维生素C减轻失血性休克引起的大鼠肺树突细胞聚集及肺损伤

目的 探讨失血性休克对大鼠肺组织树突细胞聚集及肺损伤的影响,以及维生素C的保护作用.方法 SD大鼠(6～7周龄)42只,按数字随机法随机分为对照组、失血性休克2h、6h、24 h组及失血性休克+维生素C2h、6h、24 h组等7组,每组各6只.以股动脉放血法建立大鼠失血性休克模型.免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织树突细胞特异性细胞间粘附分子非整合素蛋白-3(DC-SIGN)表达情况.同时检测肺TNF-α、IL-6含量,髓过氧化物酶(MPO)活性,并进行肺损伤评分.结果 对照组肺中DC-SIGN蛋白表达很少,失血性休克组表达显著升高(P＜0.05),失血性休克后2h肺DC-SIGNmRNA含量就开始增高,休克后24 h仍呈升高趋势.失血性休克组大鼠肺TNF-α、IL-6 mRNA水平升高(P＜0.05),MPO活性增加(P＜0.05),病理损伤显著加重(P＜0.05).失血性休克大鼠在复苏前给予维生素C干预后,上述现象均减轻(P＜0.05).结论 失血性休克可能通过促进肺组织树突细胞聚集引起急性肺损伤.维生素C对这一过程有抑制作用.     

输注不同贮存时间红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤的影响

目的观察输注不同贮存时间的红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤的影响。方法清洁级健康雄性新西兰家兔48只,6月龄,体重2～2.5 kg,采用随机数字表法分为六组:假手术组(S组)、内毒素休克组(ES组)、内毒素休克+输注贮存1 d红细胞组(R_0组)、内毒素休克+输注贮存1周红细胞组(R_1组)、内毒素休克+输注贮存2周红细胞组(R_2组)和内毒素休克+输注贮存3周红细胞组(R_3组),每组8只。实验前1 d从家兔耳中央动脉采集15%的血容量模拟家兔失血状态。次日ES组、R_0组、R_1组、R_2组和R_3组经耳缘静脉注入脂多糖(LPS)5 mg/kg制备内毒素休克模型,S组静注等量生理盐水。2 h后,S组和ES组给予适量的复方乳酸钠,维持MAP65 mmHg, R_0组、R_1组、R_2组和R_3组分别输注不同贮存时间的红细胞,输注量为8 ml,为家兔血容量的5%,输血后继续输注适量的复方乳酸钠,维持MAP65 mmHg。采用ELISA法测定血浆IL-1β、IL-8、TNF-α的浓度。处死家兔后取肺组织,采用HE染色法观察肺组织病理变化、肺损伤评分,测定肺湿/干重比值(W/D);检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性和氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与S组比较,ES组、R_0组、R_1组、R_2组和R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P0.05)。与ES组比较,R_0组、R_1组、R_2组和R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显降低,肺损伤评分、W/D明显减小,肺组织MDA含量明显减少,MPO活性明显降低,SOD活性明显升高(P0.05)。与R_0组比较,R_1组和R_2组血浆IL-8浓度明显升高,R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,R_1组、R_2组和R_3组肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P0.05)。与R_1组比较,R_2组血浆IL-8浓度明显升高,R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,R_1组和R_2组肺损伤评分明显升高,肺组织MDA含量明显增加,SOD活性明显降低(P0.05)。与R_2组比较,R_3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P0.05)。结论输注不同贮存时间的红细胞均可改善内毒素休克家兔急性肺损伤,贮存时间不超过2周的红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤治疗效果更佳。     

