血清丙肝病毒RNA二种提取方法的比较

２４例抗－ＨＣＶ阳性的血清标本，同时以硫氰胍半字符热酚变性方法和蛋白酶ＫＩ肖化法裂解提取丙肝病毒ＲＮＡ（ＨＣＶＲＮＡ），并应用反转录半字符多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和套式多聚酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）检测ＨＣＶＲＮＡ。结果表明，硫氰胍半字符热酚法明显优于蛋白酶Ｋ消化法。前者处理标本的阳性检出率为５８．３％，后者处理标本的阳性检出率为３３．３％（Ｐ＜０．０５）；前者操作步骤简便，在试剂的保存等方面优于后者，故前者更适于临床ＨＣＶＲＮＡ的检测     

丙型肝炎患者唾液和尿HCV－RNA检测及其意义

采用套式聚合酶链反应检测丙肝患者血清，唾液和尿各５２份。结果血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性３９例，２３例分别在尿和唾液中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ；１３份血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者中，尿和唾液均未检出ＨＣＶ－ＲＮＡ，有非常显著差异（Ｐ＝０．０００１）。血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者分ＡＬＴ正常组和异常组，尿和唾液ＨＣＶ－ＲＮＡ阳检率分别为１８％和７５％，亦有非常显著差异（Ｐ＝０．００１）。对照组１３例正常人血清、唾液和尿ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性。表明丙肝患者尿和唾液中能否检出ＨＣＶ－ＲＮＡ与病毒血症及ＡＬＴ有关，提示丙肝患者的尿和唾液可能为ＨＣＶ感染的传播媒介。     

RIBA在慢性丙型病毒性肝炎中的应用价值

采用含ＨＣＶ三种抗原（Ｃ２２，Ｃ３３Ｃ，Ｃ１９０）的重级免疫印迹试验（ＲＩＢＡ）检测了７１例抗－ＨＣＶ阳性一（ＲＩＡ－２法）的慢性非甲非乙型肝炎患者血清并与ＨＣＶＲＮＡ结果进行比较。ＲＩＢＡ阳性５６例，可疑８例，对应ＨＣＶＲＮＡ检出率分别为９４．６４％（５３／５６）和３７．５％（３／８），ＲＩＢＡ阴性的７例均未检出ＨＣＶＲＮＡ。ＨＣＶＲＮＡ阳性病例中ＲＩＢＡ多为阳性，可疑仅占５．３６％（３／５６０     

丙型肝炎患者尿液特异标志物的检测及其临床意义

对５４例丙型肝炎患者尿液特异指标检测，结果：抗－ＨＣＶ阳性５／５４例（９．２％）。ＨＣＶＲＮＡ阳性９／５４例（１６．７％）。急性ＨＣＶ感染者，尿中抗－ＨＣＶ检出率为２／６例（３３％），较慢性者３／３８例（７．９％）为高（Ｐ＜０．０５）。尿液ＨＣＶＲＮＡ全部出现在未经α－干扰素治疗的慢性患者中，故可用作判断干扰素疗效的指标之一。本文在尿中检出ＨＣＶＲＮＡ，提示ＨＣＶ可经尿液污染环境。     

丙型肝炎患者唾液和尿HCV—RNA检测及其意义

采用套式聚合酶链反应检测丙肝患者血清，唾液和尿各５２份。结果血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性３９例，２３例分别在尿和唾液中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ；１３份血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性者中，尿和唾液均未检出ＨＣＶ－ＲＮＡ，在非常显著差异。血清ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性者分ＡＬＴ正常组和异常组，尿和唾液ＨＣＶ－ＲＮＡ阳检率分别为１８％和７５％，亦有非常差异。     

