通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及miR-210表达的影响北大核心CSCD

目的探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植治疗对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达的影响。方法将70只♂Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型,以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组,造模大鼠随机分成6组:模型组、通心络组、西洛他唑组、干细胞组、通心络联合干细胞组、西洛他唑联合干细胞组,分别给予治疗干预28 d后麻醉,腹主动脉取血,离心取上清,酶联免疫吸附测定VEGF-A和HIF-1α;大鼠缺血肢肌组织分别采用Western blot检测VEGF-A和VEGF-R2蛋白表达和RT-PCR检测VEGF-A基因表达。结果检测结果显示:与对照组比较,模型组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各用药组VEGF-A、VEGF-R2和mi R-210表达均明显升高(P<0.01),其中通心络联合干细胞组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达高于通心络组、西洛他唑组及干细胞组(P<0.05,P<0.01)。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可能通过调节HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达,促进内皮细胞增殖、分化,促进新生血管形成。     

通心络超微粉对缺血性脑卒中大鼠微血管新生影响的实验研究

目的探讨通心络超微粉对缺血性脑卒中大鼠微血管新生及相关因子的影响。方法利用开颅结扎法阻断大鼠一侧大脑中动脉制作局灶性脑缺血模型(MCAO),筛选后随机分为假手术组、模型组、通心络大、中、小剂量组、尼莫地平组,给药14 d后,免疫组化方法测定MCAO大鼠微血管密度(CD31)、血管内皮生长因子(VEGF)表达,ELISA放射免疫方法和硝酸还原酶法检测血清VEGF、一氧化氮(NO)的水平。结果通心络大、中剂量组、尼莫地平组CD31蛋白阳性分布密集且着色明显,均强于模型组;通心络大剂量组VEGF表达明显加强,优于模型组。通心络大、中剂量组大鼠血清NO水平明显提高优于模型组(P<0.05,P<0.01),且通心络大剂量组优于通心络中剂量组(P<0.05);通心络大剂量组大鼠血清VEGF水平明显提高优于模型组(P<0.01),通心络大剂量组优于通心络小剂量组和尼莫地平组(P<0.05,P<0.01)。结论通心络能够明显增加缺血侧脑组织微血管密度,促进血管生长因子VEGF、NO表达,具有促进微血管新生的作用。     

通心络联合外周血间充质干细胞移植对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及miR-210表达的影响

目的探讨通心络联合外周血间充质干细胞移植治疗对糖尿病足大鼠血管新生HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达的影响。方法将70只♂Sprague-Dawley大鼠进行高脂喂养联合链脲佐菌素注射建立糖尿病大鼠模型,成模大鼠结扎右下肢股动、静脉制造糖尿病足模型,以同批次正常大鼠复制下肢缺血模型为对照组,造模大鼠随机分成6组:模型组、通心络组、西洛他唑组、干细胞组、通心络联合干细胞组、西洛他唑联合干细胞组,分别给予治疗干预28 d后麻醉,腹主动脉取血,离心取上清,酶联免疫吸附测定VEGF-A和HIF-1α;大鼠缺血肢肌组织分别采用Western blot检测VEGF-A和VEGF-R2蛋白表达和RT-PCR检测VEGF-A基因表达。结果检测结果显示:与对照组比较,模型组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达明显降低(P<0.01)。与模型组比较,各用药组VEGF-A、VEGF-R2和mi R-210表达均明显升高(P<0.01),其中通心络联合干细胞组VEGF-A、HIF-1α、VEGF-R2和mi R-210表达高于通心络组、西洛他唑组及干细胞组(P<0.05,P<0.01)。结论通心络联合外周血间充质干细胞移植可能通过调节HIF-1/VEGF通路及mi R-210表达,促进内皮细胞增殖、分化,促进新生血管形成。     

