杨树芽提取物体外抗氧化活性及抗DNA损伤作用

目的运用三种不用方法测定杨树芽提取物体外抗氧化活性及其对DNA损伤的保护作用。方法通过DPPH法、邻苯三酚自氧化法和CuSO4-Phen-Vc-H2O2化学发光体系测定其体外抗氧化活性,并用CuSO4-Phen-Vc-H2O2-DNA化学发光体系测定PBE对·OH致DNA损伤的保护。结果浓度在0.05~0.8mg/mL时,对DPPH自由基的清除率为38.1%~94%;浓度为0.1mg/mL时,随物质的量的增大,对邻苯三酚产生的·O2-抑制率为37.4%~44.2%;浓度在0.05mg/mL~0.8mg/mL时,对·OH自由基的清除率为40.8%~60%。DNA损伤体系中,各浓度均表现出良好的损伤保护作用,浓度大于0.4mg/mL时,效果更加明显。结论杨树芽提取物有较强的抗氧化活性,对DPPH自由基、·O2-和·OH有较强的清除作用,并对·OH所致的DNA损伤有保护作用。     

槲皮素及异槲皮素、芦丁抗自由基活性的比较研究

目的评价3种黄酮类同系化合物槲皮素及其单糖苷异槲皮素和双糖苷芦丁的体外抗自由基作用,进一步研究其构效关系。方法采用H2O2/Fe2 体系,通过Fenton反应生成羟自由基(·OH);采用邻苯三酚自氧化法产生超氧阴离子(O2-)。利用·OH造成肝细胞脂质过氧化以及红细胞膜破裂,观察受试化合物的保护作用,并计算IC50。结果在以上4种体外模型中,3种药物均表现出极强的清除自由基能力。在·OH以及O2-清除实验中,抗氧化活性顺序为芦丁>异槲皮素>槲皮素;在抑制肝匀浆脂质过氧化及红细胞膜破裂实验中,抗氧化活性顺序为槲皮素>异槲皮素>芦丁。结论3种受试黄酮类化合物均具有十分强大的自由基清除作用,且呈现明显的剂量依赖性和糖基结构依赖性,在不同的实验体系中其抗自由基活性强弱顺序不同。     

金钱草提取物体外清除活性氧及抗氧化作用研究

目的:研究金钱草提取物体外清除活性氧及抗氧化作用。方法:利用Fenton反应、光照核黄素产生活性氧自由基·OH、O2-,分光光度法·OH、O2-的作用。通过FeSO4诱导的脂质过氧化模型,硫代巴比妥分光光度法研究金钱草提取物抗·OH引起的DNA氧化损伤的保护作用。结果:实验结果表明金钱草提取物能有效清除·OH、O2-自由基,对DNA的OH氧化损伤有显著抑制作用。结论:金钱草提取物有较强的清除活性氧及抗氧化作用。     

山银花黄酮粗提物抗氧化活性的体外观察

目的提取山银花中黄酮类化合物,并体外观察其抗氧化活性。方法以70%乙醇作为提取溶剂,超声提取山银花中黄酮化合物;用邻苯三酚自氧化法、Fenton反应和DPPH反应测定粗提物对不同自由基的清除能力;用MTT法检测粗提物对H2O2诱导的氧化损伤内皮细胞和心肌细胞的保护作用。结果山银花中黄酮粗提物的提取率为5.65%;粗提取物中含黄酮16.35%。山银花黄酮粗提物质量浓度为250μg/mL时对超氧阴离子自由基(O-2·)、羟自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)的清除率分别为42.40%、64.99%和28.90%。内皮细胞和心肌细胞与浓度1.0 mmol/L的H2O2共同孵育12 h后,其存活率分别下降到49.21%和61.32%,山银花黄酮粗提物预处理30 min,细胞存活率分别提高到60.45%和69.98%。结论山银花中黄酮提取物对O-2·、·OH、DPPH·有较强的清除能力,并具有明显的抗H2O2氧化损伤、恢复细胞活性作用。     

龙血竭胶囊的体外抗氧化研究

目的:研究龙血竭胶囊(血竭)的体外抗氧化作用。方法:通过一系列的体豌分析体系,包括DPPH·/O2-·/·OH自由基清除体系,还原能力分析体系,Fe2 诱导的脂质过氧化反应和β-胡萝卜素/亚油酸自氧化体系,研究龙血竭胶囊的体外抗氧化活性。结果:龙血竭胶囊能够清除DPPH·、O2-·和·OH自由基,具有一定的还原能力,并且可以有效抑制Fe2 诱导的脂质过氧化反应和β-胡萝卜素/亚油酸的自氧化。结论:龙血竭胶囊具有明显的体外抗氧化活性。     

