滴金免疫渗滤法快速诊断肺吸虫病的研究

目的寻找一种快速诊断肺吸虫病的方法.方法以肺吸虫成虫浸出液为抗原,金标抗人IgG为显示剂检测肺吸虫抗体(DIGFA).结果检测肺吸虫病人血清41份,阳性符合率为100%;检测非流行区健康人血清51份,流行区健康人血清30份,阴性符合率100%;检测班氏丝虫病人血清20份,均为阴性;检测日本血吸虫病人血清20份,其中2例呈阳性.用DIGFA与ELISA同时检测肺吸虫病人血清41份,非流行区健康人血清51份及流行区健康人血清30份,两种方法的阳性与阴性符合率均为100%.结论DIGFA检测人体肺吸虫抗体敏感性高,特异性强,检测时无需特定的仪器,操作简便、快速,适于基层单位和现场应用.     

两种试剂盒快速检测斯氏狸殖吸虫抗体的研究

目的观察肺吸虫病金标渗滤试剂盒(DIGFA kit)和酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测斯氏狸殖吸虫抗体的敏感性和特异性。方法采用DIGFA kit和ELISA检测斯氏狸殖吸虫病流行区人群和病鼠血清抗体。结果 DIGFA和ELISA试剂盒检测斯氏狸殖吸虫病流行区人群和病鼠血清特异性抗体阳性率均为5.08%(54/1062)和100%(40/40);用两种试剂盒检测正常大鼠、旋毛虫病大鼠、血吸虫病兔和蛔虫病病人血清,除1例血吸虫病兔血清DIGFA出现阳性反应外,其他血清两种方法均为阴性。大鼠感染斯氏狸殖吸虫后第2周用两种方法检测抗体,阳性率分别为20.00%(8/40)和27.50%(11/40),第4周阳性率均达100%,并持续至第8周。结论 DIGFA试剂盒具有与ELISA试剂盒相同的敏感性和特异性,且有操作快速、简便、直观等特点,适合在基层和斯氏狸殖吸虫病流行地区推广使用。     

双夹心DIGFA检测血吸虫循环抗原的应用研究

以日本血吸虫重组极低密度脂蛋白 ( SVL BP)制备的多抗为捕捉抗体 ,胶体金标记血吸虫虫卵多克隆抗体为覆盖抗体 ,采用双夹心金标免疫渗滤法 ( DIGFA)检测血吸虫病病人血清中循环抗原。结果 70份急性血吸虫病病人血清的阳性率为 10 0 % ,15 9份慢性血吸虫病病人血清的阳性检出率为 6 2 .3% ;12 0份流行区健康人群血清检测均阴性 ;10 0份非流行区健康人群血清 ,2份呈阳性反应 ,假阳性率为 2 %。与肺吸虫病病人血清的交叉反应率为4.0 % ( 1/ 2 5 ) ;与华支睾吸虫病病人血清未见交叉反应。提示该法具有较高的敏感性和特异性 ,判断结果比较客观 ,且简便、快速 ,适合于基层医院及现场应用     

斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫病患者血清抗体的研究

目的　建立一种检测华支睾吸虫病血清抗体的简便、快速、敏感和特异的新方法。方法　以华支睾吸虫成虫抗原为包被抗原 ,金标记葡萄球菌A蛋白 (SPA)为显色剂 ,建立检测华支睾吸虫病患者血清抗体的斑点金免疫渗滤法 (DIGFA) ;并以dot ELISA作平行对照。结果　DIGFA和dot ELISA分别检测 119例华支睾吸虫病患者血清抗体 ,其阳性率分别为 96 6 %和 92 4% ,两法差异无显著性。DIGFA分别检测正常人血清 40例、囊虫病患者血清 2 0例、日本血吸虫病患者血清 2 5例 ,前者均为阴性 ,后两者的交叉反应率分别为 5 %和 4%。DIGFA与dot ELISA两法的符合率达 90 9%。结论　DIGFA的敏感性和特异性与dot ELISA相近 ,且具简便、快速及不需特殊设备等优点 ,是一种检测华支睾吸虫病患者血清抗体的新方法。     

滴金免疫测定法（DIGFA）检测血吸虫抗体的研究

目的建立一种简便、快速、敏感、特异的检测血吸虫抗体的新方法。方法用滴金免疫测定法（DIGFA）检测血吸虫病人血清抗体,并以ELISA作平行对照。结果DIGFA和ELISA的敏感性分别为97．1％和95．7％;特异性分别为99．1％和100％,两法无显著差异（P＞0．05）。62份其它寄生虫感染血清,除肺吸虫1例,ELISA呈阳性反应外,其余均为阴性。结论实验结果不仅显示了DIGFA的敏感性和特异性与ELISA相似,而且具有简便、快速、不需要特殊设备等优点,是一种值得推广应用的检测血吸虫抗体的新方法。     

肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)的研制和应用

目的开发研制简易、快速、经济、准确的肺吸虫病诊断试剂盒。方法以肺吸虫成虫可溶性蛋白为检测用抗原,以胶体金标记羊抗人IgG为探针,采用自行设计的渗滤装置,检测病人血清中肺吸虫特异性IgG抗体;用深圳康百得生物技术有限公司提供的肺吸虫抗体ELISA检测试剂盒作比较。结果用本试剂盒检测90人份肺吸虫病人血清和100人份健康人血清,其敏感性为98.9%(89/90),特异性为100%(100/100),Youden’s指数为0.989。用该试剂盒分别检测25人份血吸虫病和华支睾吸虫病患者血清,交叉反应率为24%(6/25)和4%(1/25);与姜片虫、囊虫、丝虫、肺结核病人血清均未见交叉反应。ELISA检测结果比较,符合率为93.5%,无显著性差异(χ2=0.7949,P>0.05)。结论肺吸虫抗体快速检测试剂盒(金标渗滤法)敏感性高、特异性强,可与ELISA相媲美,且操作更为简便、快速,结果判读容易,不需特殊仪器设备,非常适合临床检验和现场查病。     

滴金免疫渗滤法快速诊断肺吸虫病的研究

目的 寻找一种快速诊断肺吸虫病的方法。方法 以肺吸虫成虫浸出液为抗原，金标抗人IgG为显示剂检测肺吸虫抗体（DIGFA）。结果 检测肺吸虫病人血清41份，阳性符合率为100％；检测非流行区健康人血清51份，流行区健康人血清30份，阴性符合率100％；检测班氏丝虫病人血清20份，均为阴性；检测日本血吸虫病人血清20份，其中2例呈阳性。用DIGFA与ELISA同时检测肺吸虫病人血清41份，非流行区健康人血清51份及流行区健康人血清30份，两种方法的阳性与阴性符合率均为100％。结论 DIGFA检测人体肺吸虫抗体敏感性高，特异性强，检测时无需特定的仪器，操作简便、快速，适于基层单位和现场应用。     

金免疫斑点渗滤法检测日本血吸虫抗体的应用

建立了检测血吸虫病人血清抗体的金免疫斑点渗滤法(DIGFA)。以该法检测107份粪检阳性血吸虫病人血清,阳性率为96.2%。119份健康人血清均为阴性。与常规ELISA对照,符合率达99.1%。显示两法敏感性和特异性相近,但DIGFA操作更为简便快速。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的：评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA－kit)用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法：采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清，非流行区人群血清，疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果：DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96．8％，对非流行区健康人群的特异性为100％，该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35．6％，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97．5％；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4．6％，根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youden's指数为0．926，上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P＞0．05），结论：DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便，快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

抗旋毛虫肌肉期幼虫排泄分泌物中46-58kDa蛋白IgM和IgG抗体的研究

目的寻求简便、快速、可靠的方法,用于旋毛虫病的诊断及疗效考核。方法建立检测抗旋毛虫肌肉期幼虫排泄分泌物(TsL1-ES)中46-58kDa蛋白抗体的斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),并对患者在治疗前和治疗后血清中特异抗体水平的动态变化进行研究。结果旋毛虫病患者治疗前血清中特异IgM和IgG抗体的检出率分别为94.83%(55/58)和91.38%(53/58);正常人血清(100份)、囊虫病(25份)、血吸虫病(20份)、肺吸虫病(20份)及蛔虫病(22份)病人血清均未检出该两类特异性抗体。52例两类抗体均阳性的旋毛虫病患者经有效药物治疗后3个月、6个月、1年、1.5年连续采血,经DIGFA检测连续观察的结果表明,IgM抗体出现较早,阴转较为明显和迅速,治疗后3月的阴转率达46.15%(24/52),1年的阴转率可达88.46%(46/52);而IgG抗体则出现较晚,阴转缓慢,治疗后1.5年的阴转率仅为23.08%(12/52)。结论DIGFA为检测抗TsL1-ES中46-58kDa蛋白抗体的有效方法,检测IgM抗体可用于诊断及疗效考核,而IgG抗体的检测不宜用来判断疗效。     

