吸烟与口腔病变

已知吸烟对机体的损害性,其中吸烟与肺癌及冠心病等的关系尤其受到重视。近年来的许多报告也重视吸烟对口腔组织的损害,本文就吸烟与口腔病变的关系加以探讨。对口腔粘膜的影响吸烟刺激能促进口腔粘膜角化。即使在无角化的颊及口底粘膜上皮细胞,持续的吸烟刺激也可导致增厚及产生角蛋白,并出现临床症状。腭粘膜固有的角化细胞则因吸烟而角化更为显著。     

颊癌及转移淋巴结角蛋白谱的分析研究

目的探讨口腔颊黏膜鳞状细胞癌及转移淋巴结角蛋白谱的特点。方法颊部鳞状细胞癌活检标本及转移淋巴结活检标本,提取角蛋白,进行SDS-PAGE电泳和利用免疫印迹(Western Blot)杂交方法研究转移角蛋白谱的表达。结果颊黏膜化鳞状细胞癌中出现了单层角蛋白上皮如CK18、19,而CK10表达缺失;淋巴结转移鳞状细胞癌中出现了单层角蛋白上皮如19等,并且出现了大量角蛋白片段。结论颊黏膜鳞状细胞癌变异性表达CK18、19,不表达CK 10。转移淋巴结和原发鳞状细胞癌的角蛋白谱是不同的,在口腔鳞状细胞癌淋巴结转移过程中,角蛋白谱发生了变化。     

口腔粘膜白斑角蛋白表达的免疫组化研究

口腔白斑是具有恶变倾向的粘膜病变，其恶变潜能取决于发生部位和上皮异常增生的程度，但仅靠常规组织学检查来判断上皮异常增生程度有一定困难。近来的研究表明，口腔上皮的异常增生和分化紊乱往往伴有细胞角蛋白的表达改变。我们采用抗角蛋白单克隆抗体３４ＢＥ１２、ＭＮＦ１１６分别对正常口腔粘膜、单纯白斑和白斑伴上皮异常增生进行免疫组化检测，发现不同类型的口腔粘膜所含的角蛋白组分有一定差异。单纯白斑中角蛋白表达类型与正常粘膜上皮相似，但染色程度增强。白斑伴异常增生时，大分子角蛋白表达减弱，分布不规则，小分子角蛋白表达增强，分布范围增大，随异常增生的程度加重向上皮表层扩展。提示通过对角蛋白组分的检测，可了解病理状态下口腔上皮细胞的增殖情况和分化程度，对区别粘膜上皮单纯增生和癌前病变有辅助性诊断作用。     

颊黏膜中分化鳞状细胞癌角蛋白谱的分析

目的：研究口腔颊黏膜鳞状细胞癌角蛋白谱的特点.方法：颊黏膜中分化鳞状细胞癌活检标本,提取角蛋白,进行SDS-PAGE电泳和利用免疫印迹（Western-blot）杂交方法,研究颊黏膜中分化鳞状细胞癌中角蛋白谱的表达.结果：颊黏膜中分化鳞状细胞癌中出现了单层角蛋白上皮如CK18、19,而CK10表达缺失.结论：变异性表达的CK18、19以及不表达CK10,是颊黏膜中分化鳞状细胞癌的一个较为普遍的现象.     

口腔粘膜癌变过程中细胞角蛋白CK10和CK13的变化

目的：探讨细胞角蛋白ＣＫ１０和ＣＫ１３在口腔粘膜癌变过程的各阶段组织中的分布和表达强度。方法：用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法对口腔正常粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和口腔磷癌切片进行染色,光镜观察。结果：正常颊粘膜和口底舌腹粘膜基底上层ＣＫ１０表达阴性,ＣＫ１３表达强阳性;上皮过度不全角化时,ＣＫ１０表达可为阳性,ＣＫ１３表达减少;上皮过度正角化时,ＣＫ１０在基底上层呈强阳性表达,ＣＫ１３表达进一步减少甚至缺失。随上皮异常增生程度加重,基底上层细胞ＣＫ１０和ＣＫ１３表达减少甚至缺失。在口腔浸润癌中,不管分化程度如何,ＣＫ１３均表达阴性,而ＣＫ１０在分化较好的癌细胞及癌巢中呈阳性表达。结论：ＣＫ１３表达减少或缺失可作为口腔癌前病变诊断的辅助指标,ＣＫ１０可为口腔癌的分化程度及其预后判定提供帮助。     

