HPLC—MS／MS法与MEIA法在监测器官移植患者他克莫司全血浓度中的比较

目的：比较HPLC-MS／MS法与MEIA法在监测器官移植患者他克莫司全血浓度中的应用。方法：建立和确讧可行的HPLC-MS／MS法,并与ME—M法分别测定他克莫司相同样本的浓度,对测试结果进行统计分析,评价两种方法。结果：HPLC-MS肌S法测定他克莫司平均浓度为（4．86±0．46）ng／mL,MEIA法测定浓度平均为（5．52±0．43）ng／mL,两种方法测定结果相关系数r平均为0．8771,两种方法相关性较强。LC-MS／MS法测定浓度值／MEn法测定浓度值平均值为（90．34-5．3）％。结论：HPLC—MS／MS法测定浓度为他物在体内的准确浓度,更适用于日常治疗药物监测（TDM）工作。     

LC-MS/MS法同时测定大鼠血浆中甘草酸和甘草次酸

目的：建立一种同时测定大鼠血浆中甘草酸和其代谢产物甘草次酸的高效液相色谱一串联质谱的（LC-MS／MS）分析方法。方法：采用汉邦VP—ODS（150min×2．1nun,5μm）色谱柱,流动相为甲醇和1％的甲酸水,梯度洗脱：21％水相（0-3．5min）,2％水相（3．5-8．2min）。简单的乙腈沉淀蛋白法处理血浆样品。以格列喹酮为内标,采用ESI源负离子模式、多反应检测进行测定。检测离子对分别为m／z821．4→350．9（甘草酸）、m／z526→401．1（格列喹酮）和m／z469．2→425．2（甘草次酸）。结果：甘草酸和甘草次酸的检测浓度分别在50－2000ng·mL-1、10-500ng·mL-1范围内线性关系良好。相关系数为0.9989和0．9981。日内及日间精密度RSD均小于15％。结论：方法专属性强．准确度好．适用于同时监测甘草酸和甘草次酸的浓度及进行药动学研究。     

LC-MS/MS测定人血清帕拉德福韦浓度方法的建立及在人体药代动力学研究中的应用

目的：建立人血清帕拉德福韦浓度检测方法并运用于人体药代动力学研究。方法：血清样品乙腈沉淀蛋白处理后,采用液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）法测定。以0.2 mmol·L-1乙酸铵水溶液（A）-乙腈（B）为流动相,Thermo BDS HYPERSIL C18 column（150 mm×2.1 mm,5μm）分离,梯度洗脱。帕拉德福韦及内标（恩替卡韦）监测离子对为m/z 424.1→151.0;m/z 278.3→152.1。运用建立的方法测定健康受试者血清中药物浓度。结果：帕拉德福韦血清药物浓度在0.5~500 ng·mL-1的范围内线性关系良好,方法回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。结论：该方法专属性强、灵敏度高,可用于帕拉德福韦人体药动学研究。     

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中氨溴索浓度

目的：建立测定人血浆中氨溴索浓度的高效液相色谱串联质谱法,以用于氨溴索人体药动学研究。方法：以西替利嗪为内标,血浆样品经乙腈沉淀后,经HPLC—MS／MS分离-分析。采用Waters ODS C18柱（50mm×2．1mm,3．5μm）,以甲醇：5mmol·L^-1乙酸铵（72．5：27．5）为流动相,流速：0．20ml·min^-1,采用电喷雾离子源（ESI）,以多离子反应监测方式（MRM）进行正离子监测,氨溴索和内标西替利嗪的定量分析离子对分别为m／z 379．0→263．9和m／z 389．1→201．3。结果：氨溴索血浆浓度测定方法线性范围为1．99～398ng·ml^-1,r=0．9990。定量下限为1．99ng·ml^-1,方法回收率在85％～115％之间。日内和日间RSD〈15％。结论：本法灵敏、准确、可靠,适用于盐酸氨溴索人体药动学研究。     

