2 0例正常男性的精液进行冻融前后精子HSP90表达的定量差异研究。结果　HSP90定位于人精子的体部与尾部。图像分析共识别冻融前精子43 6个 ,冻融后精子 484个。冻融前精子HSP90表达的平均灰度值和积分灰度值分别为 69.2 9± 11.16和 692 5 .73± 3 184.84,冻融后精子HSP90表达的平均灰度值和积分灰度值分别为 61.3 6± 10 .72和 5 75 7.41± 2 3 15 .2 4,两者相比均有极显著差异 (P <0 .0 1)。结论　冻融后精子HSP90的表达量出现较为明显的下降 ,这种下降可能是精子在冻融后运动特性改变的基础     

雷帕霉素抑制门静脉高压症大鼠肠系膜血管新生

目的:研究雷帕霉素对门静脉高压症大鼠肠系膜血管新生的抑制作用,并探讨其机制。方法 :采用部分静脉结扎制备门静脉高压症模型。将雄性SD大鼠随机分为假手术对照组、假手术干预组、手术对照组和手术干预组。术后1周起,假手术干预组和手术干预组给予2 mg/(kg·d)雷帕霉素腹腔注射,持续2周,而假手术对照组和手术对照组给予同等剂量二甲基亚砜腹腔注射。病理学和血液动力学分别评估肠系膜血管新生和门静脉压力。Western印迹法测定血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和m TOR信号通路标志物P-核糖体蛋白S6激酶(P-P70S6K)和P-真核细胞翻译启始因子4E结合蛋白1(P-4E-BP1)的表达。结果:术后3周,部分门静脉结扎大鼠脾脏肿大,肠系膜血管新生和门静脉压力显著增高(P<0.01);VEGF、P-P70S6K和P-4E-BP1的相对表达量也明显增高(P<0.01)。雷帕霉素干预2周后,有效改善脾脏肿大,抑制肠系膜血管新生和降低门静脉压力(P<0.01),下调VEGF蛋白表达量、P-P70S6K和P-4E-BP1的相对表达量(P<0.01)。结论:哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路活化促进门静脉高压症大鼠肠系膜血管新生,雷帕霉素阻断该通路,可抑制肠系膜血管新生,降低内脏血流高动力循环。     

热休克蛋白70、90α在严重多发伤中的表达及意义

目的 研究热休克蛋白70(HSP70)、热休克蛋白90α(HSP90α)在严重多发伤患者外周血白细胞中的表达规律及意义.方法 采用Western blotting检测严重多发伤后患者(ISS评分≥16)外周血白细胞中HSP70、HSP90α蛋白的表达高峰期,以及检测严重多发伤经治疗后痊愈患者、严重多发伤因MODS死亡患者外周血HSP70、HSP90α蛋白在高峰期的表达情况.同时记录患者的预后.结果 严重多发伤患者伤后72 h HSP70、HSP90α蛋白均表达明显升高,而经治疗后痊愈患者表达明显增强,因MODS死亡的患者表达相对增强.结论 HSP70、HSP90α表达强弱对于严重多发伤患者预后生存情况有密切关系.     

参附注射液预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤后HSP70和HSP90表达的影响

目的探讨参附注射液(SF)单次预处理对大鼠脑缺血-再灌注损伤的保护作用。方法30只雄性SD大鼠随机均分为单纯缺血-再灌注组(MCAO组)、SF预处理组(SF组,缺血前30 min经腹腔注射SF 10 ml/kg)和假手术组(Sham组)。MCAO组和SF组采用颈内动脉尼龙线线栓法致右侧大脑中动脉栓塞120 min。观察再灌注后24 h时脑组织病理学改变,检测热休克蛋白(HSP)70和HSP90表达。结果再灌注24 h后,SF组脑组织病理学损害轻于MCAO组。Sham组未见HSP70及HSP90表达。MCAO组可见到较多的HSP70免疫阳性细胞,明显高于Sham组(P<0.01);SF组HSP70免疫阳性细胞分布较MCAO组广泛,数量明显增多,胞浆及胞核都可见HSP70免疫阳性细胞[(1.341±0.464)vs.(0.856±0.574)](P<0.05),而SF组HSP90的表达与MCAO组相仿[(0.006±0.013)vs.(0.005±0.007)]。结论SF预处理可通过增加HSP70表达而对大鼠脑缺血-再灌注损伤起保护作用。     

门静脉高压症鼠断流术前后食管中碱性成纤维细胞生长因子的表达

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在门静脉高压症断流术前后食管中的表达和意义。方法：雄性SD大鼠用门静脉缩窄术制备肝前型门静脉高压症（PHPH）模型，以假手术（SO）作为对照组，两组均取一部分在造模后7－28d取4个时间点观察，其余部分在造模后3周行联合断流术，在术后1－90d取7个时间点观察；免疫组织化学法检测bFGF在食管中的表达。结果：PHPH组较SO组bFGF表达显著增高，差异有显著性（P＜0．01），在断流术后两组均出现了bFGF表达高峰，但PHPH组表达时相较SO组显著延长，差异有显著性（P＜0．01）。结论：bFGF可能参与了门静脉高压症断流术前后食管静脉曲张形成过程。     

