头孢噻肟钠致白细胞减少和肝、肾功能异常

1临床资料患者男,43岁,教师,因发热2天、头痛、乏力、咽痛于2005年1月8日入院,既往体健,无药物不良反应史。入院时查体:T38.5℃,P82次·m in-1,R20次·m in-1,B P110/70m m H g(1m m H g=0.133kPa)。实验室检查:R B C4.46×1012·L-(1正常值为0.35-5.5×1012·L-1),W B C11.0×109·L-1(正常值为4.0-10×10·9L-1),N0.85,A L T23.7U·L-1(正常值为5.0-50.0U·L-1),A ST17.5U·L-1(正常值为8.0-50.0U·L-1);肾功能检查:B U N5.1m m o·lL-1(正常值为2.5-7.2m m ol·L-1);尿蛋白(-)。腹软,肝脾未触及,胸片检查:未发现异常;咽…     

小鼠不同细胞间表观遗传修饰的变化对Pdx-1基因转录表达的影响

目的:通过比较小鼠不同细胞类型之间Pdx-1基因转录起始区的表观遗传修饰差异,探讨表观遗传修饰对Pdx-1基因转录表达的作用。方法:采用免疫共沉淀-实时定量PCR法检测小鼠胚胎干细胞(mES)、小鼠成纤维细胞株NIH3T3细胞和小鼠β细胞株NIT-1细胞Pdx-1和MLH1基因转录起始区DNA甲基化和组蛋白修饰(H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化)的状况。同时采用实时定量RT-PCR检测上述3种细胞各基因mRNA表达水平。分析基因的DNA甲基化水平、H3K4m3、H3K9m3和H3乙酰化修饰与基因表达之间的相互关系。结果:(1)以mES细胞为对照,NIT-1细胞的Pdx-1基因转录起始区呈低DNA甲基化和高H3K4m3修饰(P0.05),NIH3T3细胞的Pdx-1基因的转录起始区的DNA甲基化、H3乙酰化、H3K4m3和H3K9m3修饰水平明显增高(P0.05);(2)Pdx-1基因仅在NIT-1细胞表达,其表达与DNA甲基化存在等级负相关(r=-0.802,P0.01),与H3K4m3修饰存在直线相关(r=0.997,P0.01),与H3K9m3修饰存在等级负相关(r=-0.879,P0.01);(3)管家基因MLH1的表达与所检测的表观遗传修饰无相关性。结论:DNA甲基化、H3K9m3与H3K4m3修饰能相互协调,共同调控Pdx-1基因的表达,对胚胎干细胞向β细胞分化具有重要意义。     

基于高效液相色谱法的聚乳酸-羟基乙酸共聚物体外降解产物的测定

目的建立准确、不受基质干扰的测定聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]降解液中降解产物乙醇酸和乳酸的分析方法并进行方法验证,为PLGA类产品的降解液的质量分析提供重要的技术参考。方法通过优化色谱柱、色谱条件和不同p H值的乳酸和乙醇酸标准溶液的色谱峰面积的比较等方法,确定色谱条件和样品降解液预处理方法,用Waters 1525高效液相色谱仪进行检测,紫外检测器检测波长210 nm,外标法定量。结果亲水性C18柱,20 mmol/L的KH2PO4水溶液为流动相(p H=2.8)和0.6 m L/min的流速等色谱条件可使降解液中的乙醇酸和乳酸得到良好的分离;同时,样品降解液的p H值宜调节至2.8~3.5范围内以对降解液中的乙醇酸和乳酸进行准确定量。此外,方法学验证结果显示,降解液中乙醇酸的线性范围为2.500~250.0μg/m L(r=0.9999),定量限为0.48μg/m L,加标回收率为99.4%~102.6%;降解液中乳酸的线性范围为2.642~264.2μg/m L(r=0.9999),定量限为1.0μg/m L,加标回收率为97.9%~103.2%。结论该方法简便、准确,实验成本较低,且不受磷酸盐缓冲液p H值的影响,稳定性好,可用于聚乳酸-羟基乙酸共聚物材料体外降解的降解产物的含量分析。     

