三氧化二砷体外诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡的研究

目的 :探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对人胃癌SGC 790 1细胞抑制生长、诱导凋亡的生物学效应。方法 :光学显微镜观察细胞形态 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)还原法检测As2 O3 对该细胞株生长的影响 ,流式细胞仪 (FCM )及 3′ OH末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果 :SGC 790 1细胞经As2 O3 作用后 ,细胞增殖受到明显抑制 ,且呈剂量和作用时间依赖关系 ,细胞周期分析显示G2 M期阻滞 ;FCM检测在细胞周期G1期前出现低于 2倍体的凋亡峰 ;TUNEL标记发现DNA链的断裂。结论 :As2 O3 能抑制人胃癌SGC 790 1细胞增殖 ,并诱导该细胞系凋亡 ,其发生机制可能与细胞周期阻滞有关。     

Fas诱导胃印戒细胞癌细胞株增殖与凋亡的研究

目的:研究不同浓度的Fas对胃印戒细胞癌细胞株的影响.方法:采用细胞染色法观察细胞凋亡的形态,MTT法检测细胞增殖情况,原位末端标记法(TUNEL法)检测凋亡细胞,流式细胞仪检测细胞的DNA含量及凋亡百分率.结果:2～8μg/ml的Fas均可抑制胃印戒细胞癌细胞增殖且诱导细胞发生凋亡.结论:Fas有明显抑制胃印戒细胞癌细胞株生长及促进细胞凋亡的作用     

三氧化二砷诱导慢性髓系白血病细胞G2/M周期停滞及其机理

目的 研究三氧化二砷对慢性髓系白血病细胞的体外作用特点及其机理。方法 将三氧化二砷与慢性髓性白血病细胞系K562作用后，测定细胞的生长曲线及活性，流式细胞测量术检测细胞凋亡和细胞周期分布的改变；同时，采用RT-PCR方法检测药物作用前后细胞周期相关基因表达的变化。结果 ①三氧化二砷明显抑制K562细胞的生长，其作用呈时间和浓度依赖性；②三氧化二砷诱导K562细胞凋亡的作用较弱，但可明显诱导K562细胞在G2／M期停滞，此效应也呈时间和浓度依赖性；③三氧化二砷作用后，细胞周期抑制基因p57表达明显上调，而细胞周期促进基因cyclinB的表达受到抑制。结论 三氧化二砷能有效抑制慢性髓系白血病细胞的生长，其机理主要为诱导细胞G2／M期周期停滞；该效应与细胞周期相关基因的表达变化有关。     

雄黄诱导卵巢癌细胞珠SKOV3和COC1凋亡的实验研究

目的:探讨雄黄对卵巢癌细胞株SKOV3和COC1增殖能力的影响及可能机理。方法:采用不同浓度雄黄溶液作用于两珠细胞,用MTT法检测生长抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率及分析细胞周期;原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡形态学。结果:不同浓度的雄黄溶液对卵巢癌细胞株SKOV3及COC1均有不同程度的生长抑制作用,具有浓度和时间依赖性,且COC1比SKOV3对雄黄更敏感。结论:雄黄对卵巢癌细胞有生长抑制作用,诱导细胞发生G1期阻滞是雄黄抑制卵巢癌细胞生长作用的可能机制之一。     

三氧化二砷对人胃癌细胞增殖的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）抑制人胃癌细胞株MKN-28生长及诱导其凋亡的生物学效应。方法采用光镜观察、溴化二甲噻唑二苯四氮唑（MTT）还原法、流式细胞仪（FCM）检测法、琼脂糖DNA凝胶电泳法检测As2O3在不同作用时间、不同给药浓度时对MKN-28细胞生长的影响。结果MKN-28细胞经As2O3作用后，细胞增殖受到明显抑制，而且呈浓度-作用时间依赖关系。流式细胞仪检测结果显示DNA直方图上出现典型的亚二倍体凋亡峰，细胞周期分析发现药物作用后MKN-28细胞的生长周期受到明显阻滞。琼脂糖DNA凝胶电泳检测到细胞发生凋亡时由于DNA的规律性降解而形成的梯状条带。结论As2O3既能有效地抑制人胃癌细胞株MKN-28的生长，又能诱导该细胞凋亡，而且呈浓度依赖性和作用时间依赖性。     

