木蹄复方体外抗肿瘤作用的实验研究

目的:筛选木蹄复方抗肿瘤活性提取物,初步分析其化学成分并观察其体外抗肿瘤效应.方法:常规水提和醇提的方法提取复方中水溶和醇溶性组分.MTT法测定木蹄复方水提取物(distilled water extract of compound Fomes fomentarius,WECF)和木蹄复方乙醇提取物(ethanol extract of compound F.fomentarius,EECF)对体外培养肿瘤细胞A549,Hela,QGY生长的抑制效应.系统预试法分析WECF化学组成.流式细胞术检测WECF对A549细胞凋亡的影响.结果:WECF对A549,Hela,QGY 3种细胞的IC50分别为(0.28±0.02),(0.40 ±0.06),(0.28±0.05) g·L-1;EECF对3种细胞的IC50分别为(0.50±0.04),(0.50±0.03),(0.60 ±0.06)g·L-1,WECF对肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用.WECF含有有机酸,氨基酸、多肽和蛋白质,糖、多糖和苷类,皂苷,内酯、香豆素及其苷类,植物甾醇、三萜成分以及挥发油和油脂,多糖含量为(16.1±0.5)％.WECF对A549,Hela,QGY,DU145,MDA-MB-435S,SGC-79016种细胞的IC50分别为0.29,0.45,0.32,0.32,0.83,0.23g·L-1; WECF 1 g·L-1作用于A549 24 h后,细胞凋亡率为22.0％.结论:WECF具有较强的体外抗肿瘤效果,对多种肿瘤细胞的生长具有非常明显的抑制作用,并可诱导A549细胞凋亡.     

裂蹄木层孔菌抗肿瘤作用及其机制研究

目的研究裂蹄木层孔菌的抗肿瘤作用及其机制。方法制备S180、H22、MFC实体瘤小鼠模型和S180腹水瘤小鼠模型。将3种实体瘤模型小鼠均分为模型组,裂蹄木层孔菌低、中、高剂量(0.5、1.0、2.0 g/kg)组和环磷酰胺(CTX)阳性对照组,S180腹水瘤小鼠模型加设对照组。观察裂蹄木层孔菌对腹水瘤小鼠生存时间以及实体瘤小鼠瘤质量、胸腺和脾脏指数、血清中白细胞介素-2(IL-2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的影响。结果与模型组比较,裂蹄木层孔菌低、中、高剂量均能延长S180腹水瘤小鼠的生存时间(P<0.05),抑制肿瘤生长(P<0.05),提高胸腺和脾脏指数(P<0.05)及血清IL-2(P<0.05)和TNF-α水平(P<0.01)。结论裂蹄木层孔菌对小鼠肉瘤S180、肝癌H22细胞、前胃癌MFC肿瘤的生长有明显抑制作用,显示一定的抗肿瘤效应,其可能通过提高免疫器官指数及血清中IL-2、TNF-α的水平达到抗肿瘤目的。     

茯苓多糖的抗肿瘤作用及其机理的研究

茯苓多糖对小鼠肉瘤180及艾氏腹水癌(EAC)的抑制作用与口服5-Fu的抑制作用相同。以荷瘤的NIH小鼠腹腔巨噬细胞(PM)和脾脏组织为材料，获苓多糖(100-200mg／kg．po，d1～8)能提高荷瘤小鼠体内的肿瘤坏死因子(TNF)水平和明显提高自然杀伤(NK)细胞活性。     

蝴蝶草提取物体内抗肿瘤作用的研究

目的:观察壮药蝴蝶草提取物体内抗肿瘤作用.方法:取生长良好的小鼠移植肿瘤S180,H22细胞,在小鼠前肢腋窝皮下接种0.2 mL瘤细胞悬液,接种24 h后,随机分成5组,即蝴蝶草提取物低、中、高剂量组,荷瘤对照组,阳性对照组,每组10只,雌雄各半,蝴蝶草提取物低、中、高剂量组分别为3,6,12 g·kg-1,ig每天1次,连续给药10d,观察壮药蝴蝶草提取物对S180肉瘤小鼠和H22肝癌小鼠的抑瘤率,对荷瘤小鼠的免疫功能和造血系统的影响,以及对荷瘤小鼠生命延长率的影响.结果:与荷瘤对照组比,壮药蝴蝶草提取物对小鼠移植肿瘤S180,H22具有明显的抑制作用(P＜0.01或P＜0.05),其中高剂量的抑瘤率分别为54.42％,60.77％;能显著提高S180肉瘤小鼠和H22肝癌小鼠的生命延长率(P＜0.01或P＜0.05),与哪一组比较？其中高剂量的延长率分别为82.13％,83.10％.对荷瘤小鼠的免疫功能(脾脏指数和胸腺指数)和造血系统无明显影响.结论:壮药蝴蝶草提取物对荷瘤S180和H22小鼠肿瘤增殖有较好的抑制作用,能明显延长荷瘤小鼠的生存时间.     

