Decreased expression and clinical significance of miR-148a in hepatocellular carcinoma tissues

Background

Aberrant expression of microRNA-148a (miR-148a) has been reported in several types of malignancies. However, its expression and clinicopathological significance in hepatocellular carcinoma (HCC) has not been entirely clarified. Our objective was to investigate the clinicopathological contribution of the miR-148a expression in HCC formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissues.

Methods

Eighty-nine HCC and their para-cancerous liver tissues were recruited. Total mRNA including miRNA was isolated and miR-148a expression was determined by using real time RT-qPCR. Furthermore, the relationship between the miR-148a level and clinicopathological features was explored.

Results

Significantly lower miR-148a expression in HCC tissues was observed than that in adjacent noncancerous hepatic tissues. miR-148a expression was also correlated to clinical TNM stage, metastasis, status of capsular infiltration and numbers of tumor nodes.

Conclusions

Underexpression of miR-148a might be associated with HCC tumorigenesis and deterioration of HCC. miR-148a might act as a suppressor miRNA of HCC and it therefore has a potential role in prognosis of HCC patients.     

miR-146a在食管鳞癌中的表达及意义

目的： 分析食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma, ESCC)组织中miR-146a的表达情况及其与食管鳞癌临床病理特征之间的关系。方法： 采用茎环结构的逆转录实时定量PCR方法检测50例ESCC患者癌组织及癌旁正常组织中miR-146a的表达情况,并分析其与临床病理特征间的关系。结果： miR 146a在癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织（Z=-3.162;P<0.01）;miR-146a的高表达分别与食管癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期显著相关（P<0.01）。结论： miR-146a的高表达在ESCC的发生发展中发挥重要作用。     

miR-146a在乳腺浸润性导管癌中的表达及临床意义

目的观察microRNA-146a（miR-146a）在乳腺浸润性导管癌及癌旁正常对照组织中的表达,探讨miR-146a的表达与乳腺癌临床病理特征的关系及其对乳腺癌发生发展的影响。方法采用组织芯片平台,应用原位杂交方法检测65例乳腺浸润导管癌及癌旁正常对照组织中miR-146a的表达。结果乳腺浸润性导管癌miR-146a阳性率低于癌旁正常对照组织（44.6%vs 66.2%,P〈0.05）;乳腺浸润性导管癌中miR-146a的表达与淋巴结转移有关联（P〈0.01）,与患者年龄、肿瘤大小、组织学分级、TNM分期、ER、PR、c-erbB-2、ki67、p53、E-cadherin过表达均无相关性（P〉0.05）。结论 miR-146a在乳腺浸润性导管癌中表达下调,提示其可能作为重要的抑癌因子参与乳腺癌的发生发展过程,并可能成为乳腺癌新的肿瘤标记物或预后因子。     

甲状腺乳头状癌组织及外周血中miR-146a含量变化

目的探讨miR-146a含量变化在甲状腺乳头状癌（PTC）发生发展过程中的作用及意义。方法应用荧光定量聚合酶链反应（polymerasechainreaction,PCR）检测43例PTC、36例结节性甲状腺肿组织的miR-146a含量变化及32例PTC、23例结节性甲状腺肿患者外周血的miR-146a含量变化,并根据PTC患者主要临床病理参数进行分析。结果①PTC与结节性甲状腺肿组织中miR-146a相对含量分别为0．0280±0．0131和0．0212±0．0111,差异有统计学意义（P〈0．05）;PTC组织的miR-146a含量变化与患者淋巴结转移、肿瘤分期等临床病理参数有明显关系（P〈0．05）,与患者年龄、肿瘤大小等无关（P〉0．05）。②PTC与结节性甲状腺肿外周血中miR-146a相对含量分别为0．0891±0．0419和0．09224-0．0456,2者差异无统计学意义（P〉0．05）;PTC外周血的miR-146a含量变化与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期等无相关性（P〉0．05）。结论miR-146a在PTC中表达升高,与淋巴结转移、肿瘤分期等临床病理参数有明显关系,多见于进展期,提示miR-146a在PTC的发生发展过程中起-定作用。     