HIF-1α和VEGF在高氧暴露早产鼠视网膜的表达及地塞米松的干预效应

目的探讨缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factors-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在高氧暴露早产鼠视网膜的表达规律及地塞米松对HIF-1α和VEGF表达的影响。方法标准SD大鼠的3日龄早产鼠30只随机分为3组,高氧组、干预组、空气组,用免疫组织化学法检测各组早产鼠视网膜HIF-1和VEGF表达水平。结果空气组HIF-1α、VEGF均呈低表达,未见或罕见突破内界膜的内皮细胞核;与空气组相比,高氧组突破内界膜的内皮细胞核明显增多(P<0.001),HIF-1α的表达均显著增加(P<0.001),VEGF表达明显增加(P<0.01),P<0.01;与高氧组相比,干预组突破内界膜的内皮细胞核明显减少(P<0.05);HIF-1α的表达均显著下降(P<0.001),VEGF表达明显降低(P<0.05);视网膜HIF-1α的表达与VEGF的表达、视网膜HIF-1α的表达与突破视网膜内界膜内皮细胞核数、VEGF的表达与突破视网膜内界膜内皮细胞核数均呈正相关(r分别为0.55、0.65、0.46,P分别<0.01、0.01、0.05)。结论高氧暴露早产鼠视网膜内可观察到VEGF和HIF-1α的高表达,地塞米松使高氧暴露早产鼠视网膜H IF-1和VEGF的表达明显下降,突破视网膜内界膜的内皮细胞核数量明显减少,减少新生血管的形成,对高氧性视网膜病有一定的保护作用。     

通心络对Aβ_(1-42)损伤人脑微血管内皮细胞HIF-1α、VEGF表达的干预作用

目的通心络对β淀粉样蛋白片段(Aβ1-42)诱导的人脑微血管内皮细胞中VEGF的分泌及VEGF和HIF-1α蛋白表达的干预作用。方法采用人脑微血管内皮细胞,给予不同剂量的通心络预处理,并用20μmol·L-1的Aβ1-42干预24h诱导细胞损伤,经处理后检测细胞形态的变化、VEGF分泌及VEGF和HIF-1α蛋白的表达。结果Aβ1-42可诱导人脑微血管内皮细胞损伤,VEGF分泌减少及VEGF蛋白表达降低,HIF-1α蛋白表达增强,通心络可升高Aβ1-42诱导的VEGF分泌、增强其蛋白的表达,增强HIF-1α蛋白表达,保护内皮细胞。结论通心络可通过HIF-1α途径增强VEGF蛋白的表达,增加上清液中VEGF蛋白的分泌,从而对Aβ1-42损伤的脑微血管内皮细胞起到保护作用。     

阿托伐他汀对心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用

目的探讨阿托伐他汀保护心肌细胞缺氧/复氧损伤的机制,为临床防治缺血再灌注损伤寻找新思路。方法分离SD乳鼠(出生1～3d)心肌细胞进行原代培养,建立H/R模型,取培养第3d的心肌细胞随机分成3组:正常对照组(CON组)、H/R组、H/R+ATV组。应用MTS法检测心肌细胞的存活率;化学发光免疫分析法检测心肌细胞特异性损伤指标肌钙蛋白I(cTnI)的含量;采用SYBR GREEN荧光定量PCR检测各组HIF-1α、VEGF mRNA表达水平。结果与CON组比较,H/R组心肌细胞存活率明显降低(P<0.05),血清肌钙蛋白I明显升高(P<0.05),HIF-1α和VEGF mRNA表达水平显著升高(P<0.05);用阿托伐他汀预处理后心肌细胞存活率明显升高(P<0.05),血清肌钙蛋白I明显降低(P<0.05),HIF-1α和VEGF mRNA表达水平进一步升高(P<0.05)。结论阿托伐他汀可能通过上调HIF-1α及VEGF的表达水平进而保护缺氧/复氧损伤的心肌细胞。     

肺癌患者癌组织及血清缺氧诱导因子-1α表达分析的临床价值

目的 检测肺癌患者癌组织及血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达水平并分析其临床价值。方法 选取2012年1月至2015年2月该院收治的肺癌患者115例作为肺癌组,选取同期住院肺部感染的肺炎患者30例作为肺炎组、健康体检者30例作为健康对照组。收集115例肺癌患者术后癌及癌旁组织标本,提取总RNA分析组织核酸代谢水平;采用组织芯片和免疫组织化学法分析HIF-1α表达状态与胞内分布;采用酶联免疫吸附试验法定量检测血清HIF-1α及血管内皮生长因子(VEGF)水平。结果肺癌组患者血清HIF-1α水平[(138.3±28.8)μg/L]明显高于健康对照组[(24.1±3.3)μg/L]和肺炎组[(58.8±14.5)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.01),且与血清VEGF水平呈显著正相关(r=0.937,P<0.01);肺癌总RNA质量分数[(1.52±1.14)μg/mg]显著高于癌周组织[(0.58±0.33)μg/mg],差异有统计学意义(t=8.494,P<0.01);不同性别、肿瘤直径、分化程度及有无淋巴结转移患者肺癌组织HIF-1α表达阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论肺癌组织HIF-1α表达与组织核酸代谢水平和血管形成密切相关,且有助于肺癌的诊断与鉴别。     