荧光定量PCR技术在检测HCV—RNA中的应用

目的 评价荧光定量ＰＣＲ技术测定ＨＣＶ－ＲＮＡ水平的价值,探讨ＰＢＭＣ中检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的意义。方法 采用荧光定量ＫＲ及ＲＴ－ＰＣＲ技术同时检测８７例血液透析患者的血清和淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ。结果血清、淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ的荧光定量ＰＣＲ检出率（４９．４％、６９．０％）,分别高于相应标本中ＨＣＶ－ＲＮＡ的ＲＴ－ＰＣＲ阳性率（３３．３％、３５．６％）（Ｐ ＜０．０５）。血清、淋巴细胞中同时检出ＨＣＶ－ＲＮＡ的一致率,荧光定量ＰＣＲ法（３１．０％）显著高于ＲＴ－ＰＣＲ定性法（６．９％）（Ｐ＜０．００１）． 荧光定量ＰＣＲ法,淋巴细胞中ＨＣＶ－ＲＮＡ检出率高于血清（Ｐ＜０．０１）。结论 与 ＲＴ－ＰＣＲ相比,荧光定量ＰＣＲ技术检测 ＨＣＶ－ＲＮＡ敏感性较高,对ＰＢＭＣ内ＨＣＶ－ＲＮＡ检测有利于提高ＨＣＶ检测的阳性率。     

肝细胞癌和癌旁肝组织中HCVRNA正,负链的检测

用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测了４２例肝细胞癌（ＨＣＣ）患者肝癌及癌旁肝组织中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ的正，负链，结果显示，肝组织中ＨＣＶＲＮＡ正，负链的检出率分别为５４．８％和３５．７％，ＨＣＶＲＮＡ的正链和负链在肝癌和癌旁肝组织中，同时阳性的患者分别占４５．２％和３１．０％，血清ＨＣＶＲＮＡ和抗ＨＣＶ阴性埂肝组织中ＨＣＶＲＮＡ的检出率仍有５１．３％，肝组织ＨＣＶＲＮＡ与乙型肝炎     

丙型肝炎病毒感染者血清ALT,抗—HCV及HCV—RNA关系的分析

对８９例丙型肝炎病毒感染者血清ＡＬＴ、抗－ＨＣＶ及ＨＣＶ－ＲＮＡ进行检测分析，结果表明：抗－ＨＣＶ与ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性检测的符合率为４８．３１％，抗－ＨＣＶ与ＨＣＶ－ＲＮＡ虽然有较好的相关性，但二者无平行关系，说明义气风发－ＨＣＶ仅在某些情况下能反映ＨＣＶ的复制状态，但不能代替ＨＣＶ－ＲＮＡ的检测，２份ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性血清抗－ＨＣＶ阴性，说明ＨＣＶ－ＲＮＡ的检测早期诊断意义较抗－ＨＣＶ更大。ＡＬ     

套式聚合酶链反应检测丙肝病毒核酸

对７０例血清谷丙转氨酶（ＡＬＴ）异常、疑是丙型肝炎（ＨＣＶ）患者血清标本，用ＨＣＶ基因５＇非编码区引物作套式聚合酶链反应（套式ＰＣＲ），扩增产物为２６０ｂｐ，结果显示５２例丙型肝炎病毒核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）阳性，１８例阴性，阳性率为７４．２％。１０例助血员血样ＨＣＶ－ＲＮＡ均为阴性。经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析，阳性ＰＣＲ产物为ＨＣＶ－ＲＮＡ所特异。作者认为，采用高保守区核苷酸序列引物作套式ＰＣＲ检测ＨＣＶ－ＲＮＡ，可提高实验的敏感性和特异性。     

丙型肝炎患者HCV基因的检测,分型及临床分析

运用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）技术检测临床肝炎患者血清中ＨＣＶ ＲＮＡ对５４例ＨＣＶＲＮＡ阳性标本用限制性内切酶Ｓａｕ３ＡＩ／ＨａｅⅢ春５’ＮＣ区扩增产物进行酶切。结果显示４种酶切类型：ＨＣＶ Ⅰ型感染３．７％（２／５４），ＨＣＶⅡ型感染７７．８％（４２／５４），ＨＣＶⅢ，Ⅳ型感染１１．１％（６／５４），ＨＣＶⅡ／Ⅲ，Ⅳ型混合感染７．４％（４／５４）；     

