酸枣仁汤对老年失眠证候模型大鼠学习记忆及脑内自由基、一氧化氮合酶的影响

目的 探讨酸枣仁汤对失眠证候模型大鼠学习记忆及脑组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性的影响.方法 用D-半乳糖致亚急性衰老、环磷酰胺及氧化可的松致阴血亏虚,及自制改良多平台法剥夺睡眠,制作老年阴血亏虚型失眠证候大鼠复合模型,观察大鼠学习记忆、大脑皮质及海马部位MDA含量及SOD、NOS活性的变化,以及酸枣仁汤对这些指标的影响.结果 与环境对照组[(47.3 ±4.6)s,(9±1.4)s,(6.5±1.2)次]比较,证候模型组[(108.9±12.5)s,(89±11.5)s,(0)次]睡眠剥夺48 h后,大鼠学习记忆能力显著下降(t=4.36,3.18,2.07,P＜0.01),证候模型组皮质、海马部位MDA含量和SOD、NOS活性[(3.8±0.6)、(3.0±0.5)nmol·mgprot-1,(229.7±25.8)、(236.3±25.2)U·mgprot-1,(5.7±0.8)、(5.4 ±0.9)U·mgprot-1]相对于环境对照组[(2.1±0.4)、(1.6±0.4)nmol·mgprot-1,(155.5±10.6)、(147.2±26.1)U·mgprot-1,(2.8±0.7)、(2.9±0.5)U·mgprot-1]均升高(t=2.89,3.01,6.78,5.94,3.10,3.46,P＜0.05);经酸枣仁汤高、低剂量干预后大鼠学习记忆能力得以明显改善(P＜0.05),高剂量组皮质、海马部位MDA含量和SOD、NOS活性明显下降(P＜0.05),低剂量组也明显下降(P＜0.05),并趋于正常范围.结论 酸枣仁汤对老年失眠证候模型大鼠的学习记忆能力障碍有改善作用,其机理之一可能与减轻睡眠剥夺中自由基和NO对神经细胞的损伤有关.     

酸枣仁总皂苷对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织Glu及GABA含量的影响

目的 观察酸枣仁总皂苷对老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑组织谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)含量的影响.方法 用D-半乳糖致衰老、环磷酰胺及氢化可的松致阴血亏虚,及自制改良多平台法剥夺睡眠,制作老年阴血亏虚型失眠证候大鼠复合模型,采用高效液相色谱法检测环境对照组、证候模型组和酸枣仁总皂苷大、小剂量组大鼠大脑皮层及下丘脑Glu及GABA含量的变化.结果 与环境对照组比较,证候模型组睡眠剥夺48h后,大鼠大脑皮层及下丘脑Glu及GABA含量均明显升高,且Glu/GABA比例增高,经酸枣仁总皂苷干预后Glu和GABA均明显下降(P<0.01,P<0.05),且趋于正常范围.结论 酸枣仁总皂苷能减少老年阴血亏虚型失眠证候模型大鼠脑内兴奋性氨基酸毒性作用,减轻Glu、GABA参与的迟发性神经元损害.     

黄精口服液对血管性痴呆大鼠行为和海马星形胶质细胞的影响

目的 观察大鼠学习记忆能力和海马星形胶质细胞的变化,探讨黄精口服液对血管性痴呆大鼠的干预效果.方法 应用Morris水迷宫、免疫组织化学法和透射电镜等技术观察血管性痴呆大鼠海马组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达和CA1区星形胶质细胞超微结构的变化.结果 (1)术后3.5个月,痴呆+黄精口服液组大鼠平均逃避潜伏期[(21.5±6.6)s]较血管性痴呆组[(31.8±7.2)s]和痴呆+盐水组[(31.0±9.2)S]减少(P＜0.01).(2)血管性痴呆组和痴呆+生理盐水组大鼠海马结构GFAP免疫反应阳性细胞数增多、校正灰度值比空白对照组增加(P＜0.01);痴呆+黄精口服液组大鼠海马结构GFAP免疫反应阳性细胞数及其胞浆校正灰度值[CA1辐射层、腔隙层和齿状回分子层分别为(27.3±7.6),(28.1±5.8),(35.4±9.6)]较痴呆+生理盐水组大鼠[(53.6±8.1),(57.9±6.4)和(59.7±6.5)]减少(P＜0.01).(3)血管性痴呆组和痴呆+生理盐水组大鼠海马组织微血管周围的星形胶质细胞肿胀,细胞内线粒体变形、肿胀、嵴断裂,胞质内大量溶酶体形成;并见空泡化的胶质细胞足突和退变的星形胶质细胞胞体.痴呆+中药组大鼠海马CA.区中,毛细血管周围的星形胶质细胞突起有轻度水肿,局部区域胶质细胞增生.结论 黄精口服液可抑制海马CA.区星形胶质细胞反应,减少其终足水肿,改善学习记忆能力.     