通心络对实验家兔血清OX-LDL的影响

目的通过构建家兔主动脉粥样硬化(AS)模型,观察通心络对血清氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)的影响。方法应用胆固醇、高脂灌胃法制作兔AS模型,实验设正常组、模型组和药物组(通心络),采用酶联免疫法测定3组血清OX-LDL的含量。结果实验开始前3组OX-LDL水平无显著差异(P>0.05)。正常组OX-LDL水平在整个实验过程中无明显变化。模型组OX-LDL水平随着时间的推移逐渐增高。药物(通心络)组OX-LDL水平在第5、10周时高于正常组,且明显低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.01)。实验结束(第10周)时,药物(通心络)组OX-LDL水平与第5周时比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论通心络可降低血清OX-LDL的浓度,通心络可增加粥样斑块稳定性,延缓动脉粥样硬化的进程。     

膀胱癌组织HIF-1α与Survivin、Bcl-2表达的关系和意义

目的探讨膀胱癌组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、生存素(Survivin)、Bcl-2的表达关系和临床意义。方法对68例膀胱移行细胞癌组织和20例正常膀胱组织石蜡标本进行免疫组化(SP)染色,检测HIF-1α与Survivin、Bcl-2的表达情况。结果膀胱癌组织中HIF-1α、Survivin、Bcl-2与正常膀胱组织相比均明显增强(P<0.05);3种蛋白质表达随病理分级、分期的升高而升高(P<0.05);复发膀胱癌组织中HIF-1α、Survivin表达较初发膀胱癌组织增强(P<0.05);相关分析显示,HIF-1α与Survivin、HIF-1α与Bcl-2表达均存在正相关关系(r=0.4486,0.3428,0.2016,P<0.05)。结论 HIF-1α在膀胱癌组织中表达增强,且随肿瘤进展表达进一步升高;其机制在于HIF-1α可能通过调节Survivin、Bcl-2表达而增强膀胱癌细胞的抗凋亡能力促进膀胱癌进展。     

乳腺癌组织中ING4、HIF-1α和HIF-2α表达及与肿瘤微血管新生的关系

目的 探讨乳腺癌组织中生长抑制因子4(ING4)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和缺氧诱导因子-2α(HIF-2α)表达及与肿瘤微血管新生的关系.方法 选取择期行手术治疗的乳腺癌病人107例,利用实时荧光定量PCR技术检测乳腺癌和癌旁组织中HIF-1α、HIF-2α、ING4和血管内皮生长因子(VEGF)基因表达,免疫组化染色检测乳腺癌和癌旁组织中微血管密度(MVD).结果 乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均高于癌旁组织,而ING4 mRNA 相对表达量低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);HIF-1α mRNA相对表达量与淋巴结转移有关(P<0.05),HIF-2α mRNA相对表达量与肿瘤大小、淋巴结转移有关(P<0.05),ING4 mRNA相对表达量与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);乳腺癌组织中VEGF mRNA相对表达量和MVD计数均高于癌旁组织,均差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关分析显示,乳腺癌组织中HIF-1α mRNA、HIF-2α mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈正相关(r=0.382、0.417和0.408、0.491,P<0.05),ING4 mRNA相对表达量均与VEGF mRNA相对表达量和MVD计数呈负相关(r=-0.395、-0.502,P<0.05).结论 乳腺癌组织中HIF-1α、HIF-2α基因表达升高,而ING4基因则被抑制,可能共同参与了乳腺癌组织中血管新生.     

