精索静脉曲张大鼠附睾线粒体钙线粒体与细胞质细胞色素C含量变化及细胞的凋亡

背景:精索静脉曲张可导致男性不育,探讨其机制对治疗男性不育有着重要意义。目的:分析外科所致的精索静脉曲张对大鼠附睾细胞线粒体钙、细胞色素C含量及附睾细胞凋亡和其显微、超微结构的影响。设计:随机对照实验。材料:实验于2003-06/2004-05在佳木斯大学完成。选取青春期雄性Wistar大鼠40只,体质量(220±20)g,室温下饲养1周后,随机分为假手术组、结扎组,每组20只。方法:假手术组显露左肾静脉建立假手术模型,结扎组部分结扎左肾静脉建立精索静脉曲张模型。术后10周,取双侧附睾,检测附睾头、体部细胞线粒体钙、细胞色素C含量及细胞质细胞色素C含量。以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,常规制作附睾体部光镜、电镜标本,观察附睾组织细胞形态变化。主要观察指标:细胞线粒体钙、细胞色素C含量;细胞质细胞色素C含量;细胞凋亡;附睾组织细胞形态变化。结果:40只大鼠全部进入结果分析。①结扎组左右侧附睾细胞线粒体钙含量较假手术组显著降低[(4.72±1.45),(5.90±1.97),(10.13±2.34)mg/g,P<0.01],②结扎组左右侧附睾细胞线粒体细胞色素C含量较假手术组线粒体组显著增高[(0.36±0.20),(0.19±0.14),(0.15±0.07)μmol/LP<0.05]。③结扎组左右侧附睾细胞胞质内细胞色素C含量较假手术组显著增高[(8.17±1.49),(7.48±1.60),(5.93±1.60)mol/L,(P<0.05)④结扎组左右侧细胞凋亡率较假手术组显著增高[(13.3±1.9)%,(12.6±1.5)%,(6.2±0.3)%,P<0.01]。结扎组左右侧线粒体钙含量、细胞色素C、胞质细胞色素C、凋亡率差别均无显著性意义(P>0.05)。⑤光镜下主要改变有附睾管萎缩,上皮细胞出现空泡化,(下转第207页)上皮内晕、亮细胞数明显增多。⑥电镜下主要表现为主细胞内溶酶体增多、变大,残余小体增加,内质网扩张,线粒体嵴模糊,高尔基复合体空泡化;核染色质致密,形成大小不等的团块,边集于核膜处;上皮细胞游离面微绒毛稀少,可见局灶性断裂和破坏。结论:外科所致精索静脉曲张大鼠附睾组织细胞线粒体有损伤,使线粒体丧失储钙功能,同时细胞色素C通过线粒体外膜被释放进入胞质中,导致Caspase3激活,执行凋亡,使附睾组织细胞凋亡过度,其显微及超微结构明显改变,这些变化可能是影响精索静脉曲张患者生育能力的机制之一。     

