淫羊藿苷对3T3-L1前脂肪细胞增殖及分化的影响

目的研究淫羊藿苷(ICA)不同作用浓度及不同作用时间对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的抑制作用。方法采用MTT法观察ICA对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响;应用ICA诱导小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化,油红O染色测定细胞内脂质含量,观察ICA对小鼠3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。结果 67μg/m L ICA对细胞增殖起抑制作用,持续至96 h并达到最大;30μg/m L和15μg/m L ICA在72 h、96 h对细胞增殖起抑制作用。结论较高浓度ICA对3T3-L1前脂肪细胞的分化有抑制作用,而低浓度ICA对3T3-L1前脂肪细胞的分化作用不明显。     

葛根素对3T3-L1前脂肪细胞分化及胰岛素抵抗模型糖代谢的影响

目的:研究葛根素(Pur)对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响,以及在胰岛素抵抗状态下对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖代谢的影响。方法:不同浓度Pur干预3T3-L1细胞,MTT法检测其对细胞增殖的影响;油红O染色法检测其对前脂肪细胞分化过程及成脂的影响;地塞米松诱导3T3-L1细胞建立胰岛素抵抗模型,用不同浓度Pur进行干预,测定细胞的葡萄糖消耗量。结果:Pur(3～300μmol/L)对3T3-L1前脂肪细胞增殖无明显影响;Pur(30～300μmol/L)促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,且具有量效关系。结论:Pur能够促进3T3-L1细胞的分化成脂,增加胰岛素抵抗状态下3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖代谢,改善胰岛素抵抗。     

柚皮苷对前脂肪细胞3T3-L1增殖和诱导分化的影响

目的观察柚皮苷对前脂肪细胞3T3-L1增殖和分化的影响,并探讨其影响3T3-L1分化的可能作用机制。方法培养3T3-L1细胞,并用不同浓度的柚皮苷进行干预,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,用油红O染色和染色比色法分析脂肪细胞的分化程度。逆转录多聚酶联反应(RT-PCR)检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物酶增殖物激活受体γ2(PPARγ2)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)mRNA的表达。结果柚皮苷能抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化,并能抑制PPARγ2、C/EBPα基因的表达。结论柚皮苷可抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖,并能通过下调分化相关基因的表达抑制分化。     

芦丁对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用

目的探索芦丁对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。方法采用3T3-L1前脂肪细胞分化模型和油红O染色法,选用罗格列酮作为阳性对照药,观察芦丁对3T3-L1前脂肪细胞分化的作用,于510 nm波长下测定芦丁对脂含量的影响。利用流式细胞仪测定芦丁对分化的脂肪细胞吸收葡萄糖的影响。结果芦丁在0.5μmol/L和1μmol/L两个浓度下均能促进3T3-L1前脂肪细胞分化过程,提高脂含量,并促进了葡萄糖吸收。结论芦丁能够促进3T3-L1前脂肪细胞分化,并促进了分化的脂肪细胞吸收葡萄糖。     

小柴胡汤对HL-60白血病细胞株体外分化的诱导作用研究

目的 观察小柴胡汤对HL-60白血病细胞的体外分化诱导作用,并初步探讨其作用机制.方法 通过药物作用后观察细胞形态学的变化,细胞吞噬功能及硝基蓝四氮唑(NBT)还原能力的改变;流式测定细胞周期改变和免疫组化检测抑癌基因P53的表达变化初步揭示其作用机制.结果 小柴胡汤能使HL-60细胞显著向成熟粒系细胞分化而且吞噬功能、NBT还原能力出现增强的趋势,以中、高剂量组最为显著(P<0.05);并使 HL-60的细胞周期阻滞于G0/G1期,S期细胞数减少,抑癌基因P53表达明显升高(P<0.05).结论 小柴胡汤可诱导HL-60细胞向粒系成熟分化;其作用机制可能与阻滞细胞于G0/G1期,并且上调抑癌基因P53的表达有关.     