慢性脑低灌注致大鼠持续性学习记忆受损及海马神经血管单元改变

目的 观察在大鼠慢性脑低灌注(chronic cerebral hypoperfusion,CCH)模型中海马神经血管单元变化的特点,探讨海马神经血管单元变化与CCH致大鼠学习记忆受损的关系.方法 取220 ～ 250 9SPF级8周龄SD雄性大鼠44只,按随机数字表法分为CCH组(n=24)和对照组(n=20).CCH组通过永久性结扎双侧颈总动脉建立CCH模型,对照组不结扎.各组大鼠分别于术后4、12周通过旷场实验、物体辨别实验和Morris水迷宫实验检测自主探索行为反应和学习记忆功能,双重免疫荧光标记检测大鼠海马星形胶质细胞足突水通道蛋白4(aquapofin-4,AQP4)和血管基底膜Collagen Ⅳ的共表达,透射电镜观察大鼠海马神经血管单元超微结构改变.结果 与对照组比较,4周和12周CCH组大鼠:①物体辨别指数明显下降[(0.86±0.14)vs(0.71 ±0.16),P＜0.05;(0.83 ±0.19)vs(0.64 ±0.10),P＜0.05],定位航行及空间探索逃避潜伏期均显著延长(P＜0.05);②海马星形胶质细胞足突AQP4[(1.94 ±0.80)vs(1.10±0.41),P＜0.05;(2.05 ±0.51)vs(0.96±0.50),P＜0.01]、血管基底膜CollagenⅣ[(6.90±2.42)vs(4.25±1.01),P＜0.05;(6.63±2.20)vs(3.66±1.22),P＜0.01]表达显著降低,二者的共表达比例[(0.94±0.02) vs (0.91 ±0.01),P＜0.01;(0.91 ±0.01)vs(0.89±0.01),P＜0.01]均明显减少;③超微结构显示海马星形胶质细胞足突与血管基底膜明显解离,胶质血管连接及神经血管单元明显破坏.结论 慢性脑低灌注所致大鼠持续性学习记忆功能受损可能与海马神经血管单元的破坏有关.     

缝隙连接蛋白-43半通道在大鼠脑缺血再灌注损伤中对神经元损伤的影响

目的 观察大鼠脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞CX43半通道对大脑海马区神经元损伤的影响.方法 128只SD雄性大鼠随机数字法分为四组,Sham组,I/R组,I/R+ Gap26组,I/R+NS组,每组32只.用TTC染色法检测各组再灌注24 h后大脑梗死体积;用免疫组化及Western印迹的方法检测脑缺血再灌注损伤后各组胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)、星形胶质细胞CX43的表达情况;用尼氏染色及免疫组化来观察大脑海马区神经元死亡的情况.结果 与Sham组相比,I/R组大脑梗死体积[(132±7) mm3比0]增加、星形胶质细胞CX43[(2.45±0.56)比(1.15±0.43)]、GFAP蛋白表达[(146±11)比(76 ±5)]增加(P＜0.05),神经元损伤程度增加;与I/R+ NS组相比,I/R+Gap26大脑梗死体积[(76±6)mm3)比(140±10)mm3]减少、星形胶质细胞CX43[(0.43 ±0.16)比(2.15±0.73)]、GFAP蛋白表达[(57±6)比(140±9)]降低(P＜0.05),神经元损伤程度减轻.结论 阻断CX43半通道可以降低脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞的活化,并且减轻了大脑海马区神经元的损伤.     

