腮腺主导管结扎及再通后腺泡凋亡与再生变化规律的研究

目的:研究大鼠腮腺主导管结扎及再通后腺泡凋亡与再生的变化规律。方法:通过对大鼠右侧腮腺主导管双重结扎14 d后再通,建立腮腺组织萎缩后再生模型。分别于主导管再通术后0、1、3、5、7、10、14和21 d获取腮腺组织标本,应用HE和AB-PAS染色观察腺体的组织学变化,免疫组织化学染色法检测腺泡中增殖细胞核抗原(PCNA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)的表达。结果:组织学观察见:主导管结扎14 d后腺泡萎缩、消失,导管样结构增多,酶原颗粒消失;主导管再通术后,腺泡再生,导管样结构减少,酶原颗粒数目恢复正常。免疫组织化学染色分析结果示:在主导管结扎14 d后PCNA散在表达,主导管再通1 d后表达增加,5 d后达峰值,7 d后降低并趋于平稳;主导管结扎14 d及再通后Caspase3表达水平持续较低,且平稳。各实验组间PCNA表达差异有统计学意义(P＜0.05),而Caspase3表达差异无统计学意义。结论:腮腺主导管持续结扎14 d后再通,萎缩的腺泡可再生,形态及功能均可恢复正常水平,表明主导管持续结扎14 d对腺体组织造成的损伤完全可逆。     

大鼠腮腺主导管结扎损伤诱导腺体萎缩的组织学变化

目的:研究大鼠腮腺主导管结扎损伤诱导腺体萎缩的组织学变化规律。方法:建立54只Wistar大鼠右侧腮腺主导管结扎损伤诱导腺体萎缩的动物模型,分别于结扎术后0、1、3、7、14和30天获取各组腮腺组织,阿新蓝—过碘酸雪夫(AB-PAS)特染检测腺小叶内酶原颗粒变化,马松三色(Masson)特染检测腺小叶内纤维结缔组织变化,免疫组织化学法检测腺体内半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase3)和增殖细胞核抗原(Ki一67)的表达。结果:主导管结扎后,AB-PAS/Masson观察见导管结扎后腺泡细胞萎缩、消失,酶原颗粒减少,腺小叶内纤维结缔组织逐渐增多;免疫组织化学染色示Caspase3在主导管结扎7d组达峰值;Ki一67在主导管结扎3d组达峰值。各实验组间Caspase3及Ki-67表达水平差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:腮腺主导管结扎后可促使腺泡细胞萎缩、凋亡,分泌功能丧失,腺体逐渐纤维化,从而可避免腮腺区域切除术后涎瘘等并发症的发生。     

层粘连蛋白、整合素α6β1、黏着斑激酶在主导管结扎诱导大鼠腮腺萎缩过程中的表达及意义

目的:研究腮腺主导管结扎后层粘连蛋白、整合素α6β1、黏着斑激酶在腺体萎缩过程中的表达变化,初步探寻腮腺组织萎缩的信号机制.方法:对54只Wistar雌性大鼠建立左侧腮腺主导管结扎动物模型,分别于结扎后0(对照组)、1、3、5、7、10、14、21、30 d获取大鼠新鲜腮腺组织(n=6).HE染色观察萎缩腮腺的组织学改变,免疫组织化学法、实时荧光定量PCR检测层粘连蛋白、整合素α6β1、黏着斑激酶在萎缩腮腺组织中的分布以及表达量变化.结果:主导管结扎后,腮腺逐渐萎缩.层粘连蛋白、整合素α6β1表达量在导管结扎后前3d内均逐步下调,在结扎第3天表达量达到最低值(P<0.05),且两者在腺泡细胞基底部染色的完整性受到破坏;而后表达量连续升高到第14天到达峰值(P<0.05);随后缓慢降低(P<0.05).黏着斑激酶表达量在腮腺萎缩过程中持续减低(P<0.05).结论:层粘连蛋白/整合素α6β1/黏着斑激酶可作为腮腺萎缩过程中信号传导通路而发挥作用,该通路能够对导管结扎产生的机械力刺激作出反应并将机械力信号传递到细胞内,参与调控腮腺组织萎缩进程.     