金樱子多糖抗氧化作用的实验研究

目的:探讨金樱子多糖体外抗氧化能力。方法:分别采用Smirnoff水杨酸法和邻苯三酚自氧化法观察金樱子多糖对羟自由基(·OH)和超氧阴离子(O2-·)的清除作用,同时观察了金樱子多糖对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH自由基)的清除作用和总还原能力。结果:金樱子多糖具有良好的抗氧化能力,并对·OH、O2-·及DPPH自由基具有较强的清除能力,但对不同的自由基敏感程度不同,对·OH和O2-·的清除能力在实验浓度范围内随浓度的增高而增强。结论:金樱子多糖具有良好的抗氧化活性,提示其具有良好的抗衰老作用。     

褐藻多糖硫酸酯对H2O2诱导皮层神经元氧化应激损伤保护作用

目的 研究褐藻多糖硫酸酯对H2O2诱导小鼠皮层神经元氧化损伤的保护作用,并探讨其作用机制.方法 以含有B-27的Neurobasal培养基无血清体外原代培养新生小鼠大脑皮层神经元,H2O2 (50μtmol/L)诱导氧化应激损伤模型,MTT法检测不同质量浓度(0.01、0.1、1g/L)褐藻多糖硫酸酯对细胞存活的影响,生化法测定乳酸脱氢酶(LDH)释放量和丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性.结果 与H2O2处理组比较,0.1、1g/L褐藻多糖硫酸酯能显著提高H2O2诱导损伤皮层神经元的存活率(P＜0.05),并且降低培养液中LDH的漏出量,抑制细胞内MDA的生成,提高细胞内SOD的活性.结论 褐藻多糖硫酸酯对H2O2损伤皮层神经元具有显著的保护作用,其机制与抗氧化作用有关.     

新疆紫草不同极性萃取部位体外抗氧化活性研究

目的:研究新疆紫草不同极性萃取部位体外抗氧化活性。方法:采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)自由基清除法、超氧阴离子(O2-·)自由基清除法、羟基(·OH)自由基清除法,测定新疆紫草不同极性萃取物的体外抗氧化活性,并与阳性对照进行比较与评价。结果:不同极性萃取部位对DPPH·、羟基(·OH)自由基及超氧阴离子(O2-·)自由基均有消除能力并呈明显的量效关系,其中乙酸乙酯层、水层、正丁醇层具有较好的抗氧化活性。乙酸乙酯层浓度为1.2 mg/m L以上时,对DPPH·的清除能力超过对照品维生素C。结论:新疆紫草提取物不同极性萃取部位均具有一定的抗氧化活性。其中极性溶剂层抗氧化能力显著。本研究为筛选新疆紫草抗氧化作用部位提供了理论依据。     

金鸡菊提取物体外抗氧化活性

目的:探讨金鸡菊提取物体外抗氧化活性。方法:采用分光光度法,测定金鸡菊提取物对羟基(OH)自由基、超氧阴离子(O 2-.)自由基及1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH)的清除能力,通过多元线性回归分析,考察金鸡菊提取物含量及其体外抗氧化活性的相关性,并同维生素(VC)进行了比较。结果:金鸡菊提取物对.OH自由基,O 2-.自由基,DPPH自由基均有较好的清除作用,在供试质量浓度范围内(0.2～1.0 g.L-1)对各自由基的清除效率与金鸡菊提取物浓度有一定量效关系,当质量浓度达1.0 g.L-1,其中50%乙醇洗脱物对OH自由基、O 2-.自由基和DPPH自由基的清除率可达86.19%,97.90%和71.85%,且清除能力与Vc相当。结论:金鸡菊提取物具有显著的体外抗氧化作用。     

三七皂苷清除活性氧自由基及对DNA氧化损伤保护作用研究

利用Fenton反应、邻苯三酚自氧化反应及光照核黄素产生活性氧自由基,紫外-可见分光光度法研究了三七总皂苷在体外对活性氧自由基的清除作用.通过硫代巴比妥分光光度法研究三七总皂苷对·OH引起的DNA氧化损伤的保护作用.实验结果表明三七总皂苷对·OH、O -·2 自由基有明显的清除作用,并能显著抑制·OH对 DNA氧化损伤.     

