新脱蜡方法和胶片在免疫组化染色中的应用

在免疫组化染色过程中，组织切片，特别是经酶消化后的切片，长时间浸泡在水溶性试剂内多次振荡冲洗，与玻片粘附性降低，常造成脱片。另外在每次加抗体前要用缓冲液冲洗，以致缓冲液弥漫于玻片，为防止抗体四溢和被稀释，必须擦掉组织周边的缓冲液，费时费力。为此，作者改用白乳胶作为切片粘附剂防止脱片和改变脱蜡方法，可以基本上不经擦水直接滴加试剂染色，取得满意效果。方法如下。     

解离管胞组织制片方法的改进

在植物输导组织管胞的显微组织构造观察实验中,以往采用管胞组织经解离后临时装片观察,其组织构造不经染色学生不易观察。但制作经染色易观察的永久切片标本,由于制片量大,经解离的管胞组织较难收集,脱水、染色、透明各步骤不容易操作,所以制作其解离组织永久切片标木比较困难。有文献介绍使用离心机收集材料的解离组织,但由于仪器所限及操作过程复杂,也很难制作。我们在制作解离组织切片中,     

HE染色切片褪色后再进行免疫组化染色方法的比较

目的:探讨HE染色切片褪色后是否可以用免疫组化的方法检测蛋白的表达。方法:将封好的HE切片放入二甲苯浸泡,去除盖玻片和中性树胶;梯度酒精水化之后用蒸馏水(或自来水)水洗;放入用75%酒精配置的1%的盐酸酒精分化液中浸泡1min,晾干后,再放入1%的盐酸酒精分化液中1min,反复数次直至颜色完全褪去,然后水洗;将防脱片剂多聚-L-赖氨酸工作液滴在已褪色的切片上,烤片60min,PBS浸泡;根据抗体需求采取合适的修复液(EDTA或柠檬酸盐)和修复方法(高压修复或水浴修复);根据常规免疫组化(Envision二步法)的方法和阳性对照片一起进行免疫组化染色。结果:所有对照片和滴加多聚-L-赖氨酸工作液的实验片均为阳性,无1例脱片。结论:此方法可以用于常规HE染色切片褪色后继续用于做免疫组化检测相关标志物,具有一定的临床实用价值。     

印片在活检诊断中的价值

本文通过114例印片诊断和石蜡切片诊断的对比分析,旨在进一步探讨印片在活检诊断中的价值。 1 材料与方法 采自我院1995年4月～1997年4月经手术摘除的淋巴结、门诊急性活检组织、穿刺组织、胃镜活检组织及手术切除的其它标本(均为未固定的新鲜标本)。方法是对较大的组织先行有针对性地做切面,用干净的载物片对切面进行多方向轻压,小组织则只行多方面轻压或轻压拉,每例做印片2～4张,立即放入95％酒糖固定1～2min,HE染色,光镜观察诊断,全部过程只需6～8min,且一个人即可完成。印片剩余的小标本     

冰冻切片免疫组化在临床病理中的应用价值

冰冻切片（frozen section）是一种在低温条件下使组织快速冷却到一定硬度后进行切片的方法[1]。免疫组化染色已成为病理诊断中不可缺少的检测手段之一,然而常规的石蜡切片抗原丢失现象较常见,修复效果有些不理想,而且高温、高压、煮沸过程脱片现象常见。而冰冻切片其组织不经过任何处理,保持原有形态,不破坏其抗原性,基本无需微波和高压等热修复,制作过程与石蜡切片比较更为快捷、简便,防止掉片,缩短时间,因此更适合于抗原抗体的免疫组化检测,多应用于手术中的快速病理诊断。     

对《鲎试剂—培养皿法检测热原》质疑

读了本刊1991年第3期刊登的《鲎试剂一培养皿法检测热原》一文后,笔者认为“将两套培养皿及时放入37℃水浴箱中恒温30min”之做法有不完     

石蜡切片HE染色的体会

目的探讨病理组织HE制片中,组织经过取材固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、石蜡切片之后,通过严格苏木素、伊红染色这一环节的技术操作、提高石蜡切片的HE染色质量为准确的病理诊断提供优质的HE切片。方法临床工作中,经过常规取材的病理组织,通过一系列的组织处理,病理专用仪器的切片再经过染色剂苏木素、伊红的染色,二甲苯透明,中性树胶封固制作成优质的HE片。结果 HE切片色彩鲜艳透明,细胞核呈蓝色,间质呈深浅不等的橙红色,核、质对比清晰。结论通过对石蜡切片苏木素、伊红染色过程技术的改进,组织细胞核、细胞质染色清晰度得到显著提高,使HE切片质量的优质率达90%以上。     