细胞角蛋白14在牙齿软组织萌出通道中的组织学定位

目的牙齿萌出时,源于成釉器的缩余釉上皮与口腔上皮细胞融合为上皮团形成牙齿的软组织萌出通道,本研究对细胞角蛋白14在这一过程中的表达进行组织学定位,从而探讨其可能作用。方法不同发育期SPF级BALB/c小鼠9只。循环内固定后分别双侧下颌骨10%EDTA脱钙30d,常规脱水包埋,近远中向5μm连续切片,行苏木精-伊红和免疫组化染色。PV免疫组化两步法检测细胞角蛋白14和细胞增殖核抗原在各组织的表达。结果牙齿萌出过程中口腔上皮对细胞角蛋白14呈现时空特异性表达,非牙齿萌出部位的口腔上皮仅基底层阳性表达细胞角蛋白14,而萌出牙齿冠方的口腔上皮阳性表达则较广泛;缩余釉上皮在牙齿萌出过程中始终阳性表达细胞角蛋白14,而且伴随缩余釉上皮和口腔上皮融合的发生,缩余釉上皮的外层细胞和口腔上皮的基底层和基底上层细胞呈现细胞角蛋白14强阳性表达。结论细胞角蛋白14与牙齿萌出软组织通道的形成密切相关,可作为缩余釉上皮相关研究的上皮性标记物。     

细胞角蛋白CK19在口腔粘膜癌变过程中的变化

目的：探讨口腔粘膜癌变过程中CK19的变化。方法：收集正常口腔粘膜、上皮单纯增生、上皮异常增生和口腔鳞癌活检标本共53例，用免疫组化、电泳和Western杂交方法研究上皮中CK19的表达。结果：CK19表达于有上皮异常增生的复层鳞状上层和口腔鳞癌尤其是低分化鳞癌的癌细胞中。随病变程度加重，CK19表达的阳性率，表达强度和占细胞角蛋白构成比显著增加。结论：CK19表达于粘膜上皮的基底上层可作为口腔癌前病变的辅助标志，CK19表达增加是 口腔粘膜病变过程中的早期事件。     

细胞角蛋白10、13、14和19在OLP中的表达研究

目的:研究口腔扁平苔藓(OLP)中细胞角蛋白(CK)的表达变化.方法:采用免疫组化SP法检测7例正常颊黏膜和17例OLP颊部病变中细胞角蛋白的表达部位和强度.结果:在对照组和OLP颊部病变中CK19表达阴性,CK10、CK13表达于复层上皮的基底上层.在对照组中CK14主要表达于基底层,在OLP颊部病变中CK14可扩展至基底上层;与对照组比较OLP中CK10、CK14出现过度表达,而CK13表达下调,有时甚至无表达.结论:OLP中CK表达的转变与OLP病变上皮的异常角化、增殖和分化有关.     

口腔上皮癌变过程中肿瘤抑制基因p53基因产物的表达分析

为了探讨ｐ５３在口腔粘膜上皮癌变过程中的作用，本研究用免疫组织化学方法观察了ｐ５３在口腔颊粘膜上皮的正常（５例）、乳头状瘤（５例）、白斑（５例）、鳞癌（２７例）以及癌旁上皮（１４例）中的表达情况，结果显示，ｐ５３在鳞癌中的表达率为５５．６％；此外发现转移、复发及分化差的鳞癌表达率更高（６６．７％）。在同一病变中分化差的肿瘤细胞阳性率明显高于分化好的细胞。在白斑和癌旁上皮中ｐ５３也有表达（３６．８％）。结果显示，ｐ５３的表达与肿瘤细胞的分化及恶性程度密切相关，在口腔颊粘膜上皮的癌变早期及晚期均有ｐ５３的过表达，此外在癌前病变中的ｐ５３表达将有助于判断其癌变发展的可能。     

细胞角蛋白在口腔扁平苔藓中表达的电泳研究

目的：研究口腔扁平苔藓（OLP）中细胞角蛋白（CK）的表达。方法：采用SDS—PAGE、Westernblot法检测15例OLP颊部病变和正常黏膜中细胞角蛋白的表达情况。结果：OLP组与对照组均出现CK1的表达，OLP组中CK2、CK4、CK5表达降低。结论：①．OLP时上皮分化产生CK1使上皮角化增厚，增强颊黏膜的抵抗性。②．OLP中CK2、CK4、CK5的异常表达分别与OLP的异常角化、基底细胞液化坏死有关。     