新型甲型H1N1流感病毒HA基因DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体

目的 探讨新型甲型流感病毒(2009H1N1)血凝素(HA)DNA疫苗诱导小鼠产生中和抗体特性.方法 构建2009H1N1或1918甲型流感病毒(1918H1N1)HA蛋白表达质粒2009HA和1918HA,采用25μg或200μg剂量2009HA质粒免疫小鼠,以2009HA或1918HA蛋白为包被抗原,测定小鼠血清中2009HA抗体总量或交叉反应抗体含量,分别用2009H1N1和1918H1N1两种假病毒(pp)测定抗体中和活性.结果 25 μg或200μg的2009HA质粒加强免疫小鼠后,4～16周内两组小鼠血清中2009HA总抗体水平以及对2009H1N1pp的中和抗体滴度相似(P>0.05),都含有与1918HA蛋白交叉反应抗体,对1918H1N1pp的交叉中和抗体滴度相似(P>0.05).结论 小剂量2009HA质粒DNA疫苗能够诱导小鼠产生持久的高水平中和抗体,对于预防新现流感病毒具有潜在应用价值.     

幽门螺杆菌空泡毒素VacA促进胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活

目的探究H. pylori空泡毒素VacA对胃上皮细胞NLRP3炎性小体激活的影响。方法采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695感染AGS细胞,Western blotting、q RT-PCR、ELISA检测NLRP3、Pro-Caspase-1、Caspase-1、pro-IL-1β和IL-1β的表达。siRNA-NC、siRNA-NLRP3转染AGS后,分别用PBS、WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695刺激,qRT-PCR和细胞因子ELISA检测试剂盒分别检测pro-IL-1β的mRNA表达水平和IL-1β的蛋白表达水平。收集慢性胃炎患者标本,鉴别出H. pylori阳性患者的VacA基因型(s1m1型和s1m2型),通过q RT-PCR检测NLRP3、caspase-1、pro-IL-1β的mRNA表达水平及采用细胞因子ELISA试剂盒检测IL-1β蛋白表达水平。C57BL/6小鼠腹腔注射DMSO或者DMSO+Mcc950,H. pylori菌液灌胃,qRT-PCR和ELISA检测胃组织IL-1β的表达。结果 H.pylori感染AGS细胞,与对照组相比,WT H. pylori26695组IL-1β的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.01);△VacA H. pylori26695组与WT H. pylori26695组相比,IL-1β的m RNA和蛋白表达水平均明显下降(P0.01)。与siRNA-NC组相比,采用WT H. pylori26695和△VacA H. pylori 26695刺激转染siRNA-NLRP3的AGS细胞pro-IL-1β的m RNA水平和IL-1β蛋白表达水平均明显下调(P0.01)。H. pylori阳性患者较阴性患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平明显升高(P0.01);与VacA s1m2型患者相比,VacA s1m1型患者NLRP3、Caspase-1和IL-1β的mRNA表达水平显著升高(P0.01),同时IL-1β成熟分泌增加。H. pylori慢性胃炎小鼠动物模型中,与对照组相比,Mcc950组中在WT H. pylori26695和△VacA H. pylori26695灌胃后,pro-IL-1β的mRNA水平和IL-1β蛋白水平表达均明显下调(P0.01)。结论H. pylori空泡毒素VacA能够激活胃上皮细胞NLRP3炎性小体,促进IL-1β的成熟分泌。     

农村居民群血清伤寒抗体的调查

<正> 1982年4月对本地区13个乡,年龄15～65岁未患过伤寒的1,234名农村居民,抽样做了血清伤寒抗体调查,采用肥达氏试验,血清稀释度为1:10～1:320,诊断菌液为卫生部武汉生物制品所产品(批号821—5),按原法标准判定结果。 结果:1,234名农村居民血清中五种伤寒抗体的几何平均值分别为“O”20.19,“H”20.51,“甲”16.31,“乙”16.45,“丙”13.5。五种抗体全阴性的288人占23.33％,“O”“H”1:160的2人占0.16％,“O”“H”均为1:80的4人占0.32％.“O”“H”均为1:40的28人占2.28％,“O”为1:40、“H”为1:80的2人占0.16％。     