石蜡切片HE染色的体会

目的探讨病理组织HE制片中,组织经过取材固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、石蜡切片之后,通过严格苏木素、伊红染色这一环节的技术操作、提高石蜡切片的HE染色质量为准确的病理诊断提供优质的HE切片。方法临床工作中,经过常规取材的病理组织,通过一系列的组织处理,病理专用仪器的切片再经过染色剂苏木素、伊红的染色,二甲苯透明,中性树胶封固制作成优质的HE片。结果 HE切片色彩鲜艳透明,细胞核呈蓝色,间质呈深浅不等的橙红色,核、质对比清晰。结论通过对石蜡切片苏木素、伊红染色过程技术的改进,组织细胞核、细胞质染色清晰度得到显著提高,使HE切片质量的优质率达90%以上。     

提高中药石蜡制片速度的方法

在观察动植物组织方面,基层医药单位缺乏利用电磁场、超声波等现代手段时,用传统石蜡切片来观察药材的组织特征,仍具有切片完整,染色清晰,利于保存等特点。但该法流程长,较费时,使用较多的有机溶媒,在药检所的常规检验中使用不多。但在实际工作中,遇到某些坚硬的植物药材和动物的非骨骼药材,采用徒手切片等方法难以制得满意的观察片,则选用石蜡切片为好。为了尽量减少石蜡制片的麻烦,作者在实际工作中,参考医院病理组织切片法,对中药的石蜡切片方法进行了一些改进,采用加     

全密封式组织处理机常规使用中的问题及改进措施

目的探讨全密封式组织处理机工作中的各种试剂、机器的稳定性及其作用。方法对全密封式组织处理机在工作使用过程中试剂周期的调整。结果经各试剂使用周期的调整后,组织脱水到位,透明、浸蜡效果好,易切片,细胞染色胞浆对比度明显,延长了各试剂最大使用周期,降低了成本。     

人体活检穿刺组织、实验动物组织荧光制片、HE制片中的技术改进

目的人体活体行肺、肝、肾穿刺及实验用动物的肺、肝、肾组织制作免疫荧光切片、石蜡HE切片,用以明确疾病的性质以及做科研时动物试验的组织进行科学病理分析。方法我院患者的活检组织标本、试验室的动物组织标本取1/4及1/3用普通胶水代替OCT包埋剂,冰冻机下行冰冻切片用以制作直接免疫荧光染色。剩余标本组织在脱水机改进时间后进行脱水处理,行石蜡包埋切片做HE染色。结果组织荧光制片效果好,无背景着色,切片完整,组织结构清晰。组织石蜡HE切片染色胞浆分明,切片完整。两种制片镜下观察定位准确。结论采用改进后方法制片,节约资金,制片的阳性强度及阳性检出率与未改进前相比效果好,定位准确。     

51O例股骨头标本常规脱水与超声波快速脱水对切片效果的比较研究

目的通过510例股骨头标本HE制片结果的分析,比较常规脱水与超声波快速脱水的效果。方法股骨头标本用锯锯成2cm×2cm×0.3cm的薄片二份,用30％的甲酸脱钙液进行脱钙16～18小时,分别用常规脱水的方法及超声波快速脱水的方法脱水处理后,经石蜡包埋、切片、染色制成HE切片,观察染色后的组织结构的清晰度及完整性。结果股骨头标本经二种脱水方法处理后制成的HE切片,阅片比较发现超声波快速脱水法优良率略高于常规脱水法,两种方法比较,P〉0．05,差异无统计学意义。但超声波组织处理仪能明显缩短病理制片工作时间。结论骨组织脱钙后采用超声波快速脱水的方法可以代替常规脱水,HE切片效果良好,缩短了病理检验报告时间,更好地满足了临床工作的需求。     

冰水混合物在病理组织制片中的应用研究

目的 探讨冰水混合物在病理组织制片中的应用价值,以寻求提高HE切片质量的方法.方法 手术切除的人体标本经脱水、浸蜡后包埋成蜡块,蜡块分别用自来水、冰块、冰水混合物处理后切片,常规HE染色,光学显微镜观察.结果 经冰水混合物处理的组织蜡块,切出的蜡片成带完整、厚薄均匀,无重叠、皱褶、脱片、空洞、龟裂或波浪样改变;HE染色...     