精索静脉曲张大鼠附睾线粒体钙线粒体与细胞质细胞色素C含量变化及细胞的凋亡

背景：精索静脉曲张可导致男性不育，探讨其机制对治疗男性不育有着重要意义。目的：分析外科所致的精索静脉曲张对大鼠附睾细胞线粒体钙、细胞色素C含量及附睾细胞凋亡和其显微、超微结构的影响。设计：随机对照实验。材料：实验于2003—06／2004—05在佳木斯大学完成。选取青春期雄性Wistar大鼠40只，体质量（220&;#177;20）g，室温下饲养1周后，随机分为假手术组、结扎组，每组20只。方法：假手术组显露左肾静脉建立假手术模型，结扎组部分结扎左肾静脉建立精索静脉曲张模型。术后10周，取双侧附睾，检测附睾头、体部细胞线粒体钙、细胞色素C含量及细胞质细胞色素C含量。以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡，常规制作附睾体部光镜、电镜标本，观察附睾组织细胞形态变化。主要观察指标：细胞线粒体钙、细胞色素C含量；细胞质细胞色素C含量；细胞凋亡；附睾组织细胞形态变化。结果：40只大鼠全部进入结果分析。①结扎组左右侧附睾细胞线粒体钙含量较假手术组显著降低[（4．72&;#177;1．45），（5．90&;#177;1．97），（10．13&;#177;2．34）mg／g，P〈0．011，②结扎组左右侧附睾细胞线粒体细胞色素C含量较假手术组线粒体组显著增高[（0.36&;#177;0．20），（0．19&;#177;0．14），（0．15&;#177;0．07）pmol／LP〈0．051。③结扎组左右侧附睾细胞胞质内细胞色素C含量较假手术组显著增高[（8．17&;#177;1．49），（7．48&;#177;1．60），（5．93&;#177;1．60）mol／L，（P〈0．05）④结扎组左右侧细胞凋亡率较假手术组显著增高[（13．3&;#177;1．9）％，（12．6&;#177;1．5）％，（6．2&;#177;0.3）％，P〈0．011。结扎组左右侧线粒体钙含量、细胞色素C、胞质细胞色素C、凋亡率差别均无显著性意义（P〉0．05）。⑤光镜下主要改变有附睾管萎缩，上皮细胞出现空泡化，上皮内晕、亮细胞数明显增多。⑥电镜下主要表现为主细胞内溶酶体增多、变大，残余小体增加，内质网扩张，线粒体嵴模糊，高尔基复合体空泡化；核染色质致密，形成大小不等的团块，边集于核膜处：上皮细胞游离面微绒毛稀少，可见局灶性断裂和破坏。结论：外科所致精索静脉曲张大鼠附睾组织细胞线粒体有损伤，使线粒体丧失储钙功能，同时细胞色素C通过线粒体外膜被释放进入胞质中，导致Caspase3激活，执行凋亡，使附睾组织细胞凋亡过度，其显微及超微结构明显改变，这些变化可能是影响精索静脉曲张患者生育能力的机制之一。     

实验性精索静脉曲张对大鼠睾丸结构和性激素影响

目的观察实验性精索静脉曲张（EV）对大鼠睾丸结构及左精索静脉内促卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）水平的影响。方法 40只雄性青春期Wistar大鼠随机分为EV 8周组、EV 12周组（每组12只）和相应对照组（各8只）,EV组部分结扎左肾静脉建立实验性大鼠EV模型,相应对照组接受假手术。分别于术后8周、12周处死动物,测量睾丸质量,光镜观察睾丸结构;放射免疫法测定曲张精索内静脉血和肾静脉血中FSH、LH、T的水平。结果 EV 12周、EV 8周组双侧睾丸质量与相应对照组比较明显下降（t=2.78~11.18,P〈0.05、0.01）,EV 12周组双侧睾丸质量较EV 8周组减轻（t=2.55、3.73,P〈0.05、0.01）。光镜下观察,EV 8周和EV 12周组大鼠双侧睾丸均有局灶性生精上皮退化,精子发生阻滞,生精细胞脱落和曲细精管萎缩等病理性改变。对照组、EV 8周组和EV 12周组大鼠左精索静脉血FSH和LH水平依次增加（t=3.53~9.51,P〈0.01）,后两者T水平较对照组降低（t=2.52、4.40,P〈0.05、0.01）。结论 EV可导致大鼠双侧睾丸质量下降,曲细精管病理性损害,性腺轴内分泌功能异常。     

PA法检测精索静脉曲张大鼠生精细胞的早期凋亡

目的:采用Annexin-FITC和PI标记法(PA)法检测外科所致的精索静脉曲张(VC)大鼠生精细胞的早期凋亡。方法:以成年雄性SD大鼠复制左VC模型,应用流式细胞术(flow cvtometry,FCM)PA法(Annexin-FITC和PI标记法)检测睾丸生精细胞的早期凋亡。结果:实验组大鼠睾丸生精细胞的凋亡率显著高于假手术对照组(P<0.01),且左右侧睾丸凋亡率相同,1 n与4 n细胞群凋亡率显著高于2n细胞群。结论:PA法可检测VC大鼠生精细胞的早期凋亡,并可较准确分析各期生精细胞凋亡。     