木蹄多糖及其抗肿瘤活性的研究

 木蹄[（Pyropolypourus fomentarius（L．ex．Fr．）Teng]子实体热水提取物经乙醇沉淀．乙酸铜分步，DEAE一纤维素柱层析，得到4个多糖组分（BI～BN）。药理实验表明：BI BN部分对优Hela细胞有明显杀伤作用；BI，BI部分对Hela细胞没有杀伤作用，但显著抑制了 Hela细胞生长。水洗脱部分（BI）经 Sepharose 4B凝胶柱层析、Sep－PakC柱层析，得到两种纯多糖 BI－IW，BI－IE。分别测定了它们中蛋白质、糖醛酸、总糖含量及分子量，并进行了组成糖分析。     

木蹄复方水提物对小鼠化学性肝损伤的保护作用研究

目的 观察木蹄复方水提物对四氯化碳(CCl4)所致小鼠急性肝损伤的保护作用.方法 将雄性昆明小鼠50只随机分为正常组,模型组,木蹄复方水提物高、中、低剂量组,每组10只,连续给药10 d.腹腔注射1％ CCl4植物油溶液5ml/kg造模,眼眶取血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)含量、肝匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量,并作肝组织切片病理观察.结果 木蹄复方水提物可明显降低小鼠血清中升高的ALT水平,提高肝组织中SOD活性,抑制肝组织中上升的MDA水平,病理镜检显示有明显的保肝作用.结论 木蹄复方水提物对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化清除自由基、抑制脂质过氧化损伤有关.     

夜香树提取物体内抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察夜香树提取物小鼠体内抗肿瘤作用。方法:以S180肉瘤H22肝癌作为实验瘤株,观察夜香树提取物中正丁醇部位、多糖部位对S180小鼠肉瘤抑瘤率,对H22腹水型肝癌进行肿瘤生存期试验。结果:夜香树提取物正丁醇部位和多糖部位明显抑制S180和H22小鼠体内肿瘤的发生和发展,剂量30、20、15 mg/kg的抑瘤率分别为52.30%、46.75%、42.28%和43.19%、37.96%、31.82%;夜香树提取物正丁醇部位和多糖部位能显著提高H22腹水瘤小鼠的生命延长率,生命延长率分别达到116.43%、44.52%、20.54%和109.52%、112.61%、115.01%。夜香树提取物正丁醇部位抑瘤作用与剂量呈正相关关系,而多糖部位抑瘤效果与剂量关系不明显。结论:夜香树提取物体内试验能延缓荷瘤小鼠的瘤体生长,明显延长荷瘤小鼠的生存期。     

裂蹄木层孔菌醋酸乙酯萃取物抗肿瘤活性初探

目的探讨裂蹄木层孔菌醋酸乙酯萃取物的体外抗肿瘤活性。方法采用磺酰罗丹明染色法(SRB法),对人肝癌细胞株BEL-7404、人肺癌细胞株H-1299、人胃癌细胞株SGC-7901、人肺腺癌细胞株A-549等4种常见的人恶性肿瘤细胞进行体外抗肿瘤实验。结果裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物对BEL-7404、H-1299、SGC-7901、A-549 4株肿瘤细胞都表现出比较明显的抑制效果,且抑制率随萃取物浓度的升高而增大,呈剂量效应关系;其半数抑制浓度(IC50)分别为26.05,41.26,34.47,60.34μg.ml-1。细胞周期实验显示BEL-7404细胞在萃取物的作用下,随着萃取物浓度的增大,G0/G1期细胞分布出现大幅度降低;S期细胞和G2/M期细胞分布出现不同程度的增加,且都与萃取物浓度呈正相关。当萃取物浓度为IC50时,G2/M期细胞分布显著增多,细胞出现G2/M期阻滞。结论裂蹄木层孔菌乙酸乙酯萃取物具有比较明显的体外抗肿瘤活性。     