生物可降解聚对二氧环己酮材料中单体残留的测定

建立聚二氧环己酮原料中单体二氧环己酮残留量的气相色谱测试方法。采用DB-624毛细管色谱柱(30.0 m×535μm×3.00μm),程序升温(146℃保持5 min,30℃/min升温至200℃,保持2 min)。载气为氮气,氢火焰离子化检测器(FID),进样口温度240℃,检测器温度250℃,分流比5:1,进样量2μL。结果显示单体在0.0239~0.1794 mg/m L范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%,RSD为1.39,检测限浓度为0.2μg/m L,定量限浓度为0.5μg/m L。该方法简便快捷、准确度和灵敏度高。     

抵抗素基因启动子-420C/G、细胞色素P4501A1-MspI多态性与吸烟的交互作用对非酒精性脂肪性肝病的影响

目的:探讨抵抗素基因启动子-420C/G、细胞色素P4501A1-Msp I(CYP1A1-Msp I)基因多态性与吸烟的交互作用与非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的关系。方法:采用病例-对照研究的方法,以1 200例NAFLD患者及1 200例健康对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术分析了抵抗素基因启动子-420C/G和CYP1A1-Msp I基因多态性。结果:-420C/G(GG)基因型和CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型频率分布分别为49.75%、50.08%(病例组)和24.00%、24.25%(对照组),两者经χ2检验差异显著(P0.01)。-420C/G(GG)基因型者患NAFLD的风险显著增加。CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型者患NAFLD的风险也显著增加。基因突变的协同分析发现-420C/G(GG)/CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型者在NAFLD组和对照组中的分布频率分别为39.83%和12.83%,两者经χ2检验有显著差异(P0.01)。-420C/G(GG)/CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型者患NAFLD的风险显著增加。病例组的吸烟率显著高于对照组的吸烟率(P0.01),吸烟与-420C/G(GG)和CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型均有交互作用。结论:-420C/G(GG)、CYP1A1-Msp I(m2/m2)基因型和吸烟是NAFLD的易患因素,基因多态性与吸烟的交互作用增加了NAFLD的发病风险。     

多发性硬化和视神经炎病人脑脊液中免疫球蛋白G含量和同种异型的关系

本文为了探讨免疫球蛋白(1g)G同种异型决定簇与多发性硬化(MS)的关系,采用放射免疫试验检测了MS、单侧视神经炎(ON)、其他神经系统疾病(OND)和健康人血清及脑脊液(CSF)中IgG含量.同时采用常规血凝抑制试验检测了血清中G1m、G3m和Km(1)及CSF中G1m和G3m.结果表明,64例MS病人CSF中平均IgG含量(78.12±7.23gμg/ml)显著高于47例ON病人(35.02±3.64μg/ml)和51例OND病人(22.41±1.39μg/ml),P<0.0001.MS病人CSF中IgG~α;~g和Gm~α,~x;~g单倍型的频率分别为41/64和17/64,与OND     

2007-2012年北京市流感样病例和流感病原学监测

目的 阐明2007-2012年北京市流行性感冒(流感)流行特征和病原学监测结果.方法 使用“北京市医疗机构传染病监测预警系统”中二级以上医院流感样病例数和百分比的周数据以及流感病原学监测周数据,分析流感样病例发病趋势和流感病毒构成情况.结果 2007-2012年,北京市二级以上医院共监测流感样病例3,045,527例,其中流感样病例百分比2.11％.期间共检测标本49,868件,检出阳性标本8,289件,其中甲型H1N1亚型573件(6.91％)、甲型H3N2亚型2,578件(31.10％)、甲型H1N1流感2,021件(24.38％)、B型Victoria系945件(11.40％)、B型Yamagada系681件(8.22％).各年度流感病毒亚型构成不同:2007-2008年度主要为B型Yamagada系(60.36％)和甲型H3N2亚型(23.68％),2008-2009年度为甲型H1N1亚型(78.63％),2009-2010年度为甲型H1N1流感(40.28％)和甲型H3N2亚型(20.29％),2010-2011年度为甲型H3N2亚型(64.34％)和甲型H1N1流感(23.44％),2011-2012年度为B型Victoria系(57.28％)、B型Yamagada系(20.80％)和甲型H3N2亚型(18.66％),2012-2013年度为甲型H3N2亚型(77.40％)和甲型H1N1流感(20.36％).结论 近年来,甲型H1N1亚型、甲型H3N2亚型、甲型H1N1流感、B型Victoria系和B型Yamagada系均有流行,且各年度优势毒株不一.     

