LC-MS/MS法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的建立液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)法测定健康人血浆中麦考酚酸浓度的方法,并对受试制剂与参比制剂的生物等效性进行评价。方法20名健康受试者单剂量口服麦考酚吗乙酯胶囊,以兰索拉唑砜为内标,血浆样品经蛋白沉淀处理后,采用CAPCELL PAK C_(18)(50 mm×2.1 mm,3.5μm,No:AKIE01045)分离。样品经电喷雾离子源(ESI)离子化后,通过三级四极杆串联质谱仪,采用多反应离子检测方式测定麦考酚酸(m/z 319.1/191.1)和内标兰索拉唑砜(m/z 384.0/180.0)的浓度,计算主要药动学参数及相对生物利用度。结果麦考酚酸在0.1～20mg·L~(-1)内线性良好,定量下限为0.1 mg·L~(-1)。方法的相对回收率在85%～115%之间,批内、批间RSD均<15%。受试制剂与参比制剂的t_(1/2)分别为(12.45±5.30)、(14.26±7.47)h,t_(max)分别为(0.74±0.36)、(0.75±0.58)h,ρ_(max)缸分别为(10.29±3.29)、(11.43±4.83)mg·L~(-1)。结论建立的LC-MS/MS法专属性强、灵敏度高,操作简便、快速。受试制剂与参比制剂生物等效。     

肾移植患者吗替麦考酚酯血药浓度监 测简

目的：探讨对吗替麦考酚酯进行治疗药物监测的临床必要性.方法：采用HPLC方法测定血浆中麦考酚酸的谷浓度和峰浓度,对2012 年10 – 12 月期间83 例肾移植患者血浆麦考酚酸浓度进行分析.结果：患者血浆麦考酚酸谷浓度在0.34 ～ 3.99 μg·mL-1范围内的共46例次,血浆麦考酚酸峰浓度在0.91～12.78 μg·mL-1范围内的有37例次.在固定给药剂量下,麦考酚酸血药浓度的个体差异较大.结论：对吗替麦考酚酯进行治疗药物监测具有重要的临床价值.     

HPLC法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的建立人血浆中麦考酚酸酯活性代谢物麦考酚酸的HPLC测定法。方法色谱柱为HYPERSIL C18(150 mm×5.0mm,5μm),预柱为岛津ODS(5.0 mm×3.9 mm,10μm)。流动相为甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(pH=3.25)-乙腈(40∶40∶20,V/V),流速0.8 mL.min-1,检测波长254 nm,柱温25℃。结果麦考酚酸的血浆样品为0.23~46.13 mg.L-1时线性良好(r=0.999 7)。方法回收率96%~106%,日内RSD<6%,日间RSD<7%。结论本方法简单、灵敏、重现性好,适用于临床血药浓度监测,以及人体药动学的研究。     

人血浆中麦考酚酸的HPLC法测定

建立人血浆中麦考酚酸酯活性代谢物麦考酚酸的HPLC测定法.以10%三氯乙酸的乙醇溶液直接沉淀血浆蛋白,色谱柱为Lichromsorb RP-18(200×3.9mm,5μm),预柱为岛津ODS(5×3.9mm,     

HPLC-/MS/MS法测定健康人血浆中普拉克索浓度

目的 建立高效液相串联质谱法测定人血浆中普拉克索浓度的方法.方法 在碱性条件下,用乙酸乙酯提取浓缩后,进样用LC-MS/MS,固定相为AQ-C18柱(4.6 mm× 150 mm,10 μm),流动相为乙腈-20 mmol·L-1醋酸铵水溶液=60:40,质谱条件为电喷雾离子源、正离子方式、多级离子反应监测,离子反应分别为m/z:212.2→152.9(普拉克索)和m/z 273.2→109.6(吡西卡尼).结果 普拉克索的血浆浓度在5 ～ 1000 pg·mL-1内线性关系良好,Y=1.33×103X+0.05(r=0.9979),定量下限可达5 pg·mL-1.结论 建立的检测方法准确、稳定,可满足血浆中普拉克索含量测定.     