抗肿瘤中药复方免疫调节作用的实验研究思路

从免疫细胞及细胞因子对肿瘤细胞的作用机理着手，结合中药复方的特点，阐述其抗肿瘤免疫调节作用的实验研究思路。     

桑黄多糖抗肿瘤作用

目的：观察桑黄多糖对荷瘤小鼠的抑瘤效应并探讨其作用机理。方法：建立小鼠肝癌（H22）、肉瘤（S180）和肺癌（Lewis）模型，测定桑黄多糖对小鼠肿瘤的抑制作用。通过对巨噬细胞（MФ）功能和肿瘤坏死因子（TNF-α）的测定，探讨其对免疫功能的影响。结果：桑黄250、500、1000mg／kg3个剂量组对S180、H22和Lewis肺癌均有明显的抑瘤作用，但无明显的量效关系；桑黄激活巨噬细胞的最小有效刺量为100μg／ml，桑黄还能促进小鼠巨噬细胞分泌肿瘤坏死因子，100μg／ml桑黄组产生的肿瘤坏死因子是对照组的4倍。结论：桑黄对H22、S180和Lewis肺癌均表现出较好的抑瘤作用，激活巨噬细胞、增强其吞噬功能、诱导巨噬细胞产生和分泌肿瘤坏死因子是桑黄抗肿瘤作用的重要机制之一。     

薯蓣皂苷元体内、外的抗肿瘤作用

目的 :观察薯蓣皂苷元 (diosgenin ,Dio)的体内和体外抗肿瘤作用。方法 :体内试验采用 4种小鼠移植性肿瘤 (S 180 ,HepA ,U14和EAC)腋部皮下接种 ,于接种后次日开始给药 ,10日内每天给药 1次 ,计算各给药组瘤肿抑制率。体外试验采用 4种肿瘤细胞株 (MCF ,L92 9,A375 S2 ,HeLa) ,分别与不同浓度的药物共同培养 ,染色后计算其抑瘤率。结果 :①两种给药途径 (ig ,ip)下 ,Dio对S-180 ,HepA ,U14小鼠移植肿瘤具有抑制作用 ,抑制率在30 %～50% ,而对EAC没有抑制作用 ;②体外Dio对L929,HeLa,MCF肿瘤细胞株具有抑瘤作用 ,IC₅₀ 分别为 1.2 ,18.2 ,19.8μg·mL^-1,而对A375-S2细胞则效果不明显。结论 :Dio对S180 ,HepA ,U14等小鼠移植肿瘤和L929,HeLa ,MCF肿瘤细胞株具有明显抑制作用。     

木蹄层孔菌免疫活性多糖超声提取工艺研究

目的:研究超声处理在提取木蹄层孔菌多糖(简称:木蹄多糖)中的应用,并筛选出最佳提取工艺。方法:选用L9(34)正交表,对超声时间、水提温度及水提时间三因素各选三个水平进行组合,以多糖提取率、多糖含量及免疫刺激活性(刺激小鼠脾细胞代谢MTT活力)作为评价指标,找出最适提取条件。结果:超声处理对木蹄多糖免疫刺激活性的影响最为明显。以免疫刺激活性为指标,最佳提取工艺为:超声30 min,水提温度80℃,水提时间2 h。结论:超声处理可以作为木蹄免疫活性多糖提取的一种有效工艺。     

维药阿里红中2个新三萜酸成分

该研究旨在阐明维药阿里红的药效物质基础。采用各种现代色谱手段(MCI,ODS,硅胶等柱色谱以及半制备高效液相色谱)从阿里红甲醇提取物中分离得到2个新的羊毛甾烷型三萜酸成分,通过一维,二维核磁共振、高分辨质谱等波谱手段鉴定其结构为12β,15α-dihydroxy-24-methyl-3,23-dioxo-lanosta-7,9(11)-dien-26-oic acid(1),3α,12β-dihydroxy-24-methyl-7,23-dioxo-lanosta-8-en-26-oic acid(2)。体外抗炎和细胞毒活性测试显示,化合物1和2均未表现出抑制LPS诱导RAW264.7细胞NO的产生,以及抑制肝癌细胞HepG2生长的活性。     

阿里红活性成分3-酮基-去氢硫色多孔菌酸在大鼠体内的药物代谢动力学及组织分布

目的:研究维族药阿里红中主要活性成分3-酮基-去氢硫色多孔菌酸(3-keto-DSA)在大鼠体内的药代动力学特征及其组织分布状况。方法:健康大鼠按12.5 mg·kg~(-1)灌胃及5 mg·kg~(-1)尾静脉注射给予3-keto-DSA后,收集不同时间点的含药血浆,采用HPLC检测大鼠血浆中3-keto-DSA的血药浓度,运用3P97药动学软件拟合房室模型,计算其药动学参数;大鼠按25 mg·kg~(-1)灌胃给予3-keto-DSA后,研究该成分在主要组织器官中的分布情况。结果:3-keto-DSA灌胃给药后在大鼠体内呈二室模型分布,吸收半衰期(t_(1/2ka))0.381 h,分布半衰期(t_(1/2α))0.415 h,表明口服3-酮基-去氢硫色多孔菌酸后,在大鼠体内吸收分布较快;达峰时间(t_(max))0.690 h,最大血药浓度(C_(max))0.059 mg·L~(-1),消除半衰期(t_(1/2β))3.852 h,绝对生物利用32.84%。大鼠按25 mg·kg~(-1)口服3-keto-DSA后,主要组织中该成分的达峰时间约30 min,达峰时,各组织中含量从高到低排序为肝脾心肾,3 h后接近完全消失。结论:3-keto-DSA灌胃给药后在大鼠体内吸收、分布快,生物利用度低,并且广泛分布于各组织中。     

