吲哚胺2,3-双加氧酶与原因不明复发性流产关系的研究进展

吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)作为一种体内天然存在的免疫调节酶,可通过调节T细胞、自然杀伤细胞和树突状细胞等重要免疫细胞的功能,使局部微环境形成一种免疫抑制状态,进而调节母体的免疫反应,影响妊娠免疫耐受。原因不明复发性流产(URSA)是指部分未找到具体病因的复发性流产。而现阶段认为导致URSA发生的一个主要原因为妊娠免疫耐受失败。因此,通过研究IDO调节免疫耐受的过程,可为URSA的治疗提供新的靶点和依据。     

吲哚胺-2,3-双加氧酶在非小细胞肺癌中的表达

目的 探讨吲哚胺-2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)在非小细胞肺癌中的表达及意义.方法 收集38例非小细胞肺癌组织和10例癌旁正常肺组织.用半定量免疫组织化学方法 检测肺组织中IDO蛋白阳性率,实时荧光定量PCR检测肺组织中IDO mRNA表达水平.结果肺癌组IDO蛋白阳性率和IDO mRNA表达水平均明显高于对照组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05);而肺癌组按不同病理分型中,腺癌组和鳞癌组比较差异无统计学意义(P＞0.05).肺癌组按不同分化程度分为高、中、低3组,经统计学分析,3组中IDO阳性表达率和IDO mRNA表达水平差异均有统计学意义(均P＜0.05).肺癌组按有和无淋巴结转移分组比较,IDO蛋白阳性率和IDO mRNA表达水平差异也均有统计学意义(均P＜0.05).结论 IDO在非小细胞肺癌中呈高表达,与分化程度及有无淋巴结转移有关,但与肺癌病理分型无关.     

吲哚胺2,3双加氧酶的表达及其在肿瘤免疫耐受中的作用

吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)是色氨酸沿犬尿酸途径分解代谢的限速酶,在体内的分布比较广泛。脂多糖、细胞因子如γ-干扰素等多种物质可以通过不同的机制调节IDO的表达。在某些肿瘤类型中,IDO可以诱导机体产生针对肿瘤的免疫耐受。对IDO的这种免疫调节机制的深入研究将在肿瘤治疗方面具有重大的意义。     

乳腺癌中吲哚胺2,3-双加氧酶和调节性T细胞的表达

[目的]通过研究在乳腺癌和引流淋巴结中吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)和调节性T细胞(Treg cells)的表达,探讨两者之间的关系.[方法]采用半定量RT-PCR法和免疫组织化学检测IDO mRNA和蛋白及Foxp3蛋白在乳腺癌、淋巴结和乳腺良性病变中表达情况.[结果]乳腺癌引流淋巴结中IDO的mRNA水平高于乳腺癌组织(P＜0.05),乳腺癌组织中IDO的mRNA水平高于乳腺良性病变组织(P＜0.05).免疫组化结果显示示乳腺癌引流淋巴结内IDO表达水平高于原发癌(P＜0.05),乳腺癌组织中IDO表达水平高于乳腺良性病变组织(P＜0.05).乳腺癌中IDO的表达与病理类型和临床分期相关(P＜0.05).乳腺癌中Treg细胞Foxp3+比例高于乳腺良性病变,乳腺癌引流淋巴结中Treg细胞Foxp3+比例高于乳腺原发癌(P＜0.05).乳腺癌组织中IDO与Treg细胞间呈正性相关(r2=0.409,P＜0.05),与引流淋巴结中Treg细胞正性相关(r2=0.528,P＜ 0.05).[结论]IDO和Treg细胞有可能在乳腺癌免疫逃逸机制中发挥重要作用.     