人脐血单核细胞颈内动脉输注对血管性痴呆大鼠学习记忆的作用及在脑内的迁移分化

目的 观察颈内动脉输注人脐血单个核细胞(HCMNCs)透过血脑屏障在血管性痴呆(VD)大鼠脑内仔活、迁移分化及对学习记忆的影响. 方法 改良Pulsinellis四血管阻断法建立VD大鼠模型;体外分离HCMNCs,术后24h治疗组颈内动脉输注数量为3×106/0.5 ml的BrdU标记细胞;采用免疫组化法和穿梭箱系统检测HCMNCs在VD大鼠脑内的存活、迁移和分化情况以及对认知功能的影响. 结果 HCMNCs广泛分布于VD大鼠脑组织,可存活较长时间(8周以上),随着时间的延长,迁移方向集中,主要聚集迁移至海马、大脑皮质等区域;HCMNCs在VD大鼠脑内微环境作用下2周已开始向神经细胞转化,表达人神经丝蛋白(NF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)以及胶质原纤维酸性蛋白(GFAP).模型组大鼠AAR比率[(55.4±4.5),(42.1±4.5),(44.2±3.6)]低于对照组[(91.7±3.9),(90.0±4.3),(92.5±5.0)],差异非常显著(P＜0.01);治疗组[(67.1±3.3),(69.2±4.7),(70.8±4.7)]较模型组明显提高(P＜0.01). 结论 颈内动脉输注HCMNCs可透过VD大鼠血脑屏障向脑缺血易损伤部位迁移聚集、存活,定向分化为神经样细胞,并可显著改善VD大鼠学习记忆能力.     

加味酸枣仁汤对睡眠剥夺大鼠细胞免疫功能紊乱的调节作用

目的观察加味酸枣仁汤对睡眠剥夺所致大鼠细胞免疫功能紊乱的调节作用。方法选择SPF级SD大鼠40只,随机分为正常组、模型组、西药组、中药组各10只。正常组大鼠给予无干扰常规喂养7天;余三组均采用平台随机移动法造模7天,造模开始模型组同时予生理盐水灌胃、西药组予劳拉西泮片0.105mg/(kg·d)、中药组予加味酸枣仁汤6.3g/(kg·d)灌胃,共7天。测量各组大鼠体质量,通过旷场实验进行行为学评定,测定静脉血中CD4+、CD8+、CD4+/CD8+,以及血清中白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、IL-2/IL-6水平。结果与正常组比较,模型组大鼠体质量显著下降[(205±12.11)g比(254±13.33)g,P0.01],旷场实验水平与垂直得分显著升高[(66.64±11.82)分比(44.71±13.82)分,(26.43±4.82)分比(16.38±5.45)分,P0.01),CD4+/CD8+、IL2/IL6明显下降[(1.16±0.64)比(1.74±0.52),(0.13±0.14)比(0.35±0.28),P0.05]。与模型组比较,中药组体质量明显升高[(219±14.45)g比(205±12.11)g,P0.05],但和西药组比较无明显差异[(219±14.45)g比(217±13.23)g,P0.05)],旷场实验水平和垂直得分明显下降[(51.35±13.37)分比(66.64±11.82)分,(21.73±4.39)分比(26.43±4.82)分,P0.05],但明显高于西药组[(51.35±13.37)分比(46.12±14.87)分,(21.73±4.39)分比(15.83±5.42)分,P0.05];CD4+/CD8+、IL2/IL6比值明显升高[(2.26±0.65)比(1.16±0.64),(0.29±0.19)比(0.13±0.14),P0.01],并明显高于西药组[(2.26±0.65)比(1.71±0.71),(0.29±0.19)比(0.17±0.11),P0.01]。结论加味酸枣仁汤能改善睡眠剥夺导致的模型大鼠体质量下降和行为学改变,并能纠正其细胞免疫功能紊乱。     