阿里红中总三萜酸的提取工艺优选及含量测定

目的:优化阿里红中总三萜酸的提取工艺,并建立其含量测定方法。方法:以齐墩果酸为对照品,采用分光光度法测定三萜酸含量;采用单因素试验考察提取溶剂种类及浓度、料液比、温度、提取时间及提取次数对总三萜酸得率的影响,在此基础上,采用L9(34)正交试验优选阿里红中总三萜酸提取工艺。结果:最佳提取工艺为30倍量90%乙醇于60℃超声提取3次,每次30 min。在此条件下,阿里红中总三萜酸质量分数35.1%。各因素影响次序为提取温度>液料比>提取时间>乙醇体积分数。结论:阿里红中三萜酸含量很高,该优选工艺稳定可行,可推广于大生产。     

瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用

目的:　研究瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用。方法:体外抗肿瘤活性研究采用MTT比色法和集落形成法测定,靶细胞采用人胃癌细胞SGC- 790 1、人肝癌细胞BEL- 74 0 2和人白血病细胞HL- 6 0 ;通过提取物对小鼠的移植性肿瘤S180和H2 2生长的影响来评价体内抗肿瘤作用。结果:瑞香狼毒总黄酮提取物对体外培养的肿瘤细胞有较强的抑制作用,体外抗肿瘤活性高于长春新碱;瑞香狼毒总黄酮提取物急性毒性较小,对小鼠移植性肿瘤S180和H2 2的生长也有显著的抑制作用,并和剂量正相关,高剂量组对小鼠移植性肿瘤S180的抑制率为4 5 . 6 4 % ,H2 2的为4 7 .5 9% ,与阳性对照组环磷酰胺的抑制率接近。结论:瑞香狼毒总黄酮提取物具有较强的体内和体外抗肿瘤作用。     

木蹄层孔菌化学成分研究

 目的 研究木蹄层孔菌 [ Fomes fomentarius ( L.Ex.Fr.) ] 的化学成分。方法 采用反复硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20 柱色谱法等进行分离纯化,并通过化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果 从木蹄体积分数95%乙醇提取物中分离得到6个化合物,其中1个木脂素类化合物：泡桐素 (1);2个小分子芳香族化合物：原儿茶醛 (2),4-( 3,4-二羟苯基)-3-丁烯-2-酮 (3); 3个甾类化合物：5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯-3β醇 (4),麦角甾-7,22-二烯-3β醇 (5),β-谷甾醇 (6) 。结论 化合物1～4, 6均为首次从该真菌中分离得到。     

金樱根多糖的制备及其体内抗肿瘤作用初探

目的:从金樱根中分离提取金樱根多糖,并探索其抗肿瘤活性。方法:水提醇沉法提取,Sevag法除蛋白,大孔树脂脱色后获得金樱根多糖粗品。建立小鼠S180肉瘤腹水瘤模型,并将小鼠随机分为4组:生理盐水组(阴性对照组)、金樱根多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg-1)。建立移植实体瘤模型,将小鼠随机分为8组:生理盐水组(阴性对照组)、阳性对照5-Fu(5-氟脲嘧啶)组(20 mg·kg-1)、金樱根多糖低、中、高剂量组(50,100,200 mg·kg-1)、金樱根多糖各剂量组+5-Fu组。腹腔注射给药结束后处死小鼠,计算各用药组抑瘤率、生命延长率和白细胞数、胸腺指数、脾指数,并用EILSA法测定荷瘤小鼠血清中IL-2(白细胞介素-2)、TNF-α(肿瘤坏死因子-α)水平。结果:制备得到金樱根多糖粗品含糖量为85.43%。金樱根多糖50,100,200 mg·kg-1剂量组荷瘤小鼠生命延长率分别为3.07%±2.35%,10.11%±4.32%,34.3%±8.31%,与对照组相比,仅高剂量组有统计学意义(P<0.05)。但金樱根多糖低、中、高剂量组与5-Fu组(20 mg·kg-1)合用抑瘤率分别为62.74%±4.35%,67.92%±3.24%,78.79%±6.23%,明显优于单用5-Fu(P<0.05),且与单用5-Fu组相比合用能升高白细胞数、胸腺指数、脾指数及IL-2水平(P<0.05),但对TNF-α水平无影响。结论:金樱根多糖单用不能有效抑制小鼠S180肉瘤生长,但与5-Fu合用有明显的增效减毒作用。