维甲酸对多种肿瘤细胞生长影响的实验研究

目的 应用全反式维甲酸(ATRA)作用前列腺癌DU—145细胞、早幼粒白血病HL—60细胞和乳腺腺癌MCF—7细胞，观察维甲酸对多种肿瘤细胞生长的影响。方法 应用全反式维甲酸作用HL—60细胞、DU—145细胞和MCF—7细胞，分别以光学显微镜、电子显微镜观察细胞形态及超微结构的改变，并用流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果 全反式维甲酸作用前列腺癌DU—145细胞、早幼粒白血病HL—60细胞和乳腺腺癌MCF—7细胞后，导致肿瘤细胞生长减缓，肿瘤细胞超微结构出现细胞核固缩、核碎裂、染色质凝集于核膜周边等细胞凋亡的典型形态学改变，流式细胞仪检测肿瘤细胞出现亚二倍体“凋亡小峰”。结论 全反式维甲酸可以诱导多种肿瘤细胞产生凋亡，凋亡的产生与药物的浓度及作用时间密切相关。     

全反式维甲酸、三氧化二砷联合HAE方案序贯治疗急性早幼粒细胞性白血病

目的 评价全反式维甲酸(ATRA)、三氧化二砷(As2O3)联合HAE方案序贯治疗急性早幼粒细胞性白血病(APL)的近期和远期疗效.方法 应用ATRA和As2O3进行双诱导治疗,同时联合HAE方案化疗,直至骨髓形态学缓解.完全缓解(CR)后给予3～5个疗程HAE方案巩固治疗,再给予应用ATRA、As2O3、HAE方案的序贯治疗,维持治疗2年.观察患者治疗前、治疗后及停药随访期间骨髓形态学、PML-RARα融合基因检测结果 的变化.结果 17例APL患者均获得CR(100%),其中16例(94.1%)达到CCR,1例(5.9%)复发.结论 应用ATRA、As2O3、HAE方案的序贯治疗可使大部分APL患者获得长期生存.     

维甲酸调变早幼粒白血病细胞株NB4中G-CSF及其受体表达

目的：进一步研究G－CSF在维甲酸致高白细胞症中的作用。方法：用RT－PCR、Northernblotting方法检测NB4细胞经全反式维甲酸（ATRA）作用后G－CSF mRNA表达的变化，同时用ELISA方法检测细胞培养上清液中G－CSF蛋白水平的变化；采用流式细胞技术检测NB4细胞经ATRA作用后G－CSF受体蛋白表达的变化。结果：ATRA可从基因水平上调NB4细胞中G－CSF表达，并可增加NB4细胞表面G－CSF受体的表达，G－CSF受体表达增加出现的时间虽然稍晚于G－CSF表达增加出现的时间，但仍然在较早期阶段，此时，细胞形态学和NBT实验均证实BN4细胞处于部分分化阶段。结论：在ATRA治疗APL过程中，G－CSF及其受体表达增加可能协同参与了高白细胞症的发生。     

全反式维甲酸治疗急性早幼粒白血病的临床观察

目的:观察全反式维甲酸(all transretinoicaidATRA)治疗36例急性早幼粒细胞白血病(acutepromyelocytic leukemia,APL)的效果及毒副作用。方法:全反式维甲酸(ATRA)40mg/d分次口服。结果:完全缓解(CR)20例,部分缓解(PR)2例,总有效率(CR PR)61.1%。结论:ATRA治疗APL有较高的缓解率,毒副作用小,适用于临床推广应用。     

三氧化二砷与全反式维甲酸联合应用对HepG2细胞的体外抑制作用

目的研究三氧化二砷(As2O3)和全反式维甲酸(all-trans retinoic acid，ATRA)联合应用对人肝母细胞瘤HepG2的抑制作用与单独应用的差异。方法采用MTT法测定药物对细胞生长的抑制作用；倒置显微镜观察药物对HepG2细胞形态学的影响。结果As2O3和ATRA联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用优于单独应用，抑制率与药物浓度、时间呈正相关。结论As2O3和ATRA联合治疗肿瘤细胞具有协同作用，毒副反应降低，没有交叉耐药作用，且促进相互作用敏感性。     