慢性牙周炎患者唾液中miR-146a的表达及临床意义

目的 通过检测慢性牙周炎患者唾液中miR-146a的表达,以探讨miR-146a在慢性牙周炎发病中的作用及意义.方法 选取2012年1月至2013年8月期间第三军医大学西南医院口腔科收治的48例慢性牙周炎患者(其中男性28例,女性20例,平均年龄42岁).同时选择20名性别、年龄匹配的健康志愿者作为对照组.采用实时荧光定量PCR技术检测上述人员唾液上清中miR-146a的表达水平.对治疗组患者(32例)进行牙周基础治疗,分别记录治疗前和治疗6周后患者的探诊深度(probing depth,PD)、临床附着丧失(attachment loss,AL)及菌斑指数(plaque index,PLI),并检测治疗后唾液上清液标本中miR-146a的表达.结果 慢性牙周炎患者唾液上清液中miR-146a的表达水平(2.52±0.87)显著高于健康对照组(0.81±0.58)(P＜0.01).治疗组患者经过治疗后的牙周临床指数、唾液中miR-146a表达水平均显著降低(P＜0.05).唾液中miR-146a水平与PD(r=0.574,P＜0.05)、AL(r =0.629,P＜0.01)及PLI(r=0.758,P＜0.01)均呈正相关.结论 慢性牙周炎患者唾液上清中miR-146a表达水平明显高于正常人,并在牙周基础治疗后显著下降,提示唾液miR-146可作为牙周病防治及疗效评估的潜在靶分子.     

miR-200c在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的 研究miR-200c在肝细胞癌组织中的表达并探讨其临床意义.方法 收集肝细胞癌手术组织标本52例,30例癌旁正常组织作为对照,采用qRT-PCR检测肝细胞癌组织及对照组织中miR-200c的表达情况,分析miR-200c表达水平与肝细胞癌临床病理参数之间的关系.结果 肝细胞癌组织中miR-200c平均表达量明显低于癌旁对照组织,差异具有统计学意义,癌旁对照组织中miR-200c平均表达量约为肝细胞癌的2.90倍.miR-200c的表达水平与肝细胞癌恶性程度、肿瘤分化程度以及AFP表达有关,miR-200c的表达水平与肝细胞癌患者年龄、性别、HBsAg、肿瘤大小、是否合并肝硬化等无关.多元Logistic回归模型分析发现,肿瘤大(OR=2.44,95％CI:1.22～10.36)、血清AFP高(OR=2.39,95％CI:1.78～5.34)、肿瘤分化程度低(OR =3.08,95％CI:2.29～6.03)是肝癌发病的独立危险因素.结论 miR-200c与肝细胞癌的发生、临床进展密切相关,它可能是肝细胞癌新的潜在的治疗靶点及诊断预后分子标志物.     

类风湿关节炎患者外周血miR-146a及miR-16的表达及与病情活动的相关性研究

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中miR-146a及miR-16的表达及与RA病情活动的相关性。方法应用实时荧光定量聚合酶链反应检测RA患者活动组24例、缓解组16例及健康对照16例PBMCs-miR-146a、miR-16的表达水平,并且与RA患者临床指标进行相关性分析。结果 RA患者组miR-146a、miR-16的表达高于健康对照组(P<0.05);在RA活动组与缓解组的比较中发现活动组miR-146a、miR-16表达水平高于缓解组(P<0.05)。RA患者组miR-146a、miR-16的表达与ESR、CRP及DAS28评分之间呈正相关(P均<0.01),与RF无相关性(P>0.05)。结论 RA患者外周血miR-146a和miR-16表达上调,其表达水平与RA病情活动相关,提示miR-146a和miR-16的检测可作为RA病情活动的判断指标。     

miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮患者中的表达

目的通过检测miR-155和miR-146a在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞(PBMC)和血浆中的表达,探讨miR-155和miR-146a的表达在SLE发病中的作用。方法 SLE患者20例,健康对照组15例。取外周血分离PBMC和血浆,提取和纯化miRNA,实时定量PCR检测miR-155和miR-146a的表达,以小分子RNAU6作为内对照,计算标准化后的2-△Ct值表示miRNA的相对表达含量。结果 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a的表达水平是健康对照组的3.07倍(P<0.01)和1.91倍(P=0.056);SLE患者血浆中miR-155和miR-146a的表达水平比对照组低,但差异无统计学意义;同时SLE患者中蛋白尿阳性组血浆中两种miRNAs表达水平有降低的趋势,活动组患者血浆中两种miRNAs表达水平也有降低的趋势,但差异无统计学意义。结论 SLE患者PBMC中miR-155和miR-146a异常高表达,但血浆miR-155和miR-146a的表达水平有下降的趋势。     