精索静脉曲张对精索静脉血与外周血性激素水平的影响

目的 :探讨精索静脉曲张对精索静脉血和外周血性激素水平的影响。方法 :对 30例精索静脉曲张患者与 2 6例腹股沟斜疝患者的精索静脉血与外周血性激素水平采用放射免疫分析法进行测定。结果 :精索静脉曲张组与腹股沟斜疝组精索静脉血睾酮有明显差异 (P <0 0 5 )。其余各组间比较无差异 (P >0 0 5 )。结论 :精索静脉曲张患者外周血性激素浓度受多种因素影响。测定精索静脉血性激素水平并结合抑制素等指标 ,则能更准确地评价精索静脉曲张患者睾丸的内分泌功能     

疏肝通络强精方对改进型实验性精索静脉曲张大鼠睾丸EGF表达的影响

目的从分子水平探讨疏肝通络强精方治疗精索静脉曲张致不育的作用机理。方法选择青春期清洁级雄性SD大鼠50只,数字表法随机分为假手术组、模型组、手术治疗组、桃红合五子汤组、疏肝通络强精方组,每组各10只。1个月后,对各组均按1ml/100g体重灌胃,给药或生理盐水,每日1次,普食喂养,自由饮食饮水,连续60d后,处死并取出睾丸,免疫组化法检测睾丸组织EGF表达。结果 (1)模型组左侧睾重量及精液质量明显低于假手术组(P0.05);温度、精索静脉直径明显高于假手术组(P0.05)。疏肝通络强精方组左侧睾丸重量高于模型组(P0.05),疏肝通络强精方组与假手术组无明显差异。疏肝通络强精方组与其他疗组比较均有显著性差异(P0.05)。(2)模型组睾丸组织EGF表达量较各治疗组明显减少,疏肝通络强精方组与其他治疗组EGF表达量明显增多,差异有显著性(P0.05)。结论实验性精索静脉曲张青春期大鼠睾丸组织病理改变和局部生长因子EGF的变化是影响生精功能并导致精子质量下降的可能机制之一;疏肝通络强精方能明显上调EGF的表达,从而提高精液质量。可能是疏肝通络强精方对改进型实验性精索静脉曲张青春期大鼠睾丸生精功能保护作用的调控机制之一。     

不同精索静脉曲张手术治疗精索静脉曲张的疗效对比

目的对比分析不同精索静脉曲张手术的临床疗效。方法回顾性分析2012~2015年泌尿外科手术治疗的原发性精索静脉曲张患者261例临床资料,根据患者接受手术方式不同分为5组,分别为:腹腔镜A组(腹腔镜经腹精索静脉结扎术),腹腔镜B组(腹腔镜腹膜外径路),开放手术A组(改良后Palomo术),开放手术B组(传统开放精索静脉高危结扎术),介入栓塞组(逆行介入栓塞术)。统计5组手术时长、住院时长、术后并发症、术后配偶妊娠率以及术后精索静脉曲张的复发率,比较各组术前、术后精子质量。结果介入栓塞组手术耗时较长(P0.05),但介入栓塞组住院时间较短(P0.05),平均1.50±0.50 d;术后1年,介入栓塞组妊娠率最低,其他各组配偶妊娠率差异无显著性(P0.05);术后各组精子浓度、低渗膨胀试验(HOS)比率以及精子向前运动(PR)百分率均明显高于手术前(P0.05),术后各组间比较,差异无统计学意义(P0.05);术后开放手术A组和B组复发率和并发症发生率均较高(P0.05)。腹腔镜A组、B组间复发率和并发症发生率无显著差异(P0.05)。介入栓塞组复发率明显高于其他组,并发症相对较少(P0.05)。结论治疗精索静脉曲张,腹腔镜手术时间短,并发症少,适宜手术量大的男科应用;介入栓塞术无手术刀疤,术后恢复最快,但复发率较高;开放性手术创伤较大,术后并发症较多,不推荐。     