用HPLC-MS/MS法同时测定Caco-2细胞单层转运介质中吗替麦考酚酯和麦考酚酸的浓度

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定Caco-2细胞单层转运介质中吗替麦考酚酯(mycophenolate mofetil,MMF)和麦考酚酸(mycophenolic acid,MPA)的浓度,用于药物转运实验研究。方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(50mm×2.1mm,3.5μm);流动相A相:甲醇(含0.05%甲酸),B相:水(含0.05%甲酸);梯度洗脱:0～3.60min,40%A,流速:0.3ml/min,3.61～7.00min,65%A,流速:0.6ml/min,7.01～10.00min,40%A,流速:0.6ml/min;柱温:30℃,以吲哚美辛为内标。质谱检测方式:多种反应监测(MRM),选择监测的离子为:m/z433.8→194.8(MMF),m/z319.1→191.0(MPA)和m/z356.0→312.1(吲哚美辛)。结果:MMF和MPA检测的线性范围均为0.01～20μmol/L,线性回归方程分别为MMF:As/Ai=-0.035 2+0.394 5 c(r=0.999 1);MPA:As/Ai=0.005 5+0.050 8 c(r=0.999 5)。低、中、高浓度(0.1、1.5、15μmol/L)MMF的回收率分别为(103.2±7.5)%、(97.3±3.1)%和(96.0±3.4)%,日内、日间RSD<7.27%;低、中、高浓度(0.1、1.5、15μmol/L)MPA的回收率分别为(106.9±1.0)%、(106.0±5.7)%和(108.4±3.2)%,日内、日间RSD<9.25%(n=5)。结论:本研究建立的测定方法简便、准确、灵敏度高,适用于MMF和MPA体外转运实验研究。     

高效液相色谱法测定人血浆中麦考酚酸的浓度

目的:建立人血浆中麦考酚酸(MPA)含量的高效液相色谱法(HPLC法),并用该方法对肾移植患者血浆中的浓度进行测定。方法:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%三氟乙酸(40∶60),流速为1.0 mL.min-1,柱温为35℃,紫外检测波长为215 nm,血样用乙腈沉淀蛋白法进行处理。结果:麦考酚酸浓度在0.20～49.96μg.mL-1(r=0.999 6)范围内线性关系良好,最小检测浓度为0.20μg.mL-1,平均回收率均>90%,提取回收率>100%,批间和批内RSD<15%。结论:本方法准确、简便、重现性好,可用于麦考酚酸的血药浓度监测及药动学研究。     

HPLC-MS/MS法测定琥乙红霉素颗粒体内活性代谢物

目的:建立琥乙红霉素人体内活性代谢物红霉素的HPLC-MS/MS分析方法。方法:选用克拉霉素为内标,血浆样品经正己烷-二氯甲烷-异丙醇(300∶150∶15)提取处理,通过检测活性代谢物红霉素的浓度来监测琥乙红霉素体内行为。色谱条件Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(80∶20,含0.5%甲酸)为流动相,流速0.6 mL·min-1,采用HPLC-MS/MS检测系统(SRM模式),质谱采用电喷雾电离源(ESI),红霉素选择检测离子对为m/z 734→m/z 158,内标克拉霉素选择检测离子对为m/z 748→m/z 158。结果:血浆中红霉素检测方法的线性范围为9.724～2431.0 ng·mL-1,最低检测限可达9.724 ng.mL-1。血浆中红霉素的平均回收率为77.6%～80.0%;日内、日间RSD均小于11%。结论:本法灵敏、准确、选择性高,可用于监测琥乙红霉素的体内行为。     

LC-MS/MS法测定人血浆中的氨氯地平

目的 采用LC-MS/MS测定人血浆中的氨氯地平.方法 血浆样品经氢氧化钠碱化,乙酸乙酯萃取后进行分析.使用Gmini C18 110A(50 mm×3 mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-水-甲酸(55:45:0.025),流速0.2 ml·min-1,通过电喷雾离子化四极串联质谱,以多反应离子方式检测.氨氯地平m/z 409.4→237.9和莫沙比利m/z 422.1→198.0.结果 线性范围为0.0313～20 ng·ml-1,最低定量限为0.0313 ng·ml-1,萃取回收率为74.4%～83.1%,方法回收率为96.1%～108.7%,日内和日间RSD均<8%.结论 所用方法快速、简便、灵敏度高,适用于人血浆中药物浓度的测定及药物动力学和生物利用度的研究.     

LC/MS/MS法测定人血浆中头孢克肟含量

目的 建立人血浆中头孢克肟的LC/MS/MS法.方法 血浆样品经蛋白沉淀提取,采用C8色谱柱分析,以乙腈:水:甲酸(40:60:0.5,v/v/v)为流动相,三重四级杆质谱检测器,正离子多反应监测模式(MRM),监测离子分别为:m/z 454.3→m/z 285.2(头孢克肟),m/z 282.2→m/z 212.2(...     

