自分泌运动因子受体及其配体系统的研究进展

自分泌运动因子受体(autocrine motility factor receptor,AMFR)属于泛素蛋白酶体系统蛋白,其配体除自分泌运动因子(autocrine motility factor,AMF)外还包括神经白细胞素(neuroleukin,NLK)、磷酸己糖异构酶(phosphohexose isomerase,PHI)和成熟因子(maturation factor,MF)等.AMFR及其配体系统具有广泛的功能,如刺激细胞运动,作为神经营养因子营养及保护神经元,调节能量代谢和介导细胞的分化等.本文主要就AMFR及其配体系统的结构特点及在肿瘤及神经系统中作用的研究进展作一综述.     

自分泌因子对牙周膜干细胞影响的研究进展

牙周疾病是引起牙周组织缺损最终导致牙齿缺失的常见原因,其主要作用机制是对牙周膜、牙槽骨、牙骨质的不可逆的广泛进行性破坏。牙周组织再生是现在研究的新型治疗方法。牙周膜干细胞具有较强的自我更新和多向分化潜能,能够通过细胞募集和移植作用促进受损组织再生,它是牙周组织再生工程中最为直接可靠的一类种子细胞[1]。组织再生除了需要种子细胞和良好的生物环境以外,还需要合适的生长因子调节。研究表明,许多细胞因子在此过程中     

逆转录病毒介导的对原代培养成年大鼠成肌细胞基因转染的研究

目的　探索成年大鼠成肌细胞的原代培养方法以及逆转录病毒对其的基因转染。方法　取成年SD大鼠的胸大肌 ,利用组织块法进行培养 ,并对培养细胞进行形态学研究和免疫细胞化学鉴定。以逆转录病毒为载体 ,将绿色荧光蛋白基因导入成年大鼠成肌细胞 ,利用倒置荧光显微镜及流式细胞仪对转染细胞进行观察。结果　采用组织块培养法 ,2周后成肌细胞的密度可达 10 7/ml,免疫细胞化学分析显示 90 %以上的细胞呈骨骼肌特异的myogenin抗体染色阳性。荧光显微镜和流式细胞仪检测发现eGFP基因可在成年大鼠成肌细胞中有效地表达 ,其转染效率约为 12 82 %。结论　利用组织块法成功培养成年大鼠原代成肌细胞 ,该方法实用性强 ,所得成肌细胞纯度高 ;逆转录病毒可介导成肌细胞的基因转导 ,为深入研究心肌梗死瘢痕中转基因成肌细胞自体移植奠定了基础。     

人脑源性神经营养因子基因转染神经干细胞治疗大鼠视神经损伤

目的 探讨转染人脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,hBDNF)-绿色荧光蛋白(GFP)基因神经干细胞体内移植后在视神经损伤大鼠视网膜内的存活、迁移和分化情况,以及其对视神经损伤后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活的影响.方法 (1)取30只SD大鼠制作右眼视神经部分损伤模型,采用随机数字表法随机均分成两组,分别于玻璃体腔内移植GFP基因转染神经干细胞(GFP-NSCs)、hBDNF和GFP双基因转染神经干细胞(hBDNF-GFP-NSCs).8周后处死大鼠,取右眼眼球做冰冻切片,然后分别用胸腺细胞表面糖蛋白(Thy1.1)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、β-微管蛋白(β-tubulin)、视紫红质(rhodopsin)抗体进行免疫标记,观察移植细胞的迁移分化情况.(2)取30只SD大鼠制作右眼视神经部分损伤模型,随机均分为三组:损伤组、GFP组、BDNF组.损伤组大鼠玻璃体腔内注射等渗盐水,而GFP组、BDNF组则分别于玻璃体腔内移植GFP-NSCs和hBDNF-GFP-NSCs,每只眼球玻璃体腔内移植5×104个细胞.8周后处死大鼠,取右侧眼球视网膜铺片,行Thy1.1免疫荧光染色后,荧光显微镜下观察计数RGCs细胞数量.结果 (1)移植后,两组细胞均可在视网膜内存活、迁移,并产生细胞分化,两组细胞均可以分化成胶质细胞、神经元.移植hBDNF-GFP-NSCs组少量细胞分化为节细胞样细胞(Thy1.1+),而GFP-NSCs组未发现有分化为Thy1.1阳性细胞.(2)视网膜铺片Thy1.1免疫荧光染色后计数发现,移植hBDNF-GFP-NSCs的视网膜神经节细胞为(1461±154)个/mm2,明显多于移植GFP-NSCs组(1 244±187)个/mm2(P<0.05).结论 移植后的hBDNF-GFP-NSCs可以分化为神经元和神经胶质细胞,少数可分化为视网膜神经节样细胞.hBDNF-GFP-NSCs移植可以增加RGCs的存活数量,有助于视神经损伤后的修复.     