LC-ESI-MS／MS法快速测定人血浆中帕洛诺司琼的浓度

目的建立快速测定人血浆中帕洛诺司琼浓度的高效液相色谱串联质谱电喷雾检测（LC-ESI-MS／MS）法。方法以Agilent C18反相柱（150mm×4．6mm,5μm）为色谱柱,流动相为乙腈：0．04mol·L^-1甲酸铵水溶液（含0．04％甲酸）=80：20（V／V）,流速0．8mL·min^-1,柱温25℃,醋酸乙酯：二氯甲烷（4：1,V：V）为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后,通过三重四级杆串联质谱仪,采用选择反应监测（SRM）模式对帕洛诺司琼（m／z 297．2→82．2）和内标地西泮（m／z285．1→154．0）进行测定。结果帕洛诺司琼高（8μg·L^-1）、中（5μg·L^-1）、低（0．1μg·L^-1）3个质量浓度血浆溶液的RSD均〈15％;线性范围为0．05—10μg·L^-1,回归方程为F=1．8319ρ＋0．009ρ,r=0．9964（n=9）,权重系数为1／ρ^2,分析方法的定量下限为0．05μg·L^1。结论该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于帕洛诺司琼临床血药浓度监测和药动学研究。     

高效液相色谱-串联质谱法测定犬血浆中盐酸二甲双胍浓度

目的：建立测定犬血浆中二甲双胍浓度的高效液相色谱．质谱．质谱联用方法，并用于二甲双胍缓释片非临床药物动力学研究。方法：血浆样品经乙腈沉淀蛋白，取上清液直接进行LC—MS／MS测定，以10mmol·L^-1甲酸铵缓冲液．乙腈（50：50）为流动相，采用ZORBAX EclipseXDB—C18柱（150mm×2．1mm，3．5μm）分离，在三级四极杆串联质谱中经电喷雾电离源（ESI）离子化，以多反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m／z 130→60（二甲双胍）和m/z304→182（可卡因，内标）。结果：LC-MS／MS法测定血浆中二甲双胍的线性范围为2．0～4117ng·ml^-1，定量下限为2．0ng．ml^-1。以3个浓度水平的质量控制样品求得各浓度水平日内、日间精密度（RSD）均小于13％。在非临床药代动力学研究中。应用此法测定了爱试Beazle犬血浆中二甲双胍的浓度．结论：该法灵敏、快速、操作简便，适用于二甲双胍的动物药物动力学研究。     

UPLC-MS/MS测定beagle犬内西罗莫司血药浓度

目的建立测定beagle犬内西罗莫司（SRL）血药浓度的UPLC-MS／MS联用方法。方法色谱柱为AgilentC18柱（50mm×2．1mm,1．7μm,）;预柱为C18柱（4．0mm×3．0mm,5μm）;流动相为乙腈-水（90：10,v／v）;流速为0．30ml／min;柱温为50℃;进样室温度为4℃。离子源为ESI源;正离子方式检测;扫描方式为多反应监测（MRM）;用于定量分析的离子反应分别为m／z936．6→m／z409．7（西罗莫司）和m／z826．6→m／z415．4（内标他克莫司）。取全血样品经液-液萃取后进样20μl。结果SRL在0．50～12．00ng／ml浓度范围内呈良好的线性（r=0．9997）,定量下限0．5ng／ml,日内、日间精密度（RSD）均小于15％,方法回收率均大于90％,萃取回收率大于76％。结论本方法具有样品处理简单,方法灵敏、快速、选择性强,满足西罗莫司在beagle犬体内药物检测的要求。     

液相色谱-离子阱质谱法测定人血清中莫西沙星浓度

目的建立一种灵敏、可靠的检测血清中莫西沙星浓度的高效液相色谱-离子阱质谱法。方法血清样品经磷酸盐缓冲液提取后,用Waters Oasis MAX小柱进行净化,以乙腈-0．05％三氟醋酸（25：75,V／V）为流动相,采用Cloversil—C18柱（150mm×3．0mm,5μm）分离,以环丙沙星为内标,应用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱多离子反应监测模式（MRM）测定,莫西沙星和内标的定量离子对分别为m／z402→358和m／z332→288。结果莫西沙星和内标的绝对回收率均为83．1％→90．7％,莫西沙星质量浓度为0．5-100．0μg·L^-1具有良好线性,日内精密度〈7．2％,日间精密度〈9．8％,检出限为0．5μg·L^-1。结论本方法简便、灵敏、干扰少、特异性好,可用于莫西沙星的临床药动学研究及临床患者的血药浓度测定。     

LC-MS／MS法测定人血浆中的帕珠沙星

目的：建立一种快速灵敏检测帕珠沙星血药物浓度的液相色谱－串联质谱方法。方法色谱柱为 Agilent Eclipse XDB－C18（4．6mm ×150mm,5μm）;流动相为乙腈：水（0．005mol· L－1甲酸铵,0．1％甲酸）＝（30∶70）;流速：0．5mL· min －1;质谱条件为电喷雾电离源（ESI）;采用选择反应监测（SRM）对帕珠沙星（m／z 319．0→301．1）和环丙沙星（m／z 332．2→314．2）进行测定。样本处理采用乙腈沉淀蛋白法,吸取上清液1μL进样。结果帕珠沙星的线性范围为0．02～20μg· mL －1,提取回收率为82％～92％,日内和日间精密度均小于15％。结论本方法简便、灵敏,该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于临床药物浓度的测定和药代动力学的研究。     