LC/MS/MS与GC/MS法分析鉴定小鼠尿中沙美特罗的代谢产物

目的:鉴定沙美特罗在小鼠尿中的主要代谢产物.方法:ig给药后,收集小鼠尿液,经固相提取,葡萄糖醛酸酶水解,进行LC/MS/MS分析和硅烷化后进行GC/MS分析同时分离鉴定沙美特罗代谢产物.结果和结论:在给药后尿样中发现沙美特罗原型和4种代谢产物M1～M4,其结构推测为19-羟基沙美特罗(M1)、2-羰基沙美特罗(M2)、19-羰基沙美特罗(M3)和19-羟基-8-甲氧基沙美特罗(M4).     

LC/MS/MS的多反应监测方法定量测定灯盏乙素

目的：建立一种可靠的灯盏乙素定量分析方法。方法：用三级四极串联质谱(MS/MS)作为HPLC的检测器,其中MS/MS使用了多反应监测(MRM)扫描方式。选择母→子离子对m/z -461→m/z -285作为MRM监测的离子对;HPLC流动相为100％甲醇,流速0.9 mL.min^-1,色谱柱Beckman ODS-1。以测定短葶飞蓬提取物的灯盏乙素含量为例,对此方法进行了应用。结果：灯盏乙素在短葶飞蓬提取物中含量为6.98%。方法线性范围20～160 ng.mL^-1 (γ=0.999);加入灯盏乙素标准品20,60和160 ng的加样回收率分别为：96.5%,97.4%和97.3%。检测限为1 ng,每个样品的分析时间为4 min。结论：此法灵敏、快速、准确,可应用于灯盏乙素的各种药剂、药代的研究。     

高效液相色谱-质谱联用测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的方法。方法血浆样品中加入内标,用乙醚提取,浓缩后采用高效液相色谱-质谱联用进行测定。结果血浆样品中辛伐他汀线性范围为0.1～20ng·mL-1(r=0.9999);萃取回收率为94.3%。结论本方法灵敏度高、专属性强、重现性好、准确,可用于辛伐他汀片人体药动学及生物等效性研究。     

HPLC/MS/MS联用技术测定全血中的瑞芬太尼

目的:建立全血中瑞芬太尼的HPLC／MS／MS测定方法,并测定围麻醉期患者体内瑞芬太尼的血药浓度。方法:全血样品中加入枸橼酸芬太尼作内标,用1-氯丁烷进行提取。以乙腈与三氯甲烷(V乙腈:V三氧甲烷= 1:1)混合液加乙酸铵(2 mmol·L-1)为流动相,色谱柱为Intersil ODS-3(50 mm×2．1 mm,3μm),流速0．3 mL·min-1。三级四极杆质谱采用正离子模式,离子采集方式为多反应监测模式(MRM),离子源温度200℃,离子源电离电压为5 000 V,雾化气流速8 L·min-1。采集离子(母离子／子离子)为瑞芬太尼377／228,芬太尼337／188。结果:瑞芬太尼在0．5～50．0 ng·mL-1浓度范围内呈良好的线性(r=0．9994)。日内、日间精密度均在15％以内,提取回收率大于67．3％,方法回收率在95．0％～97．6％。结论:本方法灵敏、准确,适合瑞芬太尼的体内分析。     

System suitability in bioanalytical LC/MS/MS

System suitability is widely recognized as a critical component of bioanalysis. This paper discusses a generic system suitability test that monitors instrument performance throughout a run when used for liquid chromatography tandem mass spectrometry (LC/MS/MS) in bioanalysis. This system suitability process is designed to ensure that the LC/MS/MS system is performing in a manner that leads to the production of accurate and reproducible data that can be submitted with confidence to regulatory agencies. This process contains tests for signal stability, carryover, and instrument response. This approach is integrated throughout an analytical run and has been used in the analysis of over 25,000 batches of clinical samples. Two case studies are presented in which quality control samples and standards meet all acceptance criteria (based on Standard Operating Procedures and the Food and Drug Administration's recommendations for bioanalytical method validation) but failed the proposed system suitability test, and thus were rejected. In these case studies, the concentrations of a significant number of clinical samples (over 35%) were affected, resulting in changes of more than 15% when the samples were reanalyzed. These data indicate that the poor performance of an LC/MS/MS system could adversely affect the calculated concentrations of unknown samples even though the results for quality control samples appear to be acceptable.     