三氧化二砷联合全反式维甲酸治疗急性早幼粒性白血病的临床疗效

目的探讨三氧化二砷(As2O3)联合全反式维甲酸(ATRA)在急性早幼粒性白血病治疗中的临床效果,为今后的用药方案提供思路。方法选取2012年1月-2014年1月期间我院收治的12例成人初治疗急性早幼粒性白血病患者作为本组研究对象,随机将其为对照组与观察组,各6例,对照组给予单纯ATRA治疗,观察组在ATRA治疗的基础上联合As2O3,对比两组患者的完全缓解(complete remission,CR)率、达CR时间、感染率、早期病死率以及临床治疗效果。结果 1观察组的CR率为83.33%(5/6),明显高于对照组(50.00%,3/6),差异有统计学意义(P<0.05);观察组的感染率为16.67%(1/6),达CR时间为(30.12±4.63)d,未发生早期死亡病例,均明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2治疗后,观察组中显效2例,有效3例,无效1例,总有效率为83.33%;对照组中显效1例,有效2例,无效3例,总有效率为50.00%;观察组明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在急性早幼性白血病患者的治疗中联合应用As2O3与ATRA,可以快速缓解患者的病情,提高临床治疗效果。     

急性早幼粒细胞白血病应用全反式维甲酸治疗外周血及骨髓形态学的改变与预后关系

对38例急性早幼粒细胞白血病(APL)患者经全反式维甲酸(ATRA)诱导分化治疗后,观察外周血及骨髓细胞形态学的改变及其与预后的关系。方法:(1)对每例患者初诊及每次化疗前后外周血及骨髓细胞形态学进行观察;(2)治疗一般用ATRA60～80mg/d。结果完全缓解(CR)率73.6％;治疗中APL细胞有明显成熟分化表现者易达CR且不易复发;4例部分缓解(PR)病人及未缓解者成熟分化改变不明显,有一定判断预后意义;CR过程中外周血出现幼粒细胞提示有复发可能;经ATRA诱导2例见有骨髓抑制。     

生物医卫三成果入选2010年度科学十大进展

据悉,近期由科技部基础研究管理中心组织开展的2010年度＂中国科学十大进展＂评选结果在京揭晓,揭示三氧化二砷和全反式维甲酸联合治疗急性早幼粒白血病的分子机制等3项生物医卫领域研究成果榜上有名。     

全反式维甲酸联合As2O3对初发急性早幼粒细胞白血病患者体内相关基因表达的影响

目的 研究全反式维甲酸联合三氧化二砷(As2O3)对初发急性早幼粒细胞白血病(APL)患者体内相关基因表达的影响.方法 选择2014年3月-2017年6月首次在喀什地区第一人民医院诊断为APL的50例患者,根据治疗方案不同分为接受全反式维甲酸联合AS2O3治疗的观察组24例,全反式维甲酸联合化疗的对照组26例.治疗前及...     

维甲酸联合维生素D3对非小细胞肺癌耐药基因表达的影响及其意义的探讨

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）联合维生素D3（VD3）逆转非小细胞肺癌细胞耐药的影响和意义。方法应用原代细胞培养、四甲基偶氮唑兰（M啊）比色、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）等方法观察ATRA联合VD3对人肺癌原代细胞、肺腺癌A549细胞株化疗敏感性及多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）表达水平的影响。结果人肺癌原代细胞MRP、LRP高表达，其表达与肿瘤病理无明显相关，MRP表达阳性与ADM、VP-16、VCR的耐药相关，LRP表达阳性与DDP、CBP、ADM、VP-16、VCR的耐药相关；ATRA与VD3可以明显降低肺腺癌原代细胞及A549细胞株MRP、LRP的表达量，对肺鳞癌MRP、LRP的表达量无明显影响；可以明显提高肺癌化疗敏感性。结论MRP、LRP在非小细胞肺癌中高表达，可反映肿瘤细胞多药耐药性；ATRA或VD，可下调肺腺癌MRP、LRP基因的表达水平，二药合用有协同作用，可以提高肺腺癌的化疗敏感性；但对肺鳞癌MRP、LRP基因的表达水平无明显影响，可能还存在其他的提高肺鳞癌化疗敏感性的机制。     

不同浓度As2O3对293t细胞和HeLa细胞的凋亡及增殖的影响

目的初步研究三氧化二砷(As2O3)作为急性早幼粒细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)的治疗剂和环境污染物的毒副作用.方法用As2O3作用于293t细胞和HeLa细胞不同时间后,用流式细胞仪、Hoechst33258染色、形态学和超微结构观察检测细胞凋亡和增殖;检测293t细胞增殖用细胞记数板连续记数6天.结果 3～5μmol/L As2O3作用24h可诱发HeLa细胞发生凋亡,而293t则不发生明显的凋亡.低浓度As2O3(<2μmol/L)可抑制293t细胞增殖.结论不同浓度的As2O3对HeLa细胞和293t细胞的增殖和凋亡作用不同.     