金标免疫渗滤法(DIGFA)快速检测血吸虫循环抗原的研究

目的　建立一种简便、快速的血吸虫病诊断方法。方法　在已建立的检测血吸虫抗体的ＤＩＧＦＡ基础上,以抗血吸虫重组蛋白ＳＶＬＢＰ多抗为捕捉抗体,金标抗ＳＥＡ多抗为覆盖抗体,建立快速检测病人血清中血吸虫循环抗原的双夹心ＤＩＧＦＡ。结果　用该法检测了急性血吸病人血清３０ 人份和慢性血吸病人血清３８ 人份,其阳性检出率分别为１００ ％ 和５２－６ ％ ;１２０ 人份流行区健康人血清全为阴性;１００ 人份非流行区健康人群血清的阴性符合率为１００％ ,与１０ 例华支睾病人血清无交叉反应;１５ 例肺吸虫病人血清有１ 例阳性,交叉反应率为６－７ ％ ;与双夹心ＥＬＩＳＡ的符合率为９７－４％ ,经χ２ 检验表明两法检测效果无显著性差异。结论　用ＤＩＧＦＡ检测血吸虫循环抗原具有较高的敏感性和特异性,并且方法简便、快速、不需特殊仪器设备,有广阔的应用前景。     

胶体金免疫渗滤法快速检测幽门螺杆菌血清抗体的研究和应用

目的建立一种简便、快速、准确的检测胃幽门螺杆菌(H.pylori)抗体的新型血清学诊断方法。方法用胶体金标记技术与渗滤法相结合,建立了快速胶体金免疫渗滤法(DIGFA),与ELISA对比检测145份H.pylori感染血清,并与病理学检查对比检测108份H.pylori血清。做阻断试验和IgG标准品最小蛋白含量的检出观察,对其敏感性、特异性做了分析并调查了216例不同年龄组的人群感染率。结果本法与ELISA相比,两者符合率为95.1％;与病理组织染色检查比较,两者符合率为88.8％。DIGFA可检出IgG标准品的最小蛋白量为10μg     

滴金免疫测定法用于检测囊虫病患者循环抗原的研究

目的　建立一种敏感、快速、简便的囊虫病诊断方法。方法　应用两株抗猪囊尾蚴囊液抗原的单克隆抗体(McAb) ,一株滴于硝酸纤维素膜上 ,另一株与胶体金结合为探针 ,建立了检测囊虫病患者血清中循环抗原 (CA)的滴金免疫测定法 ,抗原、抗体通过渗滤在膜上进行反应 ,10min内即可用肉眼观察结果。对不同稀释度的猪囊尾蚴囊液抗原进行检测 ,确定本法的最低抗原检出量 (0 .4 5ng/ml)。将本法与ELISA作了比较。 结果　对 78例囊虫病患者血清进行检测 ,循环抗原阳性率为 87.18%。其中活动型脑囊虫病患者 5 2例 ,循环抗原阳性率为 98.0 8% ;非活动型脑囊虫病患者 2 0例 ,循环抗原阳性率为 6 5 .0 0 % ;单纯皮肌型囊虫病患者 6例 ,循环抗原阳性率为 6 6 .6 7%。 4 0份健康人血清仅有 1例 (2 .5 0 % )出现假阳性 ,与10例华支睾吸虫病患者血清、15例血吸虫病患者血清及 2 3例非囊虫病的脑部疾病患者血清均无交叉反应。该方法检出最低猪囊尾蚴囊液抗原量为 0 .4 5ng/ml。本法与ELISA的符合率为 98.19%。结论　DIGFA简便、快速 ,结果客观 ,对囊虫病特别是活动型脑囊虫病敏感性高 ,特异性强 ,值得进一步推广应用。     

曼氏裂头蚴可溶性抗原DIGFA法快速检测特异性抗体的潜在诊断价值

目的 探索曼氏裂头蚴可溶性抗原金标免疫渗滤法快速检测曼氏裂头蚴特异性抗体的免疫诊断价值。方法 从自然感染的青蛙中分离出曼氏裂头蚴，经口感染小鼠；于感染后第7周剖杀小鼠，收集鼠血清和虫体并计数。以曼氏裂头蚴可溶性抗原（PsA）为探针建立PsA—DIGFA，分别检测曼氏裂头蚴感染小鼠、健康小鼠、健康人群及其他寄生虫感染者血清中特异性抗体，并与常规ELISA法进行平行检测和比较。结果 DIGFA法检测感染小鼠血清中特异性抗体的敏感性为100％（49／49）、特异性为100％（30／30），与ELISA法检测结果相同；不同虫荷数感染鼠间抗体水平差异无显著性（P〉0．05），感染鼠与正常鼠之间抗体水平差异有显著性（P〈0．01）。PSA—DIGFA检测健康人群血清100人份均为阴性，检测囊虫、包虫、旋毛虫、肺吸虫、华支睾吸虫病病人血清的阳性率分别为42．5％（17／40）、10．0％（2／20）、20．0％（5／25），80．0％（8／10）、8．0％（2／25）。结论 用曼氏裂头蚴粗抗原检测感染动物血清中特异性抗体具有较好的敏感性和特异性，但与其他蠕虫感染存在较高的交叉反应。不同虫荷数感染鼠均产生较高水平抗体，组间差异无显著性。DIGFA法与ELISA法检测的敏感性和特异性相同，但前者更为简便、快速，无需特殊仪器设备，可单份检测，适合寄生虫病的临床检验和流行病学调查。若能进一步纯化检测用抗原，减少与其他蠕虫间的交叉反应，有潜在的应用价值。     

