石棉纤维诱导的细胞因子对肺成纤维细胞作用的研究

用肺泡灌洗法获取兔肺巨噬细胞，进行体外培养，取其上清液分别用同位素掺入法和ＭＴＴ比色法测定上清液中炎性细胞因子ＴＮＦ和ＩＬ－６的活性。并将上清液与人胚肺成纤维细胞（ＷＩ－３）培养，并用抗ＴＮＦ抗体和ＩＦＮγ进行成纤维细胞增殖和胶原合成抑制试验。结果显示，石棉纤维能刺激ＡＭ释放ＴＮＦ和ＩＬ－６，其活性分别为１１９８Ｕ／ｍ，１５１１Ｕ／ｍｌ，均主于ＴｉＯ２对照组。浓度与效应之间有剂量反应关系。石棉纤维     

细胞因子对小牛晶体上皮细胞增殖和胶原合成的影响

目的：研究白介素6（IL－6）、白介素1受体拮抗剂（IL－1ra),γ干扰素（IFN－γ）对小牛晶体上皮细胞（BELC）增殖和胶原合成的影响，探讨它们在后囊浑浊形成中的作用。方法：采用MTT比色法测定不同浓度的IL－6，IL－1ra及IFN－γ对体外培养的BLEC增殖的影响，用^3H-脯氨酸掺入法检测这些细胞因子对体外培养的BLEC胶原合成的影响。结果：IL－6 10^2-10^4U/ml显著促进细胞增殖和胶原合成，IL－1ra 10^2-10^4 μg/L显著抑制细胞增殖而对胶原合成无影响，IFN－γ 10^2-10^5U/ml显著抑制细胞增殖，10^3-10^5U/ml显著抑制胶原合成。结论：这些细胞因子可能参与了后囊浑浊的形成；IFN－γ与IL-1ra可用于防治后囊浑浊。     

细胞因子对小牛晶体上皮细胞增殖和胶原合成的影响

目的 :研究白介素 6 (IL 6 )、白介素 1受体拮抗剂 (IL 1ra) ,γ干扰素 (IFN γ)对小牛晶体上皮细胞 (BELC)增殖和胶原合成的影响 ,探讨它们在后囊浑浊形成中的作用。方法 :采用MTT比色法测定不同浓度的IL 6、IL 1ra及IFN γ对体外培养的BLEC增殖的影响 ;用3H 脯氨酸掺入法检测这些细胞因子对体外培养的BLEC胶原合成的影响。结果 :IL 6 10 2 ～ 10 4 U/ml显著促进细胞增殖和胶原合成 ,IL 1ra 10 2 ～ 10 4 μg/L显著抑制细胞增殖而对胶原合成无影响 ,IFN γ 10 2 ～ 10 5U/ml显著抑制细胞增殖 ,10 3～ 10 5U/ml显著抑制胶原合成。结论 :这些细胞因子可能参与了后囊浑浊的形成 ;IFN γ和IL 1ra可用于防治后囊浑浊     

抗纤维化短肽对血清诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成与I、III型胶原表达抑制作用的实验研究

①目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对不同浓度血清(FBS)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的调节作用。②方法选用新生大鼠心脏成纤维细胞;采用3H-TdR掺入法检测心脏成纤维细胞的增殖;采用3H-脯氨酸掺入法检测心脏成纤维细胞胶原的合成,采用westernblot法检测心脏成纤维细胞I型与III型胶原的表达。③结果在0.4%、2%和10%几种血清浓度的条件下,随着血清浓度的增加,反映心脏成纤维细胞增殖3H-TdR掺入量和胶原合成的3H-脯氨酸掺入量增加。表明一定浓度的血清能诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成。与0.4%血清的基础培养条件相比较,10%高浓度血清能刺激心脏成纤维细胞I、III型胶原蛋白的表达。在10-10~10-8mol/L浓度范围内,AcSDKP对10%诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用,并且在10-9mol/L时,AcSDKP对心脏成纤维细胞增殖、胶原合成抑制作用最强。同时10-9mol/L的AcSDKP对心脏成纤维细胞I、III型胶原蛋白的表达也有明显的抑制作用。④结论AcSDKP对血清介导的心脏成纤维细胞增殖、胶原合成以及I、III型胶原蛋...     

