9—顺式维甲酸诱导HL—60细胞凋亡

目的：检测９－顺式维甲酸（９－ｃｉｓＲＡ）诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的能力，并探讨其分子机制。方法：应用形态学观察、ＤＮＡ电泳、流式细胞仪分析检测细胞凋亡，应用流式细胞仪检测ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２含量。结果：９－ｃｉｓＲＡ可以诱导ＨＬ－６０细胞在分化后发生典型的凋亡。在ＨＬ－６０细胞分化和凋亡的过程中ｂｃｌ－２含量逐渐下降。９－ｃｉｓＲＡ诱导ＨＬ－６０细胞凋亡能力和降低ｂｃｌ－２表达的能力均显著强于全反式维甲酸（Ａ－ＴＲＡ）。结论：９－ｃｉｓＲＡ具有诱导ＨＬ－６０细胞凋亡的作用。ｂｃｌ－２表达水平的降低可能是经诱导分化成熟的白血病细胞走向凋亡的重要条件。     

两种新的维生素D3类似物对白血病细胞的体外作用

为了寻找更加有效的诱导分化剂，我们测试了两种新的维生素Ｄ３类似物（ＥＢ１０８９和ＭＣ９０３）对人早幼粒细胞白血病细胞系（ＨＬ－６０）和人巨核细胞白血病细胞系（ＨＩＭｅｇ－１）的体外抑制生长和诱导分化作用。集落形成试验结果显示ＥＢ１０８９，ＭＣ９０３和１，２５（ＯＨ）２Ｄ３抑制ＨＬ－６０细胞生长的ＥＤ５０分别为９×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ，１×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ和７×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ；它们抑制ＨＩ     

鬼臼叉甙阿糖胞苷对HL－60细胞诱导分化的研究

鬼臼叉甙阿糖胞苷对ＨＬ－６０细胞诱导分化的研究贝龄，范蕾蕾，高雪芝，戴梅美我们以对ＨＬ－６０细胞具有确定分化作用的诱导剂维甲酸（ＲＡ）和１．２５二羟维生素Ｄ＿３（ＶＤ＿３）为参照，来比较鬼臼叉甙（ＶＰ－１６）和阿糖胞苷（Ａｒａ－Ｃ）对ＨＬ－６０细胞的...     

抗bcl－2核酶在HL－60细胞中的表达及促进其凋亡的研究

为消除白血病细胞中ｂｃｌ－２基因对细胞凋亡的抑制作用，开辟白血病基因治疗的途径。将合成的针对ｂｃｌ－２ｍＲＮＡ的“锤头型”核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ，ＲＺ）基因定向克隆于真核表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ，构成ｐＤＯＲ－ＲＺ重组体。通过脂质体Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ介导的ＤＮＡ转染法，把ｐＤＯＲ－ＲＺ导入ＨＬ－６０细胞。用Ｓｏｕｔｈ－ｅｒｎ印迹，ＲＮＡ斑点杂交法观察ＲＺ基因在ＨＬ－６０细胞内表达，并通过电镜、流式细胞仪（ＦＣＭ），光镜和ＤＮＡ电泳观察ＲＺ对ＨＬ－６０细胞的影响。结果：①ＲＺ在转染ＨＬ－６０后７２小时得以表达，细胞内ｂｃｌ－２蛋白合成受到抑制。②在ＦＣＭ图谱上可见到明显的凋亡峰，形态观察ＲＺ处理的ＨＬ－６０细胞呈典型的凋亡形态。③足叶乙甙（促凋亡）敏感性试验表明，与未转染的细胞和转染空载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ的细胞相比，转染ｐＤＯＲ－ＲＺ的细胞ＤＮＡ电泳易出现梯状条带。结果说明ＲＺ基因通过逆转录病毒表达载体导入ＨＬ－６０细胞后可成功地表达并抑制ＨＬ－６０细胞ｂｃｌ－２蛋白的合成，并促进ＨＬ－６０细胞凋亡     

多表位BCR—ABL融合基因的合成,克隆及表达研究

慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）的免疫治疗是清除白血病微小残留病并最终根治ＣＭＬ的方向之一，包含ＢＣＲ－ＡＢＬ融合区的多肽具有良好的免疫原性，在体内、外可诱发ＢＣＲ－ＡＢＬ特异的Ｔ细胞克隆。以ＢＣＲ－ＡＢＬ融合肽瘤苗激发特异性Ｔ细胞应答ＣＭＬ免疫治疗有希望成为根治ＣＭＬ残留白血病的有效手段。本实验通过基因工程技术，设计一个２８０ｂｐ的融合抗原基因片段，包含ＨＬＡ－Ａ２，ＨＬＡ－Ａ３，ＨＬＡ－ＤＲ１１等３     