人体口腔粘膜上皮细胞体外培养和鉴定

目的 建立稳定的人口腔颊粘膜上皮细胞体外培养方法。方法 取正常人口腔颊粘膜，中性蛋白酶和胰蛋白酶消化后，获取的粘膜上皮细胞接种于10％含胎牛血清培养基中连续培养，探索最适培养条件，进行细胞定性及形态学观察。结果 体外培养细胞中无成纤维细胞混杂，长满后呈上皮细胞特有的铺路石样外观。体外可连续传9～10代，生长期50～60天。细胞角蛋白免疫组化染色阳性，透射电镜下可见上皮细胞间特有的桥粒结构。结论 采用含血清培养基体外连续培养口腔粘膜上皮细胞获得成功，4代以内培养上皮细胞形态结构与原代无差别，可用于组织工程化口腔粘膜构建。     

P21和P185在颊粘膜上皮良性和恶性病变中的表达及意义

采用免疫组化ABC法检测P21和P185在正常颊粘膜上皮，慢性非特异性炎症病变、镤状细胞癌及其癌旁组织中的表达，并进行图像分析，结果显示，P21和P185在鳞癌和部分癌旁组织中的表达明显高于正常颊粘膜上皮和炎症病变，二者具有明显的相关性，提示P21和P18与颊粘膜上皮恶变有相关性。     

Fas抗原在颊粘膜鳞癌中的表达及意义

为探讨Ｆａｓ抗原在颊粘膜鳞癌中的表达分布特点及其相关生物学意义,采用免疫组织化学方法,分别对５例正常颊粘膜、３４例颊粘膜鳞癌进行染色,观察Ｆａｓ抗原表达分布情况。结果发现,颊粘膜上皮生发层中Ｆａｓ抗原间断性弱表达,其它层细胞广泛表达;Ｆａｓ抗原表达与颊炽膜鳞癌的分化程度有关（Ｐ＜０．０１）,高分化颊癌中,Ｆａｓ抗原连续强阳性表达于癌细胞膜,低分化颊癌则呈间断性表达。由此提示,Ｆａｓ抗原不仅与颊粘膜上皮细胞的自然分化成熟衰老有关,而且还可能在颊粘膜鳞癌发生发展过程中参与分化与去分化的调节。     

口腔扁平苔藓中细胞角蛋白19的表达及意义

目的:探讨细胞角蛋白19(keratin 19,CK19)在口腔扁平苔藓(OLP)中的表达以及其病理意义.方法:采用免疫组化法检测17例OLP和14例正常颊黏膜中CK19的表达,采用RT-PCR方法分别在OLP患者和正常人颊黏膜中比较CK19 mRNA的表达.结果:正常颊黏膜中CK19均在基底细胞胞浆内呈强阳性表达,只有5例(29.4%)OLP基底细胞呈弱阳性表达,其余为阴性表达;RT-PCR结果显示在OLP组织中CK19 mRNA表达显著高于正常黏膜(P＜0.05).结论:CK19的表达下调与颊部OLP黏膜上皮更新能力下降密切相关.     

β-防御素2在实验性大鼠牙周炎口腔龈上皮、颊黏膜上皮及腮腺导管上皮的表达

目的:探讨β-防御素2在大鼠牙周炎模型口腔龈上皮、颊黏膜上皮和腮腺导管上皮的表达变化及与牙周炎发展的关系。方法:利用结扎法建立大鼠上颌第一磨牙牙周炎模型并设对照组,于第6周取实验牙及牙周组织、相对颊黏膜和腮腺组织,制备组织切片,免疫组化染色法检测防御素2在口腔龈上皮、颊黏膜上皮、腮腺导管上皮的表达并行免疫组化评分和统计学分析。结果:β-防御素2主要表达于口腔龈上皮和颊黏膜上皮的棘层和颗粒层以及腮腺的导管上皮细胞。在口腔龈上皮的表达为牙周炎组显著低于对照组(P<0.01),在颊黏膜上皮的表达为牙周炎组显著高于对照组(P<0.01),而在腮腺导管上皮的表达牙周炎组和对照组无显著差异。结论:牙周炎症时β-防御素2在口腔龈上皮、颊黏膜上皮和腮腺导管上皮的分布各有不同的变化,提示在牙周炎进展过程中不同部位口腔上皮对牙周化学屏障改变的影响不同。     