LC-MS／MS法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质及代谢产物

目的：建立LC—MS／MS法测定大鼠脑组织中5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）、3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇（MHPG）、3，4-双羟苯乙酸（DOPAC）、高香草酸（HVA）的含量。方法：采用Thermo C18色谱柱（4．6mm×250mm，5μm），柱温为室温；水（含0．05％的甲酸）-乙腈为流动相，流速为0．8mL·min^-1。ESI^＋多个反应监测（MRM）模式监测反应质荷比（m／z）：177．06→159．92（5-HT），170．00→152．00（NE），154．00→137．00（DA）；ESI^-多个反应监测（MRM）模式监测反应质荷比（m／z）：190．00→145．90（5-HIAA），263．00→165．00和263．00→150．00（MHPG），166．90→122．80（DOPAC），180．70→136．60（HVA）。结果：5-HT、NE和DA分别在4．45～4450ng·mL^-1、4．11～4110ng·mL^-1和4．10～4100ng·mL^-1浓度范围内线性良好（r≥0．999），最低检测浓度分别为4．45，4．11，4．10ng·mL^-1；5-HIAA、MHPG、DOPAC和HVA在12．5—1000ng·mL^-1浓度范围内线性良好（r≥0．998），最低检测浓度为12．5ng·mL^-1。日内和日间RSD均小于8．5％，重复性好。结论：本方法灵敏、快捷、准确、专一性强，可用于神经精神疾病神经递质的研究与分析。     

衍生化LC—MS／MS法测定人血浆中氨基葡萄糖的浓度及药代动力学研究

目的：建立柱前衍生化高效液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法测定人血浆中氨基葡萄糖的浓度,并研究该药在健康受试者体内的药代动力学特征。方法：采用乙腈沉淀蛋白和邻苯二甲醛/3-巯基丙酸（OPA/3-MPA）衍生化法对血浆样品进行前处理,LC-MS/MS法测定受试者血浆中氨基葡萄糖的浓度,并用BAPP2.0软件计算药动学参数。色谱分离采用Phenomenex ODS柱（150mm×4.6mm,5mm）,流动相为甲醇-0.2%醋酸铵溶液（含0.1%甲酸）,梯度洗脱;待测样品通过电喷雾正离子化以选择性反应离子监测方式进行检测,用于定量分析的离子反应分别为m/z384→118（氨基葡萄糖衍生物）和m/z326→147（内标酒石酸托特罗定）。结果：血浆中氨基葡萄糖在0.012～8.272mg.L-1范围内线性关系良好（r〉0.9980）,绝对回收率为87.9%～106.5%,批内、批间精密度RSD分别为4.4%～5.4%和9.8%～19.8%,定量限为0.012mg.L-1。其主要药动学参数Cmax为（1.03±0.47）mg.L-1,AUC为（4.32±1.41）h.mg.L-1,AUC0-∞为（4．34±1．41）h·mg·L^-1,Tmax为（2．80±1．37）h,t1／2为（1．20±0．32）h,MRT为（3．74±0．63）h。结论：衍生化LC-MS／MS法可增强氨基葡萄糖在反相色谱系统中的保留,改善与内源性干扰物的分离,有效降低电喷雾质谱检测的基质效应,提高检测灵敏度和准确度,适用于氨基葡萄糖的临床药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中甲磺酸雷沙吉兰片浓度及其药动学研究

目的:建立测定人血浆中甲磺酸雷沙吉兰的液相色谱-串联质谱色谱法（LC-MS/MS）,研究甲磺酸雷沙吉兰在健康人体内的药物动力学特征。方法:采用LC-MS/MS测定人血浆中甲磺酸雷沙吉兰浓度,选择监测的离子为m/z 172→117.15（甲磺酸雷沙吉兰）和m/z 340.1→324.1（罂粟碱）。色谱柱为Inertsil ODS-3色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相:甲醇-（0.2%醋酸胺+0.25%氨水）（85:15）。结果:雷沙吉兰在0.010～40 ng·ml^-1浓度范围内呈良好的线性关系（r=0.999 5）,最低检测浓度为0.010 ng·ml^-1,应用此法测得0.5、1.0、2.0 mg剂量组不同给药方式、多个时间点的雷沙吉兰血药浓度,结果呈线性动力学特征。结论:该方法灵敏度高、专属性强、准确、简便,适用于甲磺酸雷沙吉兰片的人体药动学研究。     