链霉素及H7对机械牵张离体心肌HIF-1α、VEGF的影响及机制探讨

目的研究链霉素及H7对机械牵张大鼠心肌组织低氧诱导分子-1α和血管内皮细胞生长因子表达的影响,并探讨二者在其中的作用机制。方法采用大鼠离体灌流心脏模型,膨胀左心室30min,RT-PCR法检测左室心肌细胞HIF-1α、VEGF mRNA的表达,免疫组化观察二者在心肌细胞中定位,Western blot检测HIF-1α蛋白的表达,利用链霉素作为牵张敏感离子通道(SACs)阻断剂研究SACs和PKC抑制剂H7在其中的可能作用。结果与不牵张组HIF-1α和VEGF mRNA无表达的比较,牵张可以明显增加HIF-1α和VEGF mRNA的表达(P<0·05或P<0·01);而链霉素、H7可以明显减少HIF-1α和VEGF mRNA的表达(P<0·05);但是二者不能完全抑制急性牵张刺激激活的HIF-1α和VEGF mRNA水平升高(P<0·05),HIF-1α和VEGF在胞质和胞核中均有表达,并检测到HIF-1α蛋白表达。结论链霉素、H7对膨胀左室致HIF-1α、VEGF表达有明显抑制作用,提示心室膨胀经SACs-PKC-激活胞内信号诱导HIF-1α、VEGF表达。同时链霉素并不能完全抑制HIF-1α、VEGF表达,提示膨胀心室致HIF-1α、VEGF表达进而引起心室肥厚尚有其他传导途径,仍需进一步研究。     

无机活性元素对大鼠慢性溃疡组织乏氧诱导因子-1α及细胞因子的影响及机制

目的检测无机活性元素(德莫林)对大鼠皮肤慢性溃疡组织的影响,并对其作用机制进行分析。方法制备SD大鼠慢性溃疡模型,实验组应用无机活性元素,对照组常规消毒换药,另设空白组。观察3组溃疡的愈合时间。应用RT-PCR技术对3组溃疡组织乏氧诱导因子(HIF)-1α、表皮细胞生长因子(EGF)、碱性成纤维细胞因子(bFGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达进行检测,并对其差异进行比较分析。结果与对照组比较,实验组创面面积缩小更为明显(P<0.05);实验组、对照组的HIF-1α、EGF、bFGF和VEGF表达均明显高于正常皮肤(P<0.05),实验组EGF、bFGF和VEGF表达高于对照组,而HIF-1α表达低于对照组(P<0.05)。结论无机活性元素对慢性溃疡的治疗效果优于传统换药方法,其机制与该药物能促进EGF、bFGF和VEGF表达、抑制HIF-1α表达有关。     

常山酮对高原肺动脉高压模型大鼠心肺功能的影响及其机制研究

目的 探讨常山酮（HF）对高原肺动脉高压（HAPH）模型大鼠心肺功能的影响及其机制。方法 根据随机数字表法从50只雄性SD大鼠中抽取40只,分为模型组和低、中、高剂量组,每组10只,于低压低氧舱中模拟海拔6 000 m高原环境构建HAPH大鼠模型;另10只作为对照组于舱外喂养。低、中、高剂量组予HF（给药剂量分别为0.5、1、2 mg/kg）,模型组和对照组予等量蒸馏水,每天灌胃1次,连续4周。测定各组大鼠平均肺动脉压（mPAP）,计算右心室肥厚指数（RVHI）,苏木精-伊红（HE）染色评定肺血管重塑程度,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测大鼠血清和肺组织低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子（VEGF）、内皮素-1(ET-1)水平。结果 与对照组比较,模型组mPAP和RVHI均明显升高（P<0.05）,肺小动脉管壁明显增厚、管腔狭窄,血清和肺组织HIF-1α、VEGF、ET-1水平均明显升高（P<0.05）;与模型组比较,低、中、高剂量组mPAP和RVHI均明显降低（P<0.05）,中、高剂量组肺血管重塑程度均显著减轻,血清和肺组织HIF-1α、VEG...     