大鼠B细胞淋巴瘤-2基因的克隆及其慢病毒表达载体的构建

目的 克隆大鼠B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)基因全长cDNA,构建及鉴定大鼠bcl-2基因慢病毒表达载体.方法 采用RT-PCR法从大鼠脾脏组织中扩增全长bcl-2 cDNA,将扩增产物克隆至pMD18-T载体中,测序正确后,将基因连接到慢病毒载体pGC-FU(含EGFP 基因)中,构建慢病毒载体表达质粒pGC-FU-bcl-2,将pGC-FU-bcl-2质粒和包装质粒(pHelper1.0、pHclp-er2.0)共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞后,细胞即可分泌携带bcl-2基凶的重组慢病毒.将重组慢病毒感染293T细胞,通过Western blot-ring鉴定目的 蛋白bcl-2的表达.结果 经DNA序列分析测定证实大鼠bcl-2基因序列与GenBank中一致;pGC-FU-bcl-2中携有正确的bcl-2基因,并能转染人胚肾上皮细胞;pGC-FU-bcl-2及包装质粒共转染包装细胞293T细胞能产生重组病毒pGC-FU-bcl-2;目的 基因bcl-2能被重组慢病毒高效地转导人人胚肾上皮细胞中,并达到稳定表达,荧光显微镜下能直接观察到荧光蛋白,Westernblotting能榆测到bcl-2蛋白在靶细胞中的表达.结论 成功克隆了大鼠bcl-2基因并构建了重组慢病毒载体,包装出高浓度慢病毒,转染人胚肾上皮细胞后能够稳定表达bcl-2基因,为进一步研究该基因的功能及细胞凋亡相关疾病的治疗奠定了基础.     

人IL-1 Ra基因真核表达载体的构建及体外转染大鼠骨髓间充质干细胞

目的:构建人IL-1Ra真核表达载体,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)。方法:从PHA活化的人外周血单个核细胞中提取总RNA,RT-PCR法获得hIL-1Ra cDNA,经HindⅢ、EcoRⅠ双酶切,定向克隆到真核表达载体pcD-NA3。经酶切分析及PCR鉴定后,脂质体介导下体外转染大鼠BM-MSCs,免疫荧光法检测hIL-1Ra在大鼠MSCs的表达。结果:获得570 bp大小的IL-1Ra cDNA片段;经酶切分析、PCR鉴定及DNA测序,证实IL-1Ra cDNA定向插入pcDNA3质粒,目的序列与GenBank源序列完全一致;脂质体介导转染48h后,免疫荧光检测到hIL-1Ra在大鼠MSCs的表达。结论:成功构建pcDNA3-hIL-1Ra真核表达载体并在大鼠BM-MSCs中表达,为进一步的hIL-1Ra基因修饰MSCs研究提供了实验基础。     

DEK基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其功能鉴定

目的：构建DEK基因的RNA干扰（ RNAi）慢病毒表达载体,并对其生物学功能进行初步检测。方法采用RNAi技术,根据DEK基因的序列,确定其有效靶序列,合成DEK基因的Oligo DNA,退火形成双链DNA,将其克隆到经BamHⅠ与EcoRⅠ酶切后的小干扰RNA（ siRNA）表达载体PSIH-H1上,产生PSIH-H1-DEK慢病毒载体,筛选阳性克隆并测序鉴定。与3个包装质粒共转染293T细胞,包装成慢病毒后感染乳腺癌细胞ZR75-1,经嘌呤霉素（ puromycin,puro）筛选2周后,收集部分细胞利用实时聚合酶链反应（ real time-PCR,RT-PCR）和Western印迹分别检验DEK在信使RNA （ mRNA ）和蛋白水平的敲低效果,并通过细胞生长实验检测DEK对人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞生长的影响。结果 PCR和DNA测序结果证实,DEK siRNA慢病毒表达载体PSIH-H1-DEK构建成功。 RT-PCR和Western印迹结果显示,构建的DEK siRNA可有效抑制DEK基因的表达,并由此建立了敲低DEK的稳定克隆。生长曲线实验表明, DEK siRNA可抑制人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞的生长。结论成功构建了DEK基因的RNAi慢病毒表达载体,感染人乳腺癌细胞系ZR75-1细胞后,有效沉默了ZR75-1细胞中的DEK基因的表达,为进一步研究DEK基因在乳腺癌中的作用奠定基础。     