血浆及其外周血单个核细胞中丙型肝炎病毒检测比较

目的；了解慢性丙型肝炎患的血浆及其外周血单个核细胞中丙型肝炎病毒的存在及存在形式。方法：反转录多聚酶链反应技术检测１２４例慢性丙型肝炎患的血浆及ＰＢＭＣ中的ＨＣＶ。结果：在７０例抗－ＨＣＶ及血浆ＨＣＶ ＲＮＡ阳性的患中有２１例（３０％）的患其ＰＢＭＣ内存在ＨＣＶ ＲＮＡ正链，仅１例存在ＨＣＶ ＲＮＡ负链，在５４例抗－ＨＣＶ阳性，血浆ＨＣＶ ＲＮＡ阴性的患中，仅有２例（３．７％）检出ＨＣＶ     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗－ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关。而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

庚型肝炎病毒在乌鲁木齐市部分献血员感染现状的研究

为了解乌鲁木齐市献血员庚型炎病毒的现状，本文采用酶地和聚合酶链反应检测庚型肝炎病毒抗体（抗－ＨＧＶ）及其核酸（ＨＧＶＲＮＡ）〉结果在１００名献血员血清中检出９份血清抗－ＨＧＶ阳性，其中职业献血员抗－ＨＧＶ阳性率为１６％，非职业献血员抗－ＨＧＶ阳性率为２％，两组之间有显著性差异，９份抗－ＨＧＶ阳性血清中有２份血清ＨＧＶＥＮＡ同时阳性，二者的符合率为２２％，本研究首次在乌鲁木齐市献血员 实有庚型肝炎病     

丙型病毒性肝炎患者唾液,尿液,精液HCV—RNA的检测

有确切输血史、血丙肝抗体及核酸均阳性的５０例急、慢性丙肝（急性肝炎２２例、慢性肝炎２３例、肝炎肝硬变５例）患者的唾液、尿液及精液中的ＨＣＶ－ＲＮＡ（ＰＣＲ）检测的阳性率分别为９００％、５００％及６００％。５例肝炎肝硬变患者均并发腹水，２例尚合并胸水，检测腹水８例次、胸水３例次，ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性。１例行胆道造瘘术的急性丙肝患者瘘管中流出的胆汁检测ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性。２例患者于急性肝炎期，唾液ＨＣＶ－ＲＮＡ阴性，随病情的演变，转变为慢性肝炎后，再次检测，转呈阳性。３例病程在２年以上的男性慢性丙肝患者精液中检出丙肝核酸，采集其女性配偶的血液、唾液和尿液，ＨＣＶ－ＲＮＡ均阳性，血抗－ＨＣＶ亦阳性。该组急性丙肝中７例（２７２％）患者，于入院之初，血抗－ＨＣＶ阴性，而唾液ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性。说明部分急性丙肝的早期，唾液中ＨＣＶ－ＲＮＡ的出现，早于血抗－ＨＣＶ。     

献血员庚型肝炎病毒感染对照研究

目的 了解职业献血员与义务献血员庚型肝炎病毒感染状况。方法 采用ＥＬＡ法检测抗－ＨＧＶ、ＰＣＰ法检测ＨＧＶ－ＲＮＡ。结果 检测职业血员１８０例血清标本中抗－ＨＧＶ阳性２１例，阳性率８．５７％，ＨＧＶＲＮＡ阳性１８例，阳性率占抗ＨＧＶ的８５．７％；义务献血员１１５例血清标本中抗－ＨＧＶ阳性３例，阳性率２．６％，ＨＧＶＲＮＡ阳性２例，阳性率占抗ＨＧＶ的６６．６６％。结论 义务献血可显著降低庚型肝炎病毒     