三氧化二砷对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对胆管癌癌细胞株QBC939的增殖抑制作用并初步探讨其机制。方法 胆管癌细胞株QBC939用不同浓度As2O3处理，活细胞计数和细胞克隆试验观察As2O3对细胞动力学的影响；丫啶橙荧光染色、透射电镜，TUNEL观察细胞凋亡；流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期变化；增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2单抗SABC免疫组化染色。结果 在0．75-6μmol/L范围内，As2O3明显抑制QBC939细胞增殖和诱导细胞凋亡，其作用随As2O3浓度增加和作用时间延长而增强；相应地PCNA和bcl-2表达减弱。流式细胞仪检测可见明显的凋亡峰，并阻滞细胞周期的G2-M期。结论 As2O3可明显抑制胆管癌细胞株QBC939的生长、诱导癌细胞凋亡，有临床治疗胆管癌的潜在价值。     

尼美舒利对肝癌SMMC-7721细胞增殖、凋亡的干预作用

目的 :研究尼美舒利对肝癌SMMC 772 1细胞增殖、凋亡的干预作用。方法 :研究对象为SMMC 772 1肝癌细胞系 ,细胞增殖采用MTT比色法检测 ,细胞凋亡采用电镜观察、流式细胞仪和TUNEL法检测。结果 :尼美舒利显著抑制体外培养的SMMC 772 1细胞增殖 ,随着药物剂量的增加和时间的延长 ,SMMC 772 1的生长、增殖明显抑制 ,呈剂量和时间依赖性。流式细胞术、TUNEL法检测示 ,使用不同浓度尼美舒利作用于SMMC 772 1细胞 72h后 ,可诱导SMMC 772 1细胞凋亡 ,随着药物浓度增加 ,凋亡率和凋亡指数均显著增加 ,差异有显著性。结论 :选择性COX 2抑制剂尼美舒利可以显著抑制SMMC 772 1细胞增殖 ,且呈明显的时间、剂量依赖关系 ,同时诱导SMMC 772 1细胞凋亡 ,且具有剂量依赖性     

Paclitaxel-induced apoptosis in osteosarcoma cell line U-2 OS

目的：研究紫杉醇对成骨肉瘤细胞系U2-OS的生长抑制及凋亡诱导作用。方法：将不同浓度的紫杉醇作用于成骨肉瘤细胞系U2-OS,应用形态学观察、台盼蓝染色、流式细胞术、电镜、原位末端标记（TUNEL）等方法,检测其诱导骨肉瘤细胞凋亡的时间效应和剂量效应,并与其他化疗药物进行对比。结果：紫杉醇对U2-OS细胞的生长抑制及凋亡诱导作用具有明显的时间依赖性和剂量依赖性。细胞周期分析出现G2/M期阻滞和明显的凋亡峰。形态学检查示核碎裂及染色体凝集的凋亡特征,出现大量多核细胞。经其他化疗药物诱导的U2-OS细胞未出现多核现象。免疫组织化学检测示紫杉醇诱导后细胞核中有广泛DNA断裂。结论：紫杉醇通过抑制骨肉瘤细胞有丝分裂发挥抑制细胞生长及促进细胞凋亡的作用,该作用具有时间依赖和剂量依赖性。     

Genistein对人卵巢癌细胞系3AO抑制增殖的作用及机制的探讨

目的:研究植物雌激素染料木黄酮对人卵巢癌细胞系3AO细胞增殖的抑制作用和凋亡的诱导作用,探讨其抗癌作用的机制. 方法:应用MTT法检测不同浓度染料木黄酮对3AO细胞的生长抑制作用,电镜观察药物作用后细胞的超微结构改变,TUNEL法确定凋亡,流式细胞仪检测细胞周期、定量分析凋亡,免疫细胞化学技术检测雌激素β受体的表达. 结果: 3AO细胞经不同浓度染料木黄酮处理后,细胞生长明显受到抑制,且这种抑制作用随时间延长及浓度增高而增强,10 mg/L和20 mg/L染料木黄酮作用72 h后,抑制率分别达到54.24%和65.99%. 染料木黄酮阻断3AO细胞生长于G2/M期,在G0/G1前出现典型亚二倍体凋亡峰,且凋亡呈时间依赖性. 电镜观察到用药后凋亡细胞典型的形态学特征. TUNEL法观察到大量阳性凋亡细胞. 免疫细胞化学法检测到用药后,ERβ表达明显加强. 结论:染料木黄酮对3AO细胞的生长有明显的呈时间及浓度依赖性的抑制作用,并诱导其发生凋亡. 染料木黄酮可能通过雌激素β受体途径发挥药理作用,诱导卵巢癌细胞发生凋亡.     