新疆鼠尾草总酚酸的体外抗氧化活性

目的：研究新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的体外抗氧化活性。方法：以40%乙醇提取和大孔吸附树脂纯化分别制备得到新疆鼠尾草总酚酸的提取物和纯化物,以维生素C（VC）为对照,通过体外化学模拟方法测定新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物的还原能力、对·DPPH自由基、羟基自由基（·OH）和超氧自由基（O₂^-·）的清除能力,研究新疆鼠尾草总酚酸的抗氧化活性。结果：新疆鼠尾草总酚酸提取物和纯化物清除·DPPH自由基的作用50%清除浓度（IC₅₀,分别为0.029,0.039 g·L^-1）弱于VC（IC₅₀0.018 g·L^-1）;对羟基自由基（·OH）的清除作用（IC₅₀分别为0.212,0.165 g·L^-1）强于VC（IC₅₀0.356 g·L^-1）;对超氧自由基（O₂^-·）的清除能力（IC₅₀分别为3.735,1.913 g·L^-1）弱于VC（IC₅₀0.390 g·L^-1）,其纯化物还具有一定的还原能力。结论：新疆鼠尾草总酚酸具有较强的抗氧化作用。     

外源H2O2对不同水分条件下垂盆草线粒体稳态、生长及品质的调控作用

目的 为揭示外源H₂O₂叶面预处理对不同水分条件下垂盆草Sedum sarmentosum线粒体稳态、生长和黄酮类成分积累的调控作用。方法 设置4个处理即适宜水分、适宜水分＋1 mmol/L H₂O₂、干旱、干旱＋1 mmol/L H₂O₂处理，测定不同处理垂盆草叶肉细胞超微结构及其线粒体抗氧化系统、垂盆草生长指标、生物量、指标性成分含量及多种体外抗氧化能力。结果 在干旱胁迫条件下外源喷施1 mmol/L H₂O₂可以显著提高垂盆草线粒体超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化物酶（peroxidase，POD）和抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）活性，显著降低线粒体超氧阴离子产生速率及丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量，减轻线粒体膜结构破坏。在干旱条件下叶片喷施H₂O₂处理的垂盆草鲜质量和干质量分别比干旱处理提高51.53%和38.78%，总黄酮、总酚含量分别提高13.37%和6.50%，但槲皮素和异鼠李素含量显著低于其他处理。适宜水分条件下喷施H₂O₂处理有利于提高生物量和异鼠李素含量。垂盆草ABTS、DPPH、OH·自由基清除能力与抗脂质过氧化能力均以适宜水分＋喷施H₂O₂处理最高，干旱＋喷施H₂O₂处理次之。结论 喷施1 mmol/L H₂O₂可以缓解干旱胁迫对垂盆草的氧化伤害，维持线粒体稳态，提高垂盆草药材产量和品质，从而协调干旱逆境下垂盆草产量和品质之间的矛盾；适宜水分条件下喷施H₂O₂亦有助于提升垂盆草产量和品质。     

弯管列当提取物的抗氧化活性

目的:研究弯管列当不同提取部位对DPPH(1,1-二苯基苦基苯肼)自由基的清除能力及对H2O2诱导的人胚肾细胞系HEK-293细胞氧化损伤的保护作用.方法:弯管列当70％乙醇粗提物,依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取后,得到乙酸乙酯提取部位( gg1)、正丁醇提取部位(gg2)和水部位(gg3).用清除DPPH自由基法测试gg1,gg2,gg3的抗氧化活性.用H2O2建立人胚肾细胞系HEK-293细胞氧化损伤模型,用MTT法检测细胞活力,观察gg1,gg2,gg3对氧化受损细胞活力的影响.结果:DPPH实验的IC50从小到大依次为:gg1(0.042 9 g·L-1)＜gg2(0.059 9 g·L-1)＜Vc(0.0718 g·L-1) ＜gg3(0.330 3 g·L-1),表明gg1,gg2具有较强的抗氧化活性.研究结果亦表明弯管列当的gg1,gg2,gg3均能明显提高受损伤HEK-293细胞的活力,表现出抗氧化活性.结论:弯管列当以上各提取部位均具有一定的清除自由基、抗氧化的活性.     