住院高龄老年男性的白蛋白尿临床特点分析

目的探讨住院高龄老年男性(年龄不小于80岁)白蛋白尿的特点,为高龄保健人群慢性肾脏病研究提供理论依据。方法回顾性分析2012年6月至2014年12月住院治疗的262例患者临床资料,将晨尿白蛋白/肌酐(ACR)为30~300 mg/g诊断为白蛋白尿的218例患者纳入研究。按照年龄将住院高龄老年人群分为80+组(年龄80~89岁)157例和90+组(年龄90岁以上)61例,根据ACR结果分为白蛋白尿阳性组(ACR 30~300 mg/g)和白蛋白尿阴性组(ACR30 mg/g),队列研究分析白蛋白尿的临床特点。结果 218例住院高龄老年男性中53.21%出现白蛋白尿,Log ACR(1.78±0.85)mg/g。80+组白蛋白尿阳性率为45.16%,90+组为69.84%(P0.05)。白蛋白尿阳性组Log ACR(2.03±0.62)mg/g,白蛋白尿阴性组Log ACR(1.03±0.44)mg/g。80+组和90+组中患有糖尿病、高血压或者e GFR60 m L·(min·1.73 m2)-1者白蛋白尿的发生率分别是50%vs.77.5%(P0.05),50.38%vs.58.82%(P0.05),66.21%vs.75%(P0.05)。全组无糖尿病、高血压或者e GFR60 m L·(min·1.73 m2)-1的高龄老年人中,白蛋白尿的发生率分别是35.39%(21/59例),16.00%(4/25例)和25.84%(23/89例),低于本组的平均水平。结论住院高龄老年男性白蛋白尿发生率为53.21%,90岁以上者白蛋白尿发生率与80岁以上者比较具有增高的趋势。     

红景天苷对小鼠MSCs的增殖及其细胞周期的影响

目的本研究探讨了不同浓度红景天苷通过ERK信号通路对小鼠骨髓间充质干细胞增殖和细胞周期变化的影响及机制。方法实验分为对照组(D-MEM/F-12完全培养液)、不同浓度红景天苷(5~100μg/m L)诱导组和阻断组(5~100μg/m L+30μg/L PD98059),利用CCK8法、流式细胞术及Western blot分别检测ERK信号通路阻断前后细胞抑制率、细胞周期及其相关蛋白的表达。结果 10μg/m L诱导组和阻断组均能抑制细胞增殖,且5μg/m L(P0.01)、25μg/m L(P0.05)和100μg/m L(P0.05)诱导组对细胞抑制显著高于阻断组。25μg/m L诱导组和阻断组G_0/G_1期细胞比例均增加,细胞周期阻滞于G0/G1期。诱导组和阻断组cyclin A和cyclin D1蛋白的表达与对照组比较均下调,P21蛋白的表达上调。阻断组cyclin A蛋白的表达与诱导组比较明显下调(P0.01);50和100μg/m L诱导组与阻断组相比cyclin D1蛋白表达显著下调,P21蛋白的表达显著上调(P0.01)。结论红景天苷能通过调节细胞周期相关蛋白的表达抑制小鼠MSCs细胞的增殖和细胞周期的改变。     