实验性精索静脉曲张大鼠睾丸氧化应激水平的检测

目的测定青春期精索静脉曲张（VC）大鼠睾丸组织中氧化应激水平,探讨VC致不育的机制。方法将40只雄性青春期Wistar大鼠随机分为VC 8周组、VC 12周组（各12只）和相应的假手术对照组（各8只）,通过部分结扎左肾静脉建立实验性大鼠VC模型,对照组只游离左肾静脉不结扎。分别于术后8、12周解剖动物,测左侧精索静脉最大直径;比色法测睾丸组织内过氧化氢（H2O2）、过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（T-AOC）水平。结果成功建立了VC模型。VC 8周组和12周组大鼠左侧精索静脉均明显扩张（t=7.19、6.86,P〈0.01）,双侧睾丸组织内H2O2含量较对照组明显增加（t=2.31~4.78,P〈0.05、0.01）,与右侧相比左侧增加更明显（t=2.56、3.15,P〈0.05）,并且左侧VC 12周组比VC 8周组增加更明显（t=2.16,P〈0.05）。VC 8周组和VC 12周组左侧CAT活力与对照组比较显著降低（t=2.23、3.03,P〈0.05、0.01）,右侧数值有下降趋势但差异无显著性（t=0.95、1.41,P〉0.05）。VC 8周组和VC 12周组双侧SOD活力和T-AOC与对照组比较均明显降低（t=3.29~4.72,P〈0.01）,并且VC 12周组比VC 8周组降低更明显（t=2.80、3.38,P〈0.05、0.01）,T-AOC左侧睾丸比右侧下降更明显（t=11.66、7.54,P〈0.01）。结论 VC可引起双侧睾丸H2O2增加,CAT活力、SOD活力以及T-AOC下降,导致睾丸组织内氧化应激系统失衡。     

丙酸睾酮对精索静脉曲张大鼠睾丸和精子的修复作用

目的探讨丙酸睾酮补充治疗对精索静脉曲张青春期大鼠睾丸和精子的修复作用。方法将30只青春期SD雄性大鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,通过结扎左肾静脉建立精索静脉曲张大鼠模型,假手术组、模型组大鼠每天注射16mg/kg生理盐水,低剂量组、中剂量组、高剂量组大鼠每天分别注射丙酸睾酮2、4、16mg/kg,连续注射14d。观察各组大鼠精子活力、精子存活率、精子畸形率、脏器质量指数等相关指标。结果模型组大鼠精子活力明显低于假手术组,中剂量组、高剂量组大鼠精子活力明显高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);低剂量组与中剂量组精子存活率明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);中剂量组睾丸结构有一定的恢复;中剂量组、高剂量组附睾指数明显高于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);高剂量组肾脏指数明显大于假手术组,差异有统计学意义(P0.05)。结论补充中剂量的丙酸睾酮可提高精索静脉曲张大鼠精子活力和存活率,降低脏器指数,并可能通过此作用而达到改善精索静脉曲张大鼠精子质量,提高生育力的目的。     

精索静脉曲张对睾丸生精功能影响的研究进展

精索静脉曲张（varicocele, VC）是男性泌尿生殖系统的常见疾病之一,其发病率以青壮年较高,其中80%～98%好发于左侧精索静脉。研究发现,VC能够影响睾丸局部微环境的温度、参与生精环境局部的氧化应激进程、影响精子线粒体功能、调节男性内分泌系统过程、诱导睾丸及附睾细胞凋亡等。因此,VC会对男性睾丸生精功能造成重要影响,进而引发男性不育。但VC影响男性生精功能的具体分子机制尚未完全研究清楚。因此该文将对VC对睾丸生精功能影响的作用及机制研究作一综述。     