SP110基因过表达慢病毒载体的构建与包装

目的 构建核体蛋白SP110基因过表达慢病毒载体,并进行慢病毒包装,为研究SP110在结核病中的作用机制奠定基础。方法 利用PCR技术获得SP110基因序列并将其插入到慢病毒穿梭质粒LV5中,获得重组慢病毒质粒V-SP110,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,用RNAi-Mate将重组质粒和慢病毒包装质粒系统(pGag/Pol、pRev、pVSV-G)包装成重组慢病毒颗粒,共转染293T细胞,包装产生慢病毒。通过荧光显微镜或FACS计数荧光细胞,结合稀释倍数计算病毒滴度。结果 酶切鉴定结果显示产生约1 650 bp的片段,片段大小与SP110基因cDNA大小一致。DNA测序比对测序结果与预期SP110基因序列完全一致,说明SP110基因正确插入载体中,成功构建了SP110基因过表达载体。经293T细胞包装后,成功获得病毒滴度为1.0×108 TU/mL的重组慢病毒LV5-SP110。结论 SP110基因过表达慢病毒载体构建与包装成功完成,为进一步探讨SP110基因在结核病发生发展中的作用提供工具。     

小鼠Islet-1基因RNAi慢病毒载体的构建

目的构建高效沉默小鼠Islet-1基因的慢病毒载体。方法针对小鼠Islet-1基因设计3个RNAi靶序列,合成相应的短发卡RNA(shRNA)寡核苷酸序列(oligo):Sh1、Sh2、Sh3,分别插入经酶切后的PLVTHM载体。经PCR和测序方法筛选阳性克隆,抽提阳性克隆质粒经大肠埃希菌扩增后,与其辅助包装质粒共同感染293T细胞制备慢病毒载体,利用斑形成试验测定病毒滴度。感染C3H10T1/2细胞株,以流式细胞仪检测其感染效率、荧光定量PCR检测其干扰效率。结果与正常C3H10T1/2细胞比较,测序及PCR结果显示目的片段插入正确;病毒滴度值为3.87×108TU/ml;慢病毒载体对C3H10T1/2细胞感染效率达90.36%;3个靶点(抑制效率分别为76.8%5、5.1%和11.7%)均有干扰效果,与正常细胞比较,Sh1靶点干扰效果最为显著(76.8%,P<0.05)。结论成功构建高效沉默Islet-1基因慢病毒载体。     

小鼠RelB基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

目的 构建小鼠RelB基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默骨髓树突细胞(DC)的RelB基因表达,为构建骨髓致耐受DC用于自身免疫病的防治提供研究基础.方法 利用Invitrogen公司在线软件设计小鼠RelB基因(NM_009046)shRNA序列,合成、退火形成dsoligo后克隆到pENTRTM/U6载体的黏性末端,测序,得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组,转化stbl3感受态细胞,测序鉴定,在脂质体的介导下将慢病毒的包装混合物和RelB基因重组慢病毒载体导入293FT细胞,包装成病毒后,收集病毒上清,采用系列稀释法测定病毒滴度.结果 测序结果显示pENTRTM/U6-RelB-shRNA为阳性克隆,将该阳性重组载体与慢病毒载体重组,转化,氨苄青霉素抗性筛选阳性克隆,U6前引物测序鉴定,测序结果 显示该重组慢病毒载体也为阳性克隆,在293FT细胞中进行病毒包装,收集上清并在-80℃贮存.系列稀释法检测病毒悬液的滴度为6×105TU/ml.结论 成功构建出小鼠RelB基因shRNA慢病毒RNAi表达载体,为制备致耐受DC和研究DC在自身免疫病中的应用提供了稳定的转染细胞载体.     