SD大鼠下颌下腺主导管结扎损伤及再通后的组织学观察

目的:建立主导管结扎的SD大鼠下颌下腺组织损伤模型,观察主导管结扎及再通后腺体的组织学变化。方法:双重结扎SD大鼠下颌下腺主导管。部分腺体在6 d后摘取;其他腺体于6 d后松开结扎使再通,并于4、6、12、24 d后处死动物,取出腺体。通过HE及免疫组织化学染色观察其组织化学变化。结果:主导管结扎6 d后,腺体中腺泡消失,导管样结构增生,导管细胞表达CK19;在增生导管及周围见α6β1、LN阳性细胞。松开结扎再通的导管在6 d后有成熟的腺泡细胞出现,24 d后有大量成熟腺泡形成,Amylases、PAS(periodic acid-schiff)、AQP-5均在腺泡细胞中表达。结论:导管结扎损伤后腺体腺泡萎缩,导管上皮增生。松开结扎再通后腺泡细胞再生、功能恢复。     

Bcl-2及Bax在大鼠腺体萎缩过程中的表达及临床意义

目的：：探讨大鼠腮腺主导管结扎后B cell lymphoma 2(Bcl-2)、Bcl-2-associated X protein(Bax)在腺体萎缩过程中的表达及临床意义。方法：对72只Wistar大鼠进行不同时间点腮腺主导管结扎建立腮腺萎缩模型;分别于术后1、3、5、7、14、21、30、60、90、150、180 d取材,采用免疫组织化学染色法检测Bcl-2、Bax在不同时间点的表达及分布情况。结果：主导管结扎后7 d多数腺泡细胞萎缩消失。Bcl-2和Bax在正常腺体组织中呈低水平表达。主导管结扎后不同时间点Bcl-2和bax在腺体中呈高表达,3 d时Bax表达达到峰值(1.99±0.10),21 d时Bcl-2的表达达到峰值(3.02±0.10),随后Bcl-2及Bax表达均降低。 Bcl-2/Bax比值在1~21 d升高,随后降低并趋于稳定。结论：腮腺主导管结扎后Bax、Bcl-2的表达与腮腺萎缩过程相关。     

肌上皮细胞在大鼠腮腺萎缩过程中的转归

目的 研究大鼠腮腺主导管结扎后萎缩腮腺内肌上皮细胞（MEC）的转归规律。方法 通过结扎大鼠右侧腮腺主导管诱导腺体萎缩,采用苏木精-伊红（HE）染色观察正常腮腺及导管结扎后1、3、5、7、14、21、30、60、 100、150 d萎缩性腮腺的组织学变化,并采用免疫组织化学染色方法定量分析MEC在腮腺萎缩不同时间点的数量及分 布情况。结果 组织学观察发现：腮腺主导管结扎5 d后,大部分腺泡细胞出现凋亡丧失,在腺体萎缩过程中形成 大量导管样结构,间质逐渐纤维化并伴有炎性细胞浸润。免疫组织化学染色定量分析结果显示：导管结扎后5 d 内,MEC数量快速增加,随后其数量增长缓慢,维持在一定的范围内,100 d时MEC数量达到峰值,其后快速减少; 在腮腺萎缩早期,MEC位于腺泡及闰管表面,呈星形或梭形,随着腺体的萎缩,最终呈梭形分布于导管样结构的外层。结论 在导管结扎后5 d内,MEC出现反应性大量增殖,随后数量增长缓慢,维持在一定的范围内;随着腮腺的逐渐萎缩,100 d后MEC数量快速减少。     

