烫伤豚鼠早期痂下水肿液内毒素水平的研究

为了探讨烧伤后早期痂下水肿液中内毒素的含量及其变化规律，通过建立豚鼠烫伤后早期痂下水肿液收集的动物模型，用鲎试剂偶氮基质显色法测定了烫伤后早期水肿液内毒素的含量及其变化趋势。研究结果表明：①烧伤后早期痂下水肿液内毒素水平明显升高；水肿液内毒素水平２４小时以后各时相点创面脓毒症组显著高于单纯烫伤组（Ｐ＜０．０１）。②烧伤后各时相点两组动物血浆内毒素与痂下水肿液内毒素之间存在着明显的相关关系（Ｐ＜０．０５）。③痂下水肿液内毒素含量和痂下组织细菌计数的对数值间存在着明显相关关系（Ｐ＜０．０５）。提示：内毒素为严重烧伤早期痂下水肿液的重要组成成份之一，其含量随伤后时间的增加而增加；内毒素水平与创面Ｇ－细菌感染程度有关，血浆内毒素与水肿液内毒素有关。     

烫伤豚鼠早期痂下水肿液内毒素水平的研究

为了探讨烧伤后早期痂下水肿液中内毒素的含量及其变化规律，通过建立豚鼠烫伤后早期痂下水肿液收集的动物模型，用鲎试剂偶基质显色法测定了烫作后早期水肿液内毒素的含量及其变化趋势。研究结果表明；（１）烧合后早期痂下水肿液内毒素水平明显升高，水肿液内毒素水平２４小时以后各时相点创在脓毒症组显著高于单纯烫伤组（Ｐ〈０．０１）。（２）烧伤后各时相点两组动物血浆内毒素与痂下水肿液内毒素之间存在明显的相关关系（Ｐ〉     

家兔烫伤后早期痂下水肿液中白蛋白吸收现象及药代动力学观察

目的 了解家兔烫伤后早期痂下水肿液中白蛋白的浓度变化,分析其规律. 方法 采用成年雄性新西兰家兔34只.按随机数字表法分成对照组和实验组,每组17只.实验组家兔背部制成8%TBSA的Ⅲ度烫伤,同时痂下注射人血白蛋白作为示踪白蛋白,于伤后2、4、8、16、24、48、72 h取血液标本1.5 mL;对照组家兔除不予烫伤外,其余处理同实验组.采用酶联免疫吸附测定试剂盒检测示踪白蛋白的浓度,以生化分析仪检测家兔血清白蛋白的浓度.采用3P97实用药代动力学计算程序拟合模型并计算示踪白蛋白的药代动力学参数. 结果 (1)实验组家兔伤后各时相点示踪白蛋白浓度均高于对照组(P<0.01),于伤后8 h达峰值[(421±10)μg/L].(2)实验组家兔血清白蛋白浓度呈先下降后回升趋势,对照组浓度变化不大.(3)实验组家兔示踪白蛋白的分布相半衰期(4.0271h)约为对照组(12.0907 h)的1/3.曲线下面积(22 336.38 μg·h·mL~(-1))则约为对照组(5827.77μg·h·mL~(-1))的4倍. 结论 正常情况下,皮下组织中的白蛋白可以回吸收进入血液循环;出现明显炎性反应(如深度烧伤)后其白蛋白回吸收更早、更快、量更大;烧伤后早期白蛋白经血管外渗的同时也存在回吸收人血的现象.     

烧伤病人痂下水肿液对内皮细胞的损伤作用

目的　了解痂下水肿液（ Ｓｕｂｅｓｃｈａｒ ｔｉｓｓｕｅ ｆｌｕｉｄ , Ｓ Ｔ Ｆ） 对内皮细胞的损伤作用,进一步论证 Ｓ Ｔ Ｆ 是烧伤后一“贮毒库”的概念。方法　取烧伤病人痂下水肿液,按２０ ％ 比例与体外培养的人脐静脉内皮细胞（ Ｈ Ｕ Ｖ Ｅ Ｃ） 培养１ ,１２ ,２４ｈ ,测定培养液中乳酸脱氢酶（ Ｌ Ｄ Ｈ） 和６ｋｅｔｏ Ｐ Ｇ Ｆ１α,观察内皮细胞活力和形态改变,并用健康人血清作对照。结果　 Ｓ Ｔ Ｆ 与 Ｈ Ｕ Ｖ Ｅ Ｃ 一同孵育后培养液中 Ｌ Ｄ Ｈ 活性和６ｋｅｔｏ Ｐ Ｇ Ｆ１α含量逐渐升高,并明显高于健康人血清对照组（ Ｐ＜ ００１） ,且 Ｓ Ｔ Ｆ 与 Ｈ Ｕ Ｖ Ｅ Ｃ 共同孵育２４ｈ ,内皮细胞活力下降,内皮细胞出现收缩,细胞间间隙增大,部分细胞脱落和坏死,而健康人血清未能引起内皮细胞功能和形态改变。结论　 Ｓ Ｔ Ｆ 可损伤内皮细胞,在烧伤后内皮细胞的损伤中起重要作用。     