Sugiura procedure in portal hypertensive children

Bleeding from esophageal varices is an important cause of morbidity and mortality in children with portal hypertension. The treatment protocol is planned according to the etiologic factors underlying the portal hypertension, which may be either intrahepatic or extrahepatic. Although portasystemic venous shunt operations were common previously, they are now regarded as nonphysiologic and are rarely used because of their unexpected results and complications. Today, in many centers, endoscopic procedures have become the first-step treatment modality in bleeding esophageal varices. More complicated surgical procedures, such as devascularization procedures in extrahepatic portal hypertension, and liver transplantation in patients with failing liver, should be performed when conservative measures fail. We followed up 69 patients with portal hypertension with endoscopic sclerotherapy in our department. Here we present a retrospective evaluation of the effect of the Sugiura operation on the prognosis of 12 children (6 with extrahepatic and 6 with intrahepatic portal hypertension) who were not responsive to the sclerotherapy program. No rebleeding was seen in 9 of the 12 (75%) patients after the procedure, and the mortality rate in this series was 1 of 12 (8.3%); this patient died of hepatic failure. Received: November 7, 2000 / Accepted: January 25, 2001     

丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时脑组织热休克蛋白70基因和蛋白表达的影响

目的观察丙泊酚对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时脑组织热休克蛋白(HSP)70 mRNA和HSP70蛋白表达的影响,以探讨其脑保护的机制。方法采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。60只雄性Wistar大鼠,随机分为假手术组(Sham组)、缺血-再灌注组(I-R组)和丙泊酚组(P组),每组20只。大鼠脑缺血2 h,然后进行再灌注。在再灌注3、6、24、72 h断头取脑组织,采用原位杂交法和免疫组织化学染色检测大鼠脑组织HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达。结果局灶性脑缺血-再灌注后,HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达增加(P<0.01),但HSP70 mRNA表达较早,分布范围较广泛,而HSP70蛋白表达以半暗带区为主。应用丙泊酚能显著地促进脑缺血-再灌注后脑组织中HSP70 mRNA和HSP70蛋白的表达(P<0.01),与脑缺血-再灌注组相比较,HSP70 mRNA和HSP70蛋白不仅表达增多、范围增加,而且还能延缓下降(P<0.05)。结论丙泊酚能促进大鼠局灶性脑缺血-再灌注时HSP70的表达,这可能是其脑保护作用的部分机制。     

抑制NO生物合成对肝硬变大鼠血流动力学的影响

目的 探讨NO在肝硬变门脉高压血流动力学中的作用。方法 用SD大鼠制备肝硬变门脉高压(CPH)模型,正常鼠做为对照组。每一组实验动物再分成三个亚组：NO生物合成抑制剂L-NMMA组、L-NMMA+NO生物合成底物L-arginine组和生理盐水安慰剂组。血流动力学研究用放射性微球检测技术。结果 CPH鼠出现心输出量和内脏血流量增加,平均动脉压、外周和内脏血管阻力降低等高血流动力学特征。L-NMMA可以纠正CPH鼠的高血流动力学状态,各指标达到正常鼠基础水平。先给予L-arginine,则L-NMMA对CPH鼠的作用消失。结论 肝硬变门脉高压中NO过量形成在高动力循环中起重要作用。     

热休克大鼠缺血肾脏诱导型热休克蛋白的表达

目的研究在热休克预处理大鼠整体后,大鼠肾脏在冷缺血环境下诱导型HSP70的表达.方法用热休克方法和药物川芎嗪分别对动物整体进行预处理后,通过组织切片和免疫组化方法观察诱导型HSP70的表达情况,利用计算机图像灰度分析法测定不同缺血时间下大鼠肾脏组织的灰度值,以间接量化反映诱导型HSP70的表达.结果在非缺血状态下处理组的灰度值较对照组有明显增强(P<0.001);在不同的缺血时间下,肾脏诱导型HSP70的表达有一定规律性对照组在缺血30min时表达最高;热休克两组表达更高,时间持续到60min;川芎嗪组较热休克组次之,但高于对照组.结论热休克、缺血和川芎嗪均可以诱导肾脏组织诱导型HSP70的表达,并且在时间和量上有一定规律性.     

血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子在门静脉高压大鼠胃壁中的表达及意义

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)在门静脉高压大鼠胃壁中的表达及意义.方法 以肝前性门静脉高压症大鼠作为研究对象,以PEDF和VEGF作为观察指标,通过免疫组织化学和Western blot等方法检测PEDF和VEGF在胃壁中的表达.结果 免疫组织化学的结果显示,实验组(A组)PEDF、VEGF在胃壁的表达明显多于对照组(B组),主要位于黏膜层腺体的基底层,少量散在表达于黏膜下层及黏膜下血管内皮细胞中.Western blot结果显示,实验组大鼠胃壁PEDF与VEGF的相对表达量较对照组均有升高,在术后7、10、14 d 3个时间点VEGF的表达呈逐渐下降趋势,而PEDF的表达呈逐渐升高的趋势.结论 PEDF和VEGF在肝前性门静脉高压症大鼠胃壁中有明显的表达,主要在黏膜层的基底部.PEDF在胃壁中的表达逐渐升高,而VEGF呈逐渐下降趋势,两者可能参与门静脉高压症胃壁血管增生的调节.