33例尸检血栓血肿组织切片的探讨

在病理制片过程中，外检凝血块、尸检中的血栓及血肿标本不少见。尤其肺动脉栓塞标本，取材时血栓与动脉易分离破碎。这类组织切片有难度，因组织脆、硬、切片易碎、容易脱片、染色不佳。将血栓类组织切片进行探讨，方法如下。     

冰水混合物在病理组织制片中的应用研究

目的 探讨冰水混合物在病理组织制片中的应用价值,以寻求提高HE切片质量的方法.方法 手术切除的人体标本经脱水、浸蜡后包埋成蜡块,蜡块分别用自来水、冰块、冰水混合物处理后切片,常规HE染色,光学显微镜观察.结果 经冰水混合物处理的组织蜡块,切出的蜡片成带完整、厚薄均匀,无重叠、皱褶、脱片、空洞、龟裂或波浪样改变;HE染色鲜艳,组织结构清晰,细胞形态完整.与经自来水、冰块处理的蜡块制作的切片有明显差异.结论 切片前用冰水混合物处理蜡块的方法是可行的,可明显提高HE制片质量.     

319例冰冻切片质量分析

冰冻切片质量直接影响冰冻病理诊断 ,关系到对手术患者的处理。提供优质冰冻切片是保证医疗质量重要一环 ,现就我科 319例冰冻切片质量作如下分析。1　材料与方法本文将我科 1993年至 1998年冰冻切片 319例、 5 92张切片为研究对象。其中诊断恶性肿瘤 74例、 139片 ;诊断良性肿瘤 2 45例、45 3片。所有切片重新复习 ,将切片质量分为优、良、合格、不合格四级 :优 :切片薄 ,平整无皱摺 ,无刀痕 ,无卷片 ,染色鲜艳。良 :切片稍厚 ,平整略有皱摺或刀痕、卷片 ,染色鲜艳。合格 :切片厚 ,有皱折或刀痕、卷片 ,染色不够鲜艳。不合格 :切片破碎 ,有…     

病理组织切片染色中的常见问题及解决方法

病理组织切片作为一种实验技术,目前已经广泛应用于科研、教学、病理检验工作中。笔者对整个病理切片染色制作过程的操作程序、可能出现的问题及相应的解决方法进行了归纳总结,并对一些实验步骤与操作方法进行了改进,使组织脱水彻底、固定完全、切片较薄、染色效果较好,提高切片的质量水平。     

制作优质HE病理组织切片的要素

目的制作一张优质的病理组织切片。方法对病理组织制片过程中出现的问题加以注意及改进。结果病理组织固定、脱水效果好,制作的组织切片薄,HE染色胞浆分明。     

五种胃幽门螺旋菌染色方法比较研究

自1983年Marshall和warren在微氧条件下从慢性胃炎患者胃粘膜活检组织中分离培养出幽门螺旋菌（HelicobacterPylori，HP）以来[1]，在HP感染的诊断上，胃镜活检组织切片染色检查HP方法众多，优缺点不一。本研究选用临床病理诊断中常用的5种HP染色方法进行比较研究，以便筛选出适合一般医院病理科进行常规HP组织学诊断的染色方法。1材料和方法随意取我院慢性胃炎、胃溃疡患者胃镜活检标本50例，组织经10％甲醛液固定，常现脱水、石蜡包埋，连续切片，每例铺片5张，分别作以下5种染色，光镜观察，计算每种染色法HP阳性检出率，进行X2检…     

病理组织包埋过程中选用试剂的体会

做好一张合乎要求的病理组织切片,其关键工序有很多,本文主要介绍在包埋过程中如何选择脱水、透明、浸蜡用的试剂,其要求为:价格低,操作方便。我们采用的包埋时间表(见下)适用于各类组织和组织块,体积不超过1×1×0.2cm为限,都可以在14小时25分钟内完成。其切片质量是合乎要求的。在无自动脱水包埋机的单位,手工操作也可以达到同一目的,如用加温包埋(56℃),其时间可以折半。 1,固定:新鲜标本经肉眼检查切取的组织块材料还须经过10％甲醛固定15分钟(在60℃恒温固定器内),取出冲水3分钟,固定不好,要影响切片质量。 2.起步脱水:利用废下的70％酒精一杯,作为正