地塞米松对肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 探讨糖皮质激素在肾脏病治疗中可能的作用机理。方法 采用ＭＴＴ比色法和Ｌ－＾３Ｈ－脯氨酸掺入法,观察地塞米松对体外培养的肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。结果 一定浓度范围内地地塞米松抑制成纤维细胞的胶原合成,但未见其对细胞增殖有影响。结论 糖皮质激素可作用于肾间质成纤维细胞,抑制胶原的合成,从而可延缓肾间质纤维化的进程。     

抗纤维化短肽对血清诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成与Ⅰ、Ⅲ型胶原表达抑制作用的实验研究

①目的 探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)对不同浓度血清(FBS)诱导的大鼠心脏成纤维细胞增殖和胶原合成的调节作用.②方法 选用新生大鼠心脏成纤维细胞;采用3H-TdR掺入法检测心脏成纤维细胞的增殖;采用3H-脯氨酸掺入法检测心脏成纤维细胞胶原的合成,采用westernblot法检测心脏成纤维细胞Ⅰ型与Ⅲ型胶原的表达.③结果 在0.4%、2%和10%几种血清浓度的条件下,随着血清农度的增加,反映心脏成纤维细胞增殖3H-TdR掺入量和胶原合成的3H-脯氨酸掺入量增加.表明一定浓度的血清能诱导心脏成纤维细胞增殖和胶原合成.与0.4%血清的基础培养条件相比较,10%高浓度血清能刺激心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达.在10-10～10-8mol/L浓度范围内.AcSDKP对10%诱导的心脏成纤维细胞增殖和胶原合成有抑制作用.并且在10-9mol/L时,AcSDKP对心脏成纤维细胞增殖、胶原合成抑制作用最强.同时10-9mol/L的AcSDKP对心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达也有明显的抑制作用.④结论 AcSDKP对血清介导的心脏成纤维细胞增殖、胶原合成以及Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达有明显抑制作用.     

α,γ—干扰素对人成纤维细胞的生长和胶原合成的影响

近年来，α和γ－干扰素（IFN-α，IFN-γ）在防治肝纤维化中的作用引人注目。体外实验表明，IFN－α和IFN－γ能显著降低成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA水平[1,2]，被认为是有前途的抗肝纤维化药物。本文应用流式细胞仪，3H-脯氨酸掺入和放射免疫法分别测定不同浓度的IFN－α2b     

染料木素和槲皮素对成纤维细胞增殖和胶原合成的抑制作用

目的：研究染料木素（genistein,GE)和槲皮素（quercetin,QU)对成纤维细胞增殖和胶原合成的影响。方法：用结晶紫染色法测定光密度值检测NIH3T3成纤维细胞增殖,用3H－脯氨酸掺入法测定3H－脯氨酸掺入NIH3T3细胞的Bq值表示胶原合成作用,结果：GE和QU都能浓度依赖性 抑制血清,血小板源生长因子（PDGF）或转化生长因子β1（TGF－β1）刺激的NIH3T3细胞增殖和胶原合成。结论：GE和QU具有体外抑制成纤维细胞增殖和胶原合成的作用。     

地塞米松对肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的"探讨糖皮质激素在肾脏病治疗中可能的作用机理. 方法"采用MTT比色法和L-3H-脯氨酸掺入法,观察地塞米松对体外培养的肾间质成纤维细胞增殖及胶原合成的影响. 结果"一定浓度范围内的地塞米松抑制成纤维细胞的胶原合成,但未见其对细胞增殖有影响. 结论"糖皮质激素可作用于肾间质成纤维细胞,抑制胶原的合成,从而可延缓肾间质纤维化的进程.     

牛磺酸抑制新生大鼠心肌成纤维细胞胶原合成及其机制的初步研究

目的研究牛磺酸对新生大鼠心肌成纤维细胞增殖、胶原合成及TGF—Bl蛋白表达的影响，初步探讨其抗纤维化的作用和机制。方法在培养的心肌成纤维细胞中加不同浓度的牛磺酸72h，用羟脯氨酸法及MTT比色法分别测胶原量和细胞增殖情况，ELISA法测TGF—β1，蛋白含量。结果牛磺酸能明显抑制心肌成纤维细胞的增殖及胶原的合成，并减少TGF—βl蛋白的表达。结论牛磺酸能通过下调TGF—β1蛋白的表达，抑制心肌成纤维细胞增殖和胶原合成，起到抗心肌纤维化的作用。     