增殖细胞核抗原和P53在萎缩性腮腺再生中的表达及意义

目的 从基因和蛋白水平研究增殖细胞核抗原（PCNA）和P53在萎缩性腮腺再生过程中的表达及意义。方法 将102只Wistar大鼠分为实验组和对照组,结扎实验组大鼠腮腺主导管,分别于结扎7 d（A组）、14 d（B组）后实现腮腺导管再通,并于再通后第0、3、5、7、10、14、21、28天处死大鼠获取新鲜腮腺组织标本。采用苏木精-伊红（HE）染色法观察腮腺组织形态学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应和Western blot法检测两组腮腺组织中PCNA和P53的表达。结果 两实验组在腮腺导管结扎第7、14天,腺泡凋亡,导管细胞增殖,同组P53相对表达量高于PCNA;随着再通时间延长,腺泡细胞逐渐增多,A组在导管再通后第3天、B组在导管再通后第5天,PCNA和P53相对表达量达到峰值,与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.01）;其后PCNA和P53相对表达量逐渐减少,A组于再通后第21天、B组于再通后第28天接近对照组。结论 腮腺导管结扎后,P53相对表达量增多,诱导腮腺腺泡凋亡;导管再通后,PCNA相对表达量逐渐增多,达峰值后减少,可促进腺泡增殖。     

腮腺主导管结扎后腺体的组织学变化

目的:探讨腮腺导管结扎后腺体组织的生物学变化.方法:用SD大鼠建立动物模型,将其右侧腮腺主导管结扎;定期获取标本,制备组织切片,利用苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色及形态计量等方法,观察术后不同阶段腮腺组织中腺泡、肌上皮细胞、导管及间质的形态变化及体积分数.结果:腮腺主导管结扎后,腺体组织开始萎缩,其中腺泡体积分数逐...     

肌上皮细胞在腮腺再生过程中的变化

目的 研究腮腺再生过程中的肌上皮细胞（MEC）数量及分布的变化。方法 54只Wistar大鼠分为8个实验组和1个正常对照组,每组6只。实验组结扎大鼠右侧腮腺主导管,结扎后第14天使其再通,分别于再通后第0、1、3、5、7、10、14、21天获取腮腺组织标本,应用苏木精-伊红染色观察再生腺体的组织学变化,并采用免疫组织化学染色法定量分析MEC在腮腺再生不同时间点的数量及分布情况,并与正常对照组作比较。结果 腮腺组织于主导管结扎后第14天明显萎缩,多数腺泡细胞消失,导管样结构明显增多;而MEC数量明显增加,主要分布在导管样结构周围。导管再通后,从第3天开始,腺泡细胞明显增加,导管样结构明显减少,同时MEC数量减少,主要分布在新生腺泡及导管样结构周围,导管再通第3、5天时MEC数量下降最为明显;再通14 d后,腺体结构和MEC的数量及分布基本恢复正常,与正常对照组无明显差异。结论 MEC的数量和分布在腮腺萎缩后再生的第14天可基本恢复正常,腮腺的再生主要发生在主导管再通后的5 d内。     

实验性大鼠腮腺腺泡细胞缺血再灌注Bcl-2、Bax的表达

目的 探讨Bcl—2、Bax在实验性大鼠腮腺腺泡细胞的表达与形态学改变的关系。方法 采用颈总动脉结扎建立腮腺缺血再灌注模型，用光镜、免疫组化的方法，观察腮腺腺泡细胞形态学改变及Bcl—2、Bax的表达变化。结果 实验组在缺血再灌注早期开始出现形态学改变，中期明显，后期渐修复。缺血时间相同时，随再灌泣时间的延长，Bcl—2与Bax的表达均先升高后降低。而再灌注时间相同，随缺血时间的延长，Bcl—2呈先升高后降低的趋势；Bax在早期增高，中晚期无变化。结论 ①实验性缺血再灌注大鼠腮腺腺泡细胞有形态学改变。②Bcl—2主要在腺泡上皮细胞内表达，早期表达升高，不是影响腺泡细胞形态变化的主要因素。③Bax表达随缺血时间延长而增加，可能是促进缺血性损伤的因素之一。     