人胰岛素样生长因子1基因转染关节软骨细胞及其稳定表达

目的　研究人胰岛素样生长因子 1 (hIGF 1 )基因转染关节软骨细胞获得稳定表达的可行性。方法　用脂质体转染法将含有hIGF 1cDNA的真核表达载体转染兔关节软骨细胞 ,经G4 1 8筛选 ,形成阳性细胞克隆。继续培养 4周 ,原位杂交检测hIGF 1的表达 ,免疫细胞化学检测Ⅱ型胶原的表达。结果　G4 1 8筛选后所获得的阳性细胞克隆 ,原位杂交检测表明hIGF 1基因得到稳定表达 ,免疫细胞化学检测显示转染后的软骨细胞仍表达Ⅱ型胶原。结论　外源性hIGF 1基因能够在软骨细胞内获得稳定表达 ,而转染后的软骨细胞仍能稳定表达Ⅱ型胶原     

肝细胞生长因子基因转染大鼠急性脑卒中模型的生物效应

目的探讨肝细胞生长因子（HGF）基因转染大鼠急性脑卒中模型后的表达情况及其生物学效应。方法39只实验用大鼠，线栓法制备成可控性急性大鼠脑卒中模型。利用基因重组技术将HGF基因与增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因标记的真核表达载体PIRES2-EGFP进行融合，构建真核细胞表达质粒。通过脂质体介导法，立体定向下多点注射到大鼠急性脑卒中模型的缺血半暗带区域行基因转染，转染7d后断头取大鼠脑组织，切片观察HGF基因在大鼠脑内的表达情况；并采用兔抗人Ⅷ因子相关抗原多克隆抗体对大鼠脑组织进行免疫组化染色，显微镜下随机检测5个高倍视野下缺血半暗带区血管数量；同时在基因转染前及转染后7d，应用CT灌注扫描对实验鼠脑血流量进行监测，观察基因转染对脑血流量的影响。将大鼠脑卒中模型随机分成3组（每组13只）：（1）注射脂质体／pIRES2-EGFP-HGF质粒的实验组；（2）注射脂质体/PIRES2-EGFP空载质粒的空载体对照组；（3）空白对照组（未进行注射）。结果酶切鉴定及基因测序证实，HGF基因片段已克隆到PIRES2-EGFP的BamH Ⅰ和SalⅠ位点之间。HGF基因转染大鼠缺血半暗带区7d后，利用荧光显微镜观察可见到绿色荧光蛋白的表达，用免疫组化方法进一步证实了HGF的表达。实验组大鼠转染局部血管数量（46．71±7．11）条／5个高倍视野，明显多于对照组的（20．43±3．21）条／5个高倍视野和空白对照组的（18．00±3．27）条／5个高倍视野（F=74．447；P＜0．01）；CT灌注显示其梗死侧大脑半球的脑血流量（63．82±6．08）％也高于对照组（53．58±4．19）％和空白对照组（52．46±4．93）％（F=10．445；P＜0．01）。结论脂质体转染HGF基因能够在缺血半暗带区表达，表达产物能够发挥生物学效应，促进局部血管侧支循环形成。     

贮存温度对携带HGF基因的重组腺病毒Ad-HGF稳定性的影响

目的：探讨不同温度对重组腺病毒Ad-HGF保存时问的影响。方法：以含10％甘油的Hanks液保存Ad-HGF(携带人肝细胞生长因子基因)、Ad-GFP(携带绿色荧光蛋白基因)，用快速细胞病变(CPE)法、ELISA方法、流式细胞仪分别检测在不同贮存温度(-60℃，-20℃，4℃，25℃和37℃)、不同保存时间的重组腺病毒对其感染滴度、目的基因表达和转染细胞效率的影响。结果：-60℃保存最长时间44个月，其转染效率、HGF蛋白表达、病毒滴度未见明显下降；-20℃保存12个月各指标未见明显变化；4℃冰箱保存2个月，其各项指标已有所下降，但不是很明显，而保存7个月时，其转染效率、HGF蛋白表达量及病毒滴度均明显下降；25℃和37℃保存，除病毒滴度外，其余指标呈逐日下降趋势。结论：该病毒保存于-20℃以下性能是稳定的，可以满足临床贮存和应用条件。     