骨髓间充质干细胞移植对急性肺损伤大鼠血浆TNF-α、IL-6水平的影响

目的：探讨骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对急性肺损伤大鼠血浆TNF-α及IL-6水平的影响。方法：采用内毒素攻击法建立大鼠急性肺损伤模型,经静脉移植体外扩增培养的异体成年大鼠骨髓MSCs,检测伤后2h、4h、6h大鼠血浆TNF-α及IL-6水平的变化及对肺组织病理改变。结果：与单纯损伤组相比,MSCs移植能降低内毒素肺损伤大鼠血浆TNF-α及IL-6水平,降低肺湿/干重比值、髓过氧化酶(MPO)活性,减轻肺泡炎症损伤。结论：骨髓MSCs移植对急性肺损伤大鼠具有保护作用。     

免疫吸附与大孔树脂吸附清除循环TNF-α对内毒素休克保护作用的比较

比较亲和免疫吸附与大孔树脂吸附清除循环TNF-α对内毒素休克动物的保护作用。方法 以新西兰白兔为实验动物,复制内毒素休克模型,分别通过免疫吸附与大孔树脂吸附清除循环TNF-α,观察血浆TNF-α的动态变化、清除效率以及对存活率的影响。结果 免疫吸附较大孔树脂吸附清除效率高,血浆TNF-α水平明显降低,成活率显著提高。结论 免疫吸附治疗内毒素休克较大孔树脂吸附更有效。     

盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时NF-κB活性的影响

目的 探讨盐酸戊乙奎醚预先给药对失血性休克大鼠急性肺损伤时NF-κB活性的影响.方法 健康成年Wistar大鼠24只,体重200～250 g,雌雄不限,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、失血性休克致急性肺损伤组(ALI组)和盐酸戊乙奎醚预先给药组(P组).S组仅行动、静脉穿刺,不制备急性肺损伤模型;ALI组和P组经右侧颈内动脉穿刺置管监测BP,左侧股动脉置管放血,通过放血和回输血液维持BP 35～45 mm Hg 1 h,然后回输全部失血及等同于失血量的生理盐水,制备急性肺损伤模型;P组于放血前即刻静脉注射盐酸戊乙奎醚2 mg/kg. 于模型制备成功后6 h,采集右侧股动脉血样行血气分析,采用ELISA法测定右心房血浆TNF-α浓度,计算肺湿干重比,采用免疫组织化学法检测右肺组织NF-κB p65的表达,光镜下观察肺组织病理学.结果 与S组比较,Au组和P组PaO2降低,PaCO2、肺湿干重比、TNF-α浓度升高,NF-κB p65表达上调(P<0.05);与ALI组相比,P组PaO2升高,PaCO2、肺湿干重比、TNF-α浓度降低,NF-κB p65表达下调(P<0.05).病理结果显示:P组肺组织损伤较ALI组明显减轻.结论 盐酸戊乙奎醚预先给药可通过降低肺组织NF-κB的活性抑制炎性反应,从而减轻失血性休克诱发大鼠的急性肺损伤.     

高原失血性休克大鼠相关急性肺损伤病变及发病机制

目的探讨高原失血性休克相关急性肺损伤(acute lung injury,ALI)病变及发病机制。方法雄性Wistar大鼠72只,体重280~320g,随机分为六组:假手术组(Sham组)、休克15min组(HS15组)、休克30min组(HS30组)、休克45min组(HS45组)、休克60min组(HS60组)和休克90min组(HS90组),每组12只。建立高原大鼠失血性休克模型后,Sham组麻醉置管后不予失血,仅观察90min即刻处死,其余五组分别按照15、30、45、60和90min观察终止时间窗维持于休克状态。光镜下观察肺组织病理变化,测定肺湿/干重比(W/D)、计算肺通透指数,同时测定肺组织髓过氧化物酶(MPO)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)的活性和丙二醛(MDA)的浓度,采用ELISA法检测肺组织中TNF-α和IL-10的浓度。采用免疫组化法检测肺组织中claudin-3和claudin-4的表达和分布。结果与Sham组比较,休克造成不同程度的肺损伤,且与休克维持时间成正比。在休克15~30min,大鼠肺组织W/D、肺通透指数、MPO、MDA、TNF-α、T-SOD和IL-10的变化甚微,在此之后,随着时间的延长,肺W/D、肺通透指数、MPO活性、MDA浓度和TNF-α浓度明显升高,同时伴随SOD活性和IL-10浓度的明显下降(P0.05)。claudin-3和claudin-4在肺上皮细胞和内皮细胞处的表达明显错位并减少(P0.05)。结论高原环境下,遭受失血性休克的大鼠血流动力学在短时间代偿后,病变呈现螺旋式恶化。且随着休克的延续,大鼠体内炎性/抗炎、氧化/抗氧化稳态失衡,导致肺上皮细胞内claudin-3和claudin-4流失,呈现出急性肺损伤的表现。     