血必净注射液对S-MODS大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡的影响

目的：探讨血必净注射液对S-MODS大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡的影响。方法：将WISTAR雄性大鼠45只随机分为正常组（A组）、模型组（B组）、血必净治疗组（C组）各15只。B组和C组经鼠尾静脉注射内毒素5mg／（ml·kg）（生理盐水溶解）,A组经鼠尾静脉注射同等剂量生理盐水。1h后C组给予血必净注射液4ml／kg,1次／d,共3d;A、B组注射等体积的生理盐水。分别于静脉注射内毒素前、制模后（静脉注射内毒素1h）和使用血必净后72h后经内眦静脉取血1ml检测血常规、血清生化指标（AST,BUN,Cr,cK—MB,CPR）。于注射内毒素前、后1h和72h点有效活杀检测的大鼠,开腹取距回盲瓣5cm处近端2cm的小肠．10％福尔马林固定后送检,石蜡包埋后切片,光镜下观测肠粘膜病变,原位末端缺口标记法（TUNEL）检测肠黏膜上皮细胞凋亡。结果：肠黏膜结构破坏明显,肠黏膜细胞凋亡升高,可发现许多典型凋亡的上皮细胞,凋亡指数达（30．82±6．34）％。血必净治疗72h后,凋亡指数为（14．91±5．40）％,明显低于模型组（P〈0．01）。血必净治疗后肠粘膜上皮细胞凋亡能明显降低,肠粘膜组织损害减轻。结论：血必净注射液具有减少S-MODS大鼠肠粘膜上皮细胞凋亡,保护肠粘膜上皮细胞作用。     

肠系膜淋巴管结扎对二次打击大鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨结扎肠系膜淋巴管对失血／脂多糖（LPS）二次打击致大鼠肾小管上皮细胞凋亡的拮抗作用。方法雄性Wistar大鼠45只，随机均分为结扎组、未结扎组和假手术组。用右侧颈动脉放血及致伤后6h腹腔注射LPS 4mg／kg复制失血／LPS二次打击动物模型，结扎组行肠系膜淋巴管结扎术致肠淋巴液断流。在手术创伤后24h，选取同一部位肾组织制备病理切片，用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测肾小管上皮细胞凋亡率，免疫组化链酶素-亲合素-生物素-过氧化物酶法（SABC）检测凋亡调控基因bcl-2和促凋亡基因bax的蛋白表达。结果二次打击后，与假手术组比较，未结扎组肾小管上皮细胞凋亡率和bax蛋白表达明显增高，bcl-2蛋白表达显著降低（P均〈0．01）；结扎组大鼠肾小管上皮细胞凋亡率、bax蛋白表达显著低于未结扎组，bcl-2蛋白表达显著高于未结扎组（P均〈0．01）。结论肠系膜淋巴管结扎可减轻失血／LPS导致的大鼠肾小管上皮细胞凋亡，其机制可能与肠系膜淋巴管结扎降低促凋亡基因bax表达、提高bcl-2表达有关。     

腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术治疗精索静脉曲张的临床观察

目的探讨腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术治疗精索静脉曲张的临床效果。方法回顾性分析我院2015年3月～2017年9月收治的精索静脉曲张患者68例的临床资料,根据手术方式不同分为对照组32例和观察组36例。对照组行开放精索静脉曲张高位结扎术,观察组行腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术,比较两组手术效果及手术相关指标。结果观察组手术时间、术中出血量、肠道功能恢复时间、住院时间均明显少于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);两组术后精子浓度、精子存活率、前向运动精子百分率均明显高于术前,差异有统计学意义(P<0.05),术后两组间精子质量比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后血清睾酮(T)水平明显高于对照组,黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FSH)水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组术后并发症发生率为2.78%,明显低于对照组的18.75%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜下精索静脉曲张高位结扎术治疗精索静脉曲张效果良好,并发症少,要后恢复快,值得临床推广。     

经腹腔镜精索静脉高位结扎术对精索静脉曲张不育症患者精子质量的影响

目的 探讨经腹腔镜精索静脉高位结扎术对精索静脉曲张不育症患者精子质量的影响.方法 选取2018年1月～2020年8月我院收治的精索静脉曲张不育症患者102例,按治疗方式分为对照组和试验组各51例.对照组采用开放手术,试验组采用经腹腔镜精索静脉高位结扎术,比较两组围术期指标、精子质量、复发率及并发症.结果 试验组出血量(...     