A型肉毒毒素对大鼠胃动力作用的研究

目的探讨A型肉毒毒素(BTA)对大鼠胃动力的作用及其机制。方法选用雄性Wistar大鼠40只,随机分为4组,对照组,BTA10U(小剂量)组、20U(中剂量)组、40U(大剂量)组。给药方法均为剖腹胃窦部肌层注射,观察12周,记录进食量及体重变化。12周末,测定胃半排空时间以评价BTA对胃动力的影响,再用免疫组化法测定胃窦部乙酰胆碱酯酶(AchE)的表达。结果①中、大剂量组大鼠进食量及体重较对照组明显减低(P<0.05);小剂量组进食量及体重在短时间内与对照组比较差别显著(P<0.05)。②12周末,小剂量组胃半排时间110.5±26.67min长于对照组86.83±22.98min,但差异无统计学意义(P>0.05);中剂量组(161.67±23.53min)和大剂量组(200.33±44.37min)与对照组比较差异显著(P<0.05)。③AChE在胃窦部肌间神经丛表达的IOD值分别为:中剂量组(72.44±18.43)、大剂量组(68.38±10.60),显著低于对照组(98.05±16.53),差别有统计学意义(P<0.05)。结论BTA通过抑制胆碱能神经末梢Ach的释放,引起胃动力降低,胃排空减慢,致大鼠进食减少,体重减轻。     

Determination of left ventricular wall motility injury by factor analysis in patients with advanced ischemic heart disease

Left ventricular phase and amphlitude images (Fourier analysis, PAI) and factor analysis images (FAI) from gated radionuclide ventriculography were obtained in 235 patients after myocardial infarction (MI) and in 44 patients with well documented ischemic heart disease (IHD) in order to assess areas of regional left ventricular motility injury (LVMI). The sensitivity of FAI for LVMI detection was higher than with PAI (36.3% vs 22.7% in patients without MI; 76.6% vs 68% in those after anterior MI; and 53.2% vs 31.9% after posterior MI, respectively). In 2.9% of all patients PAI were unclear due to small time activity amplitudes and heart rate irregularity, whereas FAI could be easily assessed. Significantly decreased left ventricular ejection fraction was observed predominantly after anterior MI in connection with distinct signs of LVMI in a large area of anterior wall or in the anteroseptal and/or apical region. Areas of LVMI could be sharply delineated in FAI; however, in contrast to PAI, FAI is unable to distinguish between dyskinetic and akinetic regions. The use of both PAI and FAI is recommended for more detailed detection of regional LVMI in patients with IHD.     

携带肝细胞生长因子基因的减毒鼠伤寒沙门菌对溃疡性结肠炎大鼠免疫的影响

目的:探讨携带肝细胞生长因子基因的减毒鼠伤寒沙门菌对TNBS诱发大鼠实验性结肠炎模型外周血T细胞亚群和免疫球蛋白的影响.方法:50只Wistar大鼠经TNBS灌肠诱发溃疡性结肠炎模型,并随机分为4组:Ty治疗组、Typl-HGF治疗组、Typl-GFP观察组、模型对照组,除模型对照组20只外,其余每组10只;另设生理盐水灌肠的正常对照组10只.造模后第3天各组灌胃进行治疗,依次给予1×109cfu的Ty、Typl-HGF、Typl-GFP菌液,每只0.5 ml,隔日1次,模型和正常对照组给予同体积的100 g/L NaHCO3.3次和6次灌胃后1周,各组分别采集全血,用流式细胞仪检测各组CD4 T、CD8 T 、IgM、IgG1、IgA水平;Typl-GFP组观察目的基因的组织表达.结果:灌胃3次和6次后模型对照组与正常对照组相比CD4 T细胞均无明显变化,但CD8 T 细胞下降明显(P<0.01),CD4 /CD8 T比值明显升高(P<0.05);Typl-HGF组3次灌胃后CD4 T低于模型组(P<0.05),6次灌胃后CD4 T、CD4 /CD8 T比值均明显低于模型对照组和Ty组(P<0.01,P<0.01,P<0.05,P<0.05).灌胃3次和6次后模型对照组与正常对照组相比IgM、IgG1、IgA均明显增加(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.01);灌胃3次和6次Ty组与同期模型对照组、Typl-HGF组相比IgM明显增加(P<0.01,P<0.01),而6次Typl-HGF组与模型对照组相比IgM、IgG1明显降低(P<0.05,P<0.05).在荧光显微镜下可观察到Typl-GFP菌液灌胃后在结肠组织GFP强表达.结论:大鼠实验性结肠炎发病过程中,机体免疫功能处于亢进状态,Typl-HGF能够抑制T细胞增殖和B淋巴细胞抗体的产生,它可能代表了一种新的药物用于治疗结肠炎疾病.     