细胞内Ca2+变化在砷剂诱导胰腺癌细胞株凋亡中的作用

目的：探讨细胞内游离Ca^2 在As2O3诱导的胰腺癌细胞株凋亡过程中的作用及Fas,Fas配体（FasL)的变化和意义。方法：2μmol/L的As2O3与胰腺癌细胞株SW－1990共同孵育后,H－E染色、光镜观察,抽提细胞DNA进行琼脂糖凝胶电泳,上流式细胞仪检测细胞凋亡特征; 用Fura-2荧光负荷技术测细胞内游离Ca^2 浓度（[Ca^2 ]i),流式细胞仪检测Fas,FasL的表达情况。结果：2μmol/LAsO3作用于胰腺癌细胞48h后,胰腺癌细胞出现典型的凋亡特性改变,且凋亡过程中[Ca^2 ]i明显升高,Fas,FasL表达呈先升后降,结论：As2O3在诱导胰腺细胞凋亡过程中,肿瘤细胞凋亡与[Ca^2 ]i升高和Fas、FasL表达有关。     

三氧化二砷对鼠肝癌VEGF及COX-2表达影响的研究

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对HepA小鼠肝癌血管内皮生长因子(VEGF)及环氧合酶-2(COX-2)表达的影响.方法 建立皮下种植肝癌小鼠模型,用药后观察小鼠肿瘤体积变化及抑瘤率;利用免疫组化观察移植瘤中VEGF及COX-2.结摹三氧化二砷对小鼠肝癌瘤体体积和抑瘤率均具有抑制作用;三氧化二砷降低了VEGF及COX-2的表达,与未用药对照组相比均差异有统计学意义(P<0.05).结论三氧化二砷能缩小肿瘤体积、增加抑瘤率,并能降低VEGF及COX-2的表达.     

三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞的诱导凋亡作用

目的　研究三氧化二砷对猪髂动脉内皮细胞 (PIEC)的诱导凋亡作用。方法　采用MTT、细胞生长曲线、倒置相差显微镜、细胞爬片HE染色、细胞涂片苏丹Ⅲ染色、透射电镜等观察三氧化二砷作用后PIEC的变化。结果　PIEC细胞与三氧化二砷共孵育后出现细胞变圆、贴壁减少、上浮、细胞空泡样变性 ,脂肪颗粒增多 ;电镜等观察到核膜皱缩、核染色质凝结、边集等细胞凋亡现象 ,并且在一定的范围内该现象随药物浓度的增加而明显。结论　一定浓度的三氧化二砷能抑制PIEC细胞的生长 ,细胞脂肪变性 ,并诱导细胞凋亡。提示向肿瘤组织局部导入三氧化二砷可以抑制肿瘤局部供血动脉内皮的生长 ,促进供血动脉闭塞。     

Effect of Ad-p16 Combined with CDDP or As_2O_3 on Human Bladder Cancer Cells

Summary:To evaluate the therapeutic efficiency of combined use of p16-expressing adenovirus andchemotherapeutic agents CDDP or As_2O_3 on human bladder cancer cell line EJ,the human bladdercancer cell line EJ were transfected with adenovirus-mediated p16 gene(Ad-p16),with administra-tion of cisplatin(CDDP)or arsenic trioxide(As_2O_3).The cell growth,morphological changes,cellcycle,apoptosis and molecular changes were measured using cell counting,reverse microscopy,flowcytometry,cloning formation,immunocytochemical assays and in vivo therapy experiments to evalu-ate the therapeutic efficacy of such combined regimen.Ad-p16 transfer and CDDP or As_2O_3 adminis-tration to EJ cells could exert substantially stronger therapeutic effects than the single agent treat-ment.Especially in in vivo experiments,combined administration of p16 and CDDP or As_1o_3 inducedalmost tumor diminish compared to the partial tumor diminish induced by single agent.Moreover,delivery of Ad-p16,or administration of minimal-dose CDDP     