大苞雪莲总黄酮体外抗氧化活性

目的:研究大苞雪莲总黄酮体外自由基清除能力及抗氧化活性。方法:采用体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基(DPPH·),2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐阳离子自由基(ABTS+·),超氧阴离子(O-2·),羟基自由基(·OH),一氧化氮(NO),以及测定金属螯合能力、还原力、总抗氧化能力共8种方法对大苞雪莲总黄酮的自由基清除能力及抗氧化活性进行了评价。每组实验平行3次。结果:大苞雪莲总黄酮在一定浓度下能够有效地清除DPPH·,ABTS+·,O-2·,·OH,NO,对DPPH·,ABTS+·,·OH,NO的半数清除质量浓度分别为52.52,71.71,60.38,203.95 mg·L-1,对超氧阴离子的半数清除质量浓度为271.06 mg·L-1,小于维生素C(VC,380.10 mg·L-1),半数金属螯合质量浓度为184.52 mg·L-1,并且具有一定的还原力和总抗氧化能力。结论:大苞雪莲总黄酮具有较强的体外自由基清除能力及抗氧化活性,是一种具有较高研究价值和潜力的天然抗氧化物质。     

冠突散囊菌不同溶剂提取物体外抗氧化活性研究

目的：研究冠突散囊菌体外抗氧化活性。方法：采用萃取法对冠突散囊菌甲醇提取物萃取获得石油醚,乙酸乙酯和正丁醇3种提取物,并以维生素C（VC）为阳性对照,用清除二苯代苦味酰基（DPPH）自由基和（ABTS）自由基测定法,对冠突散囊菌3种提取物抗氧化活性进行测定。结果：冠突散囊菌石油醚提取物清除 DPPH和ABTS⁺自由基半数清除浓度（IC₅₀）分别为0.078,0.083 g·L^-1 ,乙酸乙酯提取物IC₅₀分别为0.21,0.13 g·L^-1;正丁醇提取物对DPPH和ABTS⁺自由基几乎没有清除作用;3种提取物清除DPPH和ABTS⁺自由基的能力均比阳性对照VC（IC₅₀分别为0.032,0.024 g·L^-1）弱。结论：冠突散囊菌石油醚和乙酸乙酯提取物均具有抗氧化活性,且石油醚提取物活性较强。     

参麦注射液抗氧化活性体外实验研究

[目的]系统研究参麦注射液体外抗氧化性能。[方法]采用铁还原抗氧化能力(FRAP)法、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除法、一氧化氮(NO)自由基清除法、过氧化氢(H_2O_2)清除法、亚铁(Fe~(2+))离子螯合法分别测试不同稀释倍率参麦注射液的总抗氧化能力、DPPH·清除活性、NO·清除活性、H_2O_2清除活性和Fe~(2+)离子螯合活性,并将结果与0.1mg/mL 2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)、10 mmol/L水溶性维生素E(Trolox)和10%柠檬酸的结果进行比较。[结果]参麦注射液具有一定的体外抗氧化能力,总抗氧化能力和对自由基清除活性均呈浓度正依赖性;10倍稀释参麦注射液总抗氧化能力显著低于BHT和Trolox(P0.01),但高于柠檬酸(P0.01);参麦注射液对不同自由基清除能力存在差异,其强弱顺序为:NO·[(54.4±6.6)%]Fe~(2+)离子螯[(42.6±3.2)%]DPPH·[(36.2±2.8)%] H_2O_2[(23.5±1.2)%]。[结论]参麦注射液体外抗氧化活性研究将为其抗氧化药理学机制提供了实验依据。     

海带褐藻多糖硫酸酯的抗氧化活性研究

目的 研究海带褐藻多糖硫酸醋的抗氧化作用。方法 采用体外实验研究海带褐藻多糖硫酸醢对超氧阴离子、羟自由基、DPPH的清除作用以及对H2O2诱导的红细胞氧化溶血和大鼠肝匀浆脂质过氧化的保护作用。结果 海带褐藻多糖硫酸醋对超氧阴离子具有良好的清除作用，IC50为20．3μg／mL，其对羟自由基的清除作用较弱，对有机自由基DPPH的作用很弱。褐藻多糖硫酸醋能够抑制H2O2诱导的红细胞氧化溶血，对FeSO4-抗坏血酸体系造成的脂质过氧化具有良好的保护作用。结论 海带褐藻多糖硫酸醋具有显著的体外抗氧化活性。     

