自制利福平—牛血清白蛋白抗原检测利福平特异IgG

用自制的利福平(RFP)-牛血清白蛋白(BSA)为抗原,建立了ELISA检测RFP特异IgG的方法,对1例典型RFP变态反应者、100例服RFP无不良反应者及50例未用过RFP者进行了血清RFP特异IgG检测。结果典型RFP变态反应者为阳性;100例服RFP无不良反应者仅6例阳性;未用过RFP者无一例阳性。说明本方法对诊断RFP变态反应有应用价值,值得深入研究。     

结核病患者血清特异抗体测定的临床意义

应用酶联免疫吸附试验建立血清循环免疫复合物中特异抗体的检测方法,110例活动性肺结核和30例骨关节结核其阳性率分别为82.73%和83.33%,明显高于健康时照组和疾病对照组(P<0.01)。活动性肺结核与非活动性肺结核相比有显著差异(P<0.01)。该方法为一诊断与鉴别活动性肺结核特异敏感的检测方法优于目前血清抗体和非特异循环免疫复合物(CIC)测定。也可用作骨结核的血清学诊断。在指导临床治疗上有一定的价值。同时,作者提出在结核病的致病机制中可能有Ⅲ型变态反应的参与。     

100例肺结核病患者尿中利福平测定

新疆被列为全国结核病控制项目省 (区 )之一 ,根据卫生部世界银行贷款项目办公室的要求 ,2 0 0 0年初我们对 10 0例肺结核病人服用利福平 (RFP)后的尿液进行了检测 ,现报告如下。1　材料和方法1.1　材料来源 :选择全区部分地 (州 )、县及乌鲁木齐市 3个区(县 )进行了抽检 ,每县 (区 )抽查l个乡 ,每个乡抽查 7～ 10名服用RFP的肺结核病人进行尿液测试。1.2　检测方法 :我们利用有机溶剂三氯甲烷 (氯仿 )将尿液中RFP及其代谢物浓缩抽取出来 ,再观察有机相是否呈桔红色进行判断。方法是取病人尿液 2mL于中试管内 ,加入等量三氯甲烷 ,轻摇试…     

检测血清中BCG—A60抗体对结核病诊断的临床意义

ＢＧＣ－Ａ６０是从牛型结核分支杆菌的胸浆中提纯出来的抗原，为了解用聚合酶联免疫法检测血清中抗ＢＣＧ－Ａ６０抗体对结核诊断的临床意义，对７３４例健康人和非结核病人，以及５６０例结核病患者作了抗ＢＣＧ－Ａ６０抗体的检测。结果证实，ＥＬＩＳＡ－Ａ６０．ＩｇＧ诊断结核病的特异为８９．３％，敏感性为８４．５％，获得较满意的效果，认为可用于临床对结病的辅助诊断，还发现在活动性原发型肺结核中ＩｇＭ的阳性率明显高     

利福平在艾滋病合并结核中的临床应用

结核病（Tuberculosis,TB）是由结核杆菌引起的慢性传染病,可累及全身多个脏器,但以肺结核最为常见。艾滋病（Acquired immune deficiency syndrome,AIDS）是由人类免疫缺陷病毒（Human immune deficiencyvirus,HIV）感染引起的疾病。人体感染后造成T淋巴细胞免疫功能的严重缺陷,破坏患者的免疫功能,使肺部发生各种机会性感染及肿瘤,特别是肺结核。分析北京佑安医院门诊就诊的艾滋病合并结核感染的27例病人的状况及用药情况,以提高对AIDS合并TB感染的认识及治疗。     

ABC－ELISA法检测脑脊液抗PPD－IgG及其临床意义

用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法检测５５例结脑和３７例非结脑患者脑脊液抗ＰＰＤ－ＩｇＧ并与ＥＬＩＳＡ法比较。结果两法阳性率分别为９６．４％和８３．６％，ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ法的敏感性高于ＥＬＩＳＡ法，Ｐ＜０．０５，而两法特异性均为９７．３％。同时检测结脑患者脑脊液和血清抗ＰＰＤ－ＩｇＧ，脑脊液阳性率为９６．４％高于血清阳性率为８５．５％，Ｐ＜０．０５。结果表明本法可为结脑诊断的一种辅助方法。     

逆向点杂交方法检测耐利福平结核分支杆菌rpoB基因突变

目的 建立一种灵敏、特异、快速检测结核分支杆菌耐药相关基因突变的方法，用于临床对利福平耐药的快速诊断。方法 将14条特异性探针固定在尼龙膜上，通过在下游引物标记生物素的方法得到生物素标记的结核分支杆菌DNA PCR扩增产物，与固定在尼龙膜上的特异性探针杂交，杂交物通过链酶亲和素标记辣根过氧化物酶及底物（四甲基联苯胺）显色判定结果。将杂交结果与基因测序结果及药敏试验结果进行对比分析。结果 采用逆向点杂交法共检测23株耐利福平及11株敏感型菌株，与药敏试验结果、测序结果符合率分别为28／34和30／34。所发现突变类型依次为：第531位突变11株，第526位突变7株，第533位突变3株。未检测到第516位、第513位碱基突变。结论 该方法可用于临床结核分支杆菌对利福平耐药性的快速检测。     