慢性乙型肝炎患者体内不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达

目的：通过检测慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)患者不同来源标本中miR-146a和miR-155的表达, 了解不同来源标本中2种miRNAs表达的相关性,为研究miRNA在肝病中的作用机制提供标本选择的理论依据。 方法：采用real-time PCR对41例CHB患者核苷(酸)类似物抗病毒治疗基线期和第104周血浆、外周血单个核细胞和肝 组织中miR-146a和miR-155的表达进行检测,分析3种来源标本中这2种miRNAs表达的相关性。结果：治疗第104周时 血浆、外周血单个核细胞和肝组织miR-146a和miR-155的表达水平均较基线期显著下调(P<0.05)。基线期血浆和肝组 织(r=0.560,P=0.007)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.428,P=0.047)miR-146a的表达均相关。基线期血浆和肝组织 (r=0.587,P=0.004)、外周血单个核细胞和肝组织(r=0.483,P=0.023)miR-155的表达相关,miR-146a和miR-155在血浆中 的表达与外周血单个核细胞中的表达不相关(P>0.05)。结论：与外周血单个核细胞相比,血浆中miR-146a和miR-155的 表达能更好地反映和预测肝组织miR-146a和miR-155的表达,血浆可作为研究miR-146a和miR-155在肝病中作用机制的 标本来源。     

肾透明细胞癌患者肿瘤组织中CD146 mRNA的表达及意义

目的探讨肾透明细胞癌( CCRCC)患者肿瘤组织中CD146 mRNA的表达及意义。方法用ELISA法定量检测CD146蛋白含量及Real-Time PCR技术检测102例CCRCC患者肿瘤组织中CD146 mRNA的表达,并以51例肾脏良性病变患者手术正常肾组织作为对照。结果发现存在转移的CCRCC患者, CD146蛋白浓度与对照组比较差异有统计学意义(F =52.1,P <0.01),CD146 mRNA 的平均表达值(0.0438±0.0024)明显高于原位CCRCC患者(0.0382±0.0011,P=0.018)和对照组患者(0.0344±0.0010,P=0.001)。结论 CD146 mRNA表达上调与CCRCC的病理分级及淋巴结转移相关,有望成为评判CCRCC恶性程度、转移潜能及预后的一个新指标,为临床的干预性治疗提供可靠±据。     

miR-200a 在结直肠癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨 miR-200a 在结直肠癌组织中的表达及其与结直肠癌临床病理特征之间的关系。方法收集结直肠癌患者手术标本70例,距癌灶边缘5 cm 以上切缘的正常黏膜作为对照。运用原位分子杂交技术检测结直肠癌组织及癌旁组织中 miR-200a 的表达水平,分析其与结直肠癌临床病理参数的关系。结果结直肠癌组织中 miR-200a 的阳性表达率明显高于癌旁正常黏膜（P <0.01）。miR-200a 表达与肿瘤分化程度呈正相关性（r =0.320,P <0.01）,在低分化结直肠癌中的表达低于高中分化结直肠癌的表达（ P <0.01）。但与患者年龄、性别、肿块大小、浸润深度、淋巴结转移及 TNM 分期等无显著相关性。结论 miR-200a 在结直肠癌组织中表达上调,并与肿瘤分化程度相关,提示 miR-200a可能在结直肠癌的发生、发展过程中发挥着重要作用。     

人肝细胞癌中miR-23a和XIAP的表达及意义

目的 探讨miR-23a和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在人肝细胞癌(HCC)中的表达、相互关系及临床病理意义.方法 建立组织微阵列,采用原位分子杂交方法分别检测150例人HCC和136例相对应的癌旁组织中miR-23a的变化;利用免疫组化两步法检测XIAP蛋白和Ki-67蛋白的表达水平.结果 HCC组织和癌旁组织中miR-23a的高表达率分别为48.7%(73/150)和77.2%(105/136),两者差异有统计学意义(P=0.001),XIAP蛋白在HCC和癌旁组织中的高表达率分别为25.3%(38/150)和22.1%(30/136),两者差异无统计学意义;miR-23a高表达率在患者中男性高于女性(P=0.037)、HBsAg阳性高于HBsAg阴性患者(P=0.022)、大肝癌高于小肝癌(P=0.021)、Ⅰ~Ⅱ期高于Ⅲ~Ⅳ期(P=0.002);而XIAP蛋白高表达在患者中小肝癌高于大肝癌(P=0.001)、Ⅰ~Ⅱ期高于Ⅲ~Ⅳ期(P=0.009).此外两者均与患者年龄、是否合并肝硬化、组织学分级无关.经Pearson相关检验,miR-23a和XIAP蛋白在HCC中的表达呈显著负相关性(rs=-0.308,P<0.01).结论 miR-23a和XIAP可能参与HCC的发生与发展.     