睡眠剥夺及睡眠恢复后大鼠视交叉上核星形胶质细胞反应及其与神经元的关系

目的：探索睡眠剥夺及睡眠恢复后大鼠视交叉上核（SCN）星形胶质细胞的反应及其与神经元的关系。方法：采用水环境小平台法建立大鼠睡眠剥夺模型，12只大鼠随机分为睡眠剥夺（SD）24h组，睡眠剥夺24h后恢复睡眠（SR）3h组，大平台对照组（TC）和正常饲养组（NC），每组3只。用免疫组化方法检测胶原纤维酸性蛋白（GFAP）和Fos神经元在SCN的表达变化。结果：睡眠剥夺后GFAP和Fos在SCN表达明显增强，睡眠恢复后两者表达都降低．变化趋势基本一致。结论：星形胶质细胞可能与神经元共同参与睡眠的调节。     

碱性成纤维细胞生长因子转基因治疗对放射性脑损伤大鼠星形胶质细胞相关蛋白表达的影响

目的 观察碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)转基因治疗对全脑放射后脑损伤(radiation injuries of brain,RIB)模型鼠星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和波形蛋白(Vimentin,VIM)表达的影响,为探索治疗RIB的新途径提供实验基础.方法 分组采用直线加速器对Sprague-Dawley大鼠进行全脑单次25Gy照射建立RIB模型,bFGF转基因治疗组采用侧脑室注射bFGF-pcDNA3.1(±)质粒,并设未照射组为对照.在照射前及照射后20 d和60 d分别观察各组脑组织GFAP和VIM表达情况.结果 照射组病理检查显示海马和皮层神经元轻度变性,胞体萎缩,白质区域较对照组呈现组织结构梳松、血管周隙扩大等表现;bFGF治疗组病变程度明显较照射组轻.各组大鼠照射后GFAP表达均增加,20 d时bFGF治疗组GFAP阳性细胞数[(65±6.2)个]高于照射组[(49±5.8)个]和对照组[(18±2.4)个](P＜0.05),60 d时bFGF治疗组GFAP阳性细胞数(44±5.1)较20 d时明显减少(P＜0.05),其他各组GFAP阳性细胞数与20 d时无显著性差别(P＞ 0.05).bFGF治疗组照射后20 d VIM表达(0.94 ±0.12)较照射组(1.45±0.26)明显减少(P＜0.05),60 d时各组VIM表达量无显著性差别.结论 25 Gy射线照射可提高RIB鼠脑GFAP和VIM急性期表达量,bFGF转基因治疗可增加急性期GFAP的表达,降低VIM表达.     

严重烫伤后脑内GFAP表达变化与血脑屏障功能的关系

目的:探讨严重烫伤后星形胶质细胞的形态学变化、GFAP表达与血脑屏障功能的关系。方法:建立严重烫伤大鼠模型。健康SD大鼠,随机分为正常组,假烫伤组,烫伤组,烫伤后又设3、6、12、24、48h5个时间点,用透射电镜观察血脑屏障超微结构变化;紫外分光光度计检测脑伊文蓝含量。免疫组化观察脑GFAP表达。结果:烫伤后星形胶质细胞线粒体肿胀、空泡化,胶质细胞有凋亡期表现。脑EB含量明显增高,GFAP表达增加(P<0.01)。结论:严重烫伤后星形胶质细胞活化、GFAP表达增加与血脑屏障通透性增高有关,提示GFAP在严重烫伤早期血脑屏障的损伤中起重要作用。     

ADAMTS-1 expression in rat myocardium after ischemic preconditioning: age-associated differences

Background  It has been found that cardiac protection afforded by ischemic preconditioning (IPC) is significantly reduced in the senescent myocardium. ADAMTS-1 (a disintesrin and metalloprotease with thrombospondin type 1 motifs) has been shown to inhibit angiogenesis in a variety of in vitro and in vivo assays. The aim of this study was to investigate the age-associated differences in ADAMTS-1 protein expression in rat myocardium after ischemic preconditioning.