H2-RLX抑制SSc皮损成纤维细胞增殖和向肌成纤维细胞转分化的研究

目的:探讨成纤维细胞(FB)向肌成纤维细胞( MFB)转分化在系统性硬化症(SSc)发病机制中的作用和H2松弛素( H2-RLX)在SSc中的抗纤维化作用机制.方法:体外培养SSc患者皮损和正常皮肤FB及鉴定;免疫细胞化学法定性、ELISA法定量检测FB中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)而了解MFB比重;施加并观察H2-RLX对SSc FB增殖和转分化为MFB的影响.结果:两组FB的细胞形态无明显不同;SSc组α-SMA阳性率均值高于对照组(P＜0.01);随培养时间的延长,两组α-SMA量均渐增多(P均＜0.01),但在培养的24、48、72 h,SSc组α-SMA量分别高于对照组(P均＜0.05);H2-RLX 1 μg/L对FB增殖和α-SMA量无明显影响,而10 μg/L和100 μg/L则完全地抑制FB增殖和α-SMA量(P均＜0.05),以100 μg/L时抑制作用最强.结论:SSc患者皮损来源的FB存在强烈地向MFB转分化的特性,H2-RLX则可通过抑制FB增殖及转分化为MFB而在SSc中发挥抗纤维化作用.     

间充质干细胞株C3H10移植治疗小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的实验研究

观察鼠源性间充质干细胞株C3H10移植对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型小鼠疾病进程的影响,为研究多发性硬化症(multiple sclerosis,MS)等自身免疫性疾病的治疗提供实验基础。采用MOG35-55抗原与完全弗氏佐剂(IFA)免疫C57BL/6雌性小鼠制作EAE模型;24只小鼠分成三组,即未干预对照组、C3H10细胞移植组和正常对照组。通过HE染色,Fast-blue染色观察小鼠脑和脊髓的病理学改变,结合神经功能评分和体重测量的方法观察C3H10细胞移植对EAE小鼠的影响。结果:(1)动物行为学的改变:免疫后第10天开始,未干预对照组小鼠陆续出现EAE临床症状,第14至第18天达到发病高峰,平均神经功能评分为2.3±0.36(P<0.05),持续评分30d;C3H10细胞移植组小鼠有1只14 d和18 d神经功能评分为1分,正常对照组小鼠一直未出现临床症状(0分),持续观察30 d;(2)未干预对照组小鼠体重呈逐渐下降,第14天体重约(918.93±2.12)g,第22天约(18.65±2.04)g;C3H10细胞移植组小鼠体重有上升趋势,于造模后第14天称得体重为(18.7±0.93)g,造模后22 d小鼠体重保持在(19.26±0.58)g,两组相比具有统计学差异(P<0.05);(3)病理学改变:未干预对照组小鼠脑和脊髓小血管周围炎细胞浸润,呈袖套状或脱髓鞘改变,而C3H10细胞移植组和正常对照组小鼠未出现明显的脑和脊髓小血管炎症病理变化。小鼠间充质干细胞株C3H10移植于EAE小鼠可明显减少并延缓EAE发病,呈现一定的治疗作用。     

原发性高血压颈动脉内-中膜厚度与eNOS4a/b基因多态性的相关性研究

目的:探讨皖北地区汉族人群原发性高血压(EH)颈动脉内-中膜厚度(IMT)与内皮一氧化氮合酶(eNOS) 4a/b基因多态性的关系.方法:随机选取本院门诊与住院的EH患者79例(EH组),根据颈动脉IMT是否增厚及有无粥样斑块进一步分为两个亚组,不伴有IMT增厚和颈动脉粥样斑块者36例归入H1组 , 伴有IMT增厚和/或颈动脉粥样斑块者43例归入 H2组.选取同期在门诊体检的健康人68例作为对照组(N组).所有受试者进行eNOS 4a/b基因多态性检测,并进行组间比较.结果:H1组IMT高于N组(P＜0.01), H2组IMT高于H1组及N组(P＜0.01);H2组左房内径(LA)和左室重量指数(LVMI)高于N和H1组(P＜0.01),而EF值低于N和H1组(P＜0.01).aa+ab基因型在EH组比率为27.8%(22/79), N组为10.3%(7/68),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);H2组中aa+ab基因型比率为39.5%(17/43),高于N组10.3%(7/68)及H1组13.9%(5/36), 差异有统计学意义(P＜0.05);H2组a等位基因分布比率为20.9%(18/86),高于H1组6.9%(5/72), 差异有统计学意义(P＜0.05);N组等位基因比率为5.1%(7/136)与H组14.6%(23/158)比较,差异有统计学意义( P＜0.01).结论:皖北地区汉族EH患者与正常对照相比,其eNOS 4a/b基因多态性中各基因型分布存在差异,提示eNOS 4a/b基因多态性与EH的发病及并发动脉粥样硬化相关.     