口腔颌面外科死亡病例疾病谱及死因分析

对我科１９７７～１９９７年２０年住院死亡病例疾病谱及死因分析，结果：（１）死亡病例疾病谱由感染、恶性肿瘤和外伤构成，其中感染占５０．０％，恶性肿瘤占３５．７％、外伤占１４．３％；（２）疾病谱构成比呈动态变化：前１０年中感染占６０．０％、恶性肿瘤占２０．０％、外伤占２０．０％，而近１０年中感染降至１１．２％、恶性肿瘤上升至６６．６％、外伤上升至２２．２％；（３）死亡原因包括感染性休克（２８．５％）、脓毒血症并肺脓疡致呼吸衰竭（７．１％）、肿瘤恶病质的全身性衰竭（２１．４％）、全麻术后窒息（１４．４％）、化疗致肾功能衰竭（７．１％）、外伤致脑水肿（１４．４％）及全麻术后诱发心源性猝死（７．１％），其中属医源性致死高达２８．５％。     

程序性死亡受体1及其配体在大鼠牙周炎发展中的时序性表达及意义

目的 研究程序性死亡受体1（programmed death-1,PD-1）及其配体（programmed death ligand 1,PD-L1）在大鼠牙周炎发展中的时序性表达及意义。方法 SD大鼠随机分为对照组和模型组,按照测定时间不同随机分为4个亚组,分别为A组（造模1周）、B组（造模2周）、C组（造模3周）和D组（造模4周）,每个亚组各8只大鼠。对各模型组大鼠采用“丝线结扎+接种牙龈卟啉单胞菌脂多糖”的方法建立大鼠上颌实验性牙周炎模型,对各组大鼠牙周进行组织病理检查和骨吸收面积测定,采用RT-PCR法对各组大鼠牙周组织中肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor alpha, TNF-α）、白细胞介素1β（interleukin-1, IL-1β）、白细胞介素6（interleukin 6, IL-6）及转化生长因子β（transforming growth factor beta, TGF-β）mRNA进行测定,采用Western免疫印迹法对各组大鼠牙周组织PD-1和PD-L1蛋白表达水平进行测定。采用SPSS 22.0 软件包对数据进行统计学分析。结果 建模期间,模型组大鼠第一磨牙釉-牙骨质界到牙槽嵴顶(amelocemental junction-alveolar crest, ACJ-AC)距离和根分叉区骨吸收面积逐渐增加（P<0.05）,与相应时间点对照组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。建模期间,模型组大鼠牙周组织中TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达水平持续升高（P<0.05）,TGF-β mRNA表达水平持续降低（P<0.05）,并且与相应时间点对照组相比,差异有统计学意义（P<0.01）。建模期间,模型组大鼠牙周组织中PD-1和PD-L1蛋白表达水平持续升高（P<0.05）,与相应时间点对照组相比,差异显著（P<0.01）。疾病发展过程中,大鼠牙周组织中PD-1和PD-L1蛋白表达水平与牙周组织炎症介质TNF-α和IL-6 mRNA表达水平持续正相关（P<0.05）。结论 PD-1作为免疫抑制分子与其受体PD-L1可促进牙周炎症进展,其作用可能通过调节TNF-α和IL-6的表达来实现。调节PD-1和PD-L1的表达,可作为治疗牙周炎症相关性疾病的新靶点。     