Methods  Sixty-four young (4 months) and old (24 months) male Sprague-Dawley rats were randomly assigned to an IPC group (40 rats) or a sham group (rats). A model of delayed IPC was induced and rats were sacrificed and myocardial samples were harvested from the ischemic-reperfused region for immunohistochemical detection of ADAMTS-1 at serial time points after IPC. A model of myocardial infarction was produced by ligation of the left anterior descending coronary artery in additional sets of young and old rats after sham or IPC procedures, then age-associated myocardial infarction survival after IPC was calculated.

Results  ADAMTS-1 expression increased significantly in old rats compared to young rats (P <0.05). The mean densities of ADAMTS-1 protein at 0, 6, 12, and 24 hours in young-IPC group after IPC were 0.05±0.01, 0.13±0.03, 0.16±0.04, and 0.12±0.03 vs. 0.07±0.03, 0.20±0.03, 0.24±0.05, and 0.21±0.04 in old-IPC group. IPC resulted in diminished survival rates (5/35 vs. 6/14, old-IPC group vs. old-sham group, P <0.05), reduced left ventricular fractional shortening ((13.9±2.8)% vs. (18.3±2.3)%, P <0.05) and increased the myocardial infarction size ((37.9±3.2)% vs. (32.8±5.1)%, P <0.05) in the older rats.

Conclusions  Cardioprotection with IPC is attenuated in the older heart. ADAMTS-1 expression induced by IPC is greater in old rats. Over-expression of anti-angiogenic factors might be a potential mechanism behind reduced protection after IPC associated with aging.

     

银杏叶片对衰老大鼠大脑皮层环腺苷酸反应元件结合蛋白表达的影响

目的 研究银杏叶片对衰老大鼠皮层核转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)、磷酸化CREB(pCREB)表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠分为青年对照组、老年对照组和银杏叶组.银杏叶组大鼠每日灌胃银杏叶片,其余两组动物灌胃等量蒸馏水,共8周.Morris水迷宫实验观察大鼠空间记忆变化,western blot检测皮层CREB、pCREB表达.结果 (1)与青年对照组(9.6±2.88,41.55±6.30)比较,老年大鼠逃避潜伏期延长,穿越平台次数(6.8±2.49)、平台象限停留时间(34.92±4.56)减少(P＜0.05);与老年对照组比较,EGb组大鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数和平台象限停留时间(9.4±2.63,41.0±6.68)延长(P＜0.05).(2)老年对照组大鼠皮层CREB、pCREB表达水平分别为(0.70±0.21,0.13±0.05),低于青年对照组(1.07 ±0.33,0.26±0.04),差异具有显著性(P＜0.05);与老年对照组比较,银杏叶组大鼠皮层CREB、pCREB表达升高(1.02±0.18,0.18±0.02) (P＜O.05).结论 银杏叶片可能通过上调老年大鼠大脑皮层CREB、pCREB表达改善空间学习和记忆功能.     

围生期双酚A暴露对雄性子代大鼠学习记忆能力的影响

目的 研究围生期双酚A暴露对雄性子代大鼠探索行为及学习记忆能力的影响.方法 自妊娠11 d开始直至产后7 d,一组母鼠每I:1皮下注射10μg/kg双酚A(BPA),另一组母鼠注射等量的BPA的溶剂.在大鼠出生后21 d进行开场实验、水迷宫实验,同时制作海马脑片,用电生理学方法 检测BPA暴露对海马CA1区LTP诱导的影响.结果 BPA模型组大鼠穿越格子数[(70.35±13.56)次]明显高于对照组[(29.32±14.12)次,P＜0.05];BPA模型组大鼠站立次数、理毛次数[分别为(38.52±6.52)次,(6.26±2.78)次]均较对照组大鼠显著增加[分别为(10.35±8.38)次,(2.67±1.46)次,P＜0.05].Morris水迷宫实验中,BPA模型组大鼠寻找平台的潜伏期[(55.22±5.78)s]较对照组显著延长[(21.22±2.65)s,P＜0.05];高频刺激后对照组海马CAI区可诱导稳定的LTP[(162.13±10.12)%],BPA模型组大鼠海马CA1区LTP诱导障碍[(101.05±7.58)%,P＜0.05].结论 围生期BPA暴露损伤了雄性子代大鼠的学习记忆能力,其机制可能和突触前功能受损有关.     