亚硒酸钠溶液诱导胃上皮肿瘤SGC-7901细胞凋亡的实验研究

目的：探讨亚硒酸钠能否诱导胃上皮肿瘤SGC 7901细胞凋亡,以及凋亡诱导与细胞周期改变的关系。方法：亚硒酸钠溶液不同浓度、不同作用时间分别处理SGC 7901细胞,应用电子显微镜观察亚硒酸钠溶液作用后细胞形态变化,应用DNA末端原位标记染色法 (TUNEL)及流式细胞仪技术分析细胞凋亡及细胞周期的改变。结果：亚硒酸钠作用于SGC 7901细胞后,可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩、染色质凝集、呈新月型紧贴于核膜周边,核碎裂,染色质片段化,凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA直方图上出现典型的亚二倍体的“凋亡峰”。TUNEL染色法细胞凋亡指数在8.4％～33.4％。结论：亚硒酸钠能够诱导SGC 7901细胞凋亡,亚硒酸钠诱导SGC 7901细胞凋亡与细胞周期阻滞密切相关。     

氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的研究

目的:研究食管癌细胞系SHEEC1以三氧化二砷（AS2O3）诱导细胞凋亡光镜和电镜的形态改变。方法：SHEEC1细胞常规培养在199培养基,在5umoL/LAs2O3作用72h收获细胞以苏木精－伊红染色,TUNEL标记,透射电镜和流式细胞仪检查。结果：光镜下凋亡细胞核致密,染色质片段化,胞浆红染,TUNEL标记阳性,流式细胞仪检查出现凋亡峰（亚G1／G 0峰）。电镜下可见两种死亡细胞：一种是核固缩,有染色质凝集靠近核膜等典型凋亡改变;另一种细胞浆退行性变及细胞坏死改变。结论：食管癌细胞系SHEEC1可以用As2O3引起凋亡,提示其可以作为治疗食管癌的辅助药物。     

三氧化二砷对血管内皮细胞增殖和周期的影响

目的:观察As2O3对血管内皮细胞增殖、凋亡和细胞周期的干扰,探讨As2O3对血管内皮细胞生长的直接影响。方法:血管内皮细胞EVC-304体外培养,As2O3干预。采用MTT测定细胞活性,流式细胞仪测定细胞周期、细胞凋亡。结果:ECV-304细胞经过As2O3干预,其存活率明显降低,并且呈剂量依赖性。As2O3干预后,进入S期的细胞减少,细胞周期被阻在G1期,细胞可能在G1期进入凋亡。As2O3诱导早期凋亡是对照组的2.88～5.1倍,并且呈剂量依赖性;其晚期凋亡是对照组的1.17～1.67倍。结论:As2O3可直接干扰血管内皮细胞的细胞周期,阻滞细胞在G1期,并诱导细胞凋亡,进而抑制血管内皮细胞的增殖。     

三氧化二砷对人卵巢癌细胞株体外作用的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3)对卵巢癌细胞株体外生长的影响。方法：以As2O3处理卵巢癌细胞株SKOV3，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法，测定As2O3对SKOV3生长的抑制作用，并绘制剂量－效应曲线；通过透射电镜观察细胞超微结构的变化；应用流式细胞仪分析DNA含量和细胞周期并测定凋亡特征酶caspase-3的活性变化。结果：0．5－4．0μmol/L三氧化二砷明显抑制SKOV3细胞的增殖，并呈剂量和时间依赖性；透射电镜观察可看到较为典型的细胞凋亡的形态学改变；细胞核固缩，染色质凝集，呈新月状紧贴于核膜周边，凋亡小体形成等；流式细胞仪检测出现DNA含量小于G1峰的亚二倍体凋亡峰，同时出现G2／M期阻滞；SKOV3在As2O3作用下，caspase-3是实现凋亡的效应因子，它的激活必然导致凋亡细胞最终的各种表型变化。结论：As2O3对卵巢癌细胞株SKOV3的生长有明显的抑制作用，诱导凋亡是其主要作用机制之一。     

三氧化二砷诱导人脑胶质瘤干祖细胞凋亡及其机制

目的研究三氧化二砷（As2O3）对人脑胶质瘤干祖细胞增殖和周期的影响及其相关分子表达。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定As2O3对人脑胶质瘤干祖细胞抑制率,流式细胞术检测As2O3对该细胞凋亡和周期的影响,透射电镜观察细胞形态学变化,Western blot和RT-PCR检测Fas、FasL和p53变化。结果 As2O3可明显抑制人脑胶质瘤干祖细胞的增殖,且呈一定的时间剂量依赖关系（P〈0.05）;此外,人脑胶质瘤干祖细胞周期G1期细胞的比例增加,S期和G2/M期细胞的比例减少;通过形态学观察发现,随着As2O3剂量的增加,镜下凋亡细胞比例逐渐增加,凋亡小体的数量增加;Western blot检测发现,FasL表达上调,p53下调（P〈0.05）。结论 As2O3对人脑胶质瘤干祖细胞具有抑制增殖和诱导凋亡作用,其机制可能与上调FasL和下调p53表达相关。     