吲哚胺2，3-双加氧酶及IL-12/IL-10细胞因子平衡与妊娠免疫耐受

目的:观察妊娠不同时期胎盘来源的单核-巨噬细胞吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的表达及细胞因子白细胞介素(IL)-10?IL-12的分泌情况,探讨其在妊娠免疫耐受中的可能作用?方法:机械分离中期妊娠(21周 ± 3天,19例)及足月妊娠(39周 ± 5天,25例)胎盘中的单核-巨噬细胞,ELISA法检测其分泌IL-10?IL-12的水平;RT-PCR及Western blot法分别检测IDO mRNA及蛋白水平的表达;以CCK-8法检测其激发同种异体T细胞增殖能力的不同?结果:足月妊娠较中期妊娠胎盘来源的单核-巨噬细胞产生更多的IL-12,但IL-10及IDO的表达较之明显减低;并且,足月妊娠较中期妊娠胎盘来源的单核-巨噬细胞刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力更强?结论:中期及足月妊娠胎盘来源的单核-巨噬细胞参与维持妊娠免疫耐受及分娩发动可能与其调节IL-12/IL-10细胞因子平衡及影响IDO的表达有关,但IL-12/IL-10细胞因子平衡与单核-巨噬细胞IDO表达的关系还有待进一步研究?     

吲哚胺2,3-双加氧酶在新月体肾炎肾组织中的表达变化

目的 检测新月体肾炎患者肾组织中吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)的表达情况及其与肾组织浸润炎细胞的增殖和肾小管-间质病理损害程度之间的关系.方法 采用免疫组织化学染色法检测正常肾组织和新月体肾炎患者肾组织IDO的表达情况,并进一步分析其表达与肾间质浸润PCNA阳性炎细胞数及肾小管-间质病理损害程度之间的相关关系.结果 正常肾组织未检测到IDO表达,而在新月体肾炎患者肾小管上皮细胞IDO的表达显著上调,并且新月体肾炎肾小管上皮细胞IDO的表达强度与肾小管-间质PCNA阳性浸润细胞数及肾小管-间质病理损害程度显著负相关.结论 IDO在新月体肾炎肾小管上皮细胞中高表达并与肾小管-间质炎细胞增殖及小管-间质病理损害相关,提示IDO可能通过抑制炎细胞增殖活性参与新月体肾炎肾小管-间质病理损害过程.     

吲哚胺2,3-双加氧酶1抑制剂的研究进展

吲哚胺2,3-双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1)是介导色氨酸沿犬尿氨酸途径分解代谢的限速酶。IDO1在肿瘤细胞和抗原呈递细胞(antigen presenting cells,APC)中存在过度表达现象,通过色氨酸的消耗及其代谢产物的聚积抑制局部免疫应答,使肿瘤细胞逃避免疫系统的监测,这与多数肿瘤治疗的不良预后有关。因此,IDO1是肿瘤免疫疗法的重要靶点。目前有多种骨架的IDO1抑制剂正在研究当中,其中3个已经进入了临床研究阶段。本文介绍了IDO1在肿瘤免疫耐受中的作用,并按结构分类,综述了IDO1抑制剂的研究进展。     

乳腺癌髓系来源抑制细胞中吲哚胺2,3-双加氧酶表达与Tregs分布关系及临床意义

目的:研究乳腺癌CD33+髓系来源的抑制细胞(MDSCs)中吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)表达情况及与Foxp3+调节性T细胞(Tregs)分布关系和临床意义。方法:运用免疫组化单染技术检测CD33+MDSCs细胞、Foxp3+Tregs,采用免疫组化双染检测CD33+MDSCs细胞中IDO的表达情况。结果:癌组织中CD33+MDSCs细胞、Foxp3+Tregs分布无序,呈散在分布;Foxp3+Tregs高比例组中,CD33+MDSCs细胞中IDO呈高表达,差异有统计学意义(P<0.05);CD33+MDSCs中IDO的表达与患者年龄、肿瘤直径和组织学分级无明显关系,但与是否有淋巴结转移有密切关系(P<0.05)。结论:乳腺癌中CD33+MDSCs中IDO高表达参与肿瘤细胞免疫耐受的形成,可能与乳腺癌淋巴转移存在密切联系。     