弓形虫感染者血清IgM和IgG抗体免疫印迹谱分析

目的探索近期和慢性弓形虫感染的免疫诊断标志物。方法采用无毒灵敏的TMB为底物的酶联免疫印迹技术,分析弓形虫感染者IgM或IgG抗体阳性血清与弓形虫速殖子可溶性抗原的免疫反应谱。结果IgM抗体对p35、p38和p22的识别比例达80%以上,且反应带出现率较其它抗原组分高,而p32、p30与IgG抗体的反应带出现率和识别比例也分别高达40%和80%以上。其中,反应最强烈最具代表性的分别属p35(出现率81.5%,P<0.0001)和p32(出现率57.1%,P<0.0001)。结论p35、p38、p22可能为近期弓形虫感染的诊断标志物,p32和p30则可能是慢性弓形虫感染的诊断标志物。     

应用基因芯片直接检测结核病患者各类标本中利福平和异烟肼耐药的价值

目的 研究结核分枝杆菌(MTB)耐药基因芯片直接检测结核病患者临床标本中利福平和异烟肼耐药相关基因的临床价值。方法 回顾性分析125例通过硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸肼(TCH)鉴别培养为MTB的临床标本,其中痰标本90例、支气管灌洗液12例、脓液12例、胸腔积液6例、组织标本3例、腹腔积液和尿液标本各1例,应用绝对浓度法同时进行利福平(RFP)和异烟肼(INH)药物敏感性试验(简称“绝对浓度法药敏试验”),并用基因芯片直接检测临床标本中MTB rpoB、katG和inhA基因型。以绝对浓度法药敏试验为标准,评价基因芯片检测RFP、INH耐药和耐多药(MDR)的敏感度和特异度,并且比较两种检测结果的一致性。结果 在125例结核病患者临床标本中,绝对浓度法药敏试验显示对RFP、INH的耐药率和MDR发生率分别为20.0%(25/125)[其中高耐占88.0%(22/25)、低耐占12.0%(3/25)]、17.6%(22/125)[其中高耐占18.2%(4/22)、低耐占81.8%(18/22)]、16.8%(21/125)。初治和复治结核病患者临床标本中MDR-MTB的检出率分别为7.6%(7/92)和39.4%(13/33)。以绝对浓度法药敏试验为标准,应用基因芯片直接检测临床标本中MTB rpoB、katG和inhA基因型,预示对RFP、INH耐药和MDR的敏感度分别为72.0%(18/25)、63.6%(14/22)和61.9%(13/21),特异度分别为91.0%(91/100)、86.4%(89/103)和89.4%(93/104),两种方法的一致率分别为87.2%(109/125)、82.4%(103/125)和84.8%(106/125)。 结论 应用耐药基因芯片直接检测结核病患者临床标本中MTB对 RFP和INH耐药的相关基因突变具有中等的敏感度和较高的特异度,可快速检出对RFP、INH耐药和MDR-TB患者,为临床早期开展有效化疗提供实验依据。     

包虫病人血清特异性抗包虫IgG和IgM的检测及其临床意义探讨

本文报告应用IFAT法检测包虫病人血清中特异性包虫IgG和IgM的初步结果。44例正常人血清特异性IgG和IgM的假阳性率均为0％,83例包虫病患者血清特异性IgG和IgM的阳性检出率分别为96.36％和19.28％,二者有极显著性差异(P<0.01)。提示现症包虫病患者血清中的特异性抗包虫抗体主要为IgG。在16例特异性IgM阳性病人中,有9例存在包虫囊破裂,7例为肺包虫或肝肺混合包虫病患者,表明特异性IgM在包虫囊破裂时升高,肺包虫病人比肝包虫病人检出率高。提示包虫病人血清中的特异性IgM抗体水平与包虫囊的生活状态有关。     

利福平和链霉素对结核分支杆菌敏感性的快速筛查

目的:研究使用Inno-LiPA RifTB基因型试验和一种新颖、价廉、基于噬菌体的敏感性试验对耐药结核菌进行快速检测。设计:18个取自疑为耐多药结核病病人的菌株进行微板噬菌体复制试验(microwell phagereplication assay,MPRA)与直接用痰标本做的LiPA试验进行比较。通过LiPA试验鉴别已被DNA测序证实的rpoB基因突变导致的利福平耐药,同时敏感性由比例法和BACTEC证实。本研究以应用常规方法筛查对利福平和链霉素敏感性的另外19个菌株作为对照。结果:用LiPA试验检出17/18(94.4％)的痰标本对利福平敏感。对利福平敏感性的检测,MPRA与分子学方法和传统方法间相关是100％。而对链霉素敏感性的检测却发现了一个不同的结果:一个用比例法检测对链霉素敏感的菌株,经MPRA方法检测的结果是对2μg/ml链霉素耐药。同样,一个用MPRA方法第一次对链霉素耐药的菌株,重复试验时结果却是敏感的,这与传统方法的结果相同。结论:LiPA法能快速检测耐药菌感染,而MPRA能提供操作简单、技术要求低的药物敏感性试验,适合在低收入国家应用。     