LC-MS/MS 法测定人血浆中多潘立酮的浓度

摘 要 目的:建立测定人血浆中多潘立酮浓度的高效液相-质谱联用色谱法。方法: 以普萘洛尔为内标,血浆样本经0.1 mol·Ll^-1氢氧化钠溶液处理后用乙醚萃取。采用XTerra MS C₁₈柱 （150 mm×2.1 mm,3.5 μm）为色谱柱,以乙腈-水-甲酸（80∶20,含0.3%的甲酸）为流动相,流速为0.2 ml·minl^-1。质谱条件为电喷雾离子源（ESI）,正离子方式多反应（MRM）扫描,离子选择通道分别为m/z 426.3 → m/z 175.1（多潘立酮）和m/z 260.3→ m/z 183.1（普萘洛尔）。结果:多潘立酮测定方法的线性范围为0.5～100 μg·L^-1,日内和日间精密度(RSD)均小于10 %。结论:本方法特异性强,灵敏度高,适用于临床试验中血浆样本的高通量分析。     

LC-MS/MS法测定大鼠肝微粒体孵育液中靛玉红的含量

目的:建立测定大鼠肝微粒体孵育液中靛玉红含量的方法。方法:采用液相色谱-电喷雾串联质谱法。肝微粒体孵育液样品处理采用液-液提取,提取物以甲醇-10mmol·L-1乙酸铵溶液(氨水调pH值至7.40)=90:10为流动相进行分离,以选择性反应离子监测(SRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z262.9→219.0(靛玉红)和m/z531.0→82.1(酮康唑,内标)。结果:5min内完成靛玉红的检测,工作曲线线性范围为1～100ng·mL-1,日内、日间精密度分别<3.6%、<13.4%,平均回收率为94.0%～104.4%,检测限为0.5ng·mL-1。结论:本方法灵敏度高、特异性好,可以用于肝微粒体孵育液样品中靛玉红的检测。     

小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS同时测定方法的建立及在药动学研究中的应用

目的：建立同时测定小型猪血浆中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的LC-MS/MS法,并研究小型猪皮肤外用二丙酸倍他米松乳膏后,二丙酸倍他米松及倍他米松的药动学特征。方法：血浆样品经酸化后以乙醚-环己烷（4∶1）提取,LC-MS/MS分析,以Hedera ODS-2（150 mm×2.1 mm,5μm）为分析柱,流动相为5 mmol·L-1醋酸铵水溶液（含0.1%乙酸）–甲醇,梯度洗脱。二丙酸倍他米松、倍他米松及内标布地奈德的监测离子对分别为m/z 563.2（[M＋CH3COO]-）→483.1、m/z 451.2（[M＋CH3COO]-）→361.0和m/z 489.3（[M＋CH3COO]-）→357.1。对小型猪外用二丙酸倍他米松乳膏后其血浆中二丙酸倍他米松及代谢物倍他米松的浓度进行测定,并计算主要药动学参数。结果：二丙酸倍他米松血药浓度在26.85~644.4 ng·L-1范围内线性关系良好,倍他米松血药浓度在10.62~637.2 ng·L-1范围内线性关系良好。结论：本方法专属性强、简便、灵敏,可用于血浆样本中二丙酸倍他米松及其代谢物倍他米松的测定及药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的倍他米松17-丙酸酯及其药动学研究

目的:建立人血浆中倍他米松17-丙酸酯（B17P）的LC-MS/MS测定方法,并研究其在健康人体内的药动学特征。方法:采用Agilent Zorbax C18（2.1 mm×100 mm,3.5μm）色谱柱,以甲醇-水（88:12）为流动相,流速0.15 ml·min^-1;电喷雾（ESI）离子源,正离子电离模式,多反应离子监测（MRM）的扫描方式,B17P和二丙酸倍氯米松（内标,IS）的检测离子对分别选择为m/z 471.1→397.1和543.2→433.1。结果:B17P的线性范围为0.02～2.0 ng·ml^-1（r=0.999 3,n=5）,定量下限为0.02 ng·ml^-1,日内和日间精密度（RSD）均小于10.9%,提取回收率在70%左右,方法回收率均在94.5～106.6%范围内。B17P的t_1/2为（82.5±17.3）h,C_max为（0.73±0.18）h,AUC_0～1为（63.9±13.6）ng·h·ml^-1。结论:该法简便、快速、灵敏、准确,适用于B17P血药浓度测定及其人体药动学研究。     