吲哚胺2,3-双加氧酶与白血病的关系研究

吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)是一种含铁血红素单体蛋白,其表达和活化可以被干扰素γ强烈诱导。通过催化色氨酸降解,使表达IDO的肿瘤细胞周围形成低色氨酸环境,由于色氨酸是体内必需氨基酸,缺乏色氨酸时蛋白质合成下降,外周T淋巴细胞的增殖受到抑制。目前大量研究表明IDO在白血病细胞中较高表达,抑制T细胞的增生和T细胞介导的免疫反应,使T细胞活化信号转导受阻,诱导白血病细胞发生免疫逃逸。     

丁酸钠通过下调细胞干扰素调节因子-1抑制鼻咽癌细胞CNE2吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶的表达

目的研究丁酸钠(NaB)抑制鼻咽癌细胞CNE2吲哚胺-吡咯2,3-双加氧酶(IDO)表达从而解除肿瘤免疫耐受的分子机制。方法体外培养人鼻咽癌上皮细胞CNE2,采用NaB和(或)IFN-γ处理CNE2细胞;免疫印迹检测CNE2细胞IDO的表达情况;RT-PCR检测JAK/STAT的细胞因子信号抑制因子1(SOCS1)和SOCS3的转录水平;Real time PCR检测CNE2细胞干扰素调节因子-1(IRF-1)的转录情况。结果在NaB作用下,CNE2细胞内IDO的表达减少,并且IFN-γ诱导的IDO表达也被显著抑制;SOCS1和SOCS3的转录水平未见改变;而IFN-γ诱导的IRF1转录受到NaB的显著抑制。结论 NaB抑制IFN-γ诱导的IDO表达,不是通过增加SOCS1和SOCS3的转录,而可能是通过下调IRF-1,抑制IFN-γ诱导的IDO表达。     

IDO基因转染延长同种异基因大鼠移植心脏的存活

目的:了解逆转录基因载体介导的吲哚胺-2,3-加双氧酶(IDO)基因转染能否延长同种异基因大鼠移植心脏的存活时间及机理。方法:把同种异基因大鼠心脏移植模型(Lewis→BN)分成4组,A组为对照组,同种异基因大鼠心脏移植(Lewis→BN);B组:IDO基因转染后的供体心脏移植给受体大鼠;C组:空载体转染供体心脏,再移植给受体大鼠;D组:同种异基因大鼠心脏移植 CsA组(CsA5mg/kg/d×7天)。观察记录移植心脏的存活时间及术后6天组织病理学检查明确排斥反应的诊断和分级,RT-PCR检测术后6天移植心脏TNF-α的mRNA表达,FCM检测外周血活化的T细胞(CD3 CD25 )、有核细胞CD86 表达等方法探讨其机理。结果:A、B、C、D组移植心脏平均存活时间为7.2±0.45、13.2±2.16、7.1±0.62和15.6±3.21天,其中B、D组术后6天CD3 CD25 、有核细胞CD86 表达、供心组织急性排斥反应的强度和TNF-α的mRNA表达较A、C组显著降低(P<0.05),A、C组具有典型重度急性排斥反应特征而B、D组最轻。结论:逆转录基因载体介导的IDO基因转染能够延长移植心脏存活时间的作用,其机理包括抑制反应性T细胞、抑制有核细胞共刺激信号CD86表达、抑制心肌组织表达TNF-α等。     

Indoleamine 2,3-dioxygenase in tumor induced tolerance

Objective To review the recent studies about the role of indoleamine 2,3-dioxygenase （IDO） in tumor induced tolerance. Data sources Published articles （1978-2009） on IDO and tumor induced tolerance were selected from Medline. Study selection Articles selected were relevant to development of IDO in tumor induced tolerance. Of all originally identified articles, 50 specially addressed the stated purpose. Results Recent work has revealed IDO at high levels in tumors and in tumor-draining lymph nodes and a close relationship between IDO activity and the regulatory T cells. Conclusion Up-regulation of IDO is proven to be a mechanism of acquired tolerance in tumors, in which the closely coupled positive feedback system between IDO and reclulatorv T cells may be considered to play an important role.     