淫羊藿甙对HL－60细胞诱导分化作用的研究

淫羊藿甙对ＨＬ－６０细胞诱导分化作用的研究赵勇崔正言张玲李淑贞淫羊藿甙（ＩＣＡ）是从淫羊藿中提取的主要单体成分，具有免疫调节作用。有关ＩＣＡ诱导白血病细胞分化的研究，尚未见报道。我们以ＨＬ－６０细胞为实验模型，研究了ＩＣＡ的增殖抑制及诱导分化作用。材...     

维甲酸诱导HL-60细胞Fas蛋白表达

目的：探讨全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）和９顺式维甲酸（９ｃｉｓＲＡ）对ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及维甲酸对抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡敏感性的影响。方法：用流式细胞仪检测ＨＬ６０细胞膜Ｆａｓ蛋白表达水平；分别采用形态学观察、ＤＮＡ电泳和流式细胞仪检测抗Ｆａｓ抗体诱导的细胞凋亡。结果：ＨＬ６０细胞Ｆａｓ弱表达。经１０－６ｍｏｌ／ＬＡＴＲＡ或９ｃｉｓＲＡ分别预处理４天后，ＨＬ６０细胞Ｆａｓ表达水平及对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性均显著提高。９ｃｉｓＲＡ提高ＨＬ６０细胞对抗Ｆａｓ抗体诱导凋亡的敏感性的能力强于ＡＴＲＡ。结论：维甲酸可上调ＨＬ６０细胞表达Ｆａｓ，这可能与维甲酸诱导ＨＬ６０细胞分化相关。进一步深入探讨其分子机制，将为肿瘤治疗，特别是自体骨髓移植中骨髓净化提供新方法     

三氧化二砷对HL-60细胞及NB4细胞端粒酶活性的调节

目的 了解三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对ＨＬ－６０细胞及ＮＢ４细胞端粒酶活性的调节作用。方法 利用透射电镜、流式细胞仪、半定量端粒重复扩增、－银染色等手段,检测细胞的分化、凋亡,ｂｃｌ－２表达及端粒酶活性。结果 低浓度Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０及ＮＢ４细胞的诱导分化作用不及全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）,但对其端粒酶活性的下调作用却比ＡＴＲＡ强烈和迅速。较高浓度Ａｓ２Ｏ３在有效诱导两种细胞凋亡过程中,伴随粒酶活     

柔红霉素在HL—60／ADR细胞内的异常分析

目的 了解化疗药物在非Ｐｇｐ耐药细胞朱ＨＬ６０／ＡＤＲ细胞内的异常分布与耐药的关系。方法 采用共聚焦激光扫描显微镜观察、荧光染色、ＭＴＴ、逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）等方法研究柔红霉素（ＤＮＲ）在ＨＬ－６０／ＡＤＲ细胞内的分布及秘耐药的关系,以及维拉帕米、布雷非尔得菌素、氯喹对细胞内ＤＮＲ异常分布的影响。结果 与ＤＮＲ在ＨＬ－６０细胞核、乐均匀分布不同,在ＨＬ６０／ＡＤＲ,ＤＮＲ呈点棘状分     

ICAM—1／LFA—1和HLA—DR在蕈样肉芽肿中的表达及其意义

目的：为探讨粘附分子在蕈样肉芽肿（ＭＦ）病理形成机制中的作用。方法：采用免疫组化技术，检测了１６例ＭＦ皮损部位ＩＣＡＭ－１／ＬＦＡ－１和ＨＬＡ－ＤＲ的表达。结果：ＩＡＣＭ－１／ＬＦＡ－１和ＨＬＡ－ＤＲ在ＭＦ表皮和／或毛囊上皮角朊细胞 不同程度的表达，其中ＩＣＡＭ－１的表达与ＭＦ亲表皮性明显相关。结论Ｌ：ＩＣＡＭ／１ＬＦＡ－１在ＭＦ亲表皮性形成过程中可能起着重要作用。     