双抗体夹心斑点金免疫渗滤法检测血吸虫循环抗原的现场应用

目的 探讨双抗体夹心斑点金免疫渗滤法（S－DIGFA）在现场的应用价值。方法 在原已建立的以抗26kDaGST基因重组蛋白多克隆抗体为捕获抗体兼测示抗体的S－DIGFA的基础上，应用该法检测血吸虫病中度流行区和传播阻断地区人群的血清共1388份，并以双抗体夹心ELISA（S－ELISA）作对照。结果 用S－DIGFA和S－ELISA平行检测血吸虫病中度流行区人群血清300份，阳性检出率分别为15．7％和17．3％；两法检测血吸虫病传播阻断地区人群血清1088份，阳性检出率分别为3．9％和3．7％。结论 S－DIGFA检测循环抗原可在现场扩大和作血清流行病学调查。     

Evaluation on the applied value of the dot immunogold filtration assay (DIGFA) for rapid detection of anti-Schistosoma japonicum antibody

The dot immunogold filtration assay (DIGFA) is a rapid technique for the detection of anti-Schistosoma japonicum antibody. Its sensitivity with regard to sera obtained from patients with acute or chronic schistosomiasis was shown to be 100 and 96.9%, respectively. The specificity when using sera of people living in an area non-endemic for schistosomiasis japonica was 100%. Cross-reaction rates for paragonimiasis and clonorchiasis patients were 14.3% and 0%, respectively. Parallel serum tests of 1091 residents from an area endemic for S. japonicum by means of DIGFA, enzyme-linked immunosorbent assay and indirect haemagglutination test resulted in positive rates of 9.3%, 11.5% and 11.0%, respectively. Thus, there was a high level of agreement between the sets of results (P>0.05). In conclusion, DIGFA holds considerable promise for rapid and accurate diagnosis of S. japonicum, as it does not require any specific instruments and can be applied with ease. DIGFA has therefore several advantages over conventional diagnostic approaches and is useful not only for screening and sero-epidemiological surveys in the field, but also in clinical settings.     

二种抗原检测结核分枝杆菌抗体的临床意义评价

目的　评价两种抗原检测结核分枝杆菌抗体对结核病诊断的意义。方法　以结核分枝杆菌多肽 (TB4 )和脂阿拉伯甘露糖 (LAM )为抗原 ,斑点金免疫渗滤法为检测方法对 78例临床确诊为肺TB的病人血清、15例气管炎患者血清和 5 0例正常人血清进行抗体测定 ,观察这些抗原诊断结核病的敏感性、特异性。结果　两种抗原检测结核抗体的敏感性分别为84 6 % (6 6 / 78)和 73 1% (5 7/ 78) ;特异性分别达 92 3% (6 0 / 6 5 )和 95 4 % (6 2 / 6 5 ) ,与痰涂片的符合率为 84 8%和 81 8%。各指标比较 ,经 χ2 检验表明 ,差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论　提示TB4是一种敏感性高 ,特异性强的抗原 ,可用于临床查病和血清流行病学调查。     

快速检测抗日本血吸虫抗体的金标免疫渗滤法的建立及应用

以血吸虫虫卵浸出液为抗原，金标记兔抗人ＩｇＧ为显示剂，建立了检测抗血吸虫抗体的金标免疫渗滤法（ＤＩＧＦＡ）。以该法检测血吸虫病患者血清８７份，阳性检出率为９８．９％；非流行区血清１００份，阴性符合率为１００％；１５例肺吸虫病患者血清，１例出现阳性反应，交叉反应率为６．７％；１０例华支睾吸虫病患者和２５例乙型肝炎患者，均无交叉反应。本法与ＥＬＩＳＡ比较，符合率达９６．７％。揭示ＤＩＧＦＡ的敏感性和特异性与ＥＬＩＳＡ相近，但方法简便、快速、试剂稳定，且无需特殊设备，适合于基层单位和现场应用