微滴数字PCR检测血清miR-21和miR-4429在肝癌诊断中的应用

目的应用微滴数字PCR检测血清中miR-21和miR-4429的水平,并探讨联合AFP检测在诊断肝细胞肝癌中的临床价值。方法收集69例肝癌、47例慢性活动性乙肝以及40例健康体检者血清标本,应用微滴数字PCR检测血清miR-21和miR-4429水平,化学发光法检测血清中AFP水平,并用ROC曲线和Spearman相关进行分析。结果肝癌组患者miR-21水平明显高于健康对照组和慢性活动性乙肝组（均P＜0.05）,miR-4429水平高于健康对照组（P＜0.05）。ROC曲线分析显示：miR-21、miR-4429和AFP3者联合检测的灵敏度（95.0%）、特异度（92.5%）和准确度（92.7%）,较单独检测或两项联合检测有较大提升。miR-21、miR-4429表达与患者年龄、性别、有无HBsAg感染或肝硬化、PLT或AFP水平、TNM分期和疾病状态均无相关性（均P＞0.05）。结论血清miR-21和miR-4429对肝癌的诊断具有良好的灵敏度和特异度,联合AFP检测可以提高诊断的效能。     

新疆妇女宫颈病变组织 miR-146a/133b 的表达及临床意义

目的：探讨miR-146 a/133 b在新疆维、汉民族宫颈组织中的差异性表达及其临床意义。方法采用RT-qPCR法检测 miR-146a/133b 在石蜡包埋的宫颈炎、宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌组织中的相对表达量,分析其在宫颈癌发生、发展中的临床意义。结果与宫颈炎组织比,CIN 和宫颈癌组织 miR-146a/133b 的表达水平显著升高(P <0.05),且随宫颈病变的加重,两者的表达水平逐渐升高,宫颈癌组织中维、汉民族 miR-146a 存在差异性表达(P <0.05)。结婚年龄小于20岁、肿瘤直径大于或等于4 cm、有 HPV 感染的宫颈癌组织中 miR-146a/133b 呈高表达(P <0.05)。结论miR-146a/133b 参与宫颈癌的发生、发展,可能成为宫颈癌病情预测及评估新的分子标志物。     

精氨酸酶2在肝细胞癌组织中的表达及临床病理意义

目的 研究精氨酸酶2(Arg-2)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及临床病理意义.方法 收集113例HCC组织及癌旁肝组织,其中29例伴有癌旁异型增生结节(DN),另取12例正常肝组织.运用蛋白质印迹分析法检测Arg-2蛋白在15例HCC组织、癌旁肝组织和12例正常肝组织中的表达;运用免疫组织化学方法检测Arg-2在113例HCC、癌旁肝组织及DN中的表达情况,并分析其与HCC各临床病理特征间的关系以及鉴别诊断价值.结果 蛋白质印迹分析结果显示,Arg-2在正常肝组织和癌旁肝组织中均不表达,在HCC组织中表达升高(P＜0.01);免疫组织化学结果显示,Arg-2阳性表达于肝癌细胞质内,阳性率为77.0％(87/113),其表达与HCC组织学分级相关(P＜0.05);Arg-2在低级别DN中无表达,在高级别DN中阳性表达率为14.3％(2/14),而在高分化HCC中阳性表达率为66.7％(8/12),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 Arg 2在HCC中高表达,并且与HCC组织学分级相关,其可能参与HCC的发生、发展过程.检测Arg-2表达有助于鉴别高分化HCC与DN.     

miR-149-5p在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的分析miR-149-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法应用qRT-PCR方法检测40对HCC癌组织和癌旁肝组织中miR-149-5p的表达,并分析miR-149-5p的表达与肝癌患者临床病理之间的关系,进一步将以红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)为报告基因的miR-149-5p慢病毒(LV-miR-149-5p)感染MHCC97-H肝癌细胞,以过表达miR-149-5p,采用MTT检测感染后细胞增殖的变化,采用流式细胞仪测定感染后细胞周期的变化,并采用Transwell侵袭实验检测感染后细胞的体外侵袭能力的变化。结果 qRT-PCR结果提示miR-149-5p在HCC癌组织中的相对含量(5.522±1.104)低于癌旁肝组织(9.279±1.594)(P<0.05),统计分析表明miR-149-5p在癌和癌旁肝组织中相对含量的比值与AFP含量负相关(P<0.05)。体外实验证实,miR-149-5p过表达不能影响细胞周期但能抑制细胞增殖(P<0.05),而在Transwell侵袭实验中,LV-miR-149-5p感染MHCC97-H细胞后,对照细胞组透膜细胞数为(86.3±11.8)/视野,对照慢病毒组透膜细胞数为(83.7±4.0)/视野,LV-miR-149-5p组透膜细胞数为(50.6±3.4)/视野,实验组细胞侵袭能力较对照组细胞显著降低(P<0.05)。结论 miR-149-5p的过表达可抑制MHCC97-H细胞的增殖和侵袭,因此,miR-149-5p可作为一种抑癌基因在HCC的诊断及治疗中发挥作用。     