小鼠IDO基因重组腺病毒载体的构建表达和鉴定

目的 构建携带小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,以期进一步进行研究其免疫学效应.方法 酶切含有小鼠全长IDOcDNA的PCOUS-2质粒,亚克隆至穿梭质粒pAdtrack-CMV上,在BJ5183细菌中和AdEasy-1进行同源重组,筛选阳性克隆,酶切、测序鉴定正确后,脂质体法转染AD-293细胞进行包装,扩增,氯化铯密度梯度离心纯化病毒并检测其滴度.RT-PCR和荧光显微镜鉴定和检测重组腺病毒转染AD-293细胞后IDO的表达,同时进行野生型腺病毒的检测.结果 经酶切及测序证实IDO基因重组腺病毒载体构建成功,RT-PCR检测到转染后AD-293细胞内IDO的表达,且无野生型腺病毒的产生.结论 成功构建了含小鼠IDO基因的重组腺病毒载体,为探讨IDO的生物学功能奠定了基础.     

VEGF及其受体在妊娠高血压综合征胎盘的表达

①目的探讨血管内皮生长因子（VEGF）在妊娠高血压综合征（妊高征）发病中的作用。②方法以免疫组织化学方法观察VEGF及其受体酪氨酸激酶-1（FI，T-1）在正常妊娠及妊高征胎盘绒毛中的表达。③结果VEGF主要表达于胎盘绒毛滋养叶细胞；FLT-1在胎盘中表达于滋养叶细胞、绒毛间质和血管内皮细胞；妊高征组胎盘中VEGF、FLT-1的表达均较正常晚期妊娠组弱，差异有显著性（t=2．358、2．447，P〈0．05）。④结论胎盘中VEGF及FLT-1表达的降低，可能致胎盘浅表着床，从而可能诱发妊高征。     

不同孕期妇女胎盘组织中P物质含量的变化

为探讨 P物质 (substance P,SP)对妊娠生理过程的影响 ,本文应用放射免疫分析方法 ,测定了妊娠中、晚期妇女胎盘组织中 SP的含量。结果显示 :妊娠中、晚期妇女胎盘组织中均含有 SP。中期 SP的含量为 (2 3 .4 2±2 .53 ) pg/ mg湿重组织 ,晚期为 (9.91± 0 .96) pg/ mg。两组 SP的含量差异显著 (P<0 .0 1 )。此结果提示 SP可能在妊娠这一复杂的生理过程中起某种调控作用。     

正常及妊娠高血压综合征时胎盘、脐带一氧化氮合酶的计量研究

目的：研究一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）在正常足月妊娠和妊娠高血压时胎盘、脐带中的表达。方法：组织形态学观察，还原型辅酶Ⅱ酶组织化学和内皮型ＮＯＳ（ｅＮＯＳ）免疫组织化学及图像分析定量研究。结果：妊娠高血压者胎盘、脐带有纤维素样坏死等病理性改变，还原型辅酶Ⅱ酶组化及ｅＮＯＳ免疫组化示ＮＯＳ表达明显减弱，且分布异常。结论：妊娠高血压者胎盘及脐带中ｅＮＯＳ表达减弱，导致ＮＯ产生减少，胎盘循环缺血，可能是妊高征发病的重要机制之一。     