暂时性金属内支架治疗贲门失弛缓症对食管动力的影响

目的 探讨暂时性金属内支架治疗贲门失弛缓症对食管动力的影响。方法 29例贲门失弛缓症患者在X线透视下置入国产可扩张带膜金属内支架，术后3～7d由胃镜取出。治疗前后均测定下食管括约肌(lower esophageal sphincter LES)静息压、松弛率及食管内24h pH监测。12名健康人测定LES静息压、松弛率。结果 支架扩张前LES静息压显著高于扩张后；扩张前LES松弛率显著高于扩张后；扩张后LES静息压和松弛率与健康人相比差异无显著性。扩张后胃食管反流(GER)率显著高于扩张前。结论 暂时性金属内支架扩张术能显著降低贲门失弛缓症患者的LES压力，但GER也显著增加。     

腺病毒介导的人HGF转染大鼠骨髓间充质干细胞及其作用研究

目的：评价携带HGF基因的腺病毒栽体转染鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的效率，以及转染HGF基因对MSC增殖与分化的影响。方法：采用荧光显微镜及流式细胞术检测转染效果和转染率；采用ELISA方法检测转染后HGF的表达情况；细胞增殖分析采用MTT法；MSC向成骨细胞分化采用碱性磷酸酶染色法。结果：转染效率与病毒滴度(MOI)具有量效关系，随着MOI的增加，转染率明显增高，当MOI=400时，转染率可达99．99％。转染HGF后，MSC表达HGF明显增高，48h可达128ng/ml，随后逐渐下降并维持2周以上；转染HGF对MSC的增殖以及向成骨分化没有影响。结论：MSC是一种理想的基因载体细胞，可用于HGF的基因治疗。     

重组质粒hTSHR转染低分化甲状腺癌细胞株后对摄碘能力及特异性基因表达的影响

目的 探讨重组真核表达质粒pcDNA3.1/人TSH受体（hTSHR）体外转染TSHR表达下降的低分化滤泡状甲状腺癌细胞株后,细胞摄取放射性碘功能以及甲状腺癌相关基因mRNA表达 的变化.方法 pcDNA3.1/hTSHR转化DH5a感受态菌,进行扩增、酶切,再以核苷酸测序方法鉴定.体外转染pcDNA3.1/hTSHR,通过免疫荧光检测TSHR表达产物,井型γ计数仪检测摄碘率,相对定量实时荧光PCR验证其表达的TSHR蛋白功能和特性.采用SPSS 13.0软件,对计量资料行t检验.结果pcDNA3.1/hTSHR经PCR扩增hTSHR-cDNA片段约113 kb,Kpn Ⅰ和Xha Ⅰ双酶切：hTSHR-cDNA的片段约2.3 kb,pcDNA3.1（＋）的片段约5.5 kb,均同预期片段大小相符;核苷酸测序方法鉴定测序结果与GenBank中收录的hTSHR全长序列一致,表明真核表达质粒构建正确.在hTSH刺激下,转染pcDNA3.1/hTSHR细胞与转染pcDNA3.1（＋）细胞比较：（1）在甲状腺肿瘤细胞胞质、胞膜有增强的绿色荧光,（2）前者125 I摄取率是后者的2.9倍（t=28.63,P＜0.01）,（3）甲状腺碘摄取相关基因TSHR、钠碘转运体（NIS）、甲状腺过氧化物酶（TPO）、Tg的mRNA的表达分别升高1.74倍（t=5.959,P＜0.01）、7.2倍（t=3.807,P＜0.05）、2.88倍（t=4.769,P＜0.01）和2.67倍（t=6.388,P＜0.01）.结论 pcDNA3.1/hTSHR体外转染甲状腺癌肿瘤细胞后,可有效提高碘的摄取;这可为放射性碘治疗失分化甲状腺癌提供新的实验依据.