烧伤病人痂下水肿液对内皮细胞的损伤作用

目的了解痂下水肿液(Subeschar tissue fluid,STF)对内皮细胞的损伤作用,进一步论证 STF 是烧伤后一“贮毒库”的概念。方法取烧伤病人痂下水肿液,按20％比例与体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)培养1,12,24h,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和6-keto-PGF 1α,观察内皮细胞活力和形态改变,并用健康人血清作对照。结果 STF 与 HUVEC 一同孵育后培养液中LDH 活性和6-keto-PGF 1α含量逐渐升高,并明显高于健康人血清对照组(P<0.01),且 STF 与 HU-VEC 共同孵育24h,内皮细胞活力下降,内皮细胞出现收缩,细胞间间隙增大,部分细胞脱落和坏死,而健康人血清未能引起内皮细胞功能和形态改变。结论 STF 可损伤内皮细胞,在烧伤后内皮细胞的损伤中起重要作用。     

烧伤病人痂下水肿液对内皮细胞的损伤作用

OBJECTIVE: To assess the effect of subeschar tissue fluid (STF) on the function and structure of endothelial cell in vitro. METHODS: Human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) were incubated with STF obtained from patients in the early postburn stage. Then the morphological changes in EC were observed, and activity of EC and contents of LDH, 6-keto-PGF1 alpha in media were determined. RESULTS: The activity of LDH and the content of 6-keto-PGF1 alpha were increased gradually after HUVEC incubated with STF, and were higher than that measured after HUVEC incubated with healthy volunteer's sera. Furthermore, activity of HUVEC decreased and they became deformed, showing shrinkage of the cell body with enlargement of intercellular space. In addition, small vacuoles appeared in cytoplasm with karyopyoknosis after 24 h. CONCLUSION: STF can damage endothelial cell and might play an important role in the pathophysiological process of burn injury.     

大鼠严重烫伤后早期血浆内毒素水平的改变

我们利用内毒素微量测定技术，动态地同步测定了大鼠烫伤后门脉血和外周血内毒素水平的变化。结果对照组门脉血内毒素水平明显高于外周血内毒素水平（Ｐ＜０．００１）。烫伤后门脉血内毒素水平呈双峰样改变，即烫伤后２小时明显升高（Ｐ＜０．００１）；６小时回降至正常（Ｐ＞０．０５），１２小时又明显升高（Ｐ＜０．００１）。外周血内毒素水平升高不明显（Ｐ＞０．０５）。结果提示，正常情况下门脉血含有一定量内毒素。烫伤早期即有大量肠道内毒素进入门脉血形成肠源性内毒素血症。文中结合文献对烫伤后外周血内毒素的来源进行了讨论。     

大鼠严重烫伤后早期血浆内毒素水平的改变

我们利用内毒素微量测定技术，动态地同步测定了大鼠烫伤后门脉血和外周血外毒素水平的变化。结果对照组门脉血内毒素水平明显高于外周血内毒素水平（Ｐ＜０．００１）。烫伤后门脉血内毒素水平呈双峰样改变，即烫伤后２小时明显升高（Ｐ＜０．００１）；６小时回降至正常（Ｐ＞０．０５），１２小时又明显升高（Ｐ＜０．００１）。外周血内毒素水平升高明显（Ｐ＞０．０５）。结果提示：正常情况下门脉血含有一定量内毒素。烫伤早期     