SLE患者AMLR及单核细胞Ia抗原表达的探讨

本文以氚标胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入的淋巴细胞转化试验测定单核细胞（Ｍｏｎ）刺激自身Ｔ细胞的增殖反应（ＡＭＬＲ）；用单克隆抗体（ＭｃＡｂ）Ｗｕ３５和Ｗｕ２２通过ＰＡＰ免疫酶标组化技术测定Ｍｏｎ表面ＨＬＡ－Ⅱ类抗原的表达，分析ＳＬＥ患者ＡＭＬＲ的改变及其机理。结果表明，活动期的ＳＬＥ患者ＡＭＬＲ有明显减弱，Ｗｕ３５＾＋（ＨＬＡ－ＤＲ＾＋）Ｍｏｎ百分率及Ｗｕ２２＾＋（ＨＬＡ－ＤＱ＾＋）Ｍｏｎ百分率     

严重型再生障碍性贫血患者骨髓和外周血 HLA-DR~ T 细胞的变化及其淋巴细胞造血抑制活性的研究

目的：进一步阐明免疫紊乱在严重型再生障碍性贫血（ＳＡＡ）发病中的作用。方法：对１３例初诊ＳＡＡ、７例抗淋巴细胞球蛋白（ＡＬＧ）治疗后恢复期ＳＡＡ（ｒＳＡＡ）患者骨髓和外周血及对照组（包括９名骨髓对照和１１名外周血对照）的ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞进行检测，并对部分患者和对照组刺激的外周血去单核细胞的单个核细胞培养上清液（ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ）的造血活性进行检测。结果：初诊ＳＡＡ患者骨髓及外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者骨髓和外周血ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞较初诊ＳＡＡ下降，但仍高于对照组（Ｐ＜０．００１）；ＳＡＡ患者骨髓内ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞显著高于外周血（Ｐ＜０．００１）；与对照组比较，初诊的ＳＡＡ患者外周血ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ具有显著的抑制作用（Ｐ＜０．００１），而ＡＬＧ治疗后ｒＳＡＡ患者ＰＨＡ－ＬＹＣＭｓ对正常骨髓ＢＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ的抑制作用明显减弱。结论：ＨＬＡ－ＤＲ＋Ｔ细胞在ＳＡＡ的发病中可能发挥重要的作用。     

急性非淋巴细胞白血病与HLA—DR抗原表达关系的研究

应用免疫酶标染色法检测了５７例急性非淋巴细胞白血病患者的ＨＬＡ－ＤＲ和其它细胞免疫类型，其中３８例，表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，表达ＨＬＡ－ＤＲ的的ＡＮＬＬ常伴有ＣＤ７的表达，而较成熟的髓系细胞表面标记ＣＤ１５则不表达，ＨＬＡ－ＤＲ＾＝的ＡＮＬＬ与ＦＡＢ亚型Ｍ１，Ｍ５ａ有密切关系。     

Raji细胞免疫酶抑制法检测血清抗HLA—DR抗体

本研究利用Ｒａｊｉ细胞表面具有表达组织相容性抗原ＤＲ（ＨＬＡ－ＤＲ）特点，以及被检血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体与抗人ＨＬＡ－ＤＲ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）竞争结合Ｒａｊｉ细胞表面ＨＬＡ－ＤＲ抗原的特征，建立检测血清抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体的Ｒａｊｉ细胞免疫酶抑制法。对７２例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者和１１３例健康者血清检测结果表明：ＳＬＥ患者和健康者血清中抗ＨＬＡ－ＤＲ抗体阳性率分别为３９．０％和１．８％。此     

急性非淋巴细胞白血病与HLA-DR抗原表达关系的研究

应用免疫酶标染色法检测了５７例急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）患者的ＨＬＡ－ＤＲ和其它细胞免疫类型，其中３８例（６６７％）表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原，表达ＨＬＡ－ＤＲ抗原的ＡＮＬＬ常伴有ＣＤ７的表达，而较成熟的髓系细胞表面标记ＣＤ１５则不表达，ＨＬＡ－ＤＲ＋的ＡＮＬＬ与ＦＡＢ亚型Ｍ１、Ｍ５ａ有密切关系。ＨＬＡ－ＤＲ－组缓解机会大于ＨＬＡ－ＤＲ＋组（Ｐ＜００５），检测ＨＬＡ－ＤＲ抗原不仅有利于ＡＮＬＬ的诊断而且有助于判断预后。     

人外周血树突状细胞抗HL—60细胞活性探讨

人外周血树突状细胞抗ＨＬ－６０细胞活性探讨张吉才缪继武杨宁尹兰珍树突状细胞（ＤＣ）是一种重要的免疫辅助细胞。近年来，大量临床研究发现：肿瘤组织内ＤＣ浸润的程度与肿瘤患者的预后密切相关，但这些研究均局限于原位。体外观察ＤＣ抗肿瘤活性及其对ＬＡＫ细胞杀瘤...     