罗格列酮对转移生长因子诱导的大鼠肺纤维化的影响及其作用机制研究

目的采用转化生长因子（TGF-β1）诱导肺成纤维细胞,给予罗格列酮（过氧化物体增殖活化受体γ激动剂）干预,明确其对肺纤维的治疗作用及其作用机制。方法以组织贴块法培养肺成纤维细胞。实验分为0.4%血清组、TGF-β1刺激组、罗格列酮＋TGF-β1处理组,采用免疫细胞化学染色法检测TGF-β1和罗格列酮对肺成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的作用;采用Westernblot法检测肺脏成纤维细胞ERK1/2及磷酸化ERK1/2蛋白的表达。结果罗格列酮能够抑制TGF-β1诱导的大鼠肺成纤维细胞的增殖,抑制了Ⅰ型、Ⅲ型胶原的表达。同时磷酸化的ERK1/2蛋白的表达下降,而ERK1/2表达无明显改变,表明罗格列酮抑制了肺成纤维细胞的ERK1/2信号转导途径的活化。结论 TGF-β1能够通过激活ERK1/2途径促进大鼠肺成纤维细胞的增殖和胶原合成,而罗格列酮能够通过阻断TGF-β1介导的ERK1/2通路的激活进而抑制大鼠肺成纤维细胞增殖和胶原合成,对肺间质纤维化存在一定治疗作用。     

rhGM-CSF对小鼠口腔粘膜损伤的防治作用

目的：探讨rhGM-CSF促进口腔腔溃愈合的作用机制。方法：取体外培养的胎儿口腔粘膜成纤维细胞，用rhGM-CSF刺激成纤维细胞后第2、4、6天用细胞计数及^3H－胸腺嘧啶掺入法（^3H-TdR）测定其增殖情况，结果rhGM-CSF对胎儿口腔粘膜成纤维细胞增殖及DNA合成有刺激作用，在80－100ng/ml时，细胞生长达到最佳状态，过高浓度rhGM-CSF的刺激作用反而下降。结论：rhGM-CSF可以通过刺激成纤维细胞增殖及DNA合成促进口腔溃疡愈合。     

He-Ne激光重复照射抑制培养增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的实验研究

目的 探讨Ｈｅ－Ｎｅ激光重复照射对培养增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的抑制作用。方法 以不同功率密度（１０、５０、１００和１５０ｍＷ／ｃｍ＾２）Ｈｅ－Ｎｅ激光照射培养增生性瘢痕成纤维细胞３０ｍｉｎ,１／ｄ,连续照射３ｄ,在３ｄ重复照射后２４ｈ用＾３Ｈ－脯氨酸掺入法和斑点杂交法分别检测成纤维细胞胶原合成和Ⅰ型前胶原基因表达。结果 培养增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成、Ⅰ型前胶原基因表达水平在１０、５０ｍ     

三七总甙对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用

目的　观察三七总甙对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及胶原合成的作用 ,以寻找治疗人增生性瘢痕的有效药物。方法　体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别应用MTT比色法和3H 脯氨酸掺入法检测三七总甙作用后细胞增殖及胶原合成的变化。结果　和对照组相比 ,三七总甙能够显著抑制成纤维细胞增殖及胶原合成 (P <0 0 1)。结论　三七总甙具有体外抗纤维化作用 ,可能成为治疗增生性瘢痕的有效药物     

TNF-α和IFN-γ对OSF成纤维细胞胶原合成的影响

目的研究TNF-α、IFN-γ对正常人颊黏膜成纤维细胞(NM-FB)和口腔黏膜下纤维化(OSF)患者颊黏膜成纤维细胞(OSF-FB)胶原合成的影响。方法取6例OSF患者及5例正常人颊黏膜组织,采用组织块法进行成纤维细胞原代培养并传代,用羟脯氨酸试剂盒观察不同浓度TNF-α及IFN-γ对NM-FB和OSF-FB胶原合成的影响。结果浓度为100~10000U/mL的TNF-α能明显促进NM-FB和OSF-FB的胶原合成(P<0.05),浓度为40~4000U/mLrIFN-γ则明显抑制两者的胶原合成(P<0.05),且400U/mL的IFN-γ其抑制率接近峰值(与4000U/mL的IFN-γ组比,P>0.05)。结论TNF-α促进NM-FB和OSF-FB的胶原合成,而IFN-γ对两者的胶原合成具有抑制作用。     