H2O2对远志愈伤组织中总酚总黄酮含量及相关酶活性的影响

目的:研究远志愈伤组织在加有不同浓度H_2O_2的MS培养基上总酚总黄酮含量变化及抗氧化酶活性变化,从细胞水平探讨其适应H_2O_2环境胁迫的生理机制。方法:以远志愈伤组织为实验材料,H_2O_2浓度设置为0,5,10,15,20 mmol·L~(-1)5个梯度加至MS培养基中,分别在培养5,10,15,20,25 d后取样测定愈伤组织总酚、总黄酮含量及抗氧化酶活性。结果:H_2O_2浓度在5 mmol·L~(-1)下远志愈伤组织15 d时总酚、总黄酮含量最高。当远志愈伤组织培养5 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时的超氧化物歧化酶(SOD)活性最高。培养25 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时的过氧化物酶(POD)活性最高。培养25 d,外源H_2O_2浓度为15 mmol·L~(-1)时的过氧化氢酶(CAT)活性最高。结论:远志愈伤组织具有适应一定浓度H_2O_2环境胁迫的能力,在其受到H_2O_2环境胁迫时,远志愈伤组织能通过调节自身的次生代谢物、保护酶系统来缓解带来的伤害。对次生代谢物总酚、总黄酮的含量在5～10 mmol·L~(-1)时有显著促进作用;在5 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时可显著提高SOD活性;在25 d,外源H_2O_2浓度为5 mmol·L~(-1)时可显著提高POD活性;在25 d,外源H_2O_2浓度为15 mmol·L~(-1)时可显著提高CAT活性。     

参芎葡萄糖注射液对H2O2诱导的HUVEC细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨参芎葡萄糖注射液(Shenxiong glucose injection,SGI)对H_2O_2诱导的人脐静脉上皮细胞(HUVEC)细胞氧化模型损伤的保护作用及其机制。方法:体外培养HUVEC人脐静脉内皮细胞,用H_2O_2(130 mmol·L~(-1))处理0.5 h,建立HUVEC细胞H_2O_2氧化损伤模型。SGI组HUVEC细胞用(6%,8%,10%)SGI预处理6 h后,再用H_2O_2处理0.5 h。用MTS法检测细胞存活率;用ELISA法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力;用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)技术检测凋亡相关基因及蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的mRNA和蛋白表达情况。结果:在130 mmol·L~(-1)H_2O_2作用细胞0.5 h的情况下,细胞存活率降低至50%左右,降低的程度合适,且实验结果重复性好,因此后续实验用该条件建立氧化损伤模型。与H_2O_2组比较,SGI预处理6 h能显著升高细胞存活率(P0.05,P0.01),减少LDH的外漏和MDA的生成(P0.05,P0.01),显著增加SOD,GSH-Px和CAT的活性(P0.05,P0.01)。RT-PCR和Western blot结果表明,SGI能显著上调Bcl-2的表达(P0.05,P0.01),下调Caspase-3,Bax的表达(P0.05,P0.01)。结论:参芎葡萄糖注射液能保护HUVEC细胞对抗H_2O_2诱导的氧化损伤,具有一定的剂量依赖关系,其作用机制可能与抑制细胞凋亡有关。     

外源H2O2预处理对垂盆草抗寒性及药材产量和品质的影响

目的 探索外源过氧化氢（hydrogen peroxide,H₂O₂）预处理对垂盆草Sedum sarmentosum抗逆性及药材产量和品质的影响,为逆境信号物质诱导药材高产优质的栽培模式提供依据。方法 垂盆草叶面喷施不同浓度（0、1、10、100 mmol/L） H₂O₂后经历自然低温,收获时测定生长指标、生物量、多种黄酮类成分含量及多种体外抗氧化能力。结果 在低温条件下,喷施H₂O₂均显著提高垂盆草最大分枝长、叶片层数、分枝数、生物量、多种黄酮类成分含量以及体外抗氧化能力。随外源H₂O₂浓度提高,垂盆草叶片层数、分枝数、新生芽数、生物量及过氧化物酶（peroxidase,POD）酶活性呈下降趋势,而超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）酶活性及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量呈上升趋势。1、10 mmol/L H₂O₂处理的生物量分别比对照提高209.38%和87.50%。总黄酮、总酚酸含量以及槲皮素、山柰酚、异鼠李素含量均以10 mmol/L H₂O₂处理最高,比对照提高16.67%~37.84%,1 mmol/L H₂O₂处理次之。1 mmol/L H₂O₂处理垂盆草1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）和2,2''-联氮-双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐[2,2''-azino-bis （3-ehtylbenzothiazolin-6-sulfnic acid）,ABTS]自由基清除能力最强,而羟基自由基清除能力和抗脂质过氧化能力以10 mmol/L H₂O₂处理最强。结论 在低温条件下H₂O₂预处理有利于提高垂盆草抗寒性及药材产量和品质;综合比较生物量及活性成分含量,1或10 mmol/L H₂O₂预处理利于提高垂盆草抗寒性,高产优质兼得。