肿瘤坏死因子单克隆抗体在严重脓毒性休克中的应用

本文报道一种被称为CB 0006的α肿瘤坏死因子(TNF-α)单抗对严重脓毒性休克的初步临床试验结果。 CB 0006是鼠抗人重组TNF-α的单克隆抗体,可中和TNF-α的细胞毒性,阻断TNF-α     

体外循环中抗肿瘤坏死因子抗体的肺保护作用

目的 探讨抗肿瘤坏死因子抗体(TNF-α Ab)对体外循环(CPB)肺损伤的保护作用。方法 选择CPB瓣膜置换病人20例，随机分为对照组和用药组各10例。用药组于CPB前和主动脉开放后即刻经气管插管注入TNF-αAb。测定两组围CPB期肺动态顺应性，左、右心房血中性粒细胞计数、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量等指标。结果 用药组CPB后各时点肺动态顺应性显著高于对照组；TNF—αAb明显抑制肺源性TNF(COB)-α的释放及中性粒细胞在肺内的聚集。结论 预防性应用TNF-αAb对体外循环肺损伤有明显的保护作用。     

盐酸戊乙奎醚对大鼠失血性休克致急性肺损伤肺组织CD40和CD40L表达的影响

目的观察盐酸戊乙奎醚对大鼠失血性休克致急性肺损伤肺组织CD40和CD40L表达的影响,探讨盐酸戊乙奎醚的肺保护作用机制及对预后的影响。方法选取健康成年大鼠40只,随机均分为对照组(S组),失血性休克模型组(A组),P1组、P2组、P3组分别于放血前即刻、放血完成后即刻、再灌注前即刻给予盐酸戊乙奎醚2mg/kg。除S组外其他组动物制作失血性休克再灌注急性肺损伤模型。采用免疫组织化学检测肺组织CD40、CD40L的表达,采用ELISA法检测血浆TNF-α、IL-10含量,用HE染色观察肺组织的病理改变。结果 A组肺组织明显增大,肺叶表面有散在的大小不等的红色斑点,切面可见粉红色液体渗出,镜下见肺泡壁增厚,肺间质水肿,肺泡腔内有大量的红细胞渗出及中性粒细胞浸润,病理形态证实急性肺损伤模型建立成功。P1组、P2组和P3组肺组织的炎症病理改变较A组减轻,炎性细胞浸润减少,S组肺组织形态正常。A组、P1组、P2组和P3组W/D明显大于、CD40和CD40L表达明显高于S组(P0.05)。而P1组、P2组和P3组W/D明显小于、CD40和CD40L表达明显低于A组(P0.05)。P1组、P2组W/D明显小于、CD40和CD40L表达明显低于P3组(P0.05),P1组、P2组差异无统计学意义。A组、P1组、P2组和P3组TNF-α、IL-10含量明显高于S组(P0.05),P1组、P2组和P3组TNF-α、IL-10含量明显低于A组(P0.05),P1和P2组TNF-α、IL-10含量明显低于P3组(P0.05),P1组和P2组差异无统计学意义。结论盐酸戊乙奎醚抑制大鼠失血性休克复苏肺组织CD40、CD40L的表达,进一步降低TNF-α、IL-10的合成和表达,从而减轻肺损伤,具有一定的肺保护作用。并且,早期给予盐酸戊乙奎醚对预后改善明显。     