Targeting MALAT1 and miRNA-181a-5p for the intervention of acute lung injury/acute respiratory distress syndrome

探讨大补肺汤通过调控HIF-1α/NLRP3信号通路及相关分子的表达,从而对高原低氧大鼠急性肺损伤的干预作用。

SPF级SD大鼠60只随机分为空白组,模型组,阳性药物组,大补肺汤高、中、低剂量组,每组10只。适应性饲养3 d后给药,空白组和模型组大鼠灌胃给予等量生理盐水;大补肺汤高、中、低剂量组分别连续灌胃大补肺汤14 d;阳性药物组给予地塞米松,腹腔注射,进舱前连续给药3 d。除空白组外,第15天起各组大鼠于实验动物低压模拟舱中进行低氧暴露,连续3 d。最后,检测大鼠肺组织湿干重比(wet to dry ratio,W/D);HE染色法观察大鼠肺组织形态;ELISA法检测血清中IL-1β、IL-18的水平;Western blotting与RT-qPCR法分别检测大鼠肺组织中HIF-1α、NLRP3、GSDMD、caspase-1蛋白和mRNA表达。

W/D值结果表明,与空白组相比,模型组大鼠W/D显著升高(P<0.01);与模型组相比,阳性药物组及大补肺汤高、中、低剂量组大鼠W/D显著降低(P<0.01或P<0.05)。HE结果显示,与空白组相比,模型组大鼠肺组织可见肺泡间隔增厚,肺间质充血、水肿,炎性细胞浸润,肺泡腔内可见少量渗出;与模型组相比,阳性药组及大补肺汤高、中、低剂量组肺泡壁增厚减轻,肺间质充血、水肿及炎性细胞浸润明显减轻。ELISA结果显示大鼠血清中IL-1β、IL-18水平在模型组中均显著高于空白组(P<0.01);与模型组相比,阳性药组及大补肺汤高、中、低剂量组血清中IL-1β、IL-18水平均显著下降(P<0.05或P<0.01)。此外,Western blotting与RT-qPCR结果显示,与空白组相比,模型组大鼠肺组织HIF-1α、NLRP3、GSDMD和caspase-1蛋白及mRNA相对表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,阳性药组及大补肺汤高剂量肺组织HIF-1α、NLRP3、caspase-1、GSDMD蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.05或P<0.01),大补肺汤中剂量肺组织HIF-1α、NLRP3、caspase-1、GSDMD蛋白表达显著降低且HIF-1α、caspase-1 mRNA表达降低(P<0.05),大补肺汤低剂量肺组织HIF-1α、GSDMD蛋白表达降低(P<0.05)。阳性药物组及大补肺汤高剂量组作用效果更显著。

大补肺汤可调控HIF-1α/NLRP3信号通路,抑制细胞焦亡、减轻炎症反应,对高原低氧大鼠急性肺损伤具有一定的保护作用。

     

阿帕替尼联合SOX方案对晚期胃癌患者疗效的影响

目的 探究阿帕替尼联合替吉奥联合奥沙利铂(SOX)方案对晚期胃癌患者疗效、血常规、血清低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平的影响。方法 前瞻性选取2018年1月—2019年1月在内蒙古包钢医院接受诊治的96例晚期胃癌患者作为研究对象,采用随机数字表法简单随机分为2组,对照组(48例)予SOX方案治疗,观察组(48例)在对照组的基础上予阿帕替尼治疗,21 d为1个周期,均治疗2个周期。比较2组患者疗效,治疗前后血常规、血清HIF-1α和VEGF水平以及治疗期间不良反应发生情况。结果 观察组无疾病进展生存时间和总生存时间的平均值以及中位数均高于对照组(P<0.05)。重复测量方差分析显示时点效应、治疗方式、时点和治疗方式的交互效应均可以显著改变白细胞、血红蛋白、血小板、HIF-1α、VEGF水平(P<0.05);且观察组治疗后白细胞、血红蛋白、血小板、HIF-1α和VEGF水平降低程度较对照组明显(P<0.05)。观察组药物治疗期间Ⅰ~Ⅳ度和Ⅲ~Ⅳ度高血压、口腔溃疡、乏力、手足皮肤反应、神经毒性、白细胞减少和血小板减少的发生率与对照组比较,差异无统计学意义。结论 阿帕替尼联合SOX化疗方案可显著延长晚期胃癌患者生存期,降低血清HIF-1α及VEGF水平,安全性较高,但会对血小板、白细胞和血红蛋白等血常规指标造成一定的影响。     