白血病患者WT1基因的表达及其临床意义

目的：探讨ＷＴ１基因在白血病细胞中的表达及其临床意义。方法：应用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）法测定Ｋ５６２、ＨＬ－６０、ＴＦ－１及Ｕ９３７四株白血病细胞系，４５例白血病患者，１５名正常人外周血及１０例非血液病患者正常骨髓细胞ＷＴ１基因的表达。结果：Ｋ５６２、ＨＬ－６０及ＴＦ－１三株白血病细胞系均高度表达ＷＴ１，而Ｕ９３７细胞系未测到ＷＴ１。急性髓系白血病（ＡＭＬ）２５例中２１例、急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）１１例中８例、慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）急性变者２例、慢性及加速期ＣＭＬ患者７例中１例ＷＴ１表达阳性。１５名正常人外周血及１０例非血液病患者正常骨髓细胞ＷＴ１基因表达阴性。结论：ＷＴ１基因在大多数急性白血病中表达，与白血病的病程发展可能有关，可作为检测白血病微量残留病的特异性标记。     

急性髓细胞白血病细胞抗原分化途径的研究

用造血因子体外培养５例正常人和１５例急性髓细胞白血病（ＡＭＬ）患者的骨髓单个核细胞，同时用碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）检测培养０，５，１０天时两组造血干、祖细胞和髓系分化阶段标志抗原（ＣＤ３４、ＣＤ３８、ＣＤ１３、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１５）表达的变化，研究ＡＭＬ细胞抗原分化途径和阻滞点。结果显示ＡＭＬ细胞虽然在培养０～５天能沿正常髓系分化途径分化成熟，但培养６～１０天间ＡＭＬ细胞则不能象正常骨髓细胞一样继续分化成熟，表现在ＣＤ３４＋、ＣＤ３８＋、ＣＤ１３＋细胞持续升高。证明ＡＭＬ细胞自身存在独特的调控失常机制     

雄黄对NB4及HL-60细胞的促凋亡作用

目的：研究复方青黛片的主要成分雄黄治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的机制。方法：应用细胞形态、ＤＮＡ电泳及流式细胞仪测定等多项方法，在体外研究雄黄诱导ＮＢ４细胞和ＨＬ６０细胞凋亡的作用。结果：雄黄具有诱导ＮＢ４细胞和ＨＬ６０细胞凋亡作用，雄黄浓度在２５．０～２００．０ｍｇ／Ｌ之间这种诱导作用无明显差异。浓度为１２．５ｍｇ／Ｌ，培养７２小时，ＮＢ４细胞表现典型的凋亡特征而ＨＬ６０细胞则无。二硫化二砷（Ａｓ２Ｓ２）与雄黄在相同条件下实验结果一致。结论：雄黄诱导ＮＢ４和ＨＬ６０细胞凋亡是其主要成分Ａｓ２Ｓ２的作用，而非其所含少量其它重金属元素的作用。在一定范围，其作用随时间和浓度增加而增强。雄黄是复方青黛片治疗ＡＰＬ取得高缓解率的中药成分。     

白血病细胞TGFβ1及其受体基因表达与白血病患者血清TGFβ …

目的：研究转化生长因子β（ＴＧＦβ１）对白血病细胞增殖抑制作用的机制及急性白血病患者血清ＴＧＦβ１变化及意义。方法：应用逆转录－聚合酶链反应方法检测白血病细胞的细胞因子及其受体基因表达；应用白血病细胞集落试验测定ＴＧＦβ１对ＨＬ－６０、ＤＡＭＩ、Ｋ５６２细胞增殖作用；应用ＥＬＩＳＡ方法测定３３例急性白血病患者血清ＴＧＦβ１水平。结果：ＴＧＦβ１对ＨＬ－６０、Ｋ５６２、ＤＡＭＩ细胞增殖具有明显的抑制