外环下精索静脉显微解剖结扎术对精索静脉曲张患者精液质量的影响

目的探讨外环下精索静脉显微解剖结扎术对精索静脉曲张患者精子质量的影响。方法对67例精索静脉曲张患者行经外环下精索静脉显微解剖结扎术(显微结扎组),对58例精索静脉曲张患者行经腹膜后精索静脉高位结扎术(高位结扎组),术后对两组患者进行随访比较。结果显微结扎组治疗后精子数量、正常形态、活力均优于高位结扎组(P<0.01),畸形率低于高位结扎组(P<0.05);并发症、复发率无明显差别。结论采用外环下精索静脉显微解剖结扎术治疗精索静脉曲张,对于改善精子质量明显优于经腹膜后精索静脉高位结扎术。     

实验性精索静脉曲张模型的建立及其对睾丸的影响

目的:研究青春期精索静脉曲张对睾丸的损害,探讨精索静脉曲张不育的机理。方法:通过部分结扎左肾静脉建立大鼠实验性精索静脉曲张模型,于术后8周研究双侧睾丸的组织学改变。结果:成功建立了大鼠实验性精索静脉曲张模型。该模型大鼠的睾丸病理损害以生精上皮退化,精子发生阻滞,生精细胞脱落,曲精小管萎缩,间质水肿,异常Leydig细胞增加最为多见。损害为双侧性。精索静脉曲张大鼠左侧睾丸平均重量较对照组显著减小。结论:精索静脉曲张大鼠双侧睾丸有严重的病理改变,这可能是精索静脉曲张不育的主要原因之一。     

丹参肠内营养制剂对S-MODS模型大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡影响

目的：观察丹参肠内营养制剂对内毒素导致S-MODS模型大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡影响,探索防治S-MODS新途径。方法：建立大鼠内毒素S-MODS模型,将WISTAR大鼠70只随机分为正常组（10只）、模型组（20只）、能全素组（20只）和丹参组（20只）。试验周期12d,试验第1d起分别用生理盐水、能全素以及丹参肠内营养制剂灌胃,试验第4d,正常组经鼠尾静脉注射生理盐水1mL/kg,其余3组经相同部位注射内毒素3mg/（mL·kg）（生理盐水溶解）。实验第11d停止灌胃。分别于静脉注射内毒素前1d、后1d和试验结束时测定白细胞计数,试验结束时石蜡包埋切片,用TUNREL方法检测肠黏膜上皮细胞凋亡情况。结果：通过临床表现以及白细胞计数、病理结果显示S-MODS造模成功,试验结束时与注射内毒素后1d相比,丹参组临床症状显著改善,试验结束时丹参组白细胞计数升高数目以及小肠黏膜上皮细胞凋亡指数明显低于模型组以及能全素组。结论：丹参肠内营养制剂能阻止肠道屏障破坏,保护肠黏膜,能减轻S-MODS模型大鼠全身炎症反应。     

术前心理干预对精索静脉曲张患者心理状况的影响

目的探讨心理干预对精索静脉曲张患者术前心理状况的影响。方法将60例精索静脉曲张患者随机分为观察组和对照组,每组各30例。观察组进行心理干预,对照组进行常规护理。结果观察组进行心理干预后,与自身治疗前及与对照组比较,焦虑、抑郁等心理因子评分均明显下降（均P〈0．05）。结论术前心理干预对精索静脉曲张患者的心理状况有明显改善作用。     

拓展护理服务对精索静脉曲张合并不育患者的影响

目的:探讨拓展护理服务对精索静脉曲张并不育患者的影响。方法:将100例精索静脉曲张继发不育需要手术治疗的患者随机分为观察组和对照组各50例,两组住院期间均给予常规护理及健康教育,包括:建立服务档案、心理干预、家庭指导、群体健康教育讲座,观察组出院后持续进行拓展护理服务,包括:建立护理延伸服务档案、给予心理护理和生活方式指导、督促患者改掉不良生活方式、保持健康心理状况。结果:观察组术后2年内配偶受孕率为67.9%,对照组为43.1%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:拓展护理服务能有效提高精索静脉曲张患者术后配偶受孕率。