以3T3-L1细胞模型探讨部分丹参提取物的调脂机制

目的:观察部分丹参提取物对前脂肪细胞3T3-L1增殖、分化和分泌Leptin、PAI-1的影响,探讨其调脂作用的可能机制。方法:培养3T3-L1细胞,并用不同浓度的丹参提取物进行干预,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖,用油红O染色和染色比色法分析脂肪细胞的分化程度。用ELISA法检测细胞培养上清中Leptin、PAI-1的含量。结果:(1)丹参素高浓度组明显抑制模型细胞增殖,中、低浓度组可显著抑制其分化;(2)丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA明显抑制模型细胞的增殖,但对其分化无明显影响;(3)丹参素、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA均明显抑制脂肪细胞Leptin的分泌;(4)丹参素对脂肪细胞分泌PAI-1有明显抑制作用,丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA作用不明显。结论:丹参提取物通过不同机制影响脂肪细胞,提示中药丹参可能通过多种机制作用于脂肪细胞而达到调脂作用。     

中药复方益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的：探讨中药复方益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响。方法：培养3T3-L1前脂肪细胞;以四甲基偶氮唑盐（MTT）的方法检测益糖康对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响,通过流式细胞仪检测细胞增殖的周期;以油红O染色异丙醇萃取的方法检测益糖康对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂肪积聚的影响。结果：10%含益糖康的大鼠血清,对3T3-L1前脂肪细胞的增殖影响最佳,细胞增殖在S、G2期与对照组比较增多;5%含益糖康大鼠血清抑制分化过程中的脂肪积聚最佳。结论：中药复方益糖康具有促进3T3-L1前脂肪细胞增殖,抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的作用。     

豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化的抑制作用

目的:探讨豆茶决明冲剂含药血清对前脂肪细胞增殖和分化的影响及其机制。方法:制备豆茶决明冲剂含药血清,培养3T3-L1前脂肪细胞,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)对3T3-L1前脂肪细胞增殖过程的影响;采用油红O脂肪染色观察及评价细胞分化情况;异丙醇萃取法、甘油三酯(TG)试剂盒检测分析不同浓度豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质合成的影响;采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测关键转录因子CCAAT增强子结合蛋白(C/EBPβ、C/EBPα)、过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)mRNA表达水平;采用Western blot法检测关键转录因子C/EBPβ、C/EBPα、PPARγ蛋白表达水平。结果:与对照组(Control)相比,0.9g/kg豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)对3T3-L1前脂肪细胞增殖无显著性影响;采用"鸡尾酒法"成功诱导前脂肪细胞成脂分化为成熟脂肪细胞,豆茶决明冲剂含药血清(5%、10%、20%)干预前脂肪细胞,分化后胞浆中脂滴数量显著性降低。脂滴中TG含量显著性下降,C/EBPβ、C/EBPα、PPARγmRNA和蛋白表达显著性降低。结论:豆茶决明冲剂含药血清对3T3-L1前脂肪细胞分化有抑制作用,其分子机制可能与下调PPARγ、C/EBPα和C/EBPβmRNA和蛋白表达相关。     

槐花提取物降血糖活性研究

目的研究槐花Sophora japonica L.(Leguminosae)提取物对2型糖尿病小鼠降血糖活性。方法通过超声提取法获得槐花乙醇提取物。使用腹腔注射烟碱和链脲霉素诱导的2型糖尿病小鼠模型和3T3-L1前脂肪细胞分化模型,检测槐花乙醇提取物对小鼠血糖的影响和对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。结果槐花乙醇提取物灌胃剂量每日100μg/g,连续灌胃给药3周,降低了2型糖尿病小鼠的血糖,改善口服葡萄糖耐受试验OGTT过程中的糖耐量。0.4 mg/L和0.8 mg/L的槐花乙醇提取物均能促进3T3-L1前脂肪细胞分化。结论槐花乙醇提取物降低2型糖尿病小鼠血糖,促进3T3-L1前脂肪细胞分化,具体作用机制有待进一步研究。     