24 h睡眠剥夺对大鼠海马长时程增强及神经颗粒素mRNA表达的影响

目的 研究24h睡眠剥夺对大鼠海马长时程增强(long-term potentiation,LTP)及神经颗粒素(Neurogranin,Ng)mRNA表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠随机分为睡眠剥夺组(SD组)和对照组(C组).利用睡眠剥夺箱对大鼠进行24h睡眠剥夺后,在体脑立体定位电生理法测量大鼠海马齿状回LTP;Trizol一步法提取海马总RNA,用SYBRA green Ⅰ荧光定量RT-PCR测定Ng mRNA水平.结果 与对照组比较,睡眠剥夺组的LTP升幅较小,尤其在高频刺激后25～50min中PS峰幅值显著低于对照组(P<0.05);睡眠剥夺组大鼠海马Ng mRNA水平显著低于对照组(P<0.05),分别为(0.48±0.38)和(1.40±1.07).结论 24h睡眠剥夺可使大鼠海马神经突触町塑性降低,该效应可能与海马Ng mRNA水平降低有关.     

苯并芘对断乳大鼠学习记忆能力的影响及机制研究

目的 探讨不同剂量苯并(a)芘[B(a)P]对断乳大鼠学习记忆能力的影响及其机制.方法 将40只SD断乳大鼠(28d)随机分为5组,空白对照组、溶剂对照组、3个染毒组(浓度分别为5,10和20mg/kg体质量),隔日腹腔染毒30d.染毒结束后用Morris水迷宫试验观察,免疫组化法测定海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸受体NR2B亚基(NMDAR2B)和脑源性生长因子(BDNF)含量.结果 Morris水迷宫试验结果显示,随B(a)P染毒剂量的增加,逃避潜伏期呈递减趋势,高剂量组[(62.78 ±47.25)s]与对照组[(40.60 4-38.79)s]相比,差异有统计学意义(P<0.01);跨台次数随染毒剂量的增加逐渐减少,高剂量组[(4.33 ± 2.08)次]与对照组[(11.25 ± 2.63)次]相比.差异有统计学意义(P＜0.05);随染毒剂量增加,海马区NMDAR2B灰度值呈递减趋势,高剂量组(150.38 ± 15.34)与对照组(162.23±6.56)相比,差异有统计学意义(P＜0.05);BDNF灰度值除低剂量组外呈递减趋势,高剂量组(141.83 ±13.37)与对照组(163.13±8.09)、低剂量组(164.56±9.10)相比均差异有统计学意义(P＜0.05).结论 亚急性B(a)P暴露可降低断乳大鼠空间学习记忆能力,其机制可能与B(a)P影响海马NMDAR2B和BDNF的表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the changes and mechanism of learning and memory in rats by different doses of benzo (a) pyrene (B(a)P). Methods Forty weaned rats (28 days) were randomly divided into control group (NS), solvent group ( vegetable oil) and three B (a) P dosage groups (the doses were 5,10 and 20 mg / kg body weight respectively ). And all rats were administrated intraperitoneally every other day to one month. The capability of learning and memory in rats were measured by Morris water maze test, and the brain-derived neurotrophic factor ( BDNF) and NMDAR2B content in hippocampus were tested by immunohistochemistry. Results In training of Morris water maze,the average escape latency was extended gradually with increasing dose, and there was a statistically significant difference between high-dose group((62. 78 ±47. 25 )s) and the control group((40.60±38.79)s)(P＜ 0.01). Compared with the control group(11.25 ±2.63), the number of crossplatform of high-dose group(4.33 ±2.08) was statistically reduced (P＜0.05). B(a)P at 10 and 20 mg/kg decreased NMDAR2B and BDNF expression in hippocampus of rats in immunohistochemistry. The level of NMDAR2B was (162.23 ±6.56) in the high-dose group and (150.38 ± 15.34) in the control group(P＜0.05);the expression level of BDNF was (163. 13 ± 8.09) in the high-dose group and (141.83 ± 13.37) in the control group(P＜ 0.05). Conclusion Subacute B(a)P exposure can reduce spatial learning and memory in weaning rats, it may be related to decreased levels of NMDAR2B and BDNF in hippocampus.     

