桃儿七HPLC指纹图谱研究

目的建立桃儿七的HPLC指纹图谱分析方法,为该药材的鉴别及质量评价提供依据。方法采用Thermo Hy PURITY C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.4%磷酸水溶液为流动相,进行梯度洗脱,柱温25℃,体积流量0.8 m L/min,检测波长290 nm,进样量10μL。采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004 A)和SPSS 19.0统计软件中的聚类分析对指纹图谱进行相似度分析。结果建立桃儿七的HPLC指纹图谱,确定了17个共有峰,并指认了其中8个共有峰,经相似度评价,19批桃儿七药材指纹图谱与共有模式比较的相似度均在0.9以上,整体相似度较好,聚类结果与相似度评价结果基本一致。结论该研究建立的桃儿七HPLC指纹图谱可为该药材的鉴别及质量评价提供更全面的参考。     

藏药材桃儿七果实HPLC指纹图谱的研究

目的:利用高效液相色谱建立桃儿七果实药材的色谱指纹图谱,为人工引种栽培植物桃儿七的可行性提供科学依据。方法:以鬼臼毒素为分析对象,采用反相C18柱,甲醇-乙腈(15∶25)混合溶液-0.2%磷酸水溶液梯度洗脱;检测波长290nm;流速1.0mL/min进行试验,用国家药典委员会"相似度评价软件2004A"处理分析。结果:不同来源的桃儿七果实药材指纹图谱高度相似,指纹图谱各共有峰相对保留时间基本一致,共有峰相对峰面积差异较大,表明不同来源的桃儿七果实药材化学成分种类相似,含量差异较大。结论:采用相似度作为定性指标、鬼臼毒素作为定量指标,能评价不同来源桃儿七果实药材的内在质量。提示合理的人工栽培植物桃儿七能替代野生资源,不仅指纹图谱相似度高度一致,而且鬼臼毒素含量相近或更高。     

不同产地马齿苋HPLC指纹图谱

目的:建立马齿苋水提液HPLC特征指纹图谱。方法:采用回流提取制备不同产地马齿苋药材供试品溶液,流动相乙腈-甲醇(7:3)-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,检测波长320 nm,建立马齿苋水提液的HPLC指纹图谱,并进行相似度评价。结果:10种不同产地马齿苋供试品溶液指纹图谱中确定了11个共有峰,5号峰咖啡酸为参照峰,10批样品指纹图谱中12个共有峰的相似度均>0.80。结论:该方法具有较好的重复性和稳定性,所建立的马齿苋HPLC指纹图谱标定了11个共有峰,色谱峰的重叠率较高,说明马齿苋没有明显的地域差异性,该方法将为马齿苋药材质量控制提供可靠依据,为其相关及临床应用研究提供借鉴。     

不同产地枳椇子HPLC指纹图谱研究

目的:建立枳椇子Hovenia acerba Lindl.的HPLC指纹图谱体系,比较不同产地枳椇子药材的化学成分差异。方法:采用DIKMA-C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%甲酸溶液,梯度洗脱,检测波长290 nm,柱温35℃,流速1.0 mL/min进行测定。获得24份枳椇子材料的HPLC图谱后,进行相似度分析、聚类分析和主成分分析。结果:建立枳椇子专属性的HPLC指纹图谱体系,24份枳椇子HPLC指纹图谱与对照图谱的相似度为0.543～0.995,确定了9个主要共有峰。聚类分析将24份枳椇子分为3类,其中第Ⅰ类的二氢杨梅素含量较高,表现出较优品质。主成分分析确定二氢杨梅素为区分不同产地枳椇子的主要成分。应用相似度分析、聚类分析及主成分分析得到的聚类结果基本一致。结论:该方法重复性好、可操作性强,可为枳椇子药材的质量控制及评价提供科学依据。     

小桃儿七HPLC指纹图谱的建立及5个成分含量测定

目的：建立小桃儿七HPLC指纹图谱,并测定5个乙型强心苷类成分的含量。方法：采用Thermo HyPURITY C₁₈(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱;以乙腈-水为流动相,梯度洗脱;建立HPLC指纹图谱,采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)”软件进行相似度评价,SPSS 19.0软件进行聚类分析,同时测定5个成分的含量。结果：11批小桃儿七指纹图谱确定23个共有峰,相似度均>0.900,聚类分析与相似度评价结果基本一致。5个成分在其各自进样量范围内与峰面积的线性关系良好,精密度、重复性、稳定性试验的RSD<3.00%,平均加样回收率为98.65%～99.52%,RSD为0.63%～0.95%。结论：该研究建立的方法稳定可行,可为小桃儿七药材质量控制和评价提供参考。     