格尔德霉素对肿瘤坏死因子诱导的PC-3M细胞中c-FLIP表达上调的影响

目的:探讨热休克蛋白90抑制剂格尔德霉素(Geldanamycin,GA)对TNF-α诱导的前列腺肿瘤细胞PC-3M中白介素-1β转换酶抑制蛋白(c-FLIP)上调的影响及意义。方法:分别用TNF-α和GA TNF-α处理PC-3M细胞,用免疫细胞化学法测c-FLIP蛋白水平表达差异,采用RT-PCR测c-FLIP mRNA水平的表达差异。结果:使用TNF-α处理6小时后PC-3M细胞c-FLIP在蛋白及mRNA表达水平明显上调,而使用热休克蛋白90抑制剂GA预处理18小时后,能明显抑制TNF-α诱导的c-FLIP表达上调。结论:热休克蛋白90抑制剂能有效抑制TNF诱导的c-FLIP表达上调。     

TNF-α McAb对急性失血性休克大鼠肝脏的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)在急性失血性休克大鼠肝损伤中的作用及TNF-α单克隆抗体的保护作用。方法将24只雄性SD大鼠随机均分为三组:对照组(A组)、休克+乳酸林格氏液复苏组(B组)和休克+TNF-α单克隆抗体复苏组(C组)。B和C组大鼠通过股动脉放血,制作急性失血性休克动物模型;B组用乳酸林格氏液复苏,C组用含TNF-α单克隆抗体(3mg/kg)的乳酸林格氏液复苏,而A组在同等条件下不进行失血。分别检测各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、TNF-α水平和肝组织中MDA、SOD含量,并在光镜和电镜下观察各组大鼠肝组织的病理变化。结果 B、C组大鼠血清ALT、AST、TNF-α水平和肝组织中MDA含量较A组升高,SOD含量降低;C组ALT(343.63±35.61)U/L、AST(748.75±49.76)U/L、TNF-α(99.38±13.16)pg/mL、丙二醛(26.33±1.30)nmol/mgProt较B组ALT、AST、TNF-α、MDA含量降低,C组肝组织中SOD含量(510.14±47.44)U/mgProt较B组升高;在光镜、电镜下观察,C组肝组织损伤较B组减轻。结论 TNF-α可能是急性失血性休克肝损伤的重要因子之一,使用TNF-αMcAb复苏可以减轻失血性休克时大鼠肝损伤,具有一定的保护作用。     

失血性低血容量休克多器官功能障碍综合征的机制探讨

目的探讨失血性低血容量休克病人血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1（IL-1）水平与预后的关系。方法应用ELISA法检测29例失血性低血容量休克病人（休克组）血清TNF-α和IL-1浓度，与20例择期手术病人（对照组）进行比较，观察TNF-α和IL-1水平与多器官功能障碍综合征（MODS）的关系。结果休克组全身炎症反应综合征（SIRS）、MODS和感染的发病率明显高于对照组（P〈0．05）；休克组血清TNF-α和IL-1浓度明显高于对照组（P〈0．05）；MODS组血清TNF-α浓度较非MODS组明显升高（P〈0．05），血清IL-1浓度差异无显著性（P〉0．05）；休克组中死亡病人血清TNF-α浓度较存活病人明显增高（P〈0．05），血清IL-1浓度差异无显著性（P〉0．05）。结论失血性低血容量性休克发生SIRS是较为常见的，并且是导致MODS的重要原因之一；血清TNF-α浓度的高低与预后密切相关。     