大鼠切口痛模型中右美托咪定对瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的影响

目的 研究大鼠切口痛模型中右美托咪定(DEX)对瑞芬太尼诱发的痛觉过敏的影响.方法 60只雄性SD大鼠随机均分成5组:对照组(C),切口痛组(I),切口痛+瑞芬太尼组(R),切口痛+DEX组(ID),切口痛+瑞芬太尼十DEX组(RD).ID、RD组于七氟醚麻醉前10min腹部皮下注射DEX50 μg/kg.除C组外均需制作切口痛模型.切口痛制作方法:右后爪跖肌位置纵行切开1 cm长的皮肤和筋膜,皮肤行褥式缝合.各组均测定并计算出术前24h(T0),术后6h(T),24h(T2),48h(T3)大鼠右后爪的机械缩足反射阈值(PMW)及热缩足反射阈值(PWTL).结果 在T1、T2、T3时点,与I组[(7.70±0.67)g,(10.79±1.83)g,(10.97±1.87)g]相比,R组[(3.72±0.71)g,(6.54±1.27)g,(7.27±1.53)g]的PMW明显降低(P＜0.05);与Ⅰ组[(20.74±2.72)s,(16.56±1.38)s,(22.55±2.01)s]相比,R组[(11.81±2.52)s,(11.27±2.30)s,(12.30±2.21)s]的PWTL明显降低(P＜0.05).与Ⅰ组相比,ID组只能缓解T1时点PMW的降低(P＜0.05).与R组相比,RD组可以缓解T1[(14.03±1.01)g]、12[(14.27±1.33)g]、T3(14.26±1.58)g]时点的PMW值的降低(P＜0.05)及T1[(23.56±1.53)s]、T2[(16.54±3.24)s]时点的PWTL值的降低(P＜0.05).结论 大鼠切口痛模型中,瑞芬太尼可以诱发切口周围组织的痛觉过敏;右美托咪定可以预防瑞芬太尼诱发的痛觉过敏.     

星形胶质细胞参与脑内炎症致大鼠多巴胺能神经元变性

目的 观察脑室内注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)引起的脑内炎症对大鼠黑质多巴胺能神经元的慢性毒性作用,探讨星形胶质细胞是否参与脑内炎症致大鼠多巴胺能神经元变性.方法 60只SD大鼠分为LPS实验组和生理盐水(NS)对照组(n=30).大鼠右侧脑室一次性注射LPS 20μl(1.25μg/μl)或同体积的NS.于给药后不同时间检测大鼠行为,免疫组织化学染色法观察黑质内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元,并用Western blot检测大鼠黑质纹状内胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 1)LPS给药后大鼠平均运动速度呈进行性下降,与相应NS对照组相比,在16周[(2.12±0.43) cm/s,(1.67±0.36)cm/s,t=2.537,P<0.05]、20周[(2.03±0.31)cm/s,(1.46±0.33) cm/s,t=3.981,P<0.01]和24周[(2.00±0.36)cm/s,(1.46±0.32)cm/s,t=3.545,P<0.01]均差异有显著性.LPS给药后大鼠黑质TH阳性神经元数量减少,在24周时是相应NS对照组的75.4% (P<0.01).2) LPS实验组大鼠给药后2周时,黑质纹状体部位GFAP蛋白表达量比相应NS对照组明显增高,为NS对照组的258%(P<0.01).到给药后24周时,LPS实验组大鼠黑质纹状体内GFAP蛋白表达量又比NS对照组明显增高,为NS对照组的168%(P<0.05).结论 侧脑室注射LPS引发大鼠黑质部位星形胶质细胞激活,参与了黑质多巴胺能神经元的变性过程.     