LDL诱导THP-1细胞炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β的顺序表达

目的探讨LDL诱导THP-1细胞内炎性因子FOS、TNF-α、IL-1β表达及3种炎性因子的关系,为早期诊断动脉粥样硬化提供依据。方法采用实时荧光定量PCR检测LDL刺激的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达,TNF-α抑制剂刺激THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA的表达及TNF-α抑制剂对LDL诱导的THP-1细胞中FOS、TNF-α、IL-1βm RNA表达影响;采用流式细胞仪检测TNF-α抑制剂刺激的THP-1细胞凋亡情况。结果 LDL刺激THP-1细胞FOS m RNA的表达0.5 h达到高峰(P0.05),TNF-αm RNA的表达1 h开始上升并达到最高(P0.05),IL-1βm RNA的表达1 h开始上升(P0.05);TNF-α抑制剂不促进细胞凋亡,100μg/ml时凋亡率最低。TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 2 h表达下降(P0.05),TNF-αm RNA 1 h表达上升(P0.05),2 h表达下降(P0.05),IL-1βm RNA 1 h表达下降(P0.05);LDL诱导细胞1 h后加入TNF-α抑制剂刺激细胞FOS m RNA 1 h表达下降(P0.05),TNF-αm RNA 0.5 h表达下降(P0.05),IL-1βm RNA 0.5 h表达下降(P0.05)。结论 LDL能够促进THP-1细胞内FOS、TNF-α、IL-1β的表达,且它们之间有一定的表达顺序,TNF-α能促进IL-1β的表达。     

肝细胞生长因子激活胶原降解途径逆转心肌纤维化

目的 研究肝细胞生长因子(HGF)对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下新生大鼠心肌成纤维细胞胶原合成降解平衡的影响.方法 差速贴壁法分离新生SD大鼠心肌成纤维细胞(CF),并用细胞免疫组织化学进行鉴定.实验分为正常对照组(C组)、Ang II 10-6mol/L组(A组)、HGF 10μg,L+AngⅡ10-6 mol/L组(H1组)、HGF 100μg/L+AngⅡ 10-6 mol/L组(H2组).作用48 h后采用羟脯氨酸法测胶原蛋白含量,RT-PCR法测Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)、基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋ca酶抑制因子-1(TIMP-1)mRNA的表达;Westernblotting 4col Ⅰ蛋白水平的表达.用Ⅰ型胶原酶活性检测试剂盒测MMP-1的活性.结果 作用48 h后,A组、H1组胶原蛋白含量较C组增加[(39.08±2.71)mg/L比(37.45±4.22)mg/L比(23.73±1.62)ms/L,均P＜0.05],H2组胶原蛋白含量(26.03±3.04)mg/L则低于A组、Hl组(P＜0.05),与C组差异无统计学意义.在mRNA水平上ColⅠ、col Ⅲ、TIMP-1的表达A组＞H1组＞H2组＞C组(均P＜0.05),而MMP-1 mRNA表达A组＜H1组＜H2组＜C组(均P＜0.05).Col Ⅰ蛋白水平A组＞H1组＞H2组＞C组(89.90±14.29比68.21±11.43比36.08±8.8比30.14±7.36,均P＜0.05).A组、H1组MMP-1 mRNA表达量及活性水平较C组明显降低(均P＜0.05),H2组则基本恢复到C组水平.结论 HGF主要通过激活胶原降解途径,重调MMP-1.TIMP-1平衡,逆转心肌纤维化.     