吲哚胺2,3二氧化酶与肿瘤免疫耐受

肿瘤免疫耐受是一个获得性免疫应答的过程,许多机制参与调节。吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)是体内肝外色氨酸沿犬尿氨酸代谢的限速酶。其通过诱导"色氨酸删除"环境、色氨酸代谢产物的细胞毒性作用和调节Tregs等抑制T淋巴细胞增殖、活化,共同诱导肿瘤免疫耐受。抑制IDO可为今后肿瘤临床治疗提供新思路和方法。     

T-cell proliferation is inhibited by the induction of indoleamine 2,3-dioxygenase in spleen-derived dendritic cells in rat

Background  Increasing evidence suggests that, by the production of indoleamine 2, 3-dioxygenase (IDO), dendritic cells (DC) may reduce the activity of T lymphocytes and inhibit T lymphocyte proliferation-induced immune tolerance. One promising way is inspired by increasing IDO expression in DC cells for immune tolerance after transplantation. The aim of this work was to examine the effect of interferon-γ (IFN-γ) on the expression of IDO by DC.

Methods  Spleen-derived rat DCs were cultured and induced by cytokines, and the expression of OX62 and surface molecules CD80 and CD86 were measured with flow cytometry. After the DCs were induced by IFN-γ at different concentrations (0, 100, 300, 500 U/ml), the expression levels of IDO mRNA were measured with real-time PCR, and the expression levels of IDO protein in DCs were measured with Western blotting. The allogeneic mixed lymphocyte reaction (MLR) was used to test the effects of DCs incubated with different concentrations of IFN-γ on allogeneic T lymphocyte proliferation.

Results  Under the microscope, the DCs induced by IFN-γ showed a typical dendritic morphology. The expression rate of OX62 was above 80% and the positive expression rates of CD80 and CD86 were both about 80%. The expressions of IDO mRNA and IDO protein increased gradually with the increase of IFN-γ concentration, showing statistical significance in the differences between the groups (P <0.05). Compared with the control DC, the DC incubated with IFN-γ had a notable decrease in allostimulatory activity (P <0.05). With the increasing IFN-γ concentration, the T lymphocyte proliferation decreased, and the difference between the groups was also statistically significant (P <0.05).

Conclusions  The highly purified spleen derived rat DCs can be successfully acquired through the improved adhesion in-vitro method. IFN-γ can induce increased expression of IDO in spleen-derived rat DCs and reduce the spleen DCs’ capacity to stimulate the proliferation of allogeneic T cells.

     

吲哚胺2,3-二氧化酶对乙肝患者T细胞的免疫抑制作用

目的 观察吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)在慢性乙型肝炎(乙肝)病毒感染方面的免疫耐受作用,从而为重建人体主动免疫提供一种新方法.方法 采集50例慢性乙肝患者外周静脉血作为乙肝组,检测其乙肝病毒复制水平,T细胞亚群功能.以及IDOmRNA,蛋白定量以及表达活性.统计分析乙肝病毒(HBY)复制水平、T细胞亚群功能以及IDO表达三者之间的关系.采集50例健康体检人群外周静脉血作为正常对照组,以同样方法处理之.结果 乙肝患者IDOmRNA、IDO蛋白定量、IDO表达活性均明显高于健康体检人群[mRNA:(2.110±0.615)×103 vs(0.143±0.026)×103;蛋白定量:0.22±0.06 vs 0.02±0.0017;表达活性:26.07±8.12 vs 4.98±1.65;P<0.05],IDO mRNA与HBV(r=0.502,P<0.001)和ALT(r=0.65,P<0.01)均呈正相关.另外,IDOmRNA、蛋白定量和表达活性均与CD4(+)T细胞(r=-0.622,-0.682,-0.549,P<0.05)、CD8(+)T细胞(r=-0.487,-367,-294,P<0.05)以及CD4/CD8比值(r=0.426,-0.533,-0.397,P<0.05)呈负相关.结论 IDO与HBV密切相关,并且参与HBV的免疫耐受,抑制IDO的功能可以为打破乙肝病毒的免疫耐受提供一个新方法.