结核病治疗中利福平耐药金黄色葡萄球菌的筛选

获得性细菌耐药通常归因于感染部位抗菌药物浓度低于最低抑菌浓度（MIC），因此提倡抗菌药物浓度要高于MIC，从而清除敏感菌。但根据耐药突变选择窗（MSW）假说可以预测，即使药物浓度高于MIC，敏感菌被清除后仍会出现获得性细菌耐药。本课题旨在通过临床研究验证这一预测。     

细菌噬菌体实验检测结核分枝杆菌利福平耐药:更新的meta分析

目的:我们之前进行过商品化及非商品化噬菌体实验检测耐利福平(RMP)结核(TB)的诊断准确性和操作特点的分析,此文章的目的是基于更多的研究来更新前一次分析。设计及结果:我们运用二元随机效果回归模型和分层综合接受者工作特征曲线(HSROC),对检测实验的准确性进行了系统回顾及Meta分析。评估的实验包括:FASTPlaqueTM、噬菌体荧光素报告(LRP)实验、室内噬菌体扩增实验。利福平检测的敏感性及特异性是主要分析指标。结果:通过更新文献搜索及分析,共有31篇研究(3085个标本)纳入此meta分析中。与室内扩增实验相比(敏感性变异范围为88%～100%,特异性变异范围为84%～100%),商品化试剂盒的指示值变化范围较大(敏感性变异范围为81%～100%,特异性变异范围为73%～100%)。LRP实验诊断的准确性一直很稳定,8项研究中7项敏感性为100%,4项特异性为100%。仅对准确性估计不能获得商品化试剂盒其他重要问题的分析,例如:污染率和不能得到确定结果的比例,直接检测病人标本的利福平耐药率时这2个率分别为3%和36%(平均值为20%)。结论:噬菌体技术需要进一步发展,以获得最多的诊断率并降低技术失误...     

肺结核病患者血清中弓形虫CAg、IgG、IgM的检测

弓形虫为机会性致病病原体 ,近几年的研究表明 ,在正常人群、孕妇、弱智、畸形儿童、吸毒人群及中枢神经系统疾病的患者中均有不同程度感染 ,在免疫机能低下时尤为严重 ,因此免疫功能低下的肺结核病人易导致弓形虫感染和发病。为了探讨弓形虫感染与肺结核病之间的关系 ,作者采用 EL ISA和IHA方法对 5 4例肺结核患者进行了血清弓形虫循环抗原(CAg)和 Ig G、Ig M抗体的检测。材料和方法1　材料1.1　血清来源　随机抽取 5 4例哈尔滨市结核病院肺结核病患者静脉血 ,分离血清 ,4℃保存备检 ;随机抽取 30名献血员静脉血 ,分离血清 ,4℃保存…     

耐利福平作为筛选耐多药结核病指标的评估

目的探讨耐利福平作为耐多药结核病筛选指标的可行性。方法对结核分枝杆菌临床分离株采用美国BD公司BACTEC MGIT 960全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏仪进行药敏试验,并对数据进行分析。应用诊断性试验评价指标评价耐利福平作为耐多药结核病筛选指标的科学性。结果在621株结核分枝杆菌临床分离株中,177株对利福平菌耐药,其中172株至少同时对异烟肼耐药,结核分枝杆菌的耐多药率为27.7%。若以至少同时耐异烟肼和利福平作为诊断MDR-TB的参考标准,以耐利福平作为MDR-TB筛选指标的敏感性为100%、特异性为98.9%、准确度为99.2%、阳性预测值为97.2%、阴性预测值为100%、阳性似然比为34.4、阴性似然比为0。结论我市耐多药结核病发生率高;耐利福平可以作为耐多药结核病的初步筛选指标。     

联合检测血清抗日本血吸虫IgM和IgG4抗体意义的探讨

目的探讨联合检测血清特异性IgM和IgG4对日本血吸虫病的诊断价值。方法采用间接ELISA法检测急性血吸虫病、慢性血吸虫病及慢性血吸虫病患者治疗12月、24月后特异性IgM和IgG4的抗体变化。结果急性血吸虫病患者特异性IgM和IgG4阳性率分别是100%、87.9%,慢性血吸虫病患者特异性IgM和IgG4阳性率分别是45.5%、68.2%,联合检测急性血吸虫病和慢性血吸虫病患者特异性IgM和IgG4阳性率分别是100%和75.8%,慢性血吸虫病患者治疗12月、24月后特异性IgG4阳性率分别是16%、5%。结论并联检测特异性IgM和IgG4对急性血吸虫病早期诊断及慢性血吸虫病疗效考核具有较好的应用价值。