大鼠严重烫伤后早期血浆内毒素水平的改变

我们利用内毒素微量测定技术,动态地同步测定了大鼠烫伤后门脉血和外周血内毒素水平的变化。结果对照组门脉血内毒素水平明显高于外周血内毒素水平(P<0.001)。烫伤后门脉血内毒素水平呈双峰样改变,即烫伤后2小时明显升高(P<0.001);6小时回降至正常(P>0.05),12小时又明显升高(P<0.001).外周血内毒素水平升高不明显(P>0.05)。结果提示,正常情况下门脉血含有一定量内毒素。烫伤早期即有大量肠道内毒素进入门脉血形成肠源性内毒素血症。文中结合文献对烫伤后外周血内毒素的来源进行了讨论。     

Pharmacokinectics of vancomycin and amikacin in the subeschar tissue fluid in patients with severe burn

The specific aim of this study was to investigate the pharmacokinetic parameters of antibiotics represented by vancomycin and amikacin in the subeschar tissue fluid (STF) in patients with early stage severe burn. Twenty patients were studied: age 30.7+/-8.0 years old, weight 60.6+/-8.4 kg, total burn surface area (TBSA) 68.39+/-17.85%, creatinine clearance (CCr) 95.45+/-23.14 ml/min, mean+/-S.D. Patients received intravenous infusion of 500 mg vancomycin (10 patients) or 400mg amikacin (10 patients) for 60 min at 24h after burn. Subeschar tissue fluid (STF) samples were collected at 1, 2, 4, 8, 24, 48, 96, 144, 192, 240 h at the end of infusion. Concentrations of these antibiotics in the samples were determined by fluorescence polarization immunoassay (FPIA) method. Pharmacokinetic parameters of vancomycin and amikacin were calculated by the use of Program 3P97 and statistical analyses were performed by the use of Program Package SPS S10.0. The concentration-time curves of vancomycin and amikacin in the STF were both fitted in two-compartment model. Pharmacokinetic parameters of vancomycin in the STF were: distribution half-life (t(1)/2alpha)=3.74+/-2.64 h, elimination half-life (t(1)/2beta)=92.18+/-11.73 h, apparent volume of distribution (V(c))=25.64+/-5.68 L, area under the curve (AUC)=1279.42+/-256.12 microg h ml(-1), clearance (CLs)=0.4048+/-0.0788 L h(-1). Pharmacokinetic parameters of amikacin in the STF were: t(1)/2alpha=4.35+/-1.66 h, t(1)/2beta=80.04+/-9.52 h, V(c)=13.17+/-1.32 L, AUC=1802.49+/-285.68 microg h ml(-1), CLs=0.2272+/-0.0383 L h(-1). This study demonstrated significant low clearance, long half life of vancomycin and amikacin in the STF in patients with severe burn compared to the parameters obtained in the serum of normal volunteers in previous studies. Elimination half-lives (t(1)/2beta) of vancomycin and amikacin in the STF of severe burns were 18.75-34.87 times and 28.20-44.78 times longer than those in the serum of normal volunteers, respectively. Concentrations of vancomycin and amikacin in STF at 24h after the end of a single dose infusion was higher than MIC on common pathogenic bacteria. Their effective inhibitory concentration were maintained at least for 24h. There was antibiotic retention in the third space after early and short-term use of potent antibiotics. An antibiotic barrier could form in the STF, and could prevent an invasive bacterial infection from burn wound.     

严重烧伤患者应用万古霉素后痂下水肿液的药代动力学变化

目的 了解严重烧伤患者伤后早期应用万古霉素后痂下水肿液的药代动力学变化。方法 选择10例严重烧伤患者，入院后1～2h开始静脉滴注万古霉素500mg，60min匀速滴完。于给药后1、2、4、8、24、48、96、144、192、240h各取痂下水肿液0．5ml，用荧光偏振免疫法测定万古霉素浓度，采用3P97实用药代动力学计算程序处理药物浓度数据，拟合药代动力学模型并计算参数。结果 患者痂下水肿液万古霉素浓度一时间数据以二房室模型拟合为最佳，主要药代动力学参数：分布相半衰期（3．7±2．6）h、消除相半衰期（92±12）h、表观分布容积（26±6）L、曲线下面积（1279±256）μg·h·ml^-1,总体清除率（0．40±0．08）L／h。结论 严重烧伤患者伤后早期使用万古霉素后，该药能较长时间潴留在第三间隙，其抗菌浓度可维持24h以上，有利于防止创面侵袭性感染。     