PCR法检测尿毒症病人血清HCV—RNA结果分析

应用ＰＣＲ技术检测尿毒症病人血清ＨＣＶ—ＲＮＡ１６５例，结果显示：ＥＩＡ检测病人血清抗ＨＣＶ阳性率为６３．０％；抗ＨＣＶ阳性病人ＨＣＶ—ＲＮＡＰＣＲ检出阳性率为６５．３％；抗ＨＣＶ阴性病人检出率为９．８％；ＰＣＲ总阳性检出率为７５．１％。提示：ＣＲＦ病人抗ＨＣＶ和ＨＣＶ—ＲＮＡ检出率与输血呈正相关。ＣＲＦ病人接受透析与输血次数愈多，感染ＨＣＶ的机会就愈大。在血清中单独出现抗ＨＣＶ或同时检出抗ＨＣＶ和ＨＣＶ—ＲＮＡ者，表明与早期输血感染ＨＣＶ者已产生抗ＨＣＶ，ＨＣＶ—ＲＮＡ阳性与近期输血再次感染者关系极为密切。用ＰＣＲ法直接检测病毒毒粒要早于ＥＩＡ检出抗ＨＣＶ的阳性结果，有利于早期诊断。     

晚期血吸虫病患者合并HCV感染及与HBV感染的关系

采用酶联免疫吸附法检测４６１例各期血吸虫病患者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，并采用逆转录聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１０２例晚期血吸虫病（晚血）患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）．结果表明，晚血患者血清抗ＨＣＶ检出率为７．５％，显著高于急性血吸虫病（急血）．慢性血吸虫病（慢血）患者２．Ｏ％及对照人群１．８％．３０６例晚血患者血清抗ＨＣＶ和／或ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性３８例（１２．４％），其中ＨＣＶ与ＨＢＶ合并感染６３．２％（２４／３８），ＨＣＶ单一感染３６．８％（１４／３８），９２例合并与未合并ＨＣＶ感染的ＨＢｓＡｇ阳性晚血患者，ＨＢｅＡｇ阳性率差异无显著性（Ｐ＞０．０５）．揭示，晚血患者ＨＣＶ感染率高，并多以与ＨＢＶ合并感染形式存在，ＨＣＶ感染对ＨＢＶ复制无明显抑制作用．     

维持性血液透析患者庚型肝炎病毒感染状况

目的 探讨庚型肝炎病毒合并其他肝炎病毒在血液透析患者中的感染状况。方法 逆转录－套式聚合酶链反应（ＲＴ－ｎＰＣＲ）检测血液透析患者血清ＨＧＶ ＲＮＡ,ＥＬＩＳＡ法检测乙肝对半及ＨＣＶ,ＨＤＶ抗体。结果 ８０例血透患者中,ＨＧＶ阳性１５例（１８．７％）,ＨＣＶ阳性１８例（２２．５％）,ＨＢｓＡｇ阳性２１例（２６．２％）,未检出ＨＤＶ阳性。在１５例感染ＨＧＶ的患者中,７例（４６．７％）同时感染其他肝炎     

肝细胞癌患者血清与癌组织中抗HCV及HCVRNA的检测

８８例经病理确诊的肝细胞癌患者，用ＥＬＩＳＡ法检测其血清抗ＨＣＶ与ＨＢＶ－Ｍ，阳性率分别为１４．７７％和９０．９１％。用ＰＣＲ法检测发现血清ＨＣＶＲＮＡ阳性１２例（１３．６４％）；１１例血清ＨＢＶＤＮＡ阳性病人的肝癌组织中８例ＨＢＶＤＮＡ阳性；１例肝癌组织中同时检出ＨＣＶＲＮＡ与ＨＢＶＤＮＡ。结果表明，本组肝癌的发生主要与ＨＢＶ感染有关，而与ＨＣＶ感染也可能有一定关系。     

90例丙型肝炎患者HCV基因分型研究

目的 了解徐州地区丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）基因型的分布情况。方法 对９０例血清ＨＣＶ ＲＮＡ阳性的丙型肝炎（ＨＣ）患者，行ＨＣＶ基因酶切分型。结果 ９０例中ＨＣＶ－Ⅱ型７１（７８．９％），ＨＣＶ－Ⅲ型１７例（１８．９％），ＨＣＶ－Ⅱ／Ⅲ混合型２例（２．２％）。结论 徐州地区ＨＣＶ流行株基因型主要为Ⅱ型，同时存在Ⅲ、Ⅱ／Ⅲ混合型。