TGF-β1对支气管哮喘病人肺成纤维细胞的作用

目的通过观察转化生长因子β1(TGF-β1)对支气管哮喘病人肺成纤维细胞增殖和分泌的影响,探讨二者在支气管哮喘气道重塑中的作用。方法采用组织块贴壁培养方法,分离和原代培养哮喘病人肺成纤维细胞,免疫荧光法鉴定。以0、1、5、10μg/L TGF-β1分别作用肺成纤维细胞48h,MTT法测定成纤维细胞增殖情况,RT-PCR法测定肺成纤维细胞Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)mRNA表达水平。结果组织块贴壁法成功地培养出了肺成纤维细胞。免疫荧光法鉴定证明,原代培养出的细胞为肺成纤维细胞。不同浓度的TGF-β1均可促进哮喘病人肺成纤维细胞增殖,诱导哮喘病人肺成纤维细胞CollagenⅠmRNA的表达水平上调,呈浓度依赖性(F=44.723、24.704,P<0.05)。结论在哮喘发病机制中,TGF-β1可促进肺成纤维细胞的增殖,合成和分泌CollagenⅠ,从而引起气道黏膜下纤维化和胶原沉积,导致哮喘病人气道重塑。     

几丁糖作用后不同来源成纤维细胞分泌功能的变化

目的 :探讨几丁糖对异常瘢痕成纤维细胞生物学活性的作用。　方法 :以瘢痕疙瘩及增生性瘢痕成纤维细胞为研究对象 ,正常皮肤成纤维细胞为对照 ,用组织块法进行不同标本成纤维细胞体外培养。分别用 3 H 脯氨酸掺入法检测几丁糖对不同来源成纤维细胞合成及分泌胶原功能的影响 ,定量酶联检测试剂盒测定转化生长因子 β1(TGF β1 )、成纤维细胞生长因子 AB(FGF AB)、白细胞介素 8(IL 8)等。　结果 :几丁糖对不同来源成纤维细胞分泌胶原、TGF β1 、FGF AB等的功能均呈剂量依赖性抑制 ,对IL 8则增加 ,且对各组的影响无显著差异 (P >0 .0 5 )。　结论 :几丁糖可以抑制瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成及分泌功能 ,有望在异常瘢痕的防治中发挥重要作用     

低氧对人胚肺成纤维细胞增殖及Ⅰ型前胶原基因表达的影响

目的 阐明低氧在血管壁构形重组中的作用及川芎嗪的疗效机理。方法 用细胞计数法及非放射性细胞增殖检测法观察２％低氧对人胚肺成纤维细胞增殖的影响．用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交法检测２％低地人肺成纤维细胞Ｉ型前胶原基因表达的作用及川芎嗪对基因表达的影响。结果 低氧２４，４８及７２ｈ能明显促进人胚肺成纤维细胞增殖；低氧２４ｈⅠ型前胶原基因表达明显升高；川芎可抑制上述基因表达的升高。结论 低氧对人胚肺成纤维细     

食管癌患者围手术期同种输血后细胞因子和NO的变化及相互关系

目的 探讨同种输血对食管癌患者细胞因子和NO生成的影响及其相互关系和作用机制。方法 食管癌手术患者(n=20),以输注去白细胞血液的食管癌手术患者(n=14)做为实验对照及健康自愿者为正常对照(n=20),采用生物素－亲和素系统测定技术检测血清中IL－10、IFN－γ和TNF－α的浓度;硝酸还原酶法检测NO浓度;免疫比浊法检测免疫球蛋白和C3含量。结果 ①食管癌患者的血清中IFN－γ、TNF－α均低于正常人,IL－1差异无显著性。实验组输血后第1天与输血前相比,血清中IL－10、IFN－γ和TNF－α浓度升高,且以IL－10、IFN－γ变化尤为…     

甲状腺素对血管紧张素Ⅱ所致心肌成纤维细胞胶原合成改变的影响

目的 :以AngⅡ处理培养的心肌成纤维细胞 ,促使细胞中胶原的合成发生改变 ,观测T3对AngⅡ所致细胞胶原合成改变的影响。方法 :以AngⅡ及T3分别或同时作用于培养的大鼠心肌成纤维细胞 ,通过测定3H TdR和3H Leu掺入来了解成纤维细胞增殖率和蛋白质合成率 ,同时用免疫细胞化学方法检测成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。结果 :AngⅡ使成纤维细胞3H TdR和3H Leu掺入增加 ,同时细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达也显著增加。T3组成纤维细胞3H TdR和3H Leu掺入虽然也增加 ,但T3组细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达却呈显著性降低。当T3与AngⅡ共同作用于成纤维细胞时 ,与T3组和AngⅡ组比较 ,3H TdR和3H Leu的掺入率没有发生显著性的变化 ;与AngⅡ组比较 ,细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达显著性降低 ,与对照组的表达一致。结论 :T3能降低AngⅡ所致的心肌成纤维细胞中Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的增加