痂下水肿液诱导全身炎性反应综合征的实验研究

目的观察痂下水肿液(subeschar tissue     

肠道双歧杆菌与烫伤大鼠肠源性细菌/内毒素移位

目的　观察肠道双歧杆菌在肠源性细菌 /内毒素移位中的变化和作用。　方法　制作严重烫伤大鼠模型 ,同时设假伤组。检测细菌和内毒素 (LPS)移位及盲肠膜菌群变化 ,ELISA法检测血浆白细胞介素 6(IL 6)浓度。　结果　大鼠严重烫伤后脏器细菌移位明显增多 (P <0 .0 1) ;血LPS水平在致伤 1、3、5d后分别为 (0 .2 3 6± 0 148)Eu/ml、(0 .197± 0 .15 6)Eu/ml、(0 10 4± 0 .0 90 )Eu/ml,显著高于假伤组的 (0 .0 72± 0 .0 49)Eu/ml(P <0 .0 5 ) ;盲肠膜菌群中双歧杆菌数剧减 2 0～2 5 0倍、真菌数剧增至 5～ 60倍、大肠杆菌数增加 0 .5～ 3 0倍 ,双歧杆菌与大肠杆菌比值由假伤组的2 5 0 0 0∶1降为伤后的 4～ 80 0∶1;血浆IL 6水平显著增高。经分层统计 ,与未发生肠道细菌移位大鼠相比 ,盲肠膜菌群移位大鼠的双歧杆菌量减少约 12 0倍 ,真菌数增加约 5 0倍 ,大肠杆菌数增加约 3 0倍。盲肠膜菌群中双歧杆菌数量与血浆中IL 6、LPS浓度呈负相关 (r1=- 0 .4817,r2 =- 0 .4912 ,P <0 .0 1) ,血IL 6和LPS浓度间存在显著正相关 (r =0 .82 5 8,P =0 .0 0 0 1)。　结论　严重烫伤可导致大鼠盲肠膜菌群紊乱 ,细菌和LPS移位增加 ;盲肠膜菌群中双歧杆菌的比例和数量的减少 ,可能促使了严重烫伤后肠源性细菌 /内毒素移位     

严重烧伤后亚胺培南在第三间隙代谢与潴留的临床评估

目的　探讨严重烧伤后抗生素在第三间隙水肿液中的半衰期和潴留状况。　方法　选择 8例严重烧伤患者和 8例正常自愿者分别作为烧伤组和对照组 ,利用高效液相法检测血浆、痂下水肿液中亚胺培南的含量及药代动力学改变 ,并通过测定机体水肿量推测第三间隙亚胺培南总量。　结果　痂下水肿液中亚胺培南的半衰期较血浆长 [(2 .5 3± 0 .71)hvs (1.73± 0 .5 7)h],P <0 .0 5 ;随着时间推移和重复静脉滴注亚胺培南后 ,痂下水肿液中亚胺培南浓度逐渐升高 [(11.6 7± 2 .98) μg mlvs(15 .4 5± 4 .10 ) μg ml],P <0 .0 5 ;第三间隙中亚胺培南总含量明显增加 ,用药 1h与以后各时相点比较 ,P <0 .0 1。　结论　严重烧伤后第三间隙组织液中存在抗生素潴留现象 ,其返释血中可延长血浆半衰期与抗感染作用时间     

胎猪皮肤前体组织异种移植研究

目的 系统筛选猪胚胎皮肤前体组织异种移植的最佳妊娠时间窗,了解其创面修复能力. 方法 取胎龄35、42、56、70 d的胎猪皮肤前体组织,制成微粒后移植于BABL/c裸鼠背部创面,以整形患者术后剩余皮肤或者成年猪皮覆盖.观察术后移植物生长发育特性,并于移植后6、12周取材,用组织学方法观察其形态结构及成瘤性. 结果 胎猪皮肤前体组织移植后具有如下特点:(1)能成活并继续生长发育,微粒可融合成片;胎龄35、42、56、70 d的前体组织移植后12周,新生组织面积分别为(18±8)、(47±6)、(31±12)、(20±8)mm2,其中胎龄42 d的组织与其余三者比较,差异有统计学意义(P＜0.05).(2)新生(猪)皮肤组织具有表皮层和真皮层,真皮乳头明显.(3)能生长成为具有毛发、皮脂腺及汗腺等皮肤附属器的"完整"皮肤,且表皮层有黑索细胞.(4)胎龄56、70 d的胎猪皮肤前体组织移植后未出现畸胎瘤. 结论 胎龄56 d的胎猪皮肤前体组织可用于异种移植修复皮肤创面.