人颊粘膜鳞癌细胞株在裸小鼠颊囊粘膜下原位移植及组织病理学和侵袭特性的实验研究

将人颊粘膜鳞状细胞癌细胞株ＢＣａＣＤ８８５细胞移植入裸小鼠颊囊粘膜下，观察原位移植的成瘤、形态学特征（光镜、电镜、免疫组织化学）及其对周围组织的侵袭性。原位移植成瘤所需接种癌细胞量为１．０～２．０×１０６个细胞／０．２ｍｌ，在荷瘤鼠颊部可见肿瘤局部浸润性生长，侵袭颌骨及肌肉组织，未发现淋巴道及血运转移。原位移植瘤的病理学、超微结构及角蛋白表达均与亲代人颊粘膜鳞状细胞癌相似。结果说明：人颊鳞癌细胞株在裸鼠颊囊粘膜下自主生长，其微环境及生物学特征表达较腋下移植更客观地模拟了患者体内的状况。表明移植部位微环境对移植瘤的生长及生物学行为有一定影响。此模型可用于颊癌局部生物学特性及实验治疗的研究。     

单层上皮细胞角蛋白在口腔粘膜癌变过程中的表达

目的：探讨单层上皮细胞角蛋白ＣＫ１８和ＣＫ１９作为口腔癌前病变标志的可能性。方法：用ＬＳＡＢ免疫组化染色方法检测ＣＫ１８和ＣＫ１９在福尔马林固定,石蜡包埋的口腔正常粘膜,上皮单纯增生,轻度上皮导演增生,中度上皮异常增生,重度上皮异常增生和口腔鳞癌组织中的分布和表达强度,光镜观察染色切片,结果用秩和检验分析。     

口腔上皮癌过程中肿瘤抑制基因p53基因产物的表达分析

为了探讨ｐ５３在口腔粘膜上皮癌变过程中的作用本研究用免疫组织化学方法观察了ｐ５３在口腔颊粘膜上皮的正常、乳头状瘤、白斑、鳞癌以及癌旁上皮中的表达情况。结果显示，ｐ５３在鳞癌中的表达率为５５．６％，此外发现转移、复发及分化差的鳞癌表达率更高。     

颊粘膜鳞癌中p27~(Kipl)基因的蛋白质表达及临床意义

目的　分析口腔颊癌癌变过程中 p2 7蛋白表达与临床病理资料及预后的关系 ,阐明 p2 7蛋白检测在颊癌诊断与治疗中的临床意义。方法　回顾性研究 40例颊癌、2 0例白斑及 7例正常颊粘膜 p2 7蛋白表达情况 ,采用 SP法根据染色指标计数 ,并利用 Cox比例风险模型进行生存多因素分析。结果　 p2 7多分布于上皮细胞核和胞浆 ,正常组织和不伴上皮异常增生的白斑表达最强 ,伴上皮异常增生的白斑及颊癌分化较好的强阳性表达较多 ,分化较差的颊癌 p2 7表达最弱 ,甚至不表达。单因素生存分析表明 ,p2 7表达、区域淋巴结和远处转移与生存期显著相关 ,多因素 Cox回归分析表明 p2 7蛋白表达可作为辅助性颊癌预后指标。结论　 p2 7蛋白表达与口腔肿瘤的发生发展有密切关系 ,它与肿瘤的侵袭性生长及预后密切相关 ,可作为一个新的辅助性预后指标     

细胞角蛋白在硬腭粘膜良恶性病变中的表现及意义

选用抗细胞角蛋白单抗ＬＰ３４、ＬＬ００１和ＬＬ０２５分别对硬腭部正常粘膜上皮、乳头状瘤和鳞癌进行了免疫组化观察．结果显示，ＬＰ３４及ＬＬ００１在正常粘膜及乳头状瘤上皮细胞中的表现基本相似，阳性部位主要在棘层和颗粒层；而ＬＬ０２５在乳头状瘤中的表现则比正常粘膜为强烈．对于鳞癌的观察结果显示，鳞癌对于细胞角蛋白的表达均有缺失现象，尤其是分化差的病变．结果表明ＬＰ３４是一种较有效的可用于判断病变恶性程度的抗体，此外可用于进行上皮来源的病变的鉴别诊断，ＬＬ０２５及ＬＬ００１则可用于判断上皮的类型及显示上皮细胞的更新代谢和分化情况．