除痰解毒方通过EMT途径逆转肺癌吉非替尼耐药

目的:从上皮-间充质转化(EMT)途径探讨除痰解毒方逆转肺癌分子靶向耐药的机制。方法:建立人肺腺癌耐药细胞株H1975裸鼠模型(n=60),随机分为:模型组,吉非替尼(0. 04 g/kg)组,除痰解毒方低、中、高剂量(13. 52 g/kg、27. 04 g/kg和54. 08 g/kg)组,除痰解毒方中剂量(27. 04 g/kg)联合吉非替尼(0. 04 g/kg)组,每组10只。治疗2周,检测瘤体积和瘤质量,计算抑瘤率,采用免疫组织化学法、Western blot法和real-time PCR法检测各组肿瘤组织中E-cadherin、Snail和vimentin蛋白及m RNA的变化。结果:与模型组及吉非替尼组比较,除痰解毒方中、高剂量组及联合用药组瘤体积和瘤质量显著降低(P 0. 05)。免疫组织化学法、Western blot法及realtime PCR法结果均显示除痰解毒方中剂量组和联合用药组E-cadherin蛋白及m RNA的表达水平显著上调,Snail和vimentin蛋白及m RNA表达水平较模型组与吉非替尼组显著下调(P 0. 05)。结论:除痰解毒方可抑制H1975细胞裸鼠移植瘤的生长,逆转肺癌对吉非替尼的耐药,其作用机制可能与调控EMT相关标志蛋白的表达有关。     

PTA球囊扩张导管中2-氯乙醇残留量的评价方法

目的建立气相色谱-质谱(GC-MS)联用的方法分析ECH残留量,以便对PTA球囊扩张导管中的ECH残留量水平进行安全性评价。方法以丙酮为溶剂,超声提取样品中的2-氯乙醇。色谱柱ZB-624,进样口温度180℃,分流比1∶1,载气为高纯He,流速1.5 g/m L。升温条件:50℃(1 min),5℃/min升至100℃。质谱条件:离子源温度230℃,接口温度250℃,电子能量70 e V。以保留时间和质谱全扫描方式进行定性分析,质荷比m/z 35~500。选择离子监测模式外标法定量,定量离子m/z=43。结果该方法理论塔板数在56753以上,在1.44~22.96μg/m L浓度范围,线性关系良好,r=0.999,平均加样回收率为99.1%(n=5,RSD5%),检出限为0.41μg/m L。样品中未检出ECH残留。结论建立的基于GC-MS的2-氯乙醇残留量的分析方法灵敏、快速、准确,可供企业对PTA球囊扩张导管产品的质量控制和检测同行参考。     

阿托伐他汀钙缓释微球制备方法的优化北大核心

背景:近年来研究发现,他汀类药物在调节骨代谢、修复骨细微结构、抑制炎症、促进细胞增殖、修复血管内皮、调节信号通路传导等多方面具有显著效果。目的:对载阿托伐他汀钙缓释微球的制作参数进行优化,以期制备出载药量大、形态规则的缓释微球。方法:采用去溶剂法制备载阿托伐他汀钙的牛血清白蛋白缓释微球,筛选出影响去溶剂过程的主要影响因素,包括血清白蛋白溶液质量浓度(40,70,100 g/L)及p H值(7,8,9)、阿托伐他汀钙的用量(200,300,400μg)、乙醇添加速度(0.2,0.5,1 m L/min),通过正交实验筛选出最佳包封率的制备条件。在最佳组合工艺参数下制备载阿托伐他汀钙的牛血清白蛋白缓释微球,置于PBS中进行体外缓释性能测试。结果与结论:(1)最佳的制备工艺参数是:牛血清白蛋白溶液质量浓度为100 g/L、p H值为7,阿托伐他汀钙用量为400μg,乙醇添加速度为0.2 m L/min;(2)在此参数下制备的微球形态规则,表面光滑,微球直径(425.0±13.8) nm,药物包封率高达85.70%,体外释放时间可持续48h以上,累积释放量达到73%,具有较为良好的缓释效果;(3)实验成功制备了负载阿托伐他汀钙的牛血清白蛋白缓释微球,此药物缓释微球具有较高载药量及稳定性,并可以实现的药物缓释。