Necroptosis in the periodontal homeostasis: Signals emanating from dying cells

Periodontal tissues are constantly exposed to microbial stimuli. The equilibrium between microbes and host defense system helps maintain the homeostasis in the periodontal microenvironment. Growth of pathogenic bacteria in dental biofilms may induce proinflammatory cytokine production to recruit sentinel cells, mainly neutrophils and monocytes into the gingival sulcus or the periodontal pocket. Moreover, dysbiosis with overgrowth of anaerobic pathogens, such as Porphyromonas gingivalis and Tannerella forsythia, may induce death of both immune cells and host resident cells. Necroptosis is one newly characterized programmed cell death mediated by receptor‐interacting protein kinase (RIPK)‐1, RIPK3, and mixed lineage kinase like (MLKL). With its release of death‐associated molecular patterns (DAMPs) into extracellular environment, necroptosis may help transmit the danger signal and amplify the inflammatory responses. In this review, we present recent advances on how necroptosis influences bacterial infection progression and what a role necroptosis plays in maintaining the homeostasis in the periodontal niche. Until we fully decipher the signals emanated from dying cells, we cannot completely understand the mechanism of disease progression.     

面神经损伤致面运动神经元死亡的实验研究

目的　研究面神经低位切断伤及压榨伤后 ,大鼠面运动神经元的形态学改变及其死亡的时间进程。方法　手术制作大鼠右侧面神经的低位切断伤、压榨伤模型 ,左侧为正常对照侧。用HE和甲苯胺蓝染色技术观测面运动神经元死亡情况及其形态学变化。结果　面神经切断伤及压榨伤均可引起面运动神经元死亡 ,且于伤后 4周时达到高峰 (切断伤组死亡率 5 1.19%± 9.5 7% ,压榨伤组死亡率 2 7.90 %± 4 .6 8% ) ;除损伤后第一天外 ,损伤后各时间点切断伤组神经元死亡数目明显较压榨伤组多 (P <0 .0 1)。结论　面神经切断伤及压榨伤均可引起面运动神经元死亡 ,死亡数目与损伤形式有关。对重度的神经损伤 ,临床神经修复应争取在损伤后 4周内进行     

Periodontitis and premature death: a 16-year longitudinal study in a Swedish urban population

BACKGROUND AND OBJECTIVE: Growing experimental evidence implicates chronic inflammation/infection due to periodontal diseases as a risk factor for death. The objective was to evaluate the role of periodontitis in premature death in a prospective study. METHODS: The causes of death in 3273 randomly-selected subjects, aged 30-40 years, from 1985 to 2001 were registered. At baseline, 1676 individuals underwent a clinical oral examination (Group A) and 1597 did not (Group B). Mortality and causes of death from 1985 to 2001 were recorded according to ICD-9-10. RESULTS: In Groups A (clinically examined group) and B, a total of 110 subjects had died: 40 subjects in Group A, and 70 in Group B. In Group A significant differences were present at baseline between survivors and persons who later died, with respect to dental plaque, calculus, gingival inflammation and number of missing molars in subjects with periodontitis (p < 0.001). The multiple logistic regression analysis results of the relationship between being dead (dependent variable) and several independent variables identified periodontitis with any missing molars as a principal independent predictor of death. CONCLUSIONS: Young individuals with periodontitis and missing molars seem to be at increased risk for premature death by life-threatening diseases, such as neoplasms, and diseases of the circulatory and digestive systems.     

Expression of immunoregulatory molecules PD-L1 and PD-1 in oral cancer and precancerous lesions: A cohort study of Japanese patients

Objective

An association of the programmed cell death-1 (PD-1) and its ligand PD-L1 with various types of malignant tumors has been established. This study aimed to investigate the role of the PD-L1/PD-1 pathway in oral squamous cell carcinoma (OSCC) and oral epithelial precursor lesions (OEPL).