低氧诱导因子-1α对脓毒症肠黏膜屏障的保护作用

目的:探讨低氧诱导因子-1α(HIF-1α)对脓毒症肠黏膜屏障的影响及机制。方法:SD大鼠随机分4组:假手术组、脓毒症组、脓毒症+HIF-1α刺激剂组(脓毒症+DMOG组)、脓毒症+HIF-1α抑制剂组(脓毒症+Bay87-2243组),每组6只。采用盲肠结扎穿孔(cecal ligation and perforation,CLP)建立脓毒症模型。ELISA检测大鼠血浆炎性标记物IL-1β、IL-6、TNF-α,氧化应激标记物丙二醛(MDA)以及抗氧化因子超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的水平。Western blot检测大鼠肠黏膜HIF-1α表达。HE染色检测肠黏膜病理学损伤。结果:与假手术组相比,脓毒症大鼠炎症因子、氧化应激因子以及HIF-1α显著上调(P<0.05);给予腹腔注射DMOG明显降低脓毒症大鼠血浆IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平(P<0.05);增加血浆SOD、CAT水平(P<0.05);HIF-1α表达上调(P<0.05),肠黏膜病理损伤减轻,Chiu's评分显著降低(P<0.05)。口服灌胃Bay87-2243则得到相反的结果。结论:HIF-1α对脓毒症肠黏膜损伤具有保护作用,其机制可能与缓解脓毒症炎性反应和抑制氧化应激水平有关。     

沙利度胺对单侧输尿管梗阻后大鼠肾间质纤维化的影响

目的研究沙利度胺(Thd)对单侧输尿管梗阻(UUO)后大鼠肾间质纤维化的作用。方法 48只SD大鼠随机均分为四组,每组12只:假手术组(Sham组)、UUO模型组(UUO组)、Thd200mg.kg-1.d-1治疗组(Thd组)和洛丁新10mg.kg-1.d-1治疗组(Lot组)。术后7、14d取血检测肾功能,Masson染色观察肾间质病变,免疫组织化学和RT-PCR检测肾组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)、Ⅰ型胶原(ColⅠ)及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。结果与Sham组比较,UUO组血尿素氮和肌酐水平、肾间质纤维化程度以及HIF-1α、α-SMA、ColⅠ蛋白及mRNA表达均明显增加(P<0.01);Thd组上述各观察指标均较UUO组减少(P<0.01);除HIF-1α表达外,Lot组其余指标均较UUO组下降(P<0.01),且与Thd组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Thd可改善肾功能,并可能通过下调HIF-1α表达而抑制肾小管上皮细胞转分化和肾间质细胞外基质积聚,进而发挥肾保护作用。     

rhG-CSF对新生鼠缺氧缺血性脑损伤HIF-1α表达的影响

目的：探讨重组人粒细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF）对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马区及皮质HIF-1α（hypoxiainducible factor 1α）表达的影响。方法：将7日龄新生Wistar大鼠随机分成假手术组,HIBD组和rhG-CSF治疗组。在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气缺氧2.5h制备HIBD模型。应用免疫组织化学法检测HIF-1α。结果：免疫组化结果显示：在新生大鼠大脑皮层和海马区,HIBD组较假手术组HIF-1α表达明显增加（P〈0.01）,治疗组较HIBD组HIF-1α表达明显增加（P〈0.01）。结论：缺氧缺血性脑损伤后,脑组织HIF-1α表达增加,可能与促进血管形成及抑制神经细胞凋亡有关。rhG-CSF可能通过调节HIF-1α的表达,减少神经细胞凋亡,增强脑组织对缺氧的耐受,从而改善缺氧缺血性脑损伤小鼠的预后。     