三氧化二砷纳米微粒的制备及体外释药特性

目的 对聚乳酸载药纳米微粒的表面形貌、粒径分布、微粒结构、表面元素、体外释放等微粒性能进行考察与评价.方法 以可溶性乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)为载体,三氧化二砷(As2O3)为模型药物,采用超声乳化法制备PLGA载As2O3纳米微粒(As2O3-NPS),通过电子显微镜观测纳米粒外形结构,用紫外分光光度计测得载纳米粒载药量包封率并测定体外释放量,用光电能谱仪测定纳米微粒表面元素.结果 As2O3-NPS呈规则球形,平均粒径(210±23)nm,测得载药量为29.6%,包封率为82.1%.体外释放实验表明纳米微粒具有缓释特性.结论 以As2O3-NPS作为As2O3载体,可改变As2O3在体内的药代动力学行为,具有缓释作用,可制备为静脉用药,延长药物在体内的循环时间,发挥更好的抗肿瘤效应.     

三氧化二砷诱导肺癌细胞凋亡及对细胞周期的影响

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人肺癌细胞株 (Spc- A1)诱导凋亡的机制 ,为抗肿瘤药物的筛选和用药方式提供理论依据。方法 :体外培养 Spc- A1细胞株与不同浓度的 As2 O3 进行作用 ,应用 MTT比色法、流式细胞仪技术、电子显微镜技术观察细胞增殖率、细胞周期率、细胞凋亡率及亚细胞水平变化。结果 :As2 O3 能够抑制 Spc- A1细胞的增殖 ,且呈时间剂量依赖性 ,Spc- A1细胞凋亡率与药物浓度和时间呈依赖关系。电镜观察细胞线粒体肿胀、空泡 ,染色质浓缩、核碎裂。结论 :As2 O3 可诱导 Spc- A1细胞凋亡 ,细胞周期延长 ,线粒体变性。     

三氧化二砷诱导人髓样甲状腺癌TT细胞凋亡

目的观察三氧化二砷（As2O3）对人髓样甲状腺癌TT细胞体外生长的影响。方法选用不同剂量As2O3处理人髓样甲状腺癌TT细胞后，通过倒置相差显微镜、电子显微镜、MTT法、AO／EB荧光染色法和流式细胞术研究As2O3对人髓样甲状腺癌TT细胞生长的影响。结果As2O3具有抑制人髓样甲状腺癌TT细胞生长和促进其凋亡的作用，这种作用主要在中浓度（2．0～5．0μmol／L）产生，而在高浓度（10．0μmol／L）则可引起细胞死亡。结论As2O3明显抑制人髓样甲状腺癌TT细胞生长，并诱导细胞凋亡，在甲状腺癌的辅助治疗上具有很好的应用前景。     

耐As2O3的白血病细胞系SHI-1／AS2的建立及耐药机制的初步研究

目的建立三氧化二砷（As2O3）的耐药细胞株,进一步从分子水平研究其耐药机制。方法采用高度短时问接触培养方法建立耐As20,的自血病细胞系（SHI—1／AS2）。细胞倍增时间和耐药倍数测定采用M1Tr法;细胞周期和细胞免疫表型测定采用流式细胞分析术;常见的10个耐药基因检测和比较采用实时定量PCR（RQ—PCR）。结果耐As203的自血病细胞系SHI-1,AS2的细胞倍增时间与SHI-1相似,差异无统计学意义（P〉O．05）。SHI-1／AS2细胞GdGl期细胞少于SHI-1细胞,而G2／M、S期细胞则多于SHI-1细胞,差异均有高度统计学意义（均P〈0．01）。SHI—1/AS2细胞对As2O3的耐药倍数是SHI-1的2．7倍,差异有统计学意义（P〈O．01）。SHI-1,AS2细胞的集落形成率高于SHI—1细胞。SHI-1／AS2细胞的耐药相关基因Bcl-2有明显上调,Bax、Fas及MGMT下调,而其他耐药相关基因无明显变化。结论建立-株对As203产生耐药的白血病细胞系SHI-1／AS2,耐药倍数是SHI-1的2．7倍,其耐药机制与Bcl-2、Bax和Fas基因介导的细胞凋亡调控有关。