肝细胞肝癌中ZNF146蛋白的表达及意义

目的：探讨锌指蛋白146（ZNF146）在肝细胞肝癌（HCC）癌组织中的表达及其临床意义。方法：收集40例HCC肿瘤组织和癌旁组织,采用逆转录-聚合酶链式反应和免疫组化检测HCC肿瘤组织、癌旁组织ZNF146基因mRNA和蛋白的表达,分析ZNF146表达与临床病理因素的关系。结果：HCC肿瘤组织中ZNF146 mRNA及其蛋白的表达明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（P＜0.05）,在不同分期及不同大小肿瘤中ZNF146表达的差异有统计学意义（P＜0.05）,肿瘤直径≥5 cm、Ⅲ/Ⅳ期肿瘤患者中ZNF146表达明显增加,而在患者年龄、性别、是否有HBsAg感染的不同组别中ZNF146表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：ZNF146在HCC组织中表达增高,可能参与与肿瘤发生和演进,ZNF146有可能是HCC潜在的生物标志物之一。     

凹陷蛋白-1基因在乙型肝炎相关性肝癌中的表达及其意义

目的 探讨候选抑癌基因凹陷蛋白(Caveolin)-1在肝细胞癌(HCC)中的表达及其与HCC侵袭、转移的关系.方法 对123例HCC标本以及MHCC-97L和MHCC-97H肝癌细胞株进行实时荧光PCR法、免疫组化法及Western印迹法检测Caveolin-1 mRNA及蛋白表达,分析其表达与肿瘤侵袭、转移性间的关系.结果 Caveolin-1在肝癌组织中较癌旁组织表达明显下调(P<0.05);HCC 中的表达水平与大/小肝癌(≥5 em或<5 cm)、AFP表达水平、有无大血管侵袭、肿瘤单发或多发及pTNM分期5个因素均呈显著负相关(P<0.05),其在MHCC-97H细胞株中的表达显著低于MHCC-97L(P=0.000);Caveolin-1与HBx表达显著负相关(P=0.044).结论 Caveolin-1表达与HCC侵袭转移密切相关,其表达下调,预示HCC的预后不良;有可能存在HBx蛋白下调Caveolin-1表达的机制.     

肝癌组织miR-146b-5p和miR-134的表达下调及临床意义

目的 探讨微小RNA(miR)-146b-5p和miR-134在肝癌组织中的表达及其临床病理意义.方法 选取2017年6月～2018年12月我院收治的原发性肝癌患者73例,取患者的原发肿瘤组织为观察组,同时选取相对应的癌旁正常组织标本为对照组.采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)检测癌组织和癌旁正常组织中miR-...     

miR-30c减轻肝细胞肝癌的侵袭与转移

目的:观察miR-30c/snail在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达并探讨其在肝癌侵袭中的作用?方法:定量PCR检测肝癌及肝癌细胞系中miR-30c/snail的mRNA表达水平,通过免疫组织化学和Western blot分别检测肝癌及肝癌细胞系中snail的蛋白表达水平,并在肝癌细胞株中转染miR-30c模拟物或抑制物,分析其对肝癌细胞侵袭的作用?结果:与无脉管转移组相比,miR-30c在有脉管转移组的HCC组织中表达明显下调,同时在高转移肝癌细胞株MHCC-97H中也有相似的结果?转染miR-30c模拟物可减少snail的表达,并减少MHCC-97H细胞的侵袭性,然而,转染miR-30c抑制剂则增加snail的蛋白水平,增加HepG2细胞的侵袭力?结论:上调miR-30c的表达通过直接抑制snail,可减弱HCC的侵袭性?一种新的针对miR-30c的治疗策略可能有利于伴侵袭转移的HCC患者?