抗肿瘤坏死因子抗体减轻体外循环的肺损伤的实验研究

目的 探讨气管内给予抗肿瘤坏死因子抗体(TNF-αAb)对体外循环(CPB)肺损伤的保护作用及机制.方法 选取健康家兔28只,随机分为单纯开胸组、单纯CPB组、CPB+经气管插管注入生理盐水组和CPB+TNF-αAb组(术前和主动脉开放后经气管插管注入抗兔TNF-α Ab,总量2 400 pg/kg).测定各组围CPB期左、右心房血液中中性粒细胞计数、肿瘤坏死因子(TNF-α)和丙二醛(MDA)的含量;取肺组织样本,电镜观察其超微结构,并观察肺组织含水量、TNF-α mRNA和TNF-α蛋白的表达及细胞凋亡情况.结果 TNF-α Ab明显抑制CPB期间中性粒细胞在肺内的聚集,抑制肺源性TNF-α的释放,减少脂质过氧化物的终产物MDA的产生.同时,TNF-αAb还可降低肺含水量,减少肺组织细胞凋亡的发生,且肺组织病理形态学改变较轻,但并未从转录水平及蛋白水平上减少TNF-α的分泌.结论 气管内应用TNF-α Ab能明显减轻体外循环肺损伤.     

大鼠供肝冷缺血时间与肝移植术后受者肺损伤的关系

目的 探讨大鼠供肝冷保存时间与肝移植术后受者肺损伤的关系。方法 用Wismr大鼠建立原位肝移植模型，按供肝冷保存时间的不同分为5组（n=10），A组为假手术组，B组、C组、D组及E组的供肝冷保存时间分别为45min、90min、120min及180min。各组大鼠在移植肝恢复血流180min后处死，观察肺组织病理学变化，测定肺组织湿干重比值（W／D）、肺组织中髓过氧化氢酶（MPO）的活性，同时检测肝脏流出道血清肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素18（IL-1β）的水平以及肺组织中TNF-α和IL-1β的表达。结果随着供肝冷保存时间的延长，肝脏流出道血清TNF-α和IL-1β水平及肺组织中TNF-α和IL-1β的表达均逐渐升高，肺组织W／D和MPO活性逐渐增高，肺损伤加重。结论供肝冷缺血时间与肝移植术后受者肺损伤相关，肺损伤随供肝冷缺血时间的延长而加重；血清中TNF-α和IL-1β升高及肺组织中TNF-α和IL-1β表达上调可能与肝移植后的肺损伤有关。     

地塞米松对内毒素性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞丝裂原激活的蛋白激酶磷酸酶-1表达的影响

目的 探讨地塞米松(dexamethason,DEX)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)中丝裂原激活的蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)的影响,以及AM中MKP-1表达在内毒素性肺损伤中的可能作用.方法 大鼠尾静脉注射内毒素建立急性肺损伤模型.Western blot法检测肺巨噬细胞的p38MAPK,磷酸化p38MAPK,MKP-1含量变化;ELISA法检测细胞培养上滴液中TNF-α,IL-6的含量改变.结果 脂多糖可使细胞培养上滴液中,TNF-α和IL-6的表达增加(P<0.05),DEX可以部分逆转上述作用(P<0.05).且可诱导内毒素肺损伤模型AM中MKP-1表达增加(P<0.05).结论 脂多糖促进TWF-α和IL-6的表达,可能是急性肺损伤肺内炎症损害的启动和促进因素;DEX可能通过抑制TNF-α和1L-6的表达并且增加AM中MKP-1的含量,进而抑制p38MAPK,发挥抗炎作用.     