黄地安消胶囊调控磷脂酰基醇3-激酶/蛋白激酶B信号通路减轻GK大鼠血管病变损伤程度的研究

目的 探讨黄地安消胶囊治疗2型糖尿病(T2DM)血管病变的作用机制.方法 选取符合T2DM模型的GK大鼠按随机数字表法随机分为模型组、参芪降糖颗粒组、二甲双胍组、黄地安消胶囊高、中、低剂量组,另取Wistar大鼠为健康组,每组10只.通过在GK大鼠饮用水中加入0.1 g·L-1 Nω-硝基L精氨酸甲酯(L-NAME)联合高脂饲料喂养的方法复制T2DM血管病变大鼠模型.造模同时给药,每天1次,连续给药6周.实验结束后,测定大鼠的空腹血糖(FBG),血清生化指标总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HLDL)、低密度脂蛋白(LDL)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL);通过苏木精-伊红(HE)染色法、马松三色染色法、Verhoeff铁苏木精弹力纤维染色法观察腹主动脉血管纤维化程度;采用RT-qPCR技术检测GK大鼠腹主动脉中磷脂酰基醇3-激酶(PI3K)、抑癌基因(PTEN)、假性蛋白激酶3(TRIB3)、蛋白激酶B(PKB/Akt)缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达情况.结果 与健康组比较,模型组大鼠腹主动脉病理组织损伤程度明显增加,糖脂代谢水平、PI3K、Akt、HIF-1α、VEGF mRNA表达增加(P<0.05或P<0.01),PTEN、TRIB3 mRNA表达降低(P<0.01).与模型组比较,黄地安消胶囊高剂量组(12.00 g·kg-1)、中剂量组(6.00 g·kg-1)不仅可改善GK大鼠腹主动脉病理组织学损伤程度,明显降低糖脂代谢、PI3K、Akt、HIF-1α、VEGF mRNA表达水平(P<0.05或P<0.01),还可升高PTEN,TRIB3 mRNA表达水平(P<0.01),其中模型组、黄地安消胶囊高剂量组、中剂量组的PTEN mRNA表达水平分别为(0.42±0.22)、(0.70±0.12)、(0.55±0.08),TRIB3 mRNA表达水平分别为(0.43±0.07)、(0.75±0.16)、(0.55±0.04).结论 黄地安消胶囊对T2DM血管病变具有一定的治疗作用,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路、改善糖脂代谢有关.     

HIF-1α在肾缺血-再灌注损伤及高压氧、丹参酮Ⅱ_A治疗中的表达及意义

目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肾缺血-再灌注损伤及其治疗中的表达及意义。方法:选用Wistar大鼠84只,随机分为空白对照组、缺血组、缺血-再灌注组(1,3,5 h)、高压氧组(1,3,5 h)、丹参酮ⅡA组(1,3,5 h)及假手术组(1,3,5h)。空白对照组和缺血组及其余各组的每一时间点各6只。各组均先切除右肾,取左肾研究。取左肾部分皮髓质用4%的多聚甲醛固定并制作蜡块,行石蜡切片免疫组化检测各组肾HIF-1α蛋白的表达,另一部分提取总RNA,采用荧光定量PCR检测各组肾HIF-1αmRNA的表达。取肾后通过下腔静脉采血,检测MDA、TNF-α、Urea及Scr。结果:(1)Urea、HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达分别在假手术组5,3,1 h增高与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)Urea、Scr、MDA、TNF-α在缺血-再灌注组(1,3,5 h)增高与空白对照组、缺血组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。HIF-1αmRNA在缺血组呈高表达,缺血-再灌注组呈低表达,HIF-1α蛋白在缺血组和缺血-再灌注组均呈高表达。(3)经高压氧、丹参酮ⅡA治疗后,Urea、Scr、MDA、TNF-α降低,HIF-1αmRNA增高,与缺血-再灌注组比较,差异有统计学意义(P<0.05),HIF-1α蛋白的表达经丹参酮ⅡA治疗后降低,差异有统计学意义(P<0.05),而经高压氧治疗后变化不明显,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)手术本身的创伤对BUN的含量和HIF-1α的表达有影响。(2)HIF-1α在肾缺血-再灌注损伤中其基因的表达水平与蛋白的表达水平不同步。肾缺血-再灌注后,MDA和TNF-α含量增高以及肾组织中HIF-1α蛋白的过度表达是加重肾功能损害的重要原因。(3)抑制再灌注后氧自由基和致炎因子的产生是丹参酮ⅡA和高压氧产生肾保护效应的共同通路。丹参酮ⅡA对肾组织中HIF-1α蛋白的表达具有明显的抑制作用,这可能是肾缺血-再灌注后丹参酮ⅡA产生肾保护效应的另一重要机制。而高压氧对肾组织中HIF-1α蛋白的表达无明显的抑制作用,表明再灌注后高压氧可能没有通过HIF-1α环节发挥肾保护作用。