Death, dying and bereavement: a survey of dental practitioners

The dentist's role following the death of a patient in his/her practice has received little attention in the literature. This study determined the prevalence of death within a dental practice. It also investigated methods by which dentists supported grieving survivors, and how frequently dentists received formal bereavement education in dental school. A perceived need for training in death and dying was also investigated. A survey was mailed to 200 randomly selected general dental practitioners in Ontario, Canada. It was found that (1) the vast majority of respondents (86%) had experienced the death of a patient within the past 12 months; (2) support methods included sending sympathy cards (79.3%), sending flowers (34.5%), attending the funeral or wake (23%), or visiting/calling survivors (11.5%); (3) only 4% of respondents reported receiving formal bereavement education during dental school; and (4) 61% believed bereavement education should be included in the dental school curricula. While the majority of dentists in this study provided bereavement support and believed they could effectively comfort grieving persons, these dentists experienced significant stress when dealing with issues of death and bereavement. The stress may be explained by inadequate education and exposure to the issues of death and dying.     

头颈部鳞癌程序性死亡配体-1的共表达基因及 调控网络的生物信息学分析

目的 运用生物信息学的方法绘制头颈部鳞癌（HNSCC）中程序性死亡配体-1（PD-L1）共表达基因关系网络,筛选潜在的PD-L1的协同标志物,寻找可能的PD-L1基因调控肿瘤免疫状态的基因和通路。方法 利用癌症和肿瘤基因图谱（TCGA）中的大样本HNSCC的转录组学数据,在cBioPortal数据平台进行基因集的检索,筛选PD-L1共表达基因,在R语言的clusterProfiler中进行GO-BP和KEGG富集分析,再进行分子关系网络分析,提取重要节点基因（hub基因）,再进行生存分析。结果 筛选出共表达基因117个,共表达基因主要富集在免疫调节和病毒反应过程。网络节度分析得到了10个hub基因,依次为STAT1、IFNG、CXCL10、CCR5、FCGR3A、CXCL9、GBP5、CD86、GZMB、IRF1。生存分析显示：CCR5、CXCL9、GZMB是HNSCC预后相关的重要基因。这些基因均参与了免疫过程,其表达与PD-L1相关（Pearson相关系数为0.30、0.35、0.39,P值均小于0.01）。这些基因高表达在HNSCC中均为保护因素。结论 HNSCC中的PD-L1共表达的主要基因均为免疫相关基因,其中CCR5、CXCL9、GZMB与PD-L1存在共表达关系,与预后相关,其可能与程序性死亡受体-1（PD-1）/PD-L1介导的肿瘤免疫逃避相关,为进一步研究PD-1/PD-L1的作用机制和精准靶向治疗提供了新的参考。     

头颈部鳞癌程序性死亡配体-1的共表达基因及调控网络的生物信息学分析

目的 运用生物信息学的方法绘制头颈部鳞癌（HNSCC）中程序性死亡配体-1（PD-L1）共表达基因关系网络,筛选潜在的PD-L1的协同标志物,寻找可能的PD-L1基因调控肿瘤免疫状态的基因和通路。方法 利用癌症和肿瘤基因图谱（TCGA）中的大样本HNSCC的转录组学数据,在cBioPortal数据平台进行基因集的检索,筛选PD-L1共表达基因,在R语言的clusterProfiler中进行GO-BP和KEGG富集分析,再进行分子关系网络分析,提取重要节点基因（hub基因）,再进行生存分析。结果 筛选出共表达基因117个,共表达基因主要富集在免疫调节和病毒反应过程。网络节度分析得到了10个hub基因,依次为STAT1、IFNG、CXCL10、CCR5、FCGR3A、CXCL9、GBP5、CD86、GZMB、IRF1。生存分析显示：CCR5、CXCL9、GZMB是HNSCC预后相关的重要基因。这些基因均参与了免疫过程,其表达与PD-L1相关（Pearson相关系数为0.30、0.35、0.39,P值均小于0.01）。这些基因高表达在HNSCC中均为保护因素。结论 HNSCC中的PD-L1共表达的主要基因均为免疫相关基因,其中CCR5、CXCL9、GZMB与PD-L1存在共表达关系,与预后相关,其可能与程序性死亡受体-1（PD-1）/PD-L1介导的肿瘤免疫逃避相关,为进一步研究PD-1/PD-L1的作用机制和精准靶向治疗提供了新的参考。