高容量血液滤过对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响

目的评价高容量血液滤过(HVHF)治疗肢体缺血再灌注后肺损伤的疗效。方法16只大鼠随机分为A组(对照组)、B组(治疗组)每组8只,建立肺损伤模型后对照组应用Diapact CRRT机假治疗,治疗组则行HVHF。测定循环血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平及行病理检查。结果与A组比较,B组血中TNF-α、IL-6水平降低,肺炎症改变好转。结论HVHF能减少ALI大鼠循环血中炎症介质TNF-α、IL-6含量,可能成为治疗ALI的新手段。     

抗肿瘤坏死因子α抗体对体外循环肺损伤的保护作用

目的探讨气管内给予抗肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体对体外循环(CPB)中肺损伤的保护作用和机制.方法选择心瓣膜置换术患者20例,用随机抽样法分成两组,每组10例.用药组:于术前和主动脉开放后经气管内插管注入抗TNF-α抗体(1.2μg/kg)2次;对照组:常规CPB手术.测定两组围术期肺动态顺应性和氧合指数,气管内插管时间,同时测定左右心房血液中中性粒细胞计数,TNF-α和丙二醛(MDA)的含量.结果 CPB结束和CPB后各时点肺动态顺应性和氧合指数用药组显著高于对照组(P＜0.01),用药组气管内插管时间比对照组短(P＜0.01),抗TNF-α抗体明显抑制中性粒细胞在肺内的聚集,抑制肺源性TNF -α的释放,减少MDA产生.结论气管内应用抗TNF-α抗体能减轻CPB导致的肺损伤.     

抗肿瘤坏死因子抗体减轻体外循环的肺损伤

目的探讨气管内给予抗肿瘤坏死因子抗体（TNF-α Ab）对体外循环（CPB）肺损伤的保护作用及机制。方法选取健康家兔28只，随机分为单纯开胸组、单纯CPB组、CPB＋经气管插管注入生理盐水组和CPB＋TNF-α Ab组（术前和主动脉开放后经气管插管注入抗兔TNF-α Ab，总量2400pg／ks）。测定各组围CPB期左、右心房血液中中性粒细胞计数、肿瘤坏死因子（TNF-α）和丙二醛（MDA）的含量；取肺组织样本，电镜观察其超微结构，并观察肺组织含水量、TNF-α mRNA和TNF-α蛋白的表达及细胞凋亡情况。结果TNF-α Ab明显抑制CPB期间中性粒细胞在肺内的聚集，抑制肺源性TNF-α的释放，减少脂质过氧化物的终产物MDA的产生。同时，TNF-α Ab还可降低肺含水量，减少肺组织细胞凋亡的发生，且肺组织病理形态学改变较轻，但并未从转录水平及蛋白水平上减少TNF-α的分泌。结论气管内应用TNF-α Ab能明显减轻体外循环肺损伤。     

TNF—α介导酸误吸引起的急性肺损伤

目的:研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在急性肺损伤中的作用并探讨新疗法。方法:用0.1N的盐酸复制家兔误吸模型。20只动物被分为盐酸实验组和维生素C、维拉帕米两个治疗组,以测定血浆TNF-α和丙二醛(MDA)水平并计数肺组织多形核中性白细胞(PMN)。结果:误吸后血浆TNF-α和MDA水平升高,肺组织PMN数增多,维拉帕米和大剂量维生素C对此有抑制作用并能减轻肺的损伤。结论:TNF-α对PMN具有诱导作用,维拉帕米和大剂量维生素C对误吸有一定疗效。     

高氧液对严重烧伤休克期羊淋巴循环TNF-α、IL-6、IL-8水平的影响

目的：研究高氧液对严重烫伤休克期羊淋巴循环TNF-α、IL-6、IL-8水平的影响。方法：将20只成年雌性羊随机分为2组,A高氧液组（10只）和B对照组（10只）,2组均造成30%TBSAⅢ度烧伤,分别输入高氧液和平衡盐液,经股前淋巴管插管收集淋巴液,用放射免疫分析法检测伤后6、24、48h淋巴液TNF-α、IL-6、IL-8水平的变化,同时测定血氧饱和度（SaO2）。结果：烧伤休克期A组各时相点淋巴液TNF-α、IL-6、IL-8水平显著低于B组。A组SaO2明显高于B组。结论：高氧液对严重烧伤休克期羊淋巴循环有改善作用,降低淋巴液中TNF-α、IL-6、IL-8的水平。