LC-MS／MS法测定健康人体中氢溴酸加兰他敏的浓度及其制剂的生物等效性研究

目的：建立专属灵敏的LC-MS／MS法测定健康人体血浆中氢溴酸加兰他敏，并进行药动学及生物等效性研究。方法：对20名健康受试者采用随机双交叉试验设计，分别单剂量口服氢溴酸加兰他敏受试和参比制剂10mg，采用LC-MS／MS法测定受试者血浆中氢溴酸加兰他敏浓度，用DAS2．0软件计算相关药动学参数，评价两制剂的生物等效性。血浆样品经液-液萃取后，以甲醇-醋酸盐缓冲液（50：50）为流动相，LichrospherC6心柱（250mm×4．6mm，5μm）分离；样品经电喷雾离子源正离子化后，通过三重四极杆串联质谱仪，在多反应监测模式下对加兰他敏（m／z287．9→m/z 212．9）和内标盐酸克伦特罗（m／z277→m／z 202．7）的浓度进行测定。结果：氢溴酸加兰他敏受试和参比制剂的主要药动学参数为：cmax分别为（66．19±16．7）和（59．29±16．9）μg/L，Tmax分别为（0．59±0．28）和（0．81±0．56）h；t/2分别为（7．11±0．91）和（7．04±0．84）h，平均驻留时间分别为（9．80±1．35）和（9．87±1．18）h，AUC0-36分别为（453．47±132．77）和（445．62±87．79）μg·h／L，AUC0-∞分别为（469．05±140．30）和（460．49±92．20）μg·h／L，V/F分别为（180．10±77．71）和（201．10±74．95）L，CL／F分别为（23．99±6．20）和（24．21±5．13）L／h。以AUC0-36计算，受试制剂的相对生物利用度为（101．5±19．1）％。结论：本试验测得氢溴酸加兰他敏受试和参比制剂主要药动学参数与国内外文献报道基本一致。数据分析结果表明，两制剂生物等效。本试验方法专属性好，灵敏度高，快速简便。     

LC-MS／MS法测定精神分裂症合并2型糖尿病患者血浆中沙格列汀的浓度

目的建立测定精神分裂症合并2型糖尿病患者血浆中沙格列汀浓度的方法。方法血浆样品0．2mL用醋酸乙酯一二氯甲烷（体积比4：1）萃取,西他列汀作为内标,采用LC．MS／MS法测定。色谱柱为Agilent Eclipse plus C18（4．6mm×150Mm,3．5μm）,以甲醇-水（体积比95：5,含0．005mol／L甲酸铵和质量分数0．1％甲酸）为流动相,流速为0．5mL／min,柱温为40℃;质谱条件采用ESI离子源,检测方式为正离子电离,多重反应监测（MRM）,用于定量分析的离子反应分别为m／z316．2→180．2（沙格列汀）与m／z 408．1→235．1（西他列汀）。结果沙格列汀在0．5—100μg／L（r2=0．998）范围内线性良好,其平均回收率在79．24％以上,日内、日间精密度分别小于8．30％与12．92％（次低浓度点）。结论本试验建立的沙格列汀血药浓度的测定方法简便、快速、准确、灵敏,可用于临床研究中沙格列汀的药动学研究。     

LC-MS/MS法定量测定人血浆中普罗布考的浓度

目的：建立一种特异、灵敏的液质联用方法定量测定人体血浆中普罗布考的浓度。方法：在25.0μL含待测药物的血浆中加入内标Pr-1312及萃取液混匀沉淀蛋白。采用X-Terra RPC（82.1mm×50mm,3.5μm）色谱柱;柱温50℃;流动相为10mmol·L-1碳酸氢铵水溶液-乙腈（20：80）;进样量5μL;流速0.2mL·min-1。质谱检测方式为ESI-,MRM扫描,监测普罗布考m/z515.3→236.1,内标Pr-1312m/z382.2→161.0,分析时间3.3min。结果：普罗布考在10.0～5000.0ng·mL-1的浓度范围内线性关系良好（r〉0.99）,日内与日间精密度（RSD）〈10.2%,准确度（RE）〈±15.0%。所有稳定性考察项目结果均符合要求。结论：本文采用蛋白沉淀样品前处理以及液质联用定量测定人体血浆中普罗布考的浓度方法,能够满足临床试验中生物样品分析的需要。