液相色谱-质谱联用法测定人血浆双氢青蒿素浓度

目的:建立液相色谱-质谱联用法测定健康人血浆中双氢青蒿素浓度的方法。方法:以青蒿素为内标,血浆样品采用液-液萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多离子反应监测方式检测双氢青蒿素。结果:该方法双氢青蒿素线性范围为1.01~2020 ng.ml-1;定量下限为1.001±0.072 ng.ml-1;方法回收率在93.0%~98.2%;批内、批间变异系数均<10%。结论:该方法准确、灵敏、特异、简便,适用于健康人血浆双氢青蒿素浓度的测定。     

氯吡格雷在人血浆浓度的液质联用测定法

目的建立测定人血浆中氯吡格雷(抗心肌及抗脑梗死药)血药浓度的HPLC/MS/MS法。方法血浆样品用叔丁基甲醚提取,内标为噻氯匹定;色谱柱用X-Terra MS C_(18)(2.1 mm×50 mm,5μm),柱温30℃,流动相:乙腈-水(含10 mmol·L~(-1)醋酸铵,调pH为4.0)为70:30,流量为0.3 mL·min~(-1);质谱用ESI离子源,定量分析的离子反应分别为m/z 322→z 212 (氯吡格雷),m/z 264→m/z 154(内标噻氯匹定)。结果氯吡格雷的线性范围为10×10~4～1.2×10~4pg·mL~(-1)(γ=0.9993),日内、日间RSD均小于10%,提取回收率约为80%。结论该方法快速、准确、灵敏度高,可用于氯吡格雷血药浓度测定。     

UPLC(超高效液相色谱)/MS/MS联用技术测定全血中的西罗莫司

目的 建立全血中西罗莫司的UPLC（超高效液相色谱）／MS／MS测定方法,方法 全血样品中加入他克莫司（FK506）作内标，用叔丁基甲醚进行提取。以乙腈与含千分之五甲酸的水溶液为流动相（40：50），色谱柱为AcquityUPLCTMBEHC。（50mm×2．1mm，1．7μm），流速0．5ml／min。三重四极杆质谱采用正离子模式，离子采集方式为多反应监测模式（MRM），离子源温度105℃，离子源电离电压为3300V，雾化气流速500L／h。采集离子（母离子／子离子）西罗莫司为931．2／864．1，FK506为822．0／577．0。结果 西罗莫司在1～240腿／L浓度范围内呈良好的线性（n=0．9995）。日内、日间精密度均在15％以内，提取回收率大于75．0％，方法回收率为95．0％～98．5％，最低检测限为0．2μg／L。结论 本方法灵敏、准确，适合临床西罗莫司的全血分析。     

LC/MS/MS法测定辛伐他汀血浆浓度及其在健康人体内的药物动力学研究

目的:建立人体血浆中辛伐他汀的LC/MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在男性健康志愿者体内的药物动力学行为,评价其生物利用度和生物等效性。方法:采用两制剂双周期自身对照试验设计。18名男性健康志愿者随机交叉服用单剂量辛伐他汀试验片剂和参比片剂20mg,采用液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)分析方法测定血浆辛伐他汀的浓度。采用DAS2.0程序计算药物动力学参数和相对生物利用度,并进行等效性评价。结果:测定单剂量口服20mg辛伐他汀参比片剂和试验片剂的AUC_((0→24))分别为(14.90±5.86)和(14.37±4.94)ng·h·ml~(-1),AUC_((0→∞))分别为(15.62±6.29)和(14.78±5.02 )ng·h·ml~(-1);C_(max)分别为(4.54±2.11)和(4.00±1.34)ng·ml~(-1);T_(max)分别为(1.75±0.79)和(1.39±0.65)h。以AUC_((0→24))与AUC_((0→∞))计算相对生物利用度分别为(108.0±52.7)%和(106.4±52.5)%。结论:该法准确灵敏,测得的数据可靠,统计分析表明两种制剂生物等效。     

液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Re在健康人血浆的浓度

目的建立液相色谱-质谱联用法测定人参皂苷Re在健康人血浆中浓 度的方法。方法血浆样品用固相萃取法处理。用电喷雾离子化和正离子多 离子反应监测方式检测人参皂苷Re。结果该方法人参皂苷Re线性范围为 1．05～1 050 ng·mL-1;定量下限为1．05 ng·mL-1;方法回收率在99．3％～ 104．3％;日内、日间变异系数(RSD)均<15％。结论该法准确、灵敏、特异, 适用于健康人血浆人参皂苷Re浓度测定。