复方维甲酸注射液诱导K562分化及凋亡作用

目的:比较复方维甲酸注射液及其拆方制剂青蒿油注射液、维甲酸注射液在体外对人红白血病细胞株K562的增殖、分化和凋亡的影响。方法:用MTT法了解三种注射液对人红白血病细胞株K562增值的抑制作用,用形态学观察、NBT还原实验以及流式细胞术检测表面抗原CD14、CD33观察三种注射液对K562细胞的诱导分化作用;通过流式细胞术观察药物对细胞凋亡和周期的影响。结果:MTT结果显示复方维甲酸注射液对K562细胞增殖有抑制作用,且效果优于其拆方制剂,IC50为11.98±0.06μg/m l;形态学观察、NBT还原实验以及流式检测CD14、CD33均提示复方维甲酸注射液有较好的诱导细胞分化成熟能力;流式检测提示复方维甲酸注射液可将细胞周期阻滞在G2/M期,对K562细胞有诱导早期凋亡的作用,且效果最优。结论:复方维甲酸注射液对人红白血病细胞K562有抑制增殖、诱导分化和凋亡的作用,且效果优于其拆方制剂。     

宣肺汤对小鼠B16黑素瘤细胞代谢的影响

目的：观察宣肺汤对：B16黑素瘤细胞的作用,探讨其关白作用的机理及安全性。方法：测定宣肺汤对体外培养的B16黑素瘤细胞细胞活力、酪氨酸酶活性及细胞内黑素含量的影响,并与熊果苷作对照比较。结果：25、50、100μg／ml宣肺汤对黑素瘤细胞的细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素生成均有较强的抑制作用,并呈剂量依赖性,且优于同浓度熊果苷,差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论：宣肺汤有较强的抑制黑素瘤细胞增殖、酪氨酸酶活性和黑素生成的作用,同时对黑素瘤细胞的细胞毒性较低,是较为安全有效的美白药物。     

SPGL诱导HL-60细胞分化作用的研究

目的:研究光叶海桐总皂苷(SPGL)诱导HL-60细胞分化的作用。方法:采用1×10-5~5×10-4mg/ml浓度SPGL处理第3 d的HL-60细胞进行Wrigh-Giemsa染色、NBT还原能力及细胞表面抗原的检测。结果:在药物作用下,HL-60细胞形态学出现分化特征;NBT还原能力增强,且其阳性细胞数与SPGL的浓度有明显的量-效关系;CD11b与CD14表面抗原的表达明显升高。结论:SPGL有诱导HL-60细胞分化的作用,并诱导其向粒细胞系和单核系细胞分化。     

滋补肝肾方含药血清对B16黑素细胞活性黑素含量及cAMP水平的影响

目的:通过对含滋补肝肾中药大鼠血清对黑素细胞(B16)活性、黑素含量和cAMP水平影响的研究,探讨滋补肝肾方治疗白癜风的机制。方法:体外培养小鼠B16细胞,于对数生长期加不同浓度含滋补肝肾中药的大鼠血清培养后,分别采用MTT法、NaOH法和放免法检测细胞活性、黑素含量和cAMP水平。结果:与空白对照组比较,滋补肝肾方含药血清各剂量组对B16增殖均没有明显促增殖活性;但20%含药血清可明显促进B16合成黑素量(P<0.05),并提高细胞内cAMP水平(P<0.05)。结论:滋补肝肾方可能通过提高黑素细胞cAMP的水平,从而促进B16细胞合成黑素的功能。     

雄黄纳米微粒对人白血病细胞株HL-60的诱导分化作用

目的：探讨雄黄（As4S4）纳米微粒对于人急性早幼粒白血病细胞HL-60的抑制增殖和诱导分化作用。 方法：采用MTT法观察低浓度雄黄对HL-60细胞增殖的影响,Wright-Giemsa 染色观察细胞形态,硝基四氮唑蓝（NBT）还原反应和流式细胞术抗原检测等鉴定细胞的分化。结果：细胞经雄黄处理后呈现明显的分化形态。经0.25～1.0 μmol·L^-1 雄黄作用24 h 后,NBT阳性率升高。用0.50 μmol·L^-1雄黄处理48 h,细胞表面分化抗原CD11b表达升高,细胞周期阻滞于G1期。 结论：低浓度雄黄对HL-60细胞具有诱导分化作用。     