中枢内源性大麻素在快动眼睡眠剥夺导致的内脏感觉降低中的作用

目的 研究中枢内源性大麻素系统是否参与快动眼(REM)睡眠剥夺导致的内脏感觉降低.方法 采用花瓶技术制作大鼠REM睡眠剥夺模型,24只SD大鼠随机分成实验对照组(YC组),睡眠剥夺组(SD组)和睡眠剥夺加大麻素CB1受体拮抗剂利莫那班组(Rim组).睡眠剥夺持续48 h后对各组大鼠行结直肠扩张(CRD),同时用电生理记录仪记录腹壁肌电活动,以反映内脏感觉的变化.分别采用RT-PCR和蛋白质印迹技术测定YC组和SD组大鼠丘脑、脑干、脊髓(腰髓)中CBl受体、脂肪酸酰水解酶(FAAH)和单酰甘油脂肪水解酶(MGL)Mrna和蛋白表达.结果 (1)给予40、60、80 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)扩张结直肠后,SD组腹外斜肌放电次数(次:220±94、313 4±162、493±279)均显著低于YC组(次:506 4±223、1053±548、1632 4±249,均P＜0.05);Rim组(次:668±257、1144±93、1653±153)均显著高于SD组(均P＜0.01),Rim组与YC组差异无统计学意义(均P＞0.05).(2)丘脑、脑干、脊髓中CBl受体Mrna以及蛋白表达SD组均显著高于YC组(均P＜0.05),而FAAH、MGL表达量则显著低于YC组(均P＜0.05).结论 REM睡眠剥夺导致的内脏感觉降低可能与中枢内源性大麻素受体表达增加、代谢降低有关.     

精神分裂症模型鼠腹腔中的中性粒细胞趋化运动的动态可视化分析

目的：应用细胞动态可视化系统观察并分析正常鼠和精神分裂症模型鼠腹腔中的中性粒细胞趋化运动能力及其差异。方法：18只健康昆明小鼠随机分为对照组（6只）、0.3 mg/kg 5-甲基二氢二苯并环庚烯亚氨马来酸（dizocilpine maleate,MK-801）处理组（6只）、0.6 mg/kg MK 801处理组（6只）,分别提取中性粒细胞,在显微镜下观察形态并计数。将每组细胞分成两份进行趋化实验,分别为趋化剂处理组和趋化剂未处理组,即对照组 1、0.3 mg/kg MK-801处理组1、0.6 mg/kg MK-801处理组 1和对照组 2、0.3 mg/kg MK-801处理组 2、0.6 mg/kg MK-801处理组 2。使用NIS-Elements软件记录细胞动态迁移过程。使用TAXIScan Analyzer 2软件每组细胞随机选取30个细胞（即n=30）分析细胞迁移的轨迹、速度和距离,并采用配对检验和单因素方差分析进行统计学分析。结果：对照组、0.3 mg/kg MK-801处理组、0.6 mg/kg MK-801处理组的中性粒细胞的数量分别是（1.00±0.03）×104/mL、（0.05±0.02）×104/mL、（0.32±0.01）×104/mL,差异均有统计学意义（P<0.05）。在趋化剂的作用下,对照组1、0.3 mg/kg MK-801处理组1、0.6 mg/kg MK-801处理组1的中性粒细胞定向迁移能力分别是（0.85±0.11） radian、（1.00±0.11） radian、（0.96±0.10） radian,差异均有统计学意义（P<0.05）;中性粒细胞迁移速度分别是（0.09±0.02） μm/s、（0.12±0.01） μm/s、（0.14±0.01） μm/s,差异均有统计学意义（P<0.05）;中性粒细胞迁移距离分别是（94.26±0.02） μm、（134.61±0.01） μm、（156.19±0.01） μm,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论：与对照组腹腔中的中性粒细胞比较,精神分裂症模型鼠腹腔中的中性粒细胞具有更强的趋化运动能力。