癌灵一号对人肝癌细胞凋亡作用的研究

研究癌灵一号对肝癌细胞的凋亡的作用。用台盼蓝染色观察药物对照细胞增殖的抑制人艇及其形态变化;采用流式细胞仪技术检测凋亡百分数及凋亡峰。结果表明,癌灵一号对人肝癌细胞具有抑制作用,并使细胞出现形态改变;     

Nuclear matrix associated protein PML: an arsenic trioxide apoptosis therapeutic target protein in HepG2 cells

Objective To investigate arsenic trioxide(As2O3)-induced apoptosis and the effects on cell nuclear matrix related protein promyelocytic leukaemia(MPL).Methods HepG2 cells were cultured in MEM medium and treated with 0.5,2.5 and 10μmol/L As2O3 for either 24 h or 96 h at each concentration.In situ terminal deoxynucleotidyl trangferase(TdT) labeling (TUNEL)and DNA ladders were used to detect apoptosis.Confocal microscopy and Westem blotting were used to observe the expression of PML.Results The growth rates of HepG2 cells were slower in the As2O3 treated than the untreated control group.DNA ladder and TUNEL positive apoptotic cells could be detectedin As2O3 treated groups.The expression of PML decreased in HepG2 cells with 2 μmol/L As2O3 treatment,Confocal images demonstrated that the expression of PML protein in HepG2 cell nuclei decreased after treatment with 2μmol/L As2O3,and micropunctates characteristic of PML protein in HepG2 cell nuclei disappeared after treatment with 5μmol/L As2O3.Conclusions Our results show that arsenic trioxide can significantly inhlbit the growth of HepG2 cellsin vitro.As2O3 induces apoptosis in HepG2 tumor cells in a time and concentration dependent manner.As2O3 may degrade the PML protein in HepG2 cell nuclel.The decreased expression of PML in As2O3 treated tumor cells is most likely to be caused by apoptosis.Nuclear matrix associated protein PML could be the target of As2O3 therapy.     

Studies on arsenic trioxide induced mice melanoma Cloundman S91 cell apoptosis

INTRODUCTION ArsenichasalonghistoryofuseinChineseandwesternmedicine,buthasbeenoutofuseinthe mid20thcenturybecauseoftheunacceptablesideef fects.There emergenceofarsenictrioxideinclinicaluse isduelargelytopurificationofthiscompoundfromtra ditionalmixturesandtheAs2O3definitionofeffective,low doseregimensforthetreatmentofacutepromyelo cyticleukemia(APL)[1].Recently,theapoptosis As2O3inducedhasbeenobservedinmanycancercell lines,includingesophagedcarcinoma,gastriccancer,neuroblastomalymphoid…     

不同浓度As2O3对293t细胞和HeLa细胞的凋亡及增殖的影响

目的初步研究三氧化二砷(As2O3)作为急性早幼粒细胞性白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)的治疗剂和环境污染物的毒副作用.方法用As2O3作用于293t细胞和HeLa细胞不同时间后,用流式细胞仪、Hoechst33258染色、形态学和超微结构观察检测细胞凋亡和增殖;检测293t细胞增殖用细胞记数板连续记数6天.结果 3～5μmol/L As2O3作用24h可诱发HeLa细胞发生凋亡,而293t则不发生明显的凋亡.低浓度As2O3(<2μmol/L)可抑制293t细胞增殖.结论不同浓度的As2O3对HeLa细胞和293t细胞的增殖和凋亡作用不同.     

三氧化二砷在体外抑制结肠癌细胞的研究

目的 在体外观察三氧化二砷(As2O3)对结肠癌细胞系HT-29的抑制作用,并探讨其作用机制,为其是否能作为结肠肿瘤的化疗药物提供理论基础.方法 将不同浓度As2O3作用于HT-29细胞不同时间后,用MTT检测细胞抑制率,光镜及透射电镜观察细胞形态学和超微结构的变化,通过流式细胞仪及共聚焦显微镜分析凋亡及自噬.结果 4.0μmol/L As2O3作用72h可明显抑制HT-29细胞增殖及诱发其凋亡,且抑制率与药物作用时间及浓度成正比.在凋亡早期细胞形态学变化在光镜下可见细胞缩小变圆,在电镜上可见细胞质浓缩、核固缩及自噬溶酶体.4.0μmol/L As2O3作用72h后HT-29细胞凋亡率为25%.结论 As2O3能明显抑制结肠癌细胞系HT-29的增殖,其作用机制与引起凋亡及自噬密切相关.