丹参酮ⅡA诱导白血病细胞凋亡过程中端粒酶活性的改变

目的观察丹参酮Ⅱ_A(TanⅡ_A)对HL60,K562细胞端粒酶活性的抑制作用和对凋亡相关基因的影响,探讨丹参酮Ⅱ_A对造血细胞的作用机理。方法以HL60,K562为靶细胞,应用细胞培养技术,流式细胞术,透射电镜观察TanⅡ_A对HL60,K562细胞的作用,利用PCRTRAP方法检测TanⅡ_A处理前后HL60,K562细胞端粒酶活性的改变。结果经05μg·mL^-1TanⅡ_A作用6d后,HL60,K562细胞生长明显受到抑制,生长抑制率分别为756%和563%。经丹参酮诱导后,HL60,K562细胞发生凋亡,出现亚二倍体峰;同时显著下调HL60及K562细胞的cmyc,bcl2基因表达,上调cfos基因表达。HL60,K562细胞在TanⅡ_A作用后,端粒酶活性受到抑制,端粒酶活性抑制率分别为308%,508%。结论TanⅡ_A可明显抑制HL60和K562细胞的增殖和细胞端粒酶活性,并诱导细胞凋亡。     

力达霉素抑制HL-60细胞增殖和诱导分化作用

 目的 研究力达霉素对人急性髓性白血病细胞(HL-60) 增殖和诱导分化的作用。方法 用不同浓度的力达霉素处理HL-60 细胞,通过MTT法检测力达霉素对细胞的增殖抑制作用;利用瑞氏-姬姆萨染色法观察力达霉素对细胞形态的影响;通过硝基蓝四氮(NBT)还原比色法测定力达霉素对HL-60细胞的诱导分化作用。结果 不同浓度力达霉素处理细胞后,HL-60 细胞的增殖能力明显受到抑制。当力达霉素的作用浓度超过100 μmol·L-1时,抑制率可高达99%,并且抑制作用呈现时间依赖性和剂量依赖性的特点。Wright-Giemsa染色结果显示,力达霉素作用HL-60 细胞后,细胞在形态学方面发生很大变化。同时,力达霉素能够提高细胞的NBT还原能力。1 nmol·L-1和0.1 nmol·L-1浓度的力达霉素可以使HL-60细胞的NBT还原率分别提高到39.2% 和54.5 % ;0.01 nmol·L-1和0.001 nmol·L-1浓度的力达霉素则使阳性细胞的百分率增加到78.6%和89.9% ,与对照组相比,差异具有显著性（P<0.01）。结论 力达霉素具有较强的抑制HL-60细胞增殖的能力,同时,低浓度力达霉素能使HL-60细胞形态发生改变,NBT还原阳性率升高,诱导细胞发生分化,其作用机制有待于进一步深入研究。     

没食子儿茶素促进脂肪细胞吸收葡萄糖研究

目的探讨没食子儿茶素对脂肪细胞在高浓度葡萄糖条件下吸收葡萄糖的作用。方法应用3T3-L1前脂肪细胞分化模型,测定在脂肪细胞中没食子儿茶素对葡萄糖吸收的作用和对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。结果没食子儿茶素可促进脂肪细胞中高浓度葡萄糖(30 mmol/L)条件下由胰岛素刺激的葡萄糖吸收,加快3T3-L1前脂肪细胞的分化。结论没食子儿茶素可增加脂肪细胞葡萄糖吸收并促进3T3-L1前脂肪细胞分化,提示没食子儿茶素可有效改变血糖浓度和改善胰岛素抵抗。     

甘草次酸对白血病细胞侵袭力及明胶酶活性的影响

目的 研究甘草次酸（glycyrrhetinic acid，GA）对白血病细胞侵袭能力及明胶酶表达的影响。 方法 对体外培养的白血病细胞系K562、HL-60，用MTT法检测不同浓度GA对细胞增殖的影响；采用Transwell小室基质胶侵袭实验观察GA对K562、HL-60细胞株侵袭能力的影响；明胶酶谱法检测GA对细胞明胶酶活性的影响。 结果 GA对K562、HL-60细胞有明显的增殖抑制作用；能够以浓度依赖性的方式抑制K562、HL-60细胞的侵袭能力；GA能够显著下调K562、HL-60细胞明胶酶的A、B活性。 结论 GA能够抑制白血病细胞K562、HL-60明胶酶活性，从而抑制K562、HL 60细胞的侵袭能力，为白血病细胞髓外浸润的预防提供实验依据。