不同产地益智HPLC指纹图谱研究

目的:建立不同产地益智的HPLC指纹图谱,探讨不同产地化学成分的差异,为益智药材的质量鉴别与质量控制提供依据。方法:HPLC色谱法测定,采用国家药典委员会相似度评价软件进行分析。结果:不同产地益智指纹图谱有9个共有峰,不同产地益智指纹图谱的相似度均大于0.91。结论:不同产地益智化学成分相似,但成分的含量有差异。本方法稳定,重复性好,所建立的指纹图谱可用于益智药材的鉴别和质量控制。     

不同产地明党参HPLC指纹图谱分析

目的：建立明党参HPLC指纹图谱,为科学评价其质量提供可靠方法。方法：采用HPLC法,色谱柱为KromasilC18分析柱（5μm,4.6mm×250mm）;检测波长：254nm;体积流量：1.0mL/分;柱温：25℃;流动相：A相为水溶液,B相为乙腈,线性梯度洗脱。结果：确定了10个共有峰,各样品图谱与对照图谱相似度均在0.9以上。结论：所建立的HPLC指纹图谱具有良好的精密度、重现性和稳定性,可以作为明党参质量评价的主要依据之一。     

基于HPLC指纹图谱与聚类分析对不同产地连翘质量评价

目的:构建连翘药材HPLC指纹图谱,结合聚类分析对连翘药材质量进行分析。方法:采用HPLC法对连翘药材进行分析,所获数据使用中药色谱指纹图谱相似度评价系统构建连翘药材的指纹图谱,并运用SPSS 22.0系统进行聚类分析,以共有色谱峰的峰面积为变量建立树状图。色谱柱为Wondasil C18柱(250mm×4.6mm,5μm),柱温为35℃;检测波长为235nm,流动相为甲醇-0.3%冰醋酸进行梯度洗脱,流速1.0m L/min。结果:连翘药材HPLC指纹图谱的19个峰确定为共有峰,指认出连翘苷、连翘酯苷A、连翘酯苷B及芦丁等4个共有峰,20批连翘药材的相似度为0.862~0.978。聚类分析结果表明,连翘药材从质量上可分为两大类,分类受地域影响较大。结论:以HPLC指纹图谱为基础结合聚类分析,可以快速、准确地评价不同产地连翘的质量。     

红腺忍冬叶HPLC指纹图谱研究

目的:建立红腺忍冬叶指纹图谱,探讨指纹图谱的建立方法和应用。方法:RP-HPLC法,采用C18 ODS2柱(4.6mm×250 mm,5μm),甲醇-乙腈-0.05%磷酸梯度洗脱,流速0.5 mL.min-1,检测波长328 nm,柱温25℃。结果:对11批红腺忍冬叶的样品图谱数据进行了数理统计,建立红腺忍冬叶的指纹图谱标准,并将其应用于其他种忍冬样品的定性鉴别和质量评价。结论:扩展了中药指纹图谱的建立方法和在定性识别、定量、半定量评价其他样品的应用。     

不同产地洋甘菊HPLC指纹图谱分析

目的：为洋甘菊的质量评价和种植地点的选择提供参考。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）及聚类分析法,测定分析12个不同产地的洋甘菊样品,使用中药材指纹相似度评价软件进行相似度计算及指纹图谱的建立。结果：12批不同产地、批次的洋甘菊药材,根据其相似度的结果可知,洋甘菊药材因产地不同、药材采收季节不同等多种因素,导致药材之间的化学成分及其含量有一定差异。结论：使用本方法可以简便、快捷地确定洋甘菊的适宜产地,旨在从种植源头上确保药材品质,亦为洋甘菊质量评价标准的完善提供参考。     

桃儿七茎部产鬼臼毒素类成分的内生真菌筛选及鉴定

目的:筛选和鉴定濒危藏族药桃儿七茎部产鬼臼毒素类成分的内生真菌,为保护桃儿七植物资源和发现新的天然活性菌株提供参考。方法:采用组织块法对桃儿七茎部的内生真菌进行分离,利用TLC和HPLC检测其代谢产物中的鬼臼毒素类成分,检测波长254 nm,流动相乙腈-水(40∶60)。采用形态学和分子生物学相结合的方法对产鬼臼毒素类成分的内生真菌进行鉴定。结果:共分离得到9株内生真菌,其中菌株J-1,J-2,J-3的发酵液中含有鬼臼毒素类成分,分别鉴定为Chaetomium globosum strain MF564,C.sp.4RF3和Pseudallescheria sp.T55。结论:从桃儿七茎中分离到3株产鬼臼毒素类成分的内生真菌,分别来源于2个新属的不同种菌株,为开发新绿色生物能源和实现内生真菌工业发酵生产鬼臼毒素类成分奠定了理论基础。     

桃儿七不同部位2种木脂素含量的动态研究

采用超声提取和HPLC测定栽培植株与野生植株桃儿七不同部位中4'-去甲基鬼臼毒素和鬼臼毒素的含量,结果表明,栽培植株各部位4'-去甲基鬼臼毒素含量依次为叶柄 >根,叶中未检测到此物质,野生植株不同部位4'-去甲基鬼臼毒素含量依次为须根 >茎 >根状茎 >叶,果实中未检测到此物质;栽培植株和野生植株不同部位鬼臼毒素含量均为根 >茎 >叶(> 果实);桃儿七栽培植株各部位2种木脂素含量随季节变化呈W型,以7月份采收时含量最高.     

云南桃儿七遗传多样性的DALP 分析

目的 进行药用植物桃儿七Sinopodophyllum hexandrum的遗传多样性研究,为桃儿七资源的保护和开发利用提供分子遗传理论基础.方法 对6个桃儿七居群进行DALP分析,利用PopGene 1.31软件分析遗传多样性相关数据,UPGMA方法 聚类,结合Treeview软件生成树状图.结果 筛选5对引物组合,扩增共产生150条DNA片段,其中104条谱带具有遗传多态性,占69.33%,平均每组引物扩增所得多态条带为20.8,6个居群平均多态百分率为14.22%.6居群总的观察等位基因数Na为1.693 3,平均1.142 2;总的有效等位基因数Ne为1.417 1,平均1.083 8;基因多样性指数H为0.244 3, 平均0.048 8;总的Shannon多样性指数I为0.364 3,平均0.073 0;居群总的基因多样性Ht为0.244 3,居群内基因多样性Hs为0.048 7.基因分化系数Gst为0.800 5,即遗传变异有80.05%发生在居群间,19.95%发生在居群内,居群每代迁移数Nm为0.124 6.结论 桃儿七居群间存在较大的遗传分化,基因流受到阻碍,这与桃儿七的繁育系统和生存环境紧密相关.     

小叶莲化学指纹图谱研究

目的: 研究小叶莲的化学成分指纹图谱,评价小叶莲商品药材质量,并比较桃儿七不同药用部分之间的主要成分差异,为临床安全、合理应用提供依据。 方法: 采用小叶莲HPLC指纹图谱方法,测定了12份小叶莲的指纹图谱,确定了20个色谱峰作为共有峰,并指认了其中12个色谱峰;运用该方法比较了桃儿七根及根茎与小叶莲指纹图谱的差异,通过相似度评价和聚类分析对图谱数据进行分析。 结果: 本研究首次报道了小叶莲中4个黄酮类成分;首次指认了小叶莲指纹图谱中11个色谱峰,包括9个黄酮和2个木脂素类成分;桃儿七不同药用部分化学成分存在较明显的差异,小叶莲主要含异戊烯基黄酮类成分,桃儿七根和根茎主要含鬼臼毒素和简单取代的黄酮及其苷类成分。 结论: 该指纹图谱方法可以作为评价比较小叶莲、桃儿七根及根茎中黄酮类和木脂素类成分的相对含量及其质量的依据。同时,为小叶莲、桃儿七根及根茎不同药用部分的药效学差异研究提供参考。     

岗梅药材的TLC鉴别和HPLC指纹图谱

目的: 建立岗梅药材的TLC鉴别方法和HPLC指纹图谱。 方法: TLC鉴别采用Merck预制硅胶薄层板,以三氯甲烷-甲醇-乙酸乙酯-水-甲酸(20:20:40:10:2)为展开剂,10% 硫酸乙醇105 ℃显色,366 nm紫外光下检视,HPLC指纹图谱采用Phenomenex Synergi Fusion C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,4 μm),柱温25 ℃,乙腈-0.05% 磷酸梯度洗脱,流速1 mL·min^-1,203 nm波长检测;采用国家药典委员会"中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004 A版"进行相似度计算。 结果: 岗梅与同属易混淆品毛冬青、铁冬青、满树星等的TLC图有较明显差异,可相互区别。不同来源的岗梅相似度为0.716~0.890,各混淆品与岗梅共有模式的相似度均<0.630。 结论: 建立的方法可用于岗梅药材的真伪鉴别,为完善岗梅药材的质量标准提供了借鉴。     

桃儿七中1个新的异戊烯基黄酮苷类化合物

目的研究桃儿七Sinopodophyllum hexandrum中黄酮类化学成分。方法采用正相硅胶柱色谱、ODS-C18柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、制备薄层色谱等方法进行分离和纯化,通过波谱数据鉴定化合物的结构,采用MTT法研究化合物的细胞毒活性。结果从桃儿七95%乙醇冷浸提取物的醋酸乙酯部位分离出9个化合物,分别鉴定为8,2′-二异戊烯基槲皮素-3-甲醚-4′-O-β-D-葡萄糖苷(1)、8,2′-diprenylquercetin-3-methylether(2)、5,7,4′-trihydroxy-3′-(3-methylbut-2-enyl)-3-methoxy flavone(3)、8-prenylkaempferol(4)、sophoflavescenol(5)、podoverine A(6)、sinoflavonoid K(7)、香叶木素(8)、金合欢素(9)。结论化合物1为未见文献报道的异戊烯基黄酮苷类化合物,命名为桃儿七酮苷A;化合物5～9为为首次从该植物中分离得到。细胞毒活性结果显示,化合物1～5对人宫颈癌HeLa细胞均有一定的抑制作用,其半数抑制浓度(IC_(50))值分别为42.6、46.9、26.9、16.1、31.2μmol/L。     

通关藤化学成分HPLC指纹图谱研究

目的：研究通关藤化学成分的指纹图谱。方法：采用HPLC以TC-C₁₈色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,乙腈-水为流动相进行梯度洗脱,检测波长210 nm,流速1.0 mL·min^-1,柱温25 ℃。结果：以ZP-7通关藤苷元B（[11α-O-(2-甲基丁酰基)-12β-O-乙酰基通关藤苷元B]）为参照物,建立了通关藤的指纹图谱,指认了17个共有峰,精密度和重复性中共有峰相对保留时间RSD<3%,每个产地色谱图中的共有峰的峰面积之和>90%,10批药材的相似度在0.75~0.98,存在一定差异。结论：该方法准确、重复性好,为通关藤质量评价和质量控制提供依据,也为通关藤进一步开发奠定基础。     

HPLC指纹图谱法评价市售胖大海的质量一致性

目的:建立胖大海高效液相色谱指纹图谱分析方法,比较不同地区市售胖大海质量的一致性,为其质量评价提供参考.方法:通过对提取条件和色谱条件进行考察,构建高效液相色谱指纹图谱法并用其测定购自国内不同地区的市售胖大海样品的指纹图谱,采用相似度分析软件对指纹图谱进行分析比较.结果:确定了胖大海指纹图谱的提取条件和高效液相色谱条件,发现了胖大海的20个共有特征峰,8份市售胖大海样品的相似度为0.942 ～ 0.984.结论:建立了胖大海的高效液相色谱指纹图谱分析方法,通过该方法证明中国不同地区的市售胖大海的质量比较一致.     

青海上北山林场野生桃儿七根部内生真菌群落组成及多样性研究

该研究通过应用第二代测序技术(NGS),即高通量测序方法测序青海野生桃儿七根内真菌宏基因组ITS 1区,并依据RDP中设置的分类阈值对处理后的序列进行物种分类,鉴定内生真菌的群落组成。研究结果显示,测序结果经过质量控制共获得有效条带22 565条,依据97%的序列相似性做聚类相似性分析,获得全部样品的可分类操作单元(OTUs)共517个,RDP分类依据0.8的分类阈值鉴定出的全部真菌可归类为13纲、35目、44科、55属。3个样品LD1,LD2,LD3中共同的优势属真菌为Tetracladium属(所占比例分别为35.49%,68.55%,12.96%),样品的香浓多样性指数和辛普森多样性指数分别在1.75~2.92,0.11~0.32。研究结果表明,青海上北山林场野生桃儿七根内内生真菌具有较高的多样性和较复杂的群落组成,蕴含着丰富的内生真菌资源,且高通量测序技术对于研究植物内生真菌群落组成及多样性具有显著的优势。     

HPLC指纹图谱技术对3种贯叶连翘提取物制备工艺的评价

目的:比较3种贯叶连翘提取物制备工艺的稳定性与重复性.方法:建立提取物的HPLC指纹图谱,对不同批次提取物进行相似度分析、聚类分析和模式识别.结果:3种工艺均具有良好的稳定性与重复性,且酶解后优于酶解前,纯化后优于纯化前,以酶解后经大孔树脂LSA-10纯化所得提取物的制备工艺为最佳.不同批次提取物的镜像度较高,具有良好的相似性(＞0.9).结论:HPLC指纹图